Helado Saludable de Leche y Castaña
Helado Saludable de Leche y Castaña
TESIS DOCTORAL
Año 2017
1
Escuela Internacional de Doctorado
2
AGRADECIMIENTOS
Agradezco profundamente a los Doctores Francisco Javier Carballo García y Juan Antonio
Centeno Domínguez, ya no solo por haber sido mis directores de tesis y responsable de un grupo
de trabajo, sino más bien por sus cualidades humanas y su disposición en apoyarme en los
momentos más importantes, y compartir sus experiencias.
A Francisco, Jorge, Noemí, Miriam, Lucía, Alda y demás compañeros del laboratorio, en verdad
les agradezco por todo su apoyo durante mi estancia, así como los buenos momentos que hemos
compartido durante estos años.
A los colaboradores del Centro Tecnológico de la Carne, en especial a José Manuel Lorenzo y su
equipo de trabajo, por su ayuda durante las pruebas sensoriales y determinación de compuestos
volátiles de los productos en estudio.
A mi familia, A ti luz Moreno quien junto a Laia tuvieron que pasar por momentos difíciles
cuando yo no estuve junto a ustedes durante este tiempo, A mi Madre Santa Teresa y mi
hermana Rosalía por darme ánimos permanentemente, quiero hacer mención también al tío
Elías a quien debo una parte importante de mi formación, quien junto a los abuelos Víctor y
María me enseñaron que con valores y esfuerzo se superan todo tipo de dificultades en nuestro
paso por esta vida terrenal. Con mucho aprecio y dedicación para todos ustedes…
3
ÍNDICE
Página
RESUMEN 7
I. INTRODUCCIÓN 12
I.1.2.4. Helado 17
I.1.4.1. Formulación 22
I.2.1. LA LECHE 30
I.2.2. LA CASTAÑA 35
4
I.2.4.2. Los edulcorantes no sacáridos 46
II.1. OBJETIVOS 58
del helado 66
5
Página
IIII.3.3.1. Determinación de la composición química del helado
de castañas 72
III.3.3.2. Determinación de los parámetros físico-químicos 81
III.3.4. DETERMINACIÓN DEL PERFIL DE ÁCIDOS GRASOS TOTALES
DE LAS FÓRMULAS DE HELADO 83
III.3.4.1. Metilación de los ácidos grasos del helado 83
III.3.4.2. Separación, identificación y cuantificación de los ácidos
grasos 84
III.3.5. DETERMINACIÓN DE LOS COMPUESTOS VOLÁTILES DE LAS
FÓRMULAS DE HELADO 86
III.3.5.1. Extracción de compuestos volátiles 87
III.3.5.2. Análisis cromatográfico (GC/MS) 88
III.3.5.3. Identificación 90
III.3.6. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LAS FÓRMULAS DE HELADO 92
III.3.6.1. Homogeneización de las muestras y preparación
de las diluciones 92
III.3.6.2. Recuento e investigación de los diferentes
grupos microbianos 92
III.3.7. MÉTODOS PARA EL ANÁLISIS SENSORIAL DE LOS HELADOS 95
III.3.7.1. Materiales 95
III.3.7.2. Elección del preparado de castaña a emplear en la
formulación de los helados 97
III.3.7.3. Evaluación sensorial de las formulaciones de helado
control y de las preparadas con diferentes ingredientes
saludables 101
III.3.8. ANÁLISIS ESTADÍSTICO 104
6
Página
IV.7. EVALUACIÓN SENSORIAL DE LAS FORMULACIONES DE HELADO
CONTROL Y DE LAS PREPARADAS CON DIFERENTES INGREDIENTES
SALUDABLES 165
IV.7.1. PRUEBA DE PREFERENCIA CON ORDENACIÓN 165
IV.7.2. ANÁLISIS DESCRIPTIVO 168
CONCLUSIONES 172
BIBLIOGRAFÍA 175
7
RESUMEN
8
dos alternativas para cada una. Para la variable materia grasa, se emplearon
como alternativas nata láctea con el 35% en grasa láctea y grasa vegetal
(aceite de oliva); para la variable edulcorante se emplearon como alternativas
sacarosa y una mezcla de eritritol (E-968) y glucósidos de steviol (E-960) al
2,4%; finalmente, para la variable de estabilizante se emplearon como
opciones carboximetilcelulosa (CMC) y goma de tara (Caesalpinia spinosa).
Seguidamente se caracterizaron las 8 fórmulas de helado y se compararon
entre ellas. En cada fórmula se analizó la composición química proximal, los
parámetros fisicoquímicos más relevantes, los contenidos en ácidos grasos y
compuestos volátiles, la calidad microbiológica y la calidad sensorial.
9
de helados cuya formulación contiene grasa láctea, muestran como principales
ácidos grasos el ácido palmítico, oleico, mirístico, esteárico y linoleico. Los
helados formulados empleando aceite de oliva presentan el ácido oleico como
ácido graso mayoritario, seguido de los ácidos palmítico y linoleico.
10
suavidad en boca que los preparados con el edulcorante acalórico. Los
resultados parecen sugerir que los panelistas participantes en la prueba de
preferencia valoraron en mayor medida los atributos específicos “suavidad en
boca” y “dulzor” que el atributo “aroma a castaña”.
11
I. INTRODUCCIÓN
12
I.1. EL HELADO, NATURALEZA, ORÍGENES E IMPORTANCIA
13
Por otro lado, y debido a su naturaleza, elaboración y conservación, el
helado puede albergar microorganismos patógenos debido a su composición y
a las condiciones de manipulación y almacenamiento. Los helados resultan en
su mayoría contaminados por microorganismos durante la producción, el
envasado, el transporte y la conservación, pudiendo transmitir enfermedades
a los potenciales consumidores especialmente a los niños, ancianos y
personas inmunodeprimidas (Warke y col., 2000; Daniels y col., 2002).
14
Durante la Edad Media, en las cortes de países árabes se preparaban
productos azucarados con frutas y especias enfriados con hielo proveniente de
las montañas. Estas mezclas se denominaban “sharbat” en árabe. Esta
palabra pasó al idioma turco como "şerbet", y al término hispano “sorbete”,
que aparece en la actualidad recogido en el diccionario de la Real Academia
Española.
