UNIVERSIDAD LOS ANGELES DE

CHIMBOTE
ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

ANALISIS CLINICO

TEMA:

Perfil Renal: Urea y Creatinina

PRUEBAS DE FUNCION RENAL
 Las unidades funcionales del riñón son las nefronas,
sistemas compuestos por vasos sanguíneos,
capilares glomerulares y túbulos, donde se
desarrollan tres procesos básicos para la formación
de la orina:

1. La filtración de la sangre que llega a los capilares

glomerulares.
2. La reabsorción tubular de sustancias que no
deben ser eliminadas.
3. La secreción tubular de sustancias que pueden
sufrir también los dos procesos anteriores.

Del equilibrio de estos procesos dependerá la correcta

formación de orina con una composición, densidad, pH y
volumen adecuados.
Toma de muestras:
Las muestras de sangre deben ser tomadas en
ayunas para evitar las interferencias debidas a la
ingesta de alimentos y la de orina recogida
durante las 24 horas.
 Pruebas de función renal
 Creatinina.
 Urea
 Electrolitos
 Sustancias anormales y sedimento urinario
 Proteínas en orina
Objetivo principal de estas pruebas.
 1) Detección precoz de las lesiones renales.
 2) Localización anatómica del daño (pre renal, glomerular,
tubular).
 3) Cuantificar el daño del órgano comprometido.

 La estructura y función del riñón se ha dividido en dos

categorías predominantes: la glomerular y la tubular. Y de
acuerdo con esta clasificación se agrupan las diferentes
enfermedades.
 Algunas de estas pruebas van dirigidas a evaluar
fundamentalmente la función glomerular a través de la medida
de la velocidad de filtración glomerular, y otras, dirigidas a
evaluar la función tubular.
 Creatinina
 Es un producto de desecho derivado de la creatina, principalmente
de origen metabólico muscular constituida por tres aminoácidos.
Es eliminada por el riñón y sirve para estimar la función renal.La
cantidad de creatinina que aparece en la sangre de un individuo
depende de su masa muscular, por tanto, esta concentración será
constante para cada individuo si no varía su masa muscular
(Valores de referencia: mujeres: 0.4-1.3 mg/dL; hombres: 0.5-1.2 mg/
dL).

 . Creatinina alta: Insuficiencia renal. Nefropatías. Obstrucciones

urinarias (afecciones de próstata, vejiga, ureter y cálculos).
 Valor referencia: adultos: 0,7-1,54 mg/100 mL. Recién nacidos:
menor a 0,6 mg/100 mL**

 El aumento de creatinina en sangre puede ser por una mala

filtración glomerular. Se valora con la determinación de creatinina
en orina de 24 horas, la relación existente entre ésta y la
concentración de creatinina en sangre. se denomina Aclaramiento
de Creatinina. Sus unidades son ml/min. y valora la filtración
glomerular. El V.N. del aclaramiento de creatinina está
comprendido entre 100-130 ml/min. Su disminución indica que el
glomérulo está filtrando menos de lo debido mientras que su
elevación indicaría una filtración anormalmente elevada.
PRUEBA DE DEPURACION DE CREATININA

