I.
INTRODUCCIÓN
El estudio de los hongos, denominada micología, comprende tanto el
examen de sus componentes morfológicos específicos como la
determinación de sus funciones respectivas. El estudio realizado se
basa en sus características, su fisiología y su ecología deben ser
analizadas en detalle con métodos microbiológicos.
Poseen organización celular eucariota y la característica más relevante
es la presencia de pared celular, constituida en un 80-90 % de
polisacáridos complejos, proteínas y glucoproteínas. Son mayor tamaño
que las bacterias, se distinguen de otros eucariotas como los animales
por ser inmóviles y de las algas y plantas por carecer de pigmentos
fotosintéticos.
Son de nutrición heterótrofa, es decir dependen de nutrientes orgánicos,
estos organismos pueden ser unicelulares (levadura) o multicelulares
(filamentosos), sin embargo, también existen hongos di mórficos
principalmente patógenos que presentan las dos formas
alternativamente.
II. MARCO TEÓRICO
2.1.DEFINICIÓN DE HONGOS
Su origen y permanencia en la tierra es incierto, algunos micólogos creen en un
origen Monofilético a partir de algas verdes y Polifilético a partir de diversos
grupos de algas. Los hongos que forman cuerpos fructíferos forman tejidos
especiales (Roncal 1993), denominados plecténquima y prosénquima
(Alexopoulos y Mims 1979).
Los hongos son unicelulares y pluricelulares, por naturaleza estos son
heterótrofos en la mayoría no forman tejidos específicos, la mayoría se deja ver
como micelio o soporte de sus estructuras en los diferentes hospederos
(Roncal 2004).
Presentan estructura talofítica estando formado por una serie de filas o hileras
de células denominadas hifas que en conjunto constituyen el micelio (Morales
2009). Este constituye la parte vegetativa y da lugar a las estructuras
propagativas, reproductivas y de conservación (Ames de Icochea, Teresa
1974).
Los filamentos, conidióforos y conidios son hialinos brillantemente coloreados
hasta negro; por el número de células pueden ser uni a multicelulares (Roncal
1993).
Desde la perspectiva ambiental, un aumento de estos microorganismos en su
hábitat normal trae consigo una alteración en el medio ambiente llegando a
producir una contaminación del aire, promoviendo la dispersión de numerosas
esporas desde sus reservorios a los diferentes ambientes. La posibilidad de
que una persona inhale esporas fúngicas, tanto en ambientes abiertos como
cerrados, es elevada. Las respuestas alérgicas a los hongos se relacionan de
una manera más directa con las esporas que con la presencia de restos
miceliares u otras células fúngicas (Rivadeneira 2011).
2.2.DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA DE LOS HONGOS
Los hongos viven en todos los climas de la tierra en presencia de una
adecuada humedad, temperatura y un sustrato orgánico disponible. Las
esporas en suspensión, permanecen en el aire confinado o libre según las
estaciones del año y a los factores climáticos, considerándose éste un
ambiente transitorio que permite la distribución a distancia de estos
organismos, pues la mayoría de las esporas pasan parte de su vida en la
búsqueda de nuevas fuentes de sustrato y la supervivencia de la especie
(Aira et al. 2005).
2.3.GENERALIDADES DE LAS CLASES DEL REINO FUNGI
Basada principalmente en las características estructurales, modos de
formación de las esporas, estructura y formación de los cuerpos fructíferos
durante su ciclo biológico (Lura et al. 1997), a la fecha se considera el
Reino Fungi incluye a las clases que a continuación se describen:
A. Clase Chytridiomycetes, en esta clase el constituyente principal de la
pared celular es la quitina además de la celulosa. Hongos conformado
por una célula denominada ´´zoospora´´ manteniendo un movimiento
por flagelo (Alexopoulos y Mims 1979), algunas especies como
Physoderma zea mays afectan al maíz y Synchytrium endobioticum
ocasionan la verruga en papa (Latorre 1999).
