UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
CADENA RESPIRATORIA
Temario
Definiciones
Clasificación
Inh. Reversible: características
Inh. Irreversible: características
© Jorge Plasencia Alvarez
INHIBICION ENZIMATICA
Definiciones
INHIBICION: disminución de la actividad química por acción de un
inhibidor
INHIBICION ENZIMATICA: Proceso en el cual moléculas diferentes
del sustrato pueden unirse al enzima reduciendo total o
parcialmente su actividad catalítica.
Inhibidor: Efector que disminuye la actividad
enzimática, a través de interacciones con el
centro activo u otros centros específicos
(alostéricos). Los inhibidores isostéricos a su vez pueden clasificarse
Clasificación
en dos tipos:
Isostéricos: ejercen su acción en el centro activo.
Inhibidores Reversibles: establece un Inhibidores Irreversibles: modifican
Alostéricos: ejercen su acción sobre otra parte equilibrio con la enzima libre, con el químicamente a la enzima.
complejo enzima-sustrato o con ambos. E + I → E’
causando un cambio conformacional con E + I ↔ EI
repercusión negativa en la actividad enzimática ES + I ↔ ESI
INHIBICION ENZIMATICA
Importancia Clasificación
Regular vías metabólicas, de modo que las
necesidades del organismo sean satisfechas de
manera consistente.
Numerosos tratamientos clínicos, reducen o
suprimen la actividad de enzimas específicas.
Desarrollan técnicas para determinar la
arquitectura física, química y las propiedades
funcionales de las enzimas.
Fármacos, antibióticos,
conservadores
alimentarios, venenos y
metabolitos de procesos
bioquímicos normales.
INHIBICION ENZIMATICA
Clasificación Inhibición Competitiva
Compite con sustrato
parecido estructuralmente
al sustrato
Se une de forma reversible a enzima y no a complejo
El inhibidor se fija al centro
catalítico o activo, el acceso Forma complejo
del sustrato al sitio activo
queda bloqueado.
INHIBICION ENZIMATICA
Clasificación Inhibición Competitiva
Efecto del inhibidor se revierte
Se mantiene
Actividad de
enzima disminuye
aumenta
Inhibición puede revertirse al incrementar la concentración del Se emplea el inverso de Lineweaver para su
sustrato visualización, afectando el intercepto en X: 1/Km
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Competitiva Ejemplos
Productos de la reacción.
Inhibidores tienen una estructura semejante a
Análogos del sustrato que no se metabolizan.
la del sustrato
Derivados del sustrato.
Unión covalente del FAD a un resto de His de la SD.
El enzima es fuertemente inhibido por malonato,
análogo estructural del succinato.
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Competitiva Ejemplos
Inhibidores semejan una estructura del estado Se unen con mayor afinidad
Análogos del Estado de Transición que el sustrato
transicional
Tratamiento para Influenza: Oseltamivir
Análogo del ácido siálico
Compite con el ácido
siálico por el sitio activo
de la enzima viral:
Neuroamidinasa
Inhibe la escisión del
ácido siálico de proteínas
de células hospederas
impidiendo la liberación
de nuevos virus.
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Competitiva Ejemplos
Tratamiento de Hipertensión Arterial
▪ CE [Link], dipeptidil
carboxipeptidasa I
(DCP1),
▪ peptidilpeptidasa I,
▪ quinasa II
Es producida por
diferentes tejidos
(sistema nervioso
central, epitelio de
los túbulos
proximales, endotelio
vascular y epitelio
pulmonar)
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Competitiva Ejemplos
Tratamiento de Hipertensión Arterial
Análogo del
dipéptido terminal
de angiotensina I
ECA
Dominio • Largo,
ectoenzima Extracelular • Contiene los sitios activos
con alta afinidad para el
angiotensinogeno I
• Corto,
• está la porción carboxilo-
Se une al átomo de
terminal
zinc, acoplado a
• facilita el anclaje.
residuo de prolina
Dominio
Citoplasmático
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Competitiva Ejemplos
Tratamiento de Intoxicación Alcohólica por metanol
Sitio activo contiene átomo de cinc
unido a cadena lateral de OH- de
serina y N de una histidina.
histidina extrae un H+
de la serina en el sitio
activo, el cual a su vez
atrae el H+ del grupo –
OH del sustrato,
dejando al oxígeno con
una carga negativa que
es estabilizada por el
Cataliza la oxidación del cinc
etanol
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Competitiva Ejemplos
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Competitiva Ejemplos
Tratamiento antineoplásicos
Agentes antibacterianos:
Sulfamidas
Compiten con el PABA síntesis
de DNA de bacterias
✓ Inhibe síntesis de DNA
Estatinas
HMG-CoA reductasa
✓ Compite por la dihidrofolato reductasa Limitante sintesis de colesterol
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición No Competitiva
Inhibidor puede unirse tanto a enzima como al complejo E-S
Inhibidor no se parece a sustrato
No se revierte la inhibición al
incrementar la concentración del
sustrato
Formas: (2)
▪ Pura: inhibidor se une lejos del sitio activo.