 De los métodos disponibles para medir la filtración

glomerular, la depuración de la inulina es el más exacto,
pero no es práctico para uso clínico
 El clearance de creatinina endógena, introducido por Miller
y Winkle en 1938 es el método mas utilizado como
medidad de filtración glomerular.
 La determinación de creatinina sérica como índice de
función renal. Su determinación es muy fácil basta conocer
la concentración plasmátina urinaria así como la diuresis
horaria
UV
Depuración de creatinina = --------
P
( expresada en ml/min. )
 Métodos colorimétricos:
para determinación cuantitativa de creatinina en suero y orina y
método cinético o de punto final sin desproteinización para
determinar creatinina en sangre y orina.
Fundamento.
• La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio
tamponado, previa desproteinización con ácido pícrico:
obteniéndose un cromógeno de color rojo que se mide a
510 nm. la adición del ácido al medio destruye el picrato
de creatina pero no el color formado por los demás
compuestos.
• La determinación de la creatina puede llevarse a cabo por
una técnica de punto final o por una técnica cinética
eliminándose el color que se debe al cromógeno no
creatina. Los C. no C. reaccionan dentro de los 30
primeros segundos y los 5 min. Posteriores de iniciada la
reacción, en este período de tiempo el incremento de color
se debe a la creatinina.
• La creatinina directa elimina la interferencia de proteínas
del suero por el empleo de un bloqueador ( la 5-Dimetil
Amino Naftalen Sulfonamida o DANS. Determinando la
creatinina en forma cinética o de punto final
 Creatinina Directa
 Reactivos:
Estándar: Solución de creatina 20 mg/l
Acido pícrico: Solución de ácido 41.4 mmol/l
Buffer/PLE: solución 0.4% de polioxietilen lauril éter (PLE),
DANS 15 mmol/l en buffer glicina/NaOH pH 12.4.
Stopper: ácido acético al 20%
 Muestra: Suero u orina
a) recolección.- Suero de manera usual, orina de 2 o 24
horas, manteniendo de 2 a 10°C durante la recolección,
medir la diuresis, en caso de ser de 2 horas multiplicar el
volumen medido por 12 para calcular la creatinina
eliminada en 24 horas.
b) Susancias interferentes.- los sueros con bilirrubina 50
mg/l producen valores erróneos.
c) Estabilidad y almacenamiento.- La creatinina en suero
es entable hasta 24 horas i en orina hasta 4 días en
refrigeración sin conservadores.
 TECNICA DE PUNTO FINAL
 Material: espectrofotómetro o fotocolorímetro, micropipetas y pipetas,
probetas de acuerdo al requerimiento del trabajo, tubos de
fotocolorímetro o cubetas espectrofotométricas, baño de agua a 37°C,
reloj
 Condiciones de reacción:
Longitud de onda 510 nm., colorímetro con filtro verde (500 a 520 nm),
Temperatura 37°C, V. de muestra 0,1 ml, V. de React. 1 ml, v. final de Rx.
1,15 ml, Tiempo de Rx. 15 min.
 Procedimiento: En 3 tubos de fotocolorimétro marcados: B (blanco), S
(standard) y D (desconocido) colocar:

Mezclar, incubar los tubos 10 min. En baño de 37°C , dentro de los 15 min.
de retirado del baño, leer el S y el D en espectrofotómetro a 510 nm o en
fotocolorímetro con filtro verde, llevando 0, 000 D, O con el blanco

B S D
Agua destilada 0,1 --------- ---------
Standard ------------ 0,1 ml -----------
Muestra ------------ ---------- O,1 ml
Reactivo de trabajo 1ml 1ml 1ml
 Cálculos:
 Creatinina en suero:
Creatinina mg/l = f X ( D1 – D2 )
20 mg/
f = ------------
S
 Creatinina en orina

D2 – D1
Creatinina g/24 h = ------------ X V
S

siendo V volumen de la diuresis expresado en litros / 24 hs, 0,020 g/l =

Concentración Standard, 50 = Factor de dilución, Tememos:
D2 – D1
Creatinina g/24 h = ------------ x 0,020 g/l x 50 x V
S

 Depuración de creatinina endógena (D.C.E.)

Creatinina en orina g/24 hs
D.C.E. Ml/min = -------------------------------------------- x 694 ml/mil
Creatinina en suero mg/l
 Técnica cinética
 Material requerido: Espectofotómetro o fotocolorímetro, micropipetas y
pipetas, probetas de acuerdo a la necesidad del trabajo, tubos de
fotocolorímetro o cubetas espectrofotométricas, baño de agua a 25 °C, reloj.
 Condiciones de reacción: Longitud de honda 500 nm. En espectofot{ometro y
490 a 510 nm en fotocolorímetro con filtro verde, temperatura 25 °C (pudiendo
oscilar entre 22 y 30 °C), volumen de muestra 0.2 ml, Volumen de reactivo de
trabajo 1 ml, Volúmen finsl fr reacción 1,2 ml, tiempo de reacción 5 min.

 Procedimiento. Equilibrar el reactivo a temperatura de raección 25 °C antes de

agregar la muestra llevar el aparato a cero con agua destilada. Luego en dos
tubos de fotocolorímetro o cubetas espectrofotométricas marcadas S Estándar
y D Desconocido, colocar:

S D
Reactivo de trabajo 1 ml 1 ml
Standard 0, 2 ml -------------
Muestra ------------- 0, 2 ml

 Mezclar de inmediato, tomando el reloj volver a colocar los tubo en el baño y a

los 30 seg exactos, medirn la absorbancia S1 y D1) y continuar la incubación,
medir nuevamente S2 yD2 a los 5 min. ( 4 min y 30 seg después de la primera
lectura
 Cálculos
 Creatinina en suero:
Creatinina mg/l = ( D1 – D2 ) x f
20 mg/
f = ------------
S
Creatinina en orina:
Creatinina en orina
D2 – D1
Creatinina g/24 h = ------------ x V
S2 – S1
siendo V volumen de la diuresis expresado en litros / 24 hs, 0,020 g/l =
Concentración Standard, 50 = Factor de dilución, Tememos:
D2 – D1
Creatinina g/24 h = ------------ x 0,020 g/l x 50 x V
S2 – S1

 Depuración de creatinina endógena ( D.C.E.)