B. Clase Plasmodiophoromycetes, son organismos unicelulares, a esta
estructura se denomina zoospora provistas de dos flagelos desiguales
tipo látigo que tienen movimiento, algunas especies importantes son:
Plasmodio hora brassicae provoca hernia en coles, Spongospora
subterránea ocasiona la roña polvorienta en papa (Latorre 1999). Las
especies que integran esta clase viven como parásitos obligados; en
una etapa de su desarrollo presentan una etapa esporangial y no
forman cuerpos fructíferos, permaneciendo individualmente las esporas
en reposo (Roncal 1993).
C. Clase Oomycetes, presentan micelio verdadero, conformado por hifas
multinucleadas (Alexopoulos y Mims 1979), Desarrollan un micelio con
pared celular compuesta por Glucan; algunas especies como
Phytophthora infestans causante de la rancha en papa, Phytophthora
palmivora causa la pudrición del fruto del cacao, Phytophthora fragariae
ataca a la fresa (Latorre 1999).
D. Clase Zygomycetes, las especies que integran esta clase, presentan
micelio bien desarrollado, las hifas relativamente de diámetro grueso
son cenocíticas, las más conocidas son Rhizopus stolonifer ocasionan
pudrición en raíces tuberosas, tubérculos y frutos carnosos (Roncal
2004). Producen estructuras gruesas denominadas ´´Zigosporas´´ que
aseguran la sobrevivencia de los hongos en condiciones desfavorables.
Orden Mucorales, son saprofitos que viven en sustratos orgánicos
en descomposición
Orden Entomophthorales, hongos que parasitan a los insectos, la
especie más conocida es Entomophthora muscae denominado
hongo de las moscas por hallarse en los cuerpos muertos de las
moscas domesticas pegadas a los vidrios (Alexopoulos y Mims
1979).
Orden zoopagales, adoptados a una vida parasitaria en amibas,
rizópodos y nematodos; la mayoría de las especies producen
conidios aéreos filiformes, fusiformes o globosos; estos se separan
de las hifas que los llevan y germinan en la superficie del hospedero
(Alexopoulos y Mims 1979).
E. Clase Deuteromycetes, también se los conocen como hongos
imperfectos, debido a que de la mayoría de especies no se conoce la
fase perfecta o teleomorfa (Roncal 2015), se reproducen por medio de
conidios, que se forman en conidióforos libres, o dentro de estructuras
denominados picnidios, acérvulos (Roncal 1993) y otros en cuerpos
fructíferos denominados ascocarpos, propio de la clase Ascomycetos,
las esporas se forman dentro de células especiales conocidos como
ascos y otros cuyas esporas se forman sobre basidios que se
encuentran en tejidos especiales del basidiocarpo es el caso de los
miembros que integran la clase Basidiomycetes (Alexopoulos y Mims
1979).
F. Clase Ascomycetes, se pueden hallar en hábitats diversos, pueden ser
saprobios viviendo en el suelo o sobre los troncos en descomposición,
produciendo cuerpos fructíferos grandes de fácil observación; parásitos
en plantas observándose cuando los efectos se producen sobre el
hospedero y coprófilos porque solo crecen en el estiércol de algunos
animales (Alexopoulos y Mims 1979).
G. Clase Basidiomycetes, comúnmente se conoce como hongos de
sombrero, hongos de oreja, hongos en repisa, cuernos apestosos,
hongos niditos, royas y carbones; estos dos últimos son de importancia
en la agricultura (Roncal 1993). Producen basidiosporas en la parte
externa de una estructura especializada denominado ´´Basidio´´,
constituyen hongos con y especies dañinas como útiles al hombre, los
dos grupos más representativos que causan enfermedades a las
plantas son los carbones y royas (Alexopoulos y Mims 1979).
2.4.COMPOSICIÓN GENERAL DE LOS HONGOS
Las paredes celulares están conformadas por varias láminas compuestas de
fibrillas constituidas de productos químicos como polisacáridos, proteínas,
lípidos, destacando la quitina como compuesto principal de la mayoría de
hongos (Roncal 1993); los que varían en calidad y cantidad según el tipo de
célula fúngica; son organismos quimiorganotrofos que viven en ambientes
diversos (Lura et al. 1997).