▪ Mixta: se une cerca del sitio activo.
inhibidor se une en un lugar distinto del sitio
activo. Produce una modificación
conformacional de la enzima.
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición No Competitiva
Se emplea el ploteado de Lineweaver.
En el eje de la Y: 1/Vmax más alta ( Vmax más
baja)
No se afecta el Km en la forma clásica pero si la V max
La inhibición puede ser reversible si el inhibidor se separa de la E por métodos físico químicos como la diálisis
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición No Competitiva Ejemplos
Inhibición
Ritonavir
Competitiva
Nevarapina Etravirina Residuo de tirosina en posiciones 181 y
Efavirenz Rilpivirina 188 de subunidad p66 de TI
INHIBICION ENZIMATICA
Medicamento Enzima inhibida Enfermedad tratada
Amburicin® Topoisomerasa 2 Cáncer (Quimioterapia)
Antabuse® Aldehido deshidrogenasa Alcoholismo
Captopril® Enzima de la síntesis de angiotensina Hipertensión
Digoxin® ATPasa de la bomba K+ Na+ Problemas cardiacos
Lipitor® 3-hidroxo-3-metil-glutaril CoA Hipercolesterolemia
Viagra® Fosfodiesterasa 5 5 Disfunción eréctil
Hycamtin® Topoisomerasa 1 Cáncer(Quimioterapia)
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Acompetitiva
Tipo poco frecuente de inhibición no
competitiva
Inhibidor sólo se une al complejo E-S
y no a la enzima libre.
Inhibidor es ineficaz a bajas
concentraciones de sustrato porque
hay muy poco complejo ES
Se observa a menudo en el caso de enzimas que se
unen a más de un sustrato.
Inhibición competitiva, no competitiva y acompetitiva: son reversibles, por tanto pueden disocriarse de la enzima debido a que se unen
mediante enlaces no covalentes.
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Irreversible
A diferencia de la inhibición reversible, el efecto de los
Generalmente la inhibición no competitiva es irreversible inhibidores irreversibles depende del tiempo de actuación del
inhibidor.
Los inhibidores irreversibles se unen covalentemente a la enzima, con frecuencia a la cadena lateral de un residuo aminoacídico del
sitio activo
Enzima con grupo Agente alquilante Enzima inactiva
sulfhidrilo libre (yodoacetato)
Producen cambios
permanentes en la
Son por lo general
enzima, con deterioro altamente tóxicos
definitivo de su
capacidad catalítica
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Irreversible Tipos
unen a grupos SH ó Ser del centro catalítico, necesarios Agentes Alquilantes
para la actividad y no se pueden separar.
Reactivos de grupos SH: agente alquilantes (yodoacetato), compuestos
insaturados (N etilmaleimida), formadores de mercáptidos (p-
hidroximercuribenzoato), oxidantes (promueven la oxidación de dos
tioles a un disulfuro)
Organofosfóricos: diisopropilfluorofosfato (actúan sobre enzimas
serínicas Ser-activa), insecticidas (parathion), Inhibidores de la
acetilcolinisterasa, neurogases
Ligandos de metales. Ión cianuro (se fija con gran afinidad a la 6ta.
posición del hierro hemínico, impidiendo toda modificación posterior, de
esta manera actúa sobre el sistema citocromo oxidasa)
Metales pesados: Plomo, arsénico
Se inactiva mediante
alquilación con yodoacetato
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Irreversible Tipos
Formadores de Mercáptidos Diisopropilfluorfosfato
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Irreversible Insecticidas, Inhibidores de acetilcolinisterasa
Enzima con Serina forma intermediario
residuos de serina covalente con parte del sustrato
DFP, Forma complejo
organofosforados covalente con
y pesticidas serina
No puede ser hidrolizado
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Irreversible Tratamiento con Penicilinas
Inhibe la síntesis de la pared bacteriana: enzima bacteriana glucopéptido transpeptidasa
Contiene puente peptídico tensado
Los polímeros lineales de con anillo B-lactámico, que es similar
unidades G y M forman enlaces al estado de transición de la reacción
cruzados mediante la acción de normal de rompimiento, por tanto la
las transpeptidasas PNC se une fácil al sitio activo.