15
A través de la historia, los primeros productos lácteos en consumirse
fueron el queso y el helado. Más recientemente, tras la revolución industrial, y
como el ánimo de conservación de los alimentos perecederos, se han
desarrollado diversos procedimientos y técnicas que hoy conocemos. Así por
ejemplo en el siglo XIX Napoleón ofreció un premio a quien hallara el sustituto
de la mantequilla; el ganador fue Mége Mouriés, patentando en 1869 su
procedimiento que permitió el desarrollo de la margarina. En el año 1877, Alfa
Laval presentó su primera centrífuga con la que se procedía a la separación de
la nata láctea. En 1835 se patentó un aparato evaporador de leche. En 1860
se conoce la leche condensada, y es aceptada como alimento de excelente
calidad microbiológica. Y en 1855, en Gran Bretaña se patentó un
procedimiento para la deshidratación de la leche (Ordóñez y col., 2014).
16
I.1.2.2. Helado de leche
I.1.2.4. Helado
17
Existen descritas en la bibliografía otras clasificaciones de los helados.
Recogemos a continuación, en la tabla 1.1, la de Arbuckle (1981) que los
sistematiza según sus ingredientes, definiendo las condiciones y
características que deben mantener cada uno de ellos.
Se observa (Tabla 1.2) que los países que más inviertieron en el año 2015
en la producción de helados son Estados Unidos, China, Italia, Alemania y
Japón, con cifras de gasto de 8,818; 7,625; 4,064; 3,754 y 2,933 millones de
18
euros respectivamente. España invierte 1,938 millones de euros, lo que
supone el 3,93% de la inversión total mundial.
19
Tabla 1.3. Consumo de helados en el mundo (millones de litros)
20
En la tabla 1.5 se presentan los datos de consumo de helado en España
por comunidades autónomas. Galicia ocupa el quinto lugar con 27 millones de
litros de helado consumidos durante el año 2015, situándose tras Andalucía,
Cataluña, Madrid y la Comunidad Valenciana.
21
Tabla 1.6. Consumo de helados en litros por habitante y año en las
Comunidades Autónomas de España
I.1.4.1. Formulación
22
En la figura 1.1 se aprecia los porcentajes recomendados de sólidos y
agua para el caso de una mezcla previo al batido, así como los porcentajes
recomendados para los sólidos, agua y aire de una mezcla después del batido.
Figura 1.1. Composición de una mezcla de helado antes (a) y después (b) del
batido. Fuente Madrid y Cenzano, 2003.
23
porcentajes), según el tipo de helado considerado. Tales rangos se muestran
en la tabla 1.7.
24
NOTA La mezcla en polvo para helados debe presentar un máximo de 4% de
humedad, y cumplir con los requisitos microbiológicos y características
fisicoquímicas equivalentes a las indicadas para el helado, según el caso.
25
Mahaut y col. (2014) señalan que la pasteurización debe efectuarse a 85 -
90°C durante 30 segundos, de esta manera se destruye la flora patógena, se
reduce la flora total contaminante y se favorece la desnaturalización de las
proteínas, se mejora la hidratación, y se facilita la disolución (incorporación)
de los azúcares, emulsionantes y estabilizantes.
26
temperatura a la que se realiza esta operación es entre -4 y -10°C. No debería
bajarse demasiado la temperatura en esta etapa, pues aumentaría muy pronto
la consistencia del helado antes de incorporar la suficiente cantidad de aire.
Normalmente, así pues, la congelación se hace en dos fases, la primera a una
temperatura entre -4 y -10°C durante el batido y la segunda a valores entre -
18 y -25 ºC en las cámaras y túneles de congelación (Madrid, 2016).
27
Figura 1.2. Estructura de un helado (SKW Biosystem)
(Mahaut y col., 2004).
28
- Por contacto, en productos que tienen al menos dos de sus
caras paralelas, comprimiéndose los helados entre dos placas
huecas en cuyo interior circula NH3 o cualquier otro fluido
frigorígeno a -40°C.
29
I.2. MATERIAS PRIMAS E INGREDIENTES DEL HELADO
I.2.1. LA LECHE
30
Los datos de minerales y vitaminas se expresan en mg/100g, con
excepción de las vitaminas A, D, B12, que se expresan en
µg/100g.
31
Procucción de leche de vaca en la union europea para el año 2015
35 31,8
Millones de toneladas 30 25,4
25
20 15,2
13,3
15 11,1 10,9
10 6,8 6,6 5,3
5
0
Producción de leche por cumundad autónoma (miles de toneladas)
3.000 2.538
2.500
Miles de toneladas
2.000
1.500
828 676
1.000 557 483 446
500 237 214 168 128
63 55 54 48 28 15
0
Comunidades autónomas de España
32
En cuanto a la producción de leche de vaca en las diferentes
Comunidades Autónomas españolas, Galicia es la comunidad con más
entregas, con el 38,1% del total, muy por encima de Castilla y León, con el
12,8%, y de Cataluña, con el 10,5%. El 53% de la leche de vaca producida en
España lo es en Galicia, Asturias y Cantabria.
0,5
0,45
0,4
Céntimo de euro
0,35
0,3
0,25
0,2
0,15
0,1
0,05
0
Aragón
Baleares
canarias
País Vasco
Andalucía
Cantabria
Cataluña
Extremadura
Navarra
Galicia
La Rioja
Murcia
Castilla la Mancha
Castilla y León
C. Valenciana
Madrid
Asturias
33
Según la Federación Española de Industrias de la Alimentación y
Bebidas (FIAB), la industria láctea española supone el 9,2% del sector
alimentario, y emplea a más de 32.800 personas, el 7% del empleo en el sector
alimentario con cierta especialización hacia la producción de leche líquida de
consumo. El censo de industrias lácteas ascendía en 2015 a 1.557 empresas
repartidas por todo el país, produciendo la cantidad de 7,3 millones de
toneladas de productos lácteos (valor medio de los últimos 6 años). Cabe
destacar que a lo largo de este periodo la producción industrial se ha
incrementado en un 14,4%. (MAGRAMA).
Producción industrial de los lácteos en España para el año 2015
3687,2
4000
Miles de toneladas
2721,3
3000
2000
925,6
1000 465,4
117,2 40,1
0
Leche líquida Yogures y Queso Nata Mantequilla Otros
leche
fermentada
34
En relación con el mercado exterior, a pesar de la considerable
producción láctea en nuestro país, España importa mucho más de lo que
vende. Entre los productos que más importa destacan los yogures, con 227
millones de euros, y los quesos, con 920,1 millones de euros. En cuanto a las
exportaciones en los últimos años, el queso y la nata han aumentado
considerablemente. También se aprecian incrementos en el yogur y las leches
fermentadas o las leches en polvo (Tabla 1.11).