2.5. NORMANCIA DE HONGOS
Las estructuras de conservación del hongo tienen la capacidad de soportar
condiciones adversas de medio ambiente sin alterarse y comenzar a
desarrollarse cuando hay hospedero aparente y las condiciones del medio le
son propicias (Ames de Icochea, Teresa 1974).
Para evitar la degeneración y el envejecimiento de las cepas es necesario
preservarlas adecuadamente y retardar hasta donde sean posibles los cambios
degenerativos normales que ocurren en las células. La declinación en las
características deseables de una cepa, se han atribuido a diferentes factores
que actúan en el almacenamiento de la misma, como se enumeran a
continuación: Carencia o agotamiento de los nutrientes en el medio de cultivo;
acumulación de secreciones tóxicas propias del metabolismo del hongo;
alteración del pH en el medio (acidez o alcalinidad); disminución en la
concentración de oxígeno y la consecuente acumulación de C02
2.6.CONDICIONES DE CRECIMIENTO Y DESARROLLO DE LOS HONGOS
La mayor parte de los hongos crecen entre 0° y 35°C, pero la temperatura
óptima varia de 20° a 30°C. Tienen la capacidad para soportar temperaturas
extremadamente bajas en fase de reposo, condiciones propicias para su
almacenamiento a largo plazo en el caso de ser usados como cultivo. A
diferencia de las bacterias, prefieren medios ácidos para su crecimiento, siendo
el pH de 6 el óptimo para la mayoría de las especies; la luz no es esencial para
su crecimiento, pero desempeña un papel importante en la dispersión de las
esporas, puesto que los órganos soportadores de esporas de hongos
presentan fototropismo positivo y descargan sus esporas hacia la luz (Subero
2001).
Requieren compuestos orgánicos preformados como fuentes de energía y de
carbono para la biosíntesis (heterótrofos). El Carbono, Nitrógeno, Oxígeno e
Hidrógeno, son los elementos químicos cuantitativamente importantes,
seguidos por el Fósforo, Azufre, Magnesio y Potasio (Lura et al. 1997).
III. MATERIALES Y MÉTODOS
1. EQUIPOS Y MATERIALES
Solución de Azul de Metileno
Algodón
Microscopio compuesto
Porta y cubreobjetos
Asa de Koll
Pinzas estériles
Mechero
Muestras infectadas
Placas con Agar Sabourad
2. PROCEDIMIENTO
a) Identificación de Mohos en muestras infectadas
Técnica para observar el hongo en muestras frescas mediante el
microscopio
Inspeccionar cuidadosamente la parte infectada de la muestra
Aspecto Macroscópico: forma de desarrollo de colonias y
pigmentos
Aspecto Microscópico: al estado fresco entre lamina y laminilla
Transferir el portaobjeto, con la aguja de kolle, una pequeña
porción de filamentos del hongo
Colocar una gota de colorante
Extender cuidadosamente sobre la gota del colorante valiéndose
de otra aguja de kolle. Cubrir la preparación con una lámina
cubreobjetos. Observar al microscopio con lentes de menor y
mayor aumento (10 y 40)
Distinguir los elementos constituyentes del hongo, como: órgano de
reproducción, micelio, presencia de esterigmas, esporangios, etc.
Clasificar los diferentes hongos en géneros, grupos y especies
basándose en sus caracteres particulares.
Graficar y esquematizar los géneros encontrados.
b) Micro cultivo (cultivo en cámara húmeda)
Técnica para observar el desarrollo y evolución de microorganismos
desarrollados en el portaobjetos para observar en el microscopio.
En condiciones estériles y con ayuda del bisturí, cortar el agar
sabouraund en trozos de 1x 0.5cm.
Colocar una porción r ectangular sobre la lámina portaobjeto.
En un extremo de esta porción colocar, mediante el asa del Kolle
esporas del hongo en estudio.
