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Pruebas de Ureasa en Microorganismos

El documento describe dos pruebas de ureasa, la prueba de Stuart y la prueba de Christensen, que se usan para determinar la actividad de ureasa en bacterias. La prueba de Christensen es más sensible y puede detectar pequeñas cantidades de ureasa en una variedad más amplia de bacterias. También describe el agar citrato de Koser y Simmons, que se usa para diferenciar bacterias entéricas según su capacidad para utilizar citrato como fuente de carbono.

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Pruebas de Ureasa en Microorganismos

El documento describe dos pruebas de ureasa, la prueba de Stuart y la prueba de Christensen, que se usan para determinar la actividad de ureasa en bacterias. La prueba de Christensen es más sensible y puede detectar pequeñas cantidades de ureasa en una variedad más amplia de bacterias. También describe el agar citrato de Koser y Simmons, que se usa para diferenciar bacterias entéricas según su capacidad para utilizar citrato como fuente de carbono.

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Caldo Urea

Caldo Urea puede usarse para la determinación de la actividad de urea de


Enterobacterias, así como de microorganismos de las familias de Brucella,
Bacilos, Micrococos, Micobacterias y Proteus.

La función de la ureasa está relacionada con la descomposición de los


compuestos orgánicos. No todos los microorganismos son capaces de sintetizar
esta enzima, por tanto su determinación en el laboratorio permite identificar ciertas
cepas bacterianas e inclusive diferenciar entre especies de un mismo género.

Cuando los organismos utilizan urea, se genera amoníaco durante la incubación,


lo cual hace que la reacción de estos medios sea alcalina. Los tubos ureasa
positivos hacen que el indicador de fenol tome un color rojo oscuro-violáceo
(alcalinización).

Ureasa Negativa

Ureasa Positiva
Existen dos tipos de prueba de la urea: Stuart y Christensen. Se diferencian en
su composición y en la sensibilidad.

 Sensibilidad

La primera es especial para evidenciar gran cantidad de ureasa producida por


especies del género Proteus.

La segunda es más sensible y puede detectar pequeñas cantidades de ureasa


generadas tardíamente por otros géneros bacterianos, tales como Klebsiella,
Enterobacter, Staphylococcus, Brucella, Bordetella, Bacillus, Micrococcus,
Helicobacter y Mycobacterium.

 Composición

El caldo urea de Stuart está compuesto por urea, cloruro de sodio, fosfato
dipotásico, fosfato monopotásico, extracto de levaduras, rojo de fenol y agua
destilada.

En tanto que, el caldo o agar urea de Christensen está compuesto por peptonas,
cloruro de sodio, fosfato monopotásico, glucosa, urea, rojo de fenol, agua
destilada y agar-agar. Este último solo si se trata del medio sólido.
Agar Citrato de Koser y Simmons

Agar Citrato de Simmons se utiliza para diferenciar bacilos entéricos Gram


negativos en base al citrato de sodio como fuente de carbono y a la sal de amonio
inorgánica como fuente de nitrógeno.

En 1923, Stewart Koser desarrolló un medio líquido formado por sales


inorgánicas, en el que una sal de amonio era la única fuente de nitrógeno y
el citrato era la única fuente de carbono, para realizar la diferenciación entre
lo que ahora se conoce como Escherichia coli y Enterobacter aerogenes.

James S. Simmons, en 1926, modificó la fórmula de Koser con la adición de


1,5 % de agar y azul de bromotimol.

Agar Citrato de Simmons se usa de la misma manera que el Caldo de Citrato


Koser (Cat. 1200) utilizando una de las reacciones de IMVIC (Indol, Rojo Metilo,
Vogues Proskauer, Citrato); prueba del citrato.

Solo los organismos capaces de utilizar citrato como fuente de carbono crecen y
producen un cambio de color de verde a azul (alcalino), mientras que cuando no
se utiliza citrato (prueba negativa), el color del medio permanece igual.

Citrato Positivo

Citrato Negativo

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