determinación de Hemoglobina
La hemoglobina se halla en el interior de los glóbulos rojos, salvo en determinadas patologías en que
puede aparecer hemoglobina en plasma (hemoglobinemia), por ej. infecciones graves, ciertas
intoxicaciones, etc. Generalmente un aumento de los valores de hemoglobina por encima de los
normales es tan solo aparente. Suele ser debido a un aumento del número de hematíes, por ejemplo,
en la adaptación a un cambio de altitud, o bien en los casos en que la sangre sufre una concentración
por pérdida de líquido plasmático (por ejemplo, al sufrir el cólera). Un descenso en los valores de
hemoglobina por debajo de los normales es, sin embargo, muy común y un síntoma característico de
las anemias, hemorragias repetidas y leucemia.
a) Fundamento:
Consiste en hacer reaccionar la sangre con un reactivo que contiene cianuro y ferrocianuro potásico
(reactivo de Drabkins), que oxida la hemoglobina a metahemoglobina la cual a su vez pasa a
cianometahemoglobina. La intensidad de color de este compuesto se mide fotocolorimétricamente.
Los resultados se llevan a una curva estándar realizada con soluciones de cianometahemoglobina
comercial, de donde se extrapolan las concentraciones de hemoglobina de las muestras problema.
b) Material, equipo y reactivos. El análisis de hemoglobina se usa comúnmente para detectar anemia,
un nivel anormalmente bajo de glóbulos rojos en el cuerpo.
b) Material, equipo y reactivos.
-Papel de filtro.
-Gradilla.
-Tubos de ensayo.
-Frasco lavador.
-Pipetas Pasteur.
-Micropipetas.
-Puntas de micropipeta.
-Pipetas graduadas.
-Temporizador.
-Cubetas para el espectrofotómetro
-Espectrofotómetro.
Preparar el reactivo de trabajo (RT):
Poner 5 ml de cianuro de potasio en un matraz aforado de 250 ml y enrasar con agua destilada hasta la
línea de aforo.
c) Procedimiento o técnica manual.
1.- Desinfectar la yema del dedo con alcohol, secándola posteriormente con algodón. Utilizar siempre
guantes y lancetas estériles.
2.- Punzar la yema del dedo con la lanceta y presionar el mismo para que salga sangre.
3.- Se obtiene la sangre por punción capilar, de la que se toman directamente 0,02 ml con una pipeta
de hemoglobina.
4.- Se llevan los 20 µl de sangre a un tubo de ensayo que contiene 5ml de reactivo Drabkins. Agitar
por inversión varias veces y dejarlo reposar durante 10 minutos.
5.- Ajustar el fotocolorímetro a 540nm en absorbancias y presionar "auto cero", para que las
absorbancias marquen "0.000".
6.- Posteriormente ajustando el 100 por ciento de transmisión con otro tubo de ensayo que solo
contenga 5ml de reactivo Drabkins
7.- Construcción de la curva a estándar. - De un estándar comercial de cianometahemoglobina (que
contiene 20g/100ml) tomar 1, 2, 3, 4 y 5 ml y ponerlos respectivamente en 5 tubos de ensayo. Añadir
a cada tubo reactivo de Drabkins hasta completar un volumen total de 5ml. Los tubos estándar así
preparados representan 4, 8, 12, 16 y 20g de hemoglobina/100ml de sangre respectivamente. Se leen
a 540 nm frente a un tubo que solo contenga reactivo Drabkins. Se construye la curva estándar, pues
esta curva nos servirá mientras estamos utilizando los mismos reactivos.
d) Valores de referencia.
Los valores normales del análisis son los siguientes:
Hombre: de 13.8 a 17.2 gramos por decilitro (g/dL) o 138 a 172 gramos por litro (g/L)
Mujer: de 12.1 a 15.1 g/dL o 121 a 151 g/L
Los niveles normales para los niños varían con la edad y el sexo
Un resultado anómalo no siempre indica enfermedad. El hecho
de que un resultado de una prueba no quede incluido dentro del
intervalo de referencia no indica que exista un problema. Los
intervalos de referencia se establecen en personas sanas
mediante métodos estadísticos, y por lo tanto cabe la posibilidad
de que un resultado no caiga dentro del rango establecido
estadísticamente a pesar de formar parte de la población libre
de enfermedad (especialmente si el valor queda muy cercano al
límite considerado como normal). No obstante, el médico presta especial atención a resultados
claramente anómalos (no alcanzan o superan por mucho los valores inferior y superior del intervalo
de referencia, respectivamente).
e) Interpretación de resultados.
