UNIVERSIDAD AUTONOMA GABRIEL RENE MORENO

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y TECNOLOGIA

BIOTECNOLOGIA – PRQ221
LABORATORIO 5

TEMA: MEDIOS DE CULTIVOS EN PLACAS Y TUBOS

ALUMNA: DEISY MELISSA MENDOZA SALVATIERRA

REGISTRO:215053087

CARRERA: ING. QUIMICA

DOCENTE: ING. ORLANDO PEDRAZA

AUXILIAR: JHON WILMAR ALBINO APODACA

1.- OBJETIVOS

 Conocer los métodos de cultivos en placas y tubos

 Seleccionar y aplicar las técnicas para alcanzar propósitos específicos

 Organizar e interpretar los resultados del estudio de los microorganismos.

2.- FUNDAMENTO TEORICO

Medios de cultivo en medio solido: se utilizan para obtener bacterias aisladas por la formación de

colonias sobre la superficie del medio de cultivo y para el estudio de la morfología de las colonias, lo que

no permiten los medios líquidos. Usualmente para preparar un medio sólido se parte de un medio

líquido al que se le añade un agente solidificante como el agar. „ El agar es un polisacárido extraído de

algas. „ En los medios sólidos la proporción de Agar es siempre por encima del 15%. Los medios sólidos

tienen generalmente agar–agar como agente solidificante, espesante o gelificante. El agar-agar es una

sustancia hidrofílica de carácter coloidal procedente de diversas especies de algas marinas,

especialmente del géneroGelidium, que tiene la propiedad de formar un gel. Químicamente el agar-agar

es un polisacárido de cadena larga, dependiendo de su tamaño el poder gelificante.

Medios de cultivo en medio liquido: se utilizan preferentemente para favorecer el desarrollo bacteriano

de células estresadas. En determinadas ocasiones no se pueden sustituir por los medios sólidos, por

ejemplo en la síntesis de exotoxinas, pigmentos, enzimas, etc. - Ejemplo: Agua peptonada, Caldo común,

Caldo Cerebro Corazón, Caldo Saboureaud, etc. no llevan adicionados agentes solidificantes

Componenetes escenciales para un medio de cultivo

 Peptonas

 Extractos

 Fluidos corporales
  Sistemas aortiguadores

 Indicadores de pH

 Agentes reductores

 Agentes selectivos

 Agar

Aplicaciones: En el área industrial los medios de cultivo son usados para impulsar el crecimiento de

algunos microorganismos indispensables en la producción y conservación de alimentos, producción

vegetal y animal, insumos industriales, minería y servicios. esto con el fin de aportar efectos definidos en

el proceso de creación y comercialización de los mismos.

Esterilización: En Microbiología la esterilización se define como “el proceso mediante el cual se eliminan

todos los microorganismos (incluyendo formas de resistencia) de un objeto, medio o superficie” y su

aplicación garantiza la ausencia de microorganismos en el material y medios de cultivo a ser empleados.

Existen diversos métodos de esterilización, entre ellos: calor (seco o húmedo), filtración (para sustancias

termolábiles y aire), radiaciones y aplicación de gas de oxido de etileno (para jeringas y cajas de

plástico).

3.- MATERIALES EQUIPOS Y REACTIVOS

Siembra en medio liquido

MATERIALES EQUIPOS REACTIVOS

Mechero Muestra liquida
Asa batereologica Muestra solución salina o cultivo
Tuvos o matraces

Siembra por estria en placas

 MATERIALES EQUIPOS REACTIVOS
Asa bactereologica Muestra liquida de bacterias o

levaduras
Mechero Medio de cultivo en las cajas
Cajas de petri

4.- DESARROLLO DE LA EXPERIENCIA

Siembra en medio liquido

PASO1.- esterilizaos el asa de abajo PASO2.- tomamos el tubo que tiene la

hacia arriba con el mechero y uestra liquida, lo homogeneizamos y
dejamos enfriar. destapamos cerca del mechero.

PASO4.- sacamos la muestra teniendo PASO3.- flameamos la boca del tubo,

cuidado de que el asa no toque las introducimos el asa hasta sumergirla
paredes del tubo. Tapamos el tubo. en la muestra.

PASO6.- retiramos nuestra asa,

PASO5.- introducimos la muestra en
flameamos la boca del matraz y
nuestro matraz con nuestra solución
tapamos. Seguidamente con el
salina o cultivo liquido y revolvemos
mechero esterilizamos el asa
suavemente
bacteriológica.

Siembra por estría en placas (técnica estría recta)

PASO1.- tomamos es inoculo con el PASO2.- abrimos la caja de Petri con

asa bacteriológica. el medio de cultivo
 PASO3.- trazamos una o varias líneas
PASO4.-finalmente esterilizamos el
rectas en la superficie del medio.
asa con el mechero empezando desde
Cerramos la caja y la colocamos en
la base hasta la punta
posición invertida.

6.- CONCLUSION

Medante videos demostrativos llegamos a conocer los métodos de cultivos de placas y tubos, también

observamos las diferentes técnicas de cultivos en placas y tubos y el manejo de los materiales que se

usan para estos procedimientos.

7.- OBSERVACIONES

Me pareció muy importante la esterilización del asa bactereologica y el guardado de la caja de Petri

(volcado) en todas sus técnicas.

8.- CUESTIONARIO

1.- Cual es la importancia del agar en un medio de cultivo?

El agar microbiología es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de

cultivo, los cuales deben estar exentos de todo microorganismo contaminante para facilitar la

identificación, crecimiento y desarrollo de otros microorganismos que crecen en sustancias alimenticias

artificiales preparadas en laboratorios, denominados cultivo.