Tabla 1.11. Exportación española de leche y productos lácteos (toneladas)
2010 2011 2012 2013 2014 2015
Yogurt y leches fermentadas 102,943 107,562 113,358 114,549 101,546 114,114
Queso 47,602 49,779 55,609 65,089 74,995 81,247
leche líquida granel 67,672 59,086 94,965 66,486 68,884 57,324
Nata 29,207 38,101 57,683 42,763 28,049 55,906
Leche líquida envasada 51,769 65,599 61,763 52,521 48,448 46,381
Leches en polvo 11,618 22,544 27,749 11,656 15,320 17,945
Mantequilla 30,405 14,650 13,776 13,262 12,594 14,119
Otros 28,604 26,079 32,791 29,319 57,186 31,312
Total 369,820 383,400 457,694 395,645 407,022 418,348
I.2.2. LA CASTAÑA
35
para múltiples usos, su explotación se extendió y alcanzó gran importancia de
un modo rápido.
36
protección no es específica para variedades de castaña concretas, e incluye al
conjunto de los ecotipos locales seleccionados por los agricultores de Galicia.
37
el aceite de oliva virgen (de acidez libre menor a 2 g por cada 100 g, con
defectos sensoriales inferiores a una mediana de 3,5), y iii) aceite de oliva
lampante (de acidez libre superior a 2g por cada 100 g, se permite una
puntuación organoléptica defectuosa mayor a 3,5). Este último debe sufrir un
proceso de refinación para su consumo, sin embargo, el sabor afrutado en
todas debe ser cero. Como consecuencia del refinado del aceite de oliva
lampante, se obtiene el aceite de oliva refinado, un producto con
características sensoriales neutras (sin gusto ni aroma), con acidez inferior a
0,3g por cada 100 g, que mezclado con una fracción de otros aceites vírgenes
(extra o virgen), da lugar al producto que se consume en los hogares bajo la
denominación de aceite de oliva. La calidad del aceite de oliva presenta
diferentes acepciones: la calidad comercial (estabilidad oxidativa para el
transporte a rutas largas), la calidad culinaria (gusto, aroma, fluidez, calor
específico para las frituras, temperatura de humo), la calidad nutricional y
terapéutica (elevado contenido de grasa monoinsaturada, representada por el
ácido oleico, que provoca en el consumidor una disminución del contenido de
colesterol total y un aumento de los niveles de colesterol ligado a las
lipoproteínas de alta densidad “HDL”, siendo ello favorable a la prevención de
enfermedades cardiovasculares. También se ha comprobado que su contenido
en compuestos antioxidantes de naturaleza polifenólica es interesante para la
reducción de fenómenos oxidativos en el organismo y la prevención, en
consecuencia, de ciertos tipos de cáncer (Casp, 2014).
El dulce es uno de los cinco gustos básicos. Los compuestos que tienen
sabor dulce se llaman edulcorantes. En la actualidad se han desarrollado
compuestos químicos de síntesis con un potente poder edulcorante y que
puede utilizarse como aditivos en la fabricación de alimentos. Sin embargo,
habida cuenta de las modernas tendencias del mercado, y de la preferencia
creciente de los consumidores por alimentos naturales, nos referiremos en
este apartado únicamente a los edulcorantes naturales.
38
Las sustancias edulcorantes generalmente suponen entre el 16 y 20%
de la masa del helado. El aumento en el contenido del azúcar supone un
descenso en el punto crioscópico y, en consecuencia, una disminución de la
proporción de agua congelada, así como el aumento de la viscosidad, lo que
inhibe el crecimiento de los cristales de hielo. Para una composición del 12 al
18% de azúcar, el tamaño de los cristales, varía desde 67,5 x 51 a 48,5 x
47,3X x10¯⁶m. (Mahaut y col., 2003).
39
refinados, que proporcionan, además, otros nutrientes tales como vitaminas,
minerales y fibra. Haremos a continuación un repaso breve de estos
edulcorantes sacáridos considerados como más saludables. Algunos de ellos
son productos intermediarios o subproductos del proceso de obtención de la
sacarosa.
Jarabe de Ágave
Melaza
40
atribuyen diversos beneficios y propiedades (antioxidante; beneficioso para los
huesos, corazón, piel y colon; mejora los problemas del aparato digestivo;
ayuda a la pérdida de peso; fuente importante de minerales, con todas las
consecuencias positivas de ello; etc.). Como edulcorante, tiene un bajo índice
glicémico y constituye, por tanto, una opción muy saludable para las personas
diabéticas o pre-diabéticas.
Jarabe de arroz
41
Azúcar de coco
Azúcar de dátil
42
apreciables de diferentes a los azúcares, tales como fibra, proteína y minerales
(Ca, Fe, Mg, P, Zn, Cu, Mn y Se).
43
El azúcar turbinado es ligeramente diferente a todos estos productos
anteriormente mencionados. Para su elaboración, se prensa la caña para
obtener el jugo y este se ebulle hasta la granulación. Ahora bien, en este caso
los cristales de sacarosa se refinan con posterioridad mediante un lavado de la
superficie, que elimina las impurezas, seguido de una centrifugación. El
turbinado tiene, así pues, una coloración más clara y contienen menos restos
de melaza que la rapadura y los otros productos similares que se han
mencionado.
Miel
44
y vitaminas. En la miel se han descrito más de 181 sustancias diferentes
(Chow, 2002). La composición en carbohidratos de la miel es ciertamente
compleja (Ruíz-Matute y col., 2010; Siddiqui, 1970); además de los azúcares
mayoritarios ya comentados, se han identificado también los siguientes
disacáridos y trisacáridos: maltosa, isomaltosa, nigerosa, turanosa, maltulosa,
kojibiosa, α- y β-trehalosa, gentibiosa, laminaribiosa, maltotriosa, 1-kestosa,
panosa, isomaltosil glucosa, erlosa, isomaltosiltriosa, theanderosa, centosa,
isopanosa, isomaltosiltetraosa, e isomaltosilpentaosa (Siddiqui y Furgala,
1967; Siddiqui y Furgala, 1968). Se han descrito también en la miel una
amplia variedad de constituyentes minoritarios de naturaleza no
hidrocarbonada, muchos de los cuales poseen propiedades antioxidantes (por
ejemplo, ácidos fenólicos y flavonoides). Desde el punto de vista de la salud, la
presencia de tales sustancias antioxidantes representa un importante valor
añadido. Debido a la naturaleza de la miel, su composición varía ampliamente
dependiendo del área geográfica y de su origen floral (Escuredo y col., 2013)
45
como azúcar de arce, crema o mantequilla de arce, o caramelo o tofe de arce
(Eagleson y Asner, 2006).