Serina proteasa, normalmente
rompe enlaces peptídicos entre
2 residuos de D-alanina
Cuando enzima intenta romper
este enlace, esta comienza a
unirse covalente e
irreversiblemente a la serina dl
sitio activo, inactivandola.
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibición Irreversible Intoxicación por metales pesados: Hg2+, Pb2+ , CN-, As
Metales pesados: Plomo y
mercurio, se une a grupo
sulfhídrilo.
▪ Aspirina inhibe la síntesis de Prostaglandinas
▪ Fármacos antitumorales que actúan como análogos de la citidina:
Inhibidores irreversibles del metabolismo del DNA (citarabina, Azacitidina,Gemcitabidina
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibidores Suicidas
Moléculas, que se parecen al sustrato se unen al
centro catalítico de manera específica (en forma Modo de acción de los inhibidores suicidas
irreversible) igual que lo hace el sustrato o los
inhibidores competitivos
Xantina Alopurinol
Una vez unidos, la enzima transforma
la molécula en una especie química
muy reactiva que modifica
covalentemente a la enzima
inactivándola. No pueden dar
productos
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibidores Suicidas
Ejemplos: Beta lactamasa bacteriana
S La utilización masiva de antibióticos b- Preparados de penicilinas o penicilinas semisintéticas se formulan
R CO NH CH3 lactámicos (penicilinas, sus derivados añadiendo un inhibidor suicida de la b-lactamasa, el ácido
N CH3 semisintéticos y cefalosporinas) ha clavulánico.
O conducido a la aparición de resistencias
COO- O O
a los mismos CH2OH
C
O CH2OH
Penicilina (activa) N
C
CH CH2 O
C
H HN H
O Ser
Los microorganismos resistentes a COO -
COO-
estos antibióticos lo son por
Ác. clavulánico Esta molécula
producir una enzima, la b-
lactamasa, que inactiva a los reacciona con la
antibióticos b-lactámicos serina activa de la
S b-lactamasa,
R CO NH CH3 produciendo su
O C HN CH3 inactivación
O-
COO-
Á[Link] (inactivo)
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibidores Suicidas
Ejemplos: Sistema de Monoaminooxidasa cerebral (MAO) La MAO es una flavoproteína: tiene un grupo prostético
flavínico (FAD) fundamental para la catálisis. Los inhibidores
HO
Los estados depresivos, en general, suicidas de la MAO inactivan al cofactor FAD.
están relacionados con un descenso en O
HO CHOH CH2 NH2
la concentración de neurotransmisores H3C N
NH
adrenérgicos (dopamina, noradrenalina,
Noradrenalina E S H2C N N O CH3
etc.) en determinadas regiones del R HC C CH N+
cerebro CH3
Flavina
pargilina
Inhibición suicida de la
Una de las enzimas encargadas de la MAO mediante Pargilina
HO degradación de estos neurotransmisores es
la monoamino oxidasa H3C
N+ CH CH
HO CHOH CHO H3C CH O
H3C N
Dihidroxifenilglicol NH
E S H2C N NH O
La inhibición de la monoamino oxidasa se emplea como R
terapéutica de los estados depresivos. Se han desarrollado Flavina modificada
muchos inhibidores suicidas de la MAO
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibidores Suicidas
Ejemplos: Alopurinol
Xantina oxidasa cataliza la oxidación
de hipoxantina a xantina y de xantina
a ácido úrico.
Enzima contiene complejo molibdeno-sulfuro (Mo-S) que une los sustratos y transfiere los
electrones que se requieren para las reacciones de oxidación
La oxidación se realiza por complejo de coordinación de molibdeno-oxo-sulfuro en el sitio
activo que forma un nuevo complejo con el grupo que será oxidado,
INHIBICION ENZIMATICA
Inhibidores Suicidas
Ejemplos: Alopurinol
Xantina oxidasa es capa de realizar Oxipurinol permanece unido a esfera de
el primer paso de oxidación y coordinación de molibdeno, impidiendo el
convertir alopurinol en aloxantina siguiente paso de la reacción.
Enzima ha cometido suicidio
INHIBICIÓN ENZIMATICA
Bibliografía Empleada
Blanco A. “Química Biológica”9° edición. El Ateneo, Argentina-2014
Herrera E. “Bioquímica Básica”1° edición. Elsevier, España-2014
Baynes J. “Bioquímica Médica”4° edición. Elsevier, España-2014