2.- investigar sobre el Agar y sus aplicaciones

El agar agar es un agente gelificante que se usa en la preparación de medios de cultivo y otras

aplicaciones bacteriológicas. Su mayor ventaja es la ausencia de inhibidores que pueda esconder el

desarrollo óptimo de microorganismo. Además tiene otros atributos como la transparencia, alta

histéresis y reproductibilidad

Los principales campos de aplicación dentro de la industria alimentaria son en pastelería y bollería,

como el recubrimiento de donuts y pasteles permitiendo crear un “icing” estable y flexible, evitando que

se funda en días calurosos o la deshidratación y rotura de la cobertura.

3.- Porque se realiza la esterilización a los materiales?

Para eliminar la carga microbiana del producto o un microorganismo resistente.

4.- Explique los medios de cultivo según su consistencia.

Consistencia

 Líquidos: contienen nutrientes a los

cuales se les adicionan sustancias con la

capacidad de mantener estables un pH,

entre ellos podemos encontrar el caldo

nutritivo y caldo peptona.

 Solidos: se obtienen agregando agar

(sustancia de tipo polisacárido que se

obtiene de algas marinas) a un medio

liquido determinado. Al tener un medio sólido, nos facilita obtener colonias bacterianas

aisladas.
  Semisólidos: similares a los medios sólidos, la única diferencia es que a estos se les disminuye la

cantidad de agar, lo que permite conservar cepas bacterianas y la observación y registro de

bacterias móviles.

5.- explique los medios de cultivo según su composición

Según su utilización y su composición los medios de cultivo se pueden clasificar en:

 Simples

 Enriquecidos

 Selectivos

 Diferenciales

 Enriquecimiento

1. Medios Simples

 Poseen los requisitos nutricionales para permitir el desarrollo bacteriano general, ejemplos: agar

nutritivo, caldo nutritivo, entre otros.

2. Medios enriquecidos
 Son medios simples o comunes, a los que se le añaden ciertos elementos como sangre, suero,

líquido ascítico, huevo, glucosa, vitaminas, etc. lo que permite el aporte de factores de

crecimiento o sustancias que neutralizan agentes inhibidores del crecimiento en bacterias

exigentes nutricionalmente, entre algunos ejemplos: agar sangre, medio de Löwenstein-Jensen,

enriquecido con huevo para facilitar el crecimiento de Mycobacterium; agar desoxicolato-

lactosa (DLA), enriquecido con lactosa y desoxicolato.

3. Medios selectivos

 Se consiguen añadiendo al agar nutritivo compuestos químicos nocivos para algunas bacterias

cuyo crecimiento no es de interés o también mediante una alteración de las condiciones físicas

del medio, entre algunos ejemplos tenemos

 El agar Mac Conkey que contiene cristal violeta.

 Thayer-Martin medio selectivo para Neissar, ya que este posee antibióticos como la vancomicina

colistina y nistatina.

 Caldo lactosado bilis verde brillante en donde la bilis inhibe el crecimiento de bacterias gran

positivas.
 Löwenstein-Jensen con verde de malaquita es selectivo para Mycobacterium.

4. Medios diferenciales

 A estos medios se le adiciona sustancias para que solo crezcan ciertas bacterias y estas, al actuar

sobre alguna de las sustancias adicionadas, permiten observar macroscópicamente ciertas

propiedades de crecimiento que ayudan a diferenciar sus colonas de otras especies diferentes,

entre algunos ejemplos encontramos:

 Agar eosina azul de metileno (EMB), diferencia E. coli (color verde metálico brillante) de colonias

de Enterobacter aerogenes (color rosado, consistencia mucosa y crecimiento abundante).

 Agar sangre, diferencia variedades de Streptococcus pyogenes en Streptococcus

betahemolíticos de Streptococcus alfa hemolítico y gama hemolítica.

 Agar Salmonella-Shigella tiene lactosa y un indicador de pH que permite diferenciar las colonias

de bacterias fermentadoras de este disacárido.

 5. Medios de enriquecimiento

 Son medios líquidos que favorecen o permiten la multiplicación de las

bacterias cuando la muestra obtenida es muy pobre, por ejemplo:

 Caldo tioglicolate, favorece el crecimiento de las bacterias

anaeróbicas.

 Caldo tetrationato favorece crecimiento de bacterias microaerófilas.

 Los caldos bilis y de Muller-Kauffman, favorecen el crecimiento del

género Salmonella.

 Caldo o agua peptonada se utiliza para el crecimenot de Vibrio Cholerade.

6.- Que es el caldo de cultivo?

Es un medio utilizado para el cultivo de hongos y levaduras. Se puede añadir antibióticos para

asegurarse que no crezcan bacterias. Principalmente se utiliza para hacer recuento de colonias, además

la forma de la colonia variará según el hongo que sea.

7.- que es el extrato?

EXTRACTOS. Su preparación consiste en que ciertos órganos o tejidos animales o vegetales (p.e. carne,

hígado, cerebro, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor y posteriormente concentrados hasta la

forma final de pasta o polvo. Estos preparados deshidratados son a menudo empleados en la

elaboración de los medios de cultivo. Los más utilizados son el extracto de carne, de levadura y el de

malta.

9.- BIBLIOGRAFIA

[Link]

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%2C%20etc.-,2.,no%20permiten%20los%20medios%20l%C3%ADquidos.&text=Medios%20Semis

%C3%B3lidos%3A%20se%20utilizan%20para%20estudiar%20la%20motilidad%20de%20las%20bacterias.

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%20un,en%20sustancias%20alimenticias%20artificiales%20preparadas[Link]

de-cultivo/