Si los niveles de hemoglobina están bajos, esto podría ser signo de:
-Diferentes tipos de anemia
-Talasemia
-Deficiencia de hierro
-Enfermedad del hígado
-Cáncer y otras enfermedades
Si los niveles de hemoglobina están altos, esto podría ser signo de:
-Enfermedad pulmonar
-Enfermedad del corazón
-Policitemia vera, un trastorno en que el cuerpo produce demasiados glóbulos rojos. Puede causar
dolores de cabeza, cansancio y dificultad para respirarSi cualquiera de los niveles es anormal, no
significa necesariamente que tenga un problema médico que requiera tratamiento. La dieta, el nivel
de actividad, los medicamentos, el ciclo menstrual de una mujer y otras consideraciones pueden
afectar los resultados.
determinación de Hematocrito
a) Fundamento e importancia de la determinación.
El hematocrito es la proporción entre los elementos formes de la sangre y el plasma. Sus valores no
son iguales en todo el recorrido del torrente sanguíneo, quedando aumentado en las muestras de
sangre capilar. Se puede determinar por métodos manuales, centrifugación o métodos automáticos.
Nosotros vamos a utilizar el método por centrufugación, también llamado micrométodo. La importancia
de este tipo de análisis es medir la proporción de glóbulos rojos en la sangre para poder ayudar a
hacer un diagnóstico (de anemia o sangrado continuo) o bien para supervisar la respuesta del cuerpo
a algún tratamiento de este tipo.
b) Material, equipo y reactivos.
-Tubos capilares heparinizados o sin anticoagulante
-Muestra de sangre capilar
-Plastilina
-Gasas
-Lancetas
-Guatis
-Alcohol 70º
-Centrífuga para microhematocrito
-Lector de microhematocrito y regla milimetrada
c) Procedimiento o técnica manual.
1. Se le explica al paciente sobre el procedimiento a realizar
2. Aplicar presión o un vendaje de presión sobre el sitio de punción, esto para llevar la sangre
del dedo hasta la punta de la yema.
3. Desinfectar el lugar de la punción en el dedo.
4. Realizar la punción con ayuda de una lanceta.
5. Llenar un tubo capilar con sangre procedente del lugar de punción. Se deben llenar 3/4 partes
de su longitud por capilaridad, poniendo en contacto uno de los extremos con la sangre.
6. Limpiar el tubo capilar con una gasa.
7. Sellar un extremo con la plastilina.
8. Colocar el extremo de la plastilina hacia el exterior de la centrífuga para evitar que se salga la
sangre por uno de los extremos del capilar.
9. Centrifugar los capilares haciendo uso de la centrífuga para microhematocrito.
10. Leer los resultados.
d) Valores de referencia.
Los resultados normales varían, pero en general son:
Hombres: de 40.7% a 50.3%
Mujeres: de 36.1% a 44.3%
Los resultados normales para los niños varían, pero en general son:
Recién nacido: 44% a 56%
Lactante: 32% a 44%
Los ejemplos anteriores muestran las mediciones comunes para los
resultados de estas pruebas. Los rangos de los valores normales
pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Algunos
laboratorios usan diferentes medidas o pueden analizar diferentes
muestras.
e) Interpretación de resultados.
Los valores bajos de hematocrito pueden deberse a:
-Anemia
-Sangrado
-Destrucción de los glóbulos rojos
-Leucemia
-Desnutrición
-Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitaminas B12 y B6
-Mucha agua en el organismo
Los valores altos de hematocrito pueden deberse a:
-Cardiopatía congénita
-Insuficiencia del lado derecho del corazón
-Poca agua en el organismo (deshidratación)
-Niveles bajos de oxígeno en la sangre
-Cicatrización o engrosamiento de los pulmones
-Enfermedad de la médula ósea que causa aumento anormal en los glóbulos rojos.
Fuentes de consulta:
-[Link]
20385075#:~:text=Si%20el%20an%C3%A1lisis%20de%20hemoglobina,vitam%C3%ADnicas%2C%
20sangrado%20y%20enfermedades%20cr%C3%B3nicas.
-[Link]
hemoglobina/#:~:text=El%20an%C3%A1lisis%20de%20hemoglobina%20se,reciben%20el%20ox%C
3%ADgeno%20que%20necesitan.
-[Link]
-[Link]
del-valor-hematocrito-mediante-el-micrometodo/
Soto Reyes Citlali Sarai 4° “A” TM