46
Por todas estas razones, los edulcorantes no sacáridos (no
carbohidratos) han adquirido una importancia creciente en los últimos años.
Los edulcorantes no sacáridos son ciertamente un grupo muy heterogéneo de
sustancias de origen vegetal que tienen generalmente una capacidad
edulcorante muy poderosa. Estas sustancias, su naturaleza, estabilidad y
propiedades edulcorantes han sido revisadas recientemente (Priya y col.,
2011). Enumeraremos en este apartado los más interesantes clasificándolos
por familias químicas.
I.[Link]. Terpenoides
I.[Link]. Proteínas
47
frutas de Pentadiplandra brazzeana; y la mabinlina, un polipéptido presente
en las frutas de la planta china Capparis masaikai.
I.[Link]. Dihidrochalconas
I.[Link]. Polioles
48
I.2.5. LOS EMULSIONANTES
49
y la industria alimentaria tiene actualmente a su disposición sustancias muy
eficientes que se hallan incluidas en las listas positivas de aditivos. Sin
embargo, como acabamos de comentar en el caso de los edulcorantes, las
preferencias actuales de los consumidores se inclinan hacia sustancias
naturales que, si bien en algunos casos ligeramente menos efectivas, ofrecen
un máximo de confianza al consumidor sin afectar a la calidad y propiedades
de los alimentos en los que se emplean.
50
hacia la fase acuosa. Los fosfolípidos pueden formar una monocapa o una
capa múltiple (con los fosfolípidos alineados cabeza con cabeza) alrededor de
las gotitas de grasa, dependiendo de las características de la emulsión (Pichot
y col., 2013).
51
hidrofobicidad superficial medio. Las proteínas rápidamente se adsorben en la
superficie de las gotitas y forman membranas interfasiales cargadas
eléctricamente, por lo tanto, la repulsión electrostática es el principal
mecanismo que evita la coalescencia de las gotitas de grasa en las emulsiones
estabilizadas por proteínas (McClements, 2004). Debido a esta circunstancia,
las emulsiones estabilizadas por proteínas tienen una sensibilidad particular a
las condiciones de pH y fuerza iónica, y se desestabilizan cuando el valor de
pH se sitúa en torno al punto isoeléctrico de la proteína utilizada como
estabilizante, y también cuando la fuerza iónica del medio alcanza un valor
determinado (Dickinson, 2010). Además, las emulsiones estabilizadas por
proteínas globulares son sensibles a los tratamientos térmicos, debido a la
sensibilidad al calor de estas proteínas y a su fácil desnaturalización por
efecto de la temperatura.
52
monosacáridos que integran la molécula pueden ser de uno solo
(homopolisacáridos) o más tipos (heteropolisacáridos). Los polisacáridos varían
ampliamente en relación con el número de unidades de monosacáridos que los
integran (desde oligosacáridos hasta polisacáridos de alto peso molecular),
grado de ramificación (desde lineales a muy ramificados), carga eléctrica, e
hidrofobicidad/polaridad. Además, algunos polisacáridos tienen péptidos
(glicoproteínas) o lípidos (glicolípidos) unidos a ellos. Todas estas
particularidades estructurales confieren a los polisacáridos diferentes
propiedades y capacidades para servir como emulsionantes.
53
Iakovou, 2015). Los biosurfactantes pueden extraerse de plantas o ser
producidos por microrganismos a través de procesos de fermentación
controlados (De y col., 2015). Habitualmente, se obtienen en forma de mezclas
complejas con otras moléculas de varias naturalezas y deben ser purificados
antes de su uso como ingredientes alimentarios. Las ventajas de los
biosurfactantes se basan en su carácter natural (son biodegradables, su
producción es sostenible, y carecen de toxicidad), pero también en su
efectividad a temperaturas y valores de pH extremos, y concentraciones de sal
elevadas (Kralova y Sjoblom, 2009).
54
hidrofobinas (Tchuenbou-Magaia y col., 2009) y las manoproteínas (Barbosa
da Silva Araújo y col., 2014) han sido utilizadas como potenciales
bioemulsionantes en sistemas alimentarios.
55
II. JUSTIFICACIÓN Y OBJETIVOS DE LA
PRESENTE TESIS DOCTORAL
56
La ejecución de la presente tesis doctoral está en primer lugar motivada por
la necesidad de elaborar un producto que valorice dos producciones
excedentarias en la Comunidad Autónoma de Galicia: la leche de vaca y la
castaña. Habida cuenta de la inexistencia en el mercado de helados de
castaña, el helado parece ser el producto de elección a elaborar con la
finalidad señalada.
57
animadversión hacia los aditivos químicos, por lo que también resultaría de
sumo interés el valorar la sustitución de los estabilizantes habitualmente
empleados en la industria heladera por otros naturales, menos sospechosos
para el consumidor y que transmitan una imagen más saludable del producto
final elaborado.
II.1. OBJETIVOS
Los objetivos específicos de la Tesis Doctoral que nos ocupa son los
siguientes:
58
2. Sustituir en dicha fórmula la grasa láctea, la sacarosa y los
estabilizantes sintéticos por otros ingredientes y aditivos más saludables
(aceite de oliva, edulcorantes no carbohidratos y goma de tara – Caesalpinia
spinosa -, respectivamente.
59
60
III.1. PRODUCTOS QUÍMICOS Y MEDIOS DE CULTIVO
61
Tecnológico de la Carne de Galicia (Parque Tecnológico de Galicia, San
Ciprián de Viñas, Ourense).
62
microbiológico de las muestras, y para la pasteurización de las
mezclas de helado, fueron de la marca SELECTA modelos TECTRON
3473100, DIGITERM 100 y PRECITERM, equipados con regulador de
temperatura y agitación permanente.
• la marca SELECTA mod. TECTRON 3473100 (Barcelona, España),
con regulador de temperatura y agitación constante.
• El material de vidrio (tubos de ensayo, matraces, vasos de
precipitados, etc.) fue de calidad PYREX o similar.
• Equipo SOXHTEST RAYPA mod. SX-6 utilizado en la extracción de
grasa.
• Las estufas utilizadas para la determinación del contenido en
extracto seco, y evaporación de disolventes durante la extracción de
grasa, fueron de las marcas SELECTA mod. CONTERM 36L con
precisión de ±1°C (Barcelona, España) y RAYPA (estufa de desecación
con circulación de aire forzado) modelo DAE-J35 (Barcelona,
España).