Cubrir con la lámina cubreobjetos.
Colocar el conjunto dentro de la placa Petri agregando gotas de
agua destilada estéril en forma constante para que no pierda
humedad.
Colocar un papel filtro o un algodón húmedo junto al portaobjetos.
Dejar a temperatura (20 a 25°) durante una semana.
Observar el microscopio diariamente hasta observar un desarrollo
completo.
Graficar y esquematizar el proceso en el desarrollo de los hongos.
c) Aislamiento de hongos del medio ambiente
Para evaluar cualitativamente las esporas que se encuentran en el
aire.
Fijar un lugar determinado del ambiente que se quiere analizar.
Colocar, en el lugar fijado, una placa Petri con el agar sabourand al
descubierto por espacio de 5 a 10 minutos (cerca al piso, a la altura
de las manos y a la altura de la cabeza)
Anotar el tiempo de exposición, lugar, fecha y nombre del grupo
(estudiantes)
Incubar a 25 – 30°C durante cuatro o cinco días
Observar el desarrollo de las colonias y determinar:
Macroscópicamente: Número de colonias, caracteres
particulares como: forma de desarrollo, pigmentación,
bifurcaciones y aspecto general de las colonias.
Microscópicamente: Observar la presencia de órganos de
reproducción a hifas vegetativas. Observar presencia o
ausencia de esterigmas, esporangios, u otros elementos
particulares
IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES
A. RESULTADOS
CUADRO N°1: HONGOS EN ALIMENTOS
MUESTRA EN FRESCO GRÁFICO MICROCULTIV GÉNERO
O
ZANAHORI Hifas no - -
A septadas
Esporas
MANDARIN Hifas - -
A septadas
Esporas
UVAS Aspergillu Nigrospor
s sp. a
TOMATE Hifas no Nigrospor
septadas a
LEVADURA - -
CUADRO N°2: HONGOS EN EL AMBIENTE
AMBIENTE GRÁFICO GÉNERO N° DE
COLONIAS
CUARTO Nigrospora 1
PARQUE Nigrospora 1
MERCADO Trichoderma 14
PANADERÍA - - -
B. DISCUSIONES
En la práctica realizada, no obtuvimos resultados de algunos cultivos de
hongos de algunos alimentos, sin embargo, si pudimos observar en materia
fresca.
Por otro lado, si se observó de otra materia y por ende la discusión se basará
en ello.
Las hifas, en definitiva, constituyen la unidad estructural de los hongos
multicelulares. En su interior alojan el citoplasma, que a su vez contiene
organoides que desarrollan diversas funciones.
Su forma es filamentosa y de tipo tubular con paredes celulares, pudiendo
presentar tabiques (hifas septadas) o no (hifas aseptadas) y que contienen en
su interior citoplasma que viene a ser una sustancia similar a la clara de huevo
junto con pequeñas estructuras con morfologías y funciones determinadas
denominadas organoides. (Ellis, MB. 1971).
En el tomate en fresco se observó las hifas no septadas, descriptivamente lo
que vimos en el microscopio son una red de filamentos cilíndricos que
conforman la estructura del cuerpo de los hongos multicelulares. Están
constituidos por una fila de células alargadas y tubulares, envueltas por una
pared celular.
Aspergillus es un hongo filamentoso (compuesto de cadenas de células,
llamadas hifas). El hábitat natural de las especies de Aspergillus son el heno y
el compostaje. A su vez tiene dos formas de presentación: una saprofítica, en
que aparece como un hongo con hifas septadas del que surgen los
conidióforos, los cuales a su vez tienen una ampliación: la cabeza aspergilar de
la que surgen unas estructuras de forma ampular, que son las fiálides, de las
que surgirán las estructuras reproductivas (también llamados propágulos), y
que reciben el nombre de fialoconidias. (Taylor , A. G 1991)
En las uvas en fresco se pudo observar
Nigrospora es un hongo filamentoso en el aire en el filo Ascomycota. Se
encuentra en el suelo, el aire y las plantas como un patógeno foliar. Puede
ocurrir como un endófito donde produce metabolitos secundarios antivirales y
antifúngicos. La esporulación de N. sphaerica hace que sus colonias iniciales
de color blanco se vuelvan rápidamente negras.N. sphaerica a menudo se
confunde con las especies estrechamente relacionadas N. oryzae debido a sus
similitudes morfológicas.