Creatinina en orina g/24 hs
D.C.E. Ml/min = -------------------------------------------- x 694 ml/mil
Creatinina en suero mg/l
 Determinación de la Urea
 Es la forma no tóxica del amoníaco que se genera en el
organismo a partir de la degradación de proteínas, que
provienen tanto de la dieta como del recambio fisiológico.
Debido a su pequeño tamaño, presenta una reabsorción y
secreción variable en el túbulo renal acompañando al
agua. Los valores normalmente observados en sangre para
un individuo en ayunas son: 0.1-0.5 g/L.

 La retención de urea en sangre refleja el mal

funcionamiento renal globalmente, aunque se ve afectado
por la dieta rica en proteínas, por el funcionamiento
hepático y por estados catabólicos. Además, en el túbulo,
la urea acompaña al agua, de modo que, si la diuresis esta
elevada, la excreción de agua es mayor y por tanto se
eliminará urea.
 Por el contrario, si el sujeto presenta una diuresis baja
(deshidratación, hemorragia, insuficiencia cardiaca,
insuficiencia renal, etc.) aumentará la reabsorción, y por
tanto la concentración de urea en sangre.
 DETERMINACIÓN DE UREA
EN LÍQUIDOS BIOLÓGICOS
METODO DE BERTELOT:
 FUNDAMENTO: La ureasa descompone específicamente a la úrea
produciendo dióxido de carbono y amoniaco; éste reacciona con
salicilato de hipoclorito en medio alcalino produciendo un indofenol
de color verde.
 REACTIVOS PROVISTOS:
Reactivo 1 concentrado.- Solución de buffer fosfatos 200 mmol/l, pH
7,0, ácido salicílico750 mmol/l, nitroprusiato de sodio 20 mmol/l, EDTA
10 mmol/l
Reactivo 2 conentrado.- solución hipoclorito de sodio 10 mmol/l, en
hidróxido de sodio 0,1 mmol/l
Ureasa.- Ureasa ≥ 75 U/ml en solución glicerinada.
Standard.- Solución de urea 0,60 g/l
 REACTIVOS NO PROVISTOS:
Reactivo 1.- preparar diluyendo 1 parte del reactivo 1 concentrado + 4
partes de agua destilada
reactivo 2.- preparar diluyendo 1 parte del reactivo 2 concentrado + 4
partes de agua destilada
Reactivo 1 + ureasa.- se prepara agregando 4 ml de ureasa cada 100 ml
de reactivo 1
 MUESTRA: Suero o plasma u orina.
Recolección.- Obtener suero con anticoagulante; se debe tener en
cuenta que los anticoagulantes que contienen fluoruros inhiben la
acción de la ureasa, la urea en suero es estable por varios días en
refrigerados o meses en congelador sin agregar conservadores
 CONDICIONES DE REACCIÓN: Temperatura de reacción 37 °C o
temperatura ambiente; tiempo de reacción 10 min a 37 °C o 20 min a
temperatura ambiente.
 PROCEDIMIENTO:

 Técnica para suero o plasma, en 3 tubos de fotocolorímetro marcados B

(blanco) D (desconocido) y S (Standad)colocar
B S D
Standard ------ 10 ul -------
Suero o plasma -------- ------- 10 ul
Reactivo 1 + Ureasa 1ml 1ml 1ml