• Batería de camisas calefactoras SELECTA, empleada para realizar la
digestión de las muestras de helado a elevadas temperaturas y
equipo de destilación VELP científica modelo UDK 127.
• Olla-autoclave CERTOCLAV modelo CV-EL y Autoclave RAYPA
modelo STERILMATIC-CAE-75, para esterilizar los medios de cultivo
y materiales empleados en las pruebas de microbiología.
• Estufas MEMMERT modelo BE-500, SANYO CLASSIC COOLED
INCUBATOR mod. ICX180–XX2-C, HERAEUS KELVITON serie 6000,
HERAEUS mod. 6120, HERAEUS mod. B6060 y HERAEUS mod. B6
empleadas para la incubación de las placas sembradas previa a los
recuentos de los diferentes grupos de microorganismos.
• Cámara de flujo laminar TELSAR mod. BV-100 para los trabajos que
requirieron ambientes estériles durante la realización de los análisis
microbiológicos.
• Colorímetro KONICA MINOLTA CR-400, modelo AC-0305 (Konica
Minolta Sesing, Inc., Osaka, Japón) para la determinación de los
parámetros de color de las muestras de helado.
• Cromatógrafo gases Trace GC Chromatograph (THERMO FINNIGAN,
Austin, TX, USA) equipado con un inyector automático THERMO
FINNIGAN mod. AI-3000, un detector de ionización de llama (FID) de
63
THERMO FINNIGAN y un sistema informático para la recogida y
tratamiento de datos CHROM-CARD de THERMO FINNIGAN,
empleado para la separación e identificación de los ésteres metílicos
de los diferentes ácidos grasos de las muestras de helado.
El objetivo de esta primera parte del estudio fue determinar cuál era la
forma más adecuada de incorporación de la castaña en el helado. Se empleó
para ello un diseño experimental de 1 x 5, manteniendo constante en el helado
una base de leche entera, grasa láctea y sacarosa; las 5 variables fueron cinco
maneras diferentes de incorporar la castaña en la mezcla, a saber: i) harina de
castaña (suministrada por Posada Marrón Glacé, S.L., Ourense, España), , ii)
castaña en tropiezos (trozos de castaña), iii) mezcla de harina de castaña y
tropiezos, iv) castañas en almíbar (suministradas por Cuevas y Cía, S.A.,
64
Ourense, España) y v) glacé de castañas (suministrado por Cuevas y Cía, S.A.,
Ourense, España), según aparece recogido en la figura 3.2.
65
(Sveltesse, Nestlé España, S.A., conteniendo 0,9 g/100 de grasa, 52,4 g/100 g
de lactosa, 35,2 g/100 g de proteína y 1,25 g/100 g de NaCl), nata de leche
con un 35 % de materia grasa (Feiraco Lácteos, S.L., A Coruña., España),
sacarosa, carboximetilcelulosa (Tylo Powder, Cuenden Green Mill, PR5 5Lp,
UK), aromatizante (Aroma natural de Vahiné (McCormick & Company, Inc.,
Sparks, MD, USA)) y colorante (Caramelina 16%, E102/124/132 (Manuel
Riesgo, S.A., Madrid, España)). Se mezclaron los ingredientes, se pasteurizó la
mezcla (82ºC; 30 segundos), se enfrió (4°C; 4,5 min), maduró (4ºC; 2 h), batió
y congeló en máquina heladera (-6ºC; 50 min). Posteriormente se envasó y
almacenó (-22ºC; 12 h) (ver la descripción más exhaustiva de estas etapas en
el apartado de esta memoria).
Para evaluar las cinco muestras de helado, cada una con una presentación
diferente de castaña y ver cuál de las formas de incorporación de la castaña
resultaba más satisfactoria, se contó con un grupo de 32 catadores
semientrenados quienes evaluaron las muestras empleando una escala
estructurada en el rango de 0 (me desagrada mucho) a 9 (me agrada mucho).
Se utilizó para este propósito, la versión modificada de la escala hedónica
sugerida por Bodyfelt et al. (1988). Las muestras de helado (aproximadamente
30g) se sirvieron a -10°C y siempre en condiciones semejantes a cada miembro
del panel. En cada una de las muestras se evaluaron los siguientes
parámetros: color, aroma, apariencia, textura, dulzor y aceptabilidad general.
66
principales componentes (grasa, edulcorante y estabilizante), reemplazando los
ingredientes normalmente empleados por otros más saludables. Para ello, y
tomando como base el helado mejor valorado anteriormente, se elaboraron 8
formulaciones distintas de helado con un diseño factorial de 2x2x2. Se
consideraron tres variables principales (materia grasa, edulcorantes y
estabilizantes) con dos alternativas para cada una. Para la variable materia
grasa, se empleó como alternativas a la nata láctea con el 35% en materia
grasa una grasa vegetal (aceite de oliva Elosúa suave con 0,4º de acidez); para
la variable edulcorante se empleó como alternativa a la sacarosa una mezcla
de eritritol (E-968) y glucósidos de steviol (E-960) al 2,4%; finalmente, para la
variable de estabilizante se empleó como alternativa a la carboximetilcelulosa
(CMC) goma de tara (Caesalpinia spinosa) proveniente del Perú (Sosa
Ingredientes, S.L., Moià, Barcelona, España)(Figura 3.3).
67
III.3.2.2. Elaboración de los helados
III.[Link]. Aprovisionamiento
68
harina de castañas y los tropiezos, ambos hidratados a temperatura de
cocción, los edulcorantes (sacarosa y stevia + eritritol), las grasas (nata láctea
y aceite de oliva). El colorante y el aromatizante se adquirieron en una sola
ocasión para todas las formulaciones a realizar.
69
A continuación, en un recipiente se incorporaron la leche, las grasas, y
los edulcorantes según las formulaciones establecidas. Luego se agregaron los
aditivos que le confieren color y sabor al producto final (aromatizante y
colorante), cumpliendo de esta manera con la etapa de saborización (Figura
3.6).
70
Figura 3.6. Preparación de la mezcla base para helado
71
IIII.3.3.1. Determinación de la composición química del helado de
castañas
Procedimiento
72
varilla de vidrio. El contenido de la cápsula se dejó desecar en la estufa
durante 4h a 105±1ºC, dejándose enfriar posteriormente en el desecador y
pesándose de nuevo. Se repitieron los ciclos de desecación (30 minutos) y
pesada hasta obtener un peso constante.