Las colonias de N. sphaerica crecen rápidamente y aparecen peludas o
lanudas. Los conidióforos son superficies cortas y agrupadas de micelio.
Parecen de color translúcido y tienen un rango promedio de 8-11 μm de
diámetro. Los conidióforos son a menudo tallos rectos o ligeramente curvados.
(Yue-Hu 2009)
En medio de cultivo el tomate, las uvas se puso en un medio de cultivo por 7
días se observó que desarrollo nigrosporas, características macroscópicas:
Colonias vellosas, de borde regular, superficie rugosa, de color gris oscuro en
el anverso y negro en el reverso. También se vio este tipo de hongo los cultivos
que se pusieron a prueba en un parque y en una habitación.
Trichoderma es un género de hongos en la familia Hypocreaceae, que está
presente en todos los suelos, donde son los hongos cultivables más
prevalentes. Muchas especies de este género pueden caracterizarse como
simbiontes oportunistas de plantas avirulentas.
La alta presencia de humedad y el riego mejora las condiciones de vida de
muchos microorganismos entre ellos Trichoderma, pasando de un estado
latente a uno activo y desarrollándose óptimamente hasta en un 60 % de plena
capacidad del suelo de retención de humedad. A porcentajes mayores de
saturación se disminuye la colonización y sobrevivencia por la baja
disponibilidad de oxígeno. Es favorecido por condiciones de pH ácido donde su
población se incrementa por una mayor formación de conidióforos, por la
germinación de conidios y por menor competencia con microorganismos como
actinomicetos y bacterias que se encuentran limitados por la acidez. En suelos
con temperatura que oscilan entre los 10 º y 15º c y baja disponibilidad de
nutrientes esenciales no crece y se afecta la actividad benéfica. (Carlos A,
2002)
El medio de cultivo que se puso a prueba en el mercado lo cual, por su alta
humedad del lugar y por la contaminación proporcionando un bajo ingreso de
oxigeno se adaptó Trichoderma en el lugar.
V. CONCLUSIONES
El estudio de los hongos, se comprendió tanto el estudio de sus
componentes morfológicos específicos como la determinación de
sus funciones respectivas. características, su fisiología y su
ecología deben ser analizadas en detalle con métodos
microbiológicos en cada muestra que pusimos a prueba.
Observamos las características de cada hongo producida por
cada materia o lugar, como el color, la forma y por qué se
desarrollan.
VI. CUESTIONARIO
¿Cuáles son los valores promedios de las dimensiones de cada
elemento del cuerpo vegetativo en hongos filamentosos?
Los hongos son un grupo de organismos eucariotas (que poseen células
con núcleos) que se divide en levaduras y mohos. Los hongos se
encuentran en una extensa variedad de formas y tamaños, con distintas
divisiones del reino Fungi.
Las levaduras son organismos unicelulares pertenecientes a
los Ascomycetes, y tienen un tamaño que oscila entre 2 y 10 micras de
ancho y 4 y 50 micras de largo, variando según la especie.
Los mohos crecen en formas de filamentos pluricelulares o unicelulares
llamados hifas, que conforman el micelio. El nombre de setas designa
tan solo al cuerpo fructífero de algunas especies
de Basidiomycetes y Ascomycetes. El tamaño de una espora es de 1 a
20 µm, y el tamaño del moho, variable según especie, es de varios
centenares de micrómetros a varios centímetros, siendo lo más habitual
un diámetro de hifa entre 3 y 8 mm. El tamaño de estos organismos
depende del crecimiento de la unidad formadora de colonia que posea el
hongo (ALEXANDER, M. 1980.)