• Mezclar e incubar por 5 min a 37 °C o 10 min a Temp. ambiente

Reactivo 2 1ml 1ml 1ml

• Leer en espectofotómetro a 570 nm o en fotocolorímetro con filtro naranja

560 a 580 nm.
 Técnica para orina
Se sigue la misma técnica que para suero o plasma
utilizando orina diluída con agua o solución fisiológica.
Como el contenido de la úrea esta relacionado con la
densidad es conveniente diluir según el siguiente
esquema.
Densidad hasta 1,015 ……………..diluir 1/10
Densidad hasta 1,016 a 1,025 …….diluir 1/20 Densidad
mayod de 1,025 ………....diluir 1/40
Como la orina contiene cantidades variables de amoniaco
debe efectuarse un blanco de orina (BD, dicho blanco se
ejecuta igual que el blanco de reactivos (B) con la
diferencia que despues de agregado el reactivo 2 se
agregan 10 ul de dilución de orina, llevar el aparato a
cero con el blanco de reactivos (B) y leer el Standard (S), el
blanco de orina (BD) yel desconocido (D).
 El color de al reacción es estable durante 2 horas por lo
que la absorbancia debe ser leído en ese lapso.
 CÁLCULOS
Suero o plasma.
0,60 g/l
Urea g/l = D x Factor Factor = -----------
S

Orina
(D – BD) x 0,60 g/l
Urea g/l = ---------------------- x dilución
S
 Otras pruebas de función renal
 Electrolitos:
Los electrolitos son iones libres que existen en los líquidos
corporales. Los principales en líquido extracelular son: Sodio (Na+),
Potasio (K+), Cloro (Cl-) y Bicarbonato (HCO3-). Todos los procesos
metabólicos del organismo afectan de alguna manera a la
concentración de electrolitos en sangre y orina. Su concentración
(mmol/l) es determinante para la osmolalidad, el estado de hidratación
y el pH de los líquidos corporales.

A lo largo de la nefrona los electrolitos son reabsorbidos o secretados

según sea necesario para regular su concentración sanguínea y para
regular tanto la carga osmótica como el pH de la orina.

La existencia de una patología renal se reflejará en el desequilibrio de

la concentración de estas sustancias tanto en sangre como en orina
de 24 horas. La interpretación de estas determinaciones es compleja
ya que numerosas patologías, distintas a la renal, alteran su
concentración.
Junto a otras pruebas como el aclaramiento de creatinina, la
determinación de urea sanguínea y urinaria, la determinación de Calcio
(Ca++) y Fósforo (PO4H3-) en sangre y orina, etc., representan una
buena aproximación de la función renal.
 Proteínas en Orina:
 Normalmente no aparecen en orina salvo en determinadas
circunstancias como en el embarazo, tras hacer deporte,
después de haber estado mucho tiempo de pie, etc.
 No obstante, hay causas patológicas que se manifiestan
con proteinuria (proteínas en orina).

 El estudio de laboratorio de la proteinuria comienza con la

determinación de la concentración de proteínas totales en
orina. Si se detecta su presencia hay que descartar que se
deba a una patología no renal que implique un aumento de
producción, como en mielomas, fiebre, procesos
inflamatorios, quemaduras, etc.
 Una vez descartadas estas posibilidades, la causa será
renal.
 En este caso, la proteinuria puede deberse a una alteración
del glomérulo que permite que las proteínas filtren y/o a
una alteración del túbulo, que no las reabsorbe
 Proteinuria Glomerular:
Para estudiarla, se determina una proteína de un tamaño
límite para la filtración, por ejemplo albúmina, y otra
proteína de gran tamaño que en condiciones normales no
filtra como por ejemplo las inmunoglobulinas. Si estas
proteínas aparecen en orina, indican una lesión
glomerular.
 Proteinuria Tubular:
Para estudiarla, se determina una proteína que filtra en el
glomérulo pero es reabsorbida totalmente en el túbulo, con
lo que no debería aparecer en la orina. Se determinan
proteínas pequeñas como por ejemplo la proteína
transportadora de retinol, a1-microglobulina, b2-
microglobulina, etc. Si aparecen en orina se debe a que el
túbulo no está reabsorbiendo correctamente.

 Proteinuria Mixta:
Aparecen todo tipo de proteínas en orina porque se
encuentran dañados tanto el glomérulo como el túbulo de
las nefronas. Todos los parámetros anteriormente
descritos indicarán que existe un daño renal.
 Anormales y Sedimento Urinario:
Este es uno de los análisis más inespecíficos y sensibles
para detectar cualquier tipo de alteración renal.

La primera parte de la prueba consiste en detectar,

mediante tiras reactivas, la presencia de sustancias que en
situación normal no estarían presentes.

También informa de la densidad y el pH de la orina.

Posteriormente, se procede a la observación al

microscopio de la muestra de orina concentrada 10 veces,
para informar la presencia de materiales insolubles o
elementos formes que se han acumulado en la orina
durante la filtración glomerular y el tránsito del líquido por
los túbulos renales y del tracto urinario inferior.