Cálculos
% 100
Siendo:
Materiales:
- Equipo Sostest
- Estufa
- Campana de desecación
- Balanza analítica
Reactivos
73
- éter dietílico
Procedimiento
74
- Se enfriaron los vasos metálicos durante 30 minutos en el
desecador y se pesaron. Por diferencia con el peso de los vasos
vacíos se obtuvo la cantidad de grasa extraída de cada muestra.
Cálculos
2 1
% 100
Siendo:
Reactivos
75
- Verde de bromocresol
- Etanol al 96%
- Rojo de metilo
Equipamiento de laboratorio
Procedimiento
76
El porcentaje de nitrógeno total se determinó mediante la siguiente fórmula:
14,01
%
10
Siendo:
Reactivos
77
- Ácido sulfúrico al 95,5%
- Glucosa
Procedimiento
78
Para la preparación de la curva patrón se partió de una disolución de
glucosa (Sigma-Aldrich) de una concentración de 1000 µg/mL. A partir de esta
disolución madre se prepararon distintas diluciones conteniendo 20, 40, 60,
80 y 100 µg/mL. De cada una de estas diluciones se tomaron alícuotas de 1 ó
1,5 mL que se depositaron en tubos de ensayo, siguiendo a continuación el
mismo procedimiento aplicado a las muestras. La curva patrón (Figura 3.7) se
confeccionó representando las absorbancias frente a las cantidades
correspondientes de glucosa depositadas en cada tubo de ensayo.
Y = 0,0065x + 0,0095
R2 = 0,9984
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
E 409
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 20 40 60 80 100 120 140
µg de glucosa
Figura 3.7. Curva patrón para la determinación de hidratos de carbono totales
por el método de Dubois y col. (1956).
79
Reactivos y equipamiento de laboratorio
- Cápsulas de porcelana
Procedimiento
Cálculos
% 100
Siendo:
80
III.3.3.2. Determinación de los parámetros físico-químicos
Procedimiento
Procedimiento
90 0,1
á á /100
5
81
Siendo:
Procedimiento
Cálculos
% 100
Siendo:
82
El porcentaje de sólidos soluble se determinó de modo instrumental con
ayuda de un refractómetro tipo Abbe, mdelo Carl Zeiss
Para la formación de los ésteres metílicos de los ácidos grasos que constituyen
los glicéridos y fosfolípidos se aplicó el método de transesterificación de
Shehata y col. (1970).
Reactivos
- Metanol
- Rojo de metilo
83
- Hexano
Procedimiento
84
interno y 0,25 μm de espesor) de la marca AGILENT mod. HP-INNOWAX
(Santa Clara, CA, USA).
Tiempo (min.)
Rampas Tª ºC /min Tª (ºC)
transcurrido
Inicial --- 50 1
Rampa 1 5 248 40
85
pentadecanoico (C15:0), cis-10 pentadecanoico (C15:1), palmítico (C16:0),
palmitoleico (C16:1), heptadecanoico (C17:0), cis-10 heptadecanoico
(C17:1), esteárico (C18:0), oleico (C18:1 c n9), linoleico (C18:2 n6), γ-
linolénico (C18:3 n6), α-linolénico (C18:3 n3), araquídico (C20:0), cis-11
eicosaenoico (C20:1 n9), cis-11,14 eicosadienoico (C20:2 n6), cis-8,11,14
eicosatrienoico (C20:3 n6), cis-11,14,17 eicosatrienoico (C20:3 n3),
araquidónico (C20:4 n6), cis-5,8,11,14,17 eicosapentaenoico (C20:5 n3),
heneicosaenoico (C21:0), behénico (C22:0), erúcico (C22:1 n9), cis-13,16
docosadienoico (C22:2 n6), cis-4,7,10,13,16,19 docosahexaenoico (C22:6
n3), tricosaenoico (C23:0), lignocérico (C24:0) y nervónico (C24:1 n9).
86
a través de un aparato Stratum Purge&Trap Concentrator (Teledyne
Tekmar) acoplado a un módulo Criofocus (Criofocusing Module, Teledyne
Tekmar). La separación e identificación de los compuestos volátiles se
realizó mediante cromatografía gaseosa-espectrometría de masas (GC-MS).
87
volátiles se adsorben en una trampa Big Universal Trap RMSH-2
88
Figura 3.10. 6890Network Gas Cromatogrpher - 5973Network Mass Selective
Detector (Agilent Technologies)
Tiempo
Rampas ºC Tª Tiempo (min.)
(min.)
Tª /min (ºC) mantenimiento
transcurrido
89
Las temperaturas respectivas del inyector y el detector se establecieron a
220 y 260 ºC, respectivamente (Tabla 3.3).
Gas portador He
Energía de impacto 70 eV
Voltaje 1576 V
Modo Scan
90
Para la identificación de los compuestos volátiles se tuvieron en cuenta
los espectros de masas obtenidos para cada pico, comparándolos con los de
la librería NIST05a. También se calcularon los índices de Kovats (IK) de
cada pico y se compararon con los hallados en la bibliografía para columnas
tipo DB-5 o similar. Para calcular los índices de Kovats experimentales se
inyectaron patrones consistentes en n-alcanos desde 5 a 14 átomos de
carbono y a partir de los tiempos de retención obtenidos para los mismos y
los tiempos de retención de las muestras se aplicó la siguiente fórmula
descrita por David et al. (2002).
91
C8 n-octano 16,66 800
92
Para llevar a cabo los recuentos de los diferentes grupos microbianos
investigados se emplearon diferentes medios de cultivo en los que se
sembraron alícuotas de las diferentes diluciones.
93
solidificado éste, se vertió una cobertera (aproximadamente 10 mL) del
mismo medio de cultivo para crear un ambiente de microaerofilia. La
incubación posterior de las placas se llevó a cabo a 30 ºC durante 5 días.
III.[Link]. Enterobacteriaceae
94
Vassiliadis (Merck), incubando con posterioridad a 42 ºC durante 24 horas).
El intento de aislamiento final se llevó a cabo sembrado una alícuota del
caldo de Rappaport-Vassiliadis, previamente sembrado con la muestra pre-
enriquecida e incubado, en el agar de Rambach (Merck) e incubando a 37
ºC durante 24 horas.