¿Cuál es el tamaño promedio de las levaduras?
Las dimensiones pueden oscilar de 1 a 9 µm de ancho y 2 a más de 20
µm de longitud según la especie, nutrición, edad y otros factores.
Algunos hongos fitopatógenos forman colonias levaduriformes en
cultivos axénicos y varios patógenos de animales se presentan
como levaduras en los materiales clínicos (ARENAS, R. 1993)
¿Qué genero de hongo se encuentra más frecuentemente en
alimentos?
Los hongos comúnmente encontrados en carnes y aves son Alternaria,
Aspergillus, Botrytis, Cladosporium, Fusarium, Geotrichum, Monilia,
Manoscus, Mortierella, Mucor, Neurospora, Oidium, Oosproa,
Penicillium, Rhizopus y Thamnidium. Estos hongos pueden encontrarse
también en otros alimentos. (ALEXOPOULOS, C., MIMS, C.,
BLACKWELL, M. 1996.)
¿Podrían las especies de hongos patógenos estar presentes en el
aislamiento del medio ambiente que realiza?
No, porque los hongos para desarrollarse requieren ciertos elementos
nutritivos y por lo tanto si está aislado no tiene los medios necesarios.
Los nombres genéricos de muchos hongos son derivados de
características morfológicas. ¿De cuáles derivan los nombres
Penicillium, Aspergillus, Rhizopus?
PENICILLIUM
Es un género de bacterias que se ubica en el phyllum Ascomycota. Fue
descrito por primera vez por el micólogo alemán Heinrich Link en 1809 y su
taxonomía ha sido compleja. En principio fue ubicado en los Deuteromicetos
(hongos imperfectos), ya que sólo se conocía su estado anamorfo (asexual).
Posteriormente se comprobó que Penicillium se correspondía a los estados
teleomorfos (sexuales) de los géneros Eupenicillium y Talaromyces de los
Ascomicetos. (ARENAS, R. 1993)
ASPERGILLUS
En 1729 Aspergillus fue catalogado por primera vez por el biólogo italiano Pier
Antonio Micheli. Micheli usó el nombre "Aspergillum" por parecerse el hongo al
instrumento usado para dispersar agua bendita. 1 La descripción hecha por
Micheli de este género de hongo en su obra Nova Plantarum Genera tiene
importancia histórica, al ser reconocido como el punto inicial de la ciencia de
la micología (ARÍSTEGUI, B. 2002.)
RHIZOPUS
Es un género de mohos que incluyen especies
cosmopolitas de hongos filamentosos hallados en el suelo, degradando frutos y
vegetales, heces animales, y residuos.
Las especies de Rhizopus producen esporas asexuales y sexuales.
Las esporangiosporas asexuales se producen dentro de una estructura
aguzada, el esporangium, y son genéticamente idénticas a su padre.
En Rhizopus, el esporangio es soportado por una gran columela apofisada, y el
esporangióforo asoma entre rizpodes distintivos. Zigosporas negras se
producen después de dos fusiones compatibles de micelios durante la
reproducción sexual. Y hacen colonias que pueden ser genéticamente
diferentes de sus padres. (AYALA, M. 2003)
¿Porque razón alguna colonia aislada del medio ambiente no desarrollan
espora en el medio de cultivo utilizado?
Los microorganismos en fase de crecimiento realizan réplicas de sí mismos y
requieren de los elementos que se encuentran en su composición química. Se
le deben brindar los elementos nutritivos en una forma accesible desde el punto
de vista metabólico. Además, los microorganismos requieren energía
metabólica con el objetivo de sintetizar macromoléculas y conservar los
gradientes químicos esenciales a través de sus membranas. Durante el
crecimiento se deben regular los factores nutricionales (carbono, nitrógeno,
azufre y fósforo, elementos trazas y vitaminas) y los factores físicos (pH,
temperatura, oxígeno, humedad, presión hidrostática, presión osmótica y
radiación). (BAYONA, M., VILLANUEVA, C. 1999.)
VII. BIBLIOGRAFÍA
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