III.3.7.1. Materiales
95
Se emplearon dos paneles de cata diferentes. El primer panel (panel 1)
se utilizó en una prueba afectiva de satisfacción en la que se valoró el
preparado de castaña a emplear en la formulación de los helados, y en una
prueba de preferencia con ordenación de las formulaciones de helado control y
las siete elaboradas con ingredientes saludables. Este panel estuvo integrado
por 32 evaluadores o jueces no entrenados, consumidores habituales de este
tipo de productos. El panel 1 incluyó a 19 mujeres y 13 hombres, con edades
comprendidas entre 20 y 55 años, y con una media de edad de 26,5 años. Los
evaluadores fueron reclutados tanto entre el alumnado de las diferentes
titulaciones impartidas en la Facultad de Ciencias del campus universitario de
Ourense (21 alumnos) como entre el personal docente e investigador (7
profesores e investigadores) y el personal de administración y servicios (4
empleados) que desarrollaban su actividad laboral en dicha Facultad.
96
III.3.7.2. Elección del preparado de castaña a emplear en la formulación
de los helados
Los atributos generales valorados para cada una de las mezclas por los
miembros del panel 1 fueron los siguientes: color, textura (en boca), sabor y
aroma.
97
en la mayoría de estudios o proyectos de investigación donde el objetivo es
simplemente determinar si existen diferencias entre los productos en lo que se
refiere a la aceptación por parte del consumidor (Ramírez-Navas, 2012). A los
panelistas se les pidió que puntuasen muestras codificadas indicando cuánto
les agradaba cada muestra en relación con cada uno de los atributos
evaluados, marcando una de las categorías o puntos en las escalas que van
desde “me disgusta extremadamente” (1) hasta “me gusta extremadamente” (9)
en orden ascendente. Las categorías se presentaron verbalmente en la ficha de
evaluación (Figura 3.12).
98
Fig. 3.12. FICHA DE EVALUACIÓN DEL GRADO DE SATISFACCIÓN
Nombre:…………..……………………………..FECHA:……………..HORA:……………..
99
Fig. 3.13. CALIFICACIÓN DE ATRIBUTOS ESPECÍFICOS
Nombre:…..………………………………..FECHA:…….....HORA:……………………….
1 No me recuerda nada
2 Me recuerda poco
3 Me recuerda
4 Me recuerda bastante
5 Me recuerda mucho
1 Muy áspera
2 Ligeramente áspera
3 Ni áspera, ni suave
4 Suave
5 Muy suave
1 Nada dulce
2 Algo dulce
3 Dulce
4 Bastante dulce
5 Muy dulce
1 Nada relacionado
2 Algo relacionado
3 Relacionado
4 Bastante relacionado
5 Muy relacionado
100
Las ocho formulaciones de helado se sometieron a dos métodos de
evaluación sensorial: (i) prueba afectiva de preferencia con ordenación; y (ii)
análisis descriptivo. En todos los casos se siguió un diseño de bloque completo
equilibrado (Costell y Durán, 1981). La prueba de preferencia con ordenación
se llevó a cabo con la participación de los 32 evaluadores del panel 1, en tanto
que el análisis descriptivo lo realizaron los 16 jueces del panel 2. Las dos
pruebas sensoriales se llevaron a cabo en dos sesiones en diferentes días. En
cada una de las sesiones, cada catador evaluó cuatro muestras diferentes
presentadas de manera simultánea, modificando el orden de presentación en
la segunda sesión de manera que todos los panelistas valorasen todas las
muestras. A modo de ejemplo, el orden de presentación de las muestras para
la realización del análisis descriptivo se muestra en la tabla 3.5.
Los análisis se realizaron por duplicado, en un total de cuatro sesiones,
calculándose las puntuaciones medias asignadas a cada parámetro por cada
uno de los catadores.
101
La prueba de preferencia con ordenación hedónica se desarrolló conforme a la
Norma ISO 8587:2006 (ISO, 2006), utilizando una escala de 9 puntos (Tabla
3.6). En esta prueba se pidió a los evaluadores que puntuasen y ordenasen las
(cuatro) formulaciones según su preferencia para cada uno de los atributos.
Los atributos valorados por los 32 panelistas fueron los mismos que los
puntuados previamente para la elección del preparado de castaña: color,
textura (en boca), sabor y aroma.
102
horizontales de 9 puntos sobre las que se pidió que se valorase la intensidad
de cada uno de los atributos o descriptores.
103
III.3.8. ANÁLISIS ESTADÍSTICO
104
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
105
IV.1. ELECCIÓN DEL PREPARADO DE CASTAÑA A EMPLEAR EN LA
FORMULACIÓN DE LOS HELADOS
Grado de Harina +
Harina de Tropiezos Almíbar de Glaseado
satisfacción tropiezos sig.
castaña de castaña castaña de castaña
(escala 1-9) de castaña
Color 6,27±1,28 6,27±1,12 6,50±1,14 6,64±1,37 6,59±1,14 0,774
Textura 6,27±1,12b 6,64±1,22ab 7,00±0,69a 6,41±0,96ab 6,77±1,34ab 0,02
Sabor 6,36±1,05 6,14±1,39 6,50±0,96 6,18±1,56 6,09±1,69 0,843
Aroma 5,59±1,18b 5,27±0,77b 6,73±1,20a
5,68±1,32b 0,001 5,73±1,24b
*a,b,c Distintos superíndices dentro de la misma fila indican diferencias
Las puntuaciones medias obtenidas por las diferentes mezclas para cada uno
de los atributos evaluados se representan gráficamente en el histograma de la
figura 4.1.
8
7
Puntaje (escala 0 - 9)
6
5
4 Color
3 Textura
2 Sabor
1 Aroma
0
Harina de Tropiezos de Harina + Almíbar de Glaseado de
castaña castaña tropiezos de castaña castaña
castaña
Tipo de castaña empleada en las formulaciones
106
Las mezclas elaboradas con harina y tropiezos de castaña recibieron las
puntuaciones más altas para los atributos textura y aroma. Los valores
obtenidos para la textura fueron significativamente (P < 0,05) mayores para las
mezclas preparadas con harina y tropiezos que para aquellas elaboradas
únicamente con harina (Tabla 4.1). En lo que se refiere al aroma, las
puntuaciones obtenidas por los helados elaborados con harina y tropiezos
fueron significativamente (P < 0,05) más altas que las alcanzadas por el resto
de las mezclas.
107
Tabla 4.3. Calificación de atributos específicos de las mezclas elaboradas con
diferentes preparados de castaña (valores medios ± desviaciones estándar)
Harina +
Descriptivo Harina de Tropiezos Almíbar de Glaseado
tropiezos sig.
(escala 1-5) castaña de castaña castaña de castaña
de castaña
Color de
pulpa de
cataña 3,31±0,79 3,00±0,73 3,57±0,76 3,28±0,83 3,19±0,66 0,352
Suavidad en
boca 4,0±0,63a 3,38±0,72b 3,36±0,75b 3,56±0,62ab 3,69±0,48ab 0,040
Dulzor 3,31±0,60d 3,44±0,51cd 3,79±0,70bc 4,06±0,42ab 4,31±0,48ᵃ 0,001
Aroma a
castaña 1,81±0,54d 2,75±0,68b 3,57±0,76a 2,56±0,62bc 2,13±0,62cd 0,001
*a,b,c Distintos superíndices dentro de la misma fila indican diferencias
Las puntuaciones medias obtenidas por las diferentes mezclas para cada uno
de los atributos específicos calificados se representan gráficamente en el
histograma de la figura 4.2.
5
4,5
Puntaje Escala (0 - 5)
4
3,5
Color (pulpa
3 castaña)
2,5
Textura
2
(suavidad)
1,5
1 Sabor
0,5 (dulzor)
0 Aroma
Harina de Tropiezos Harina + Almíbar Glaseado (castaña)
castaña de tropiezos de de
castaña de castaña castaña
castaña
Tipo de castaña empleada en cada formulación
108
que las obtenidas por las mezclas formuladas con tropiezos o conjuntamente
con harina y tropiezos. Los helados elaborados con castañas glaseadas
recibieron las puntuaciones más altas para el atributo específico “dulzor”,
siendo estas calificaciones significativamente (P < 0,05) mayores que las
obtenidas por las mezclas preparadas con harina, tropiezos o conjuntamente
con ambos ingredientes. El atributo dulzor obtuvo igualmente puntuaciones
significativamente (P < 0,05) mayores para los helados elaborados con almíbar
de castañas que para las mezclas formuladas con harina y con tropiezos.
Finalmente, las calificaciones del atributo específico “aroma a castaña” fueron
significativamente (P < 0,05) mayores para los helados experimentales
conteniendo harina y tropiezos que para el resto de las mezclas. Este hecho
parece confirmar la mayor valoración del preparado de harina y tropiezos por
parte de los panelistas en la prueba afectiva de satisfacción.
109
Como se comentó en la sección de material y métodos, empleando como
base el helado mejor valorado en el trabajo previo de selección del modo en
que se incorpora la castaña, se elaboraron 8 formulaciones distintas de
helado, teniendo como materias primas la leche y las castañas (Castanea
sativa, Miller) en forma de harina y en trozos, mediante el empleo de un
diseño factorial de 2x2x2. Se consideraron tres variables principales de
sustitución (materia grasa, edulcorantes y estabilizantes) con dos
alternativas para cada una. Para la variable materia grasa, se emplearon
como alternativas nata láctea con el 35% en materia grasa y grasa vegetal
(aceite de oliva); para la variable edulcorante se emplearon sacarosa y una
mezcla de eritritol (E-968) y glucósidos de steviol (E-960) al 2,4%;
finalmente, para la variable de estabilizante se emplearon como opciones
carboximetilcelulosa (CMC) y goma de tara (Caesalpinia spinosa)
proveniente del Perú.
Las Tablas 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 4.10, 4.11 y 4.12 describen las
fórmulas, expresando cada componente en gramos y como porcentaje del
peso total, de los 8 tipos de helado elaborados para su posterior estudio y
evaluación. Como puede observarse, en las Tablas, la fórmula control es la
confeccionada con grasa láctea, sacarosa como edulcorante, y
carboximetilcelulosa (CMC) como estabilizante. En la fórmula nº 1, se
sustituyó únicamente la carboximetilcelulosa por goma de tara (Tabla 4.6).
En la fórmula nº 2se sustituyó la sacarosa por eritritol y stevia (Tabla 4.7).
La fórmula nº 3 presenta como particularidades diferenciales la sustitución
de ambos componentes, el azúcar y el estabilizante (Tabla 4.8). La fórmula
nº 4 fue confeccionada sustituyendo la grasa láctea por aceite de oliva
(Tabla 4.9). La fórmula nº 5 se diseñó sustituyendo la grasa láctea por la
vegetal y la carboximetilcelulosa por goma de tara (Tabla 4.10). El helado nº
6 se formuló sustituyendo la grasa láctea por aceite de oliva y la sacarosa
por eritritol más stevia (Tabla 4.11). Finalmente, en la fórmula nº 7 (Tabla
4.12) se llevaron a cabo las tres sustituciones propuestas, la grasa láctea se
sustityó por grasa vegetal, la carboximetilcelulosa por goma de tara y la
sacarosa por la mezcla de eritritol y stevia.
110
Tabla 4.5 Formulación del helado control
111
Tabla 4.7 Formulación del helado nº 2
112
Tabla 4.9 Formulación del helado nº 4
113
Tabla 4.11 Formulación del helado nº 6
114
IV.3 COMPOSICIÓN QUÍMICA PROXIMAL (EXTRACTO SECO, MATERIA
GRASA, PROTEÍNAS, CENIZAS Y CARBOHIDRATOS) Y PARÁMETROS
FISICOQUÍMICOS (pH, ACIDEZ TITULABLE, COLOR, % DE
DERRETIMIENTO) DE LAS FÓRMULAS DE HELADOS DESARTOLLADAS
115
Tabla 4.13 Composición química proximal de las 8 formulaciones de helado elaboradas. Los valores mostrados en la
tabla son las medias ± las desviaciones estándar de tres réplicas de cada formulación.
Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación
Parámetro*
control 1 2 3 4 5 6 7
Humedad 60,34±1,70a 60,20±0,09a 62,93±0,27a 62,20±0,80a 60,45±1,39a 61,06±0,83a 62,75±1,74a 62,41±1,64a
Extracto seco 39,66±1,70a 39,81±0,09a 37,07±0,27a 37,81±0,80a 39,55±1,39a 38,94±0,83a 37,25±1,74a 37,59±1,64a
Grasa total 6,40±0,03ab 5,24±0,52abcd 6,32±0,44abc 5,21±1,45abcd 6,57±0,09a 4,85±0,44cd 4,16±0,18d 4,94±0,16bcd
Proteína bruta 5,05±0,06d 4,15±0,01e 11,79±0,19a 11,93±0,50a 5,13±0,03d 4,82±0,03d 10,02±0,49c 10,63±0,05b
Cenizas totales 1,05±0,01e 0,75±0,03f 2,14±0,01b 2,10±0,01c 1,09±0,01d 1,09±0,00d 2,28±0,00a 2,27±0,00a
Carbohidratos
29,18±1,81a 28,96±0,62a 19,84±0,01b 19,62±1,17b 28,86±1,51a 28,57±0,37a 20,98±1,43b 20,67±1,53b
totales**
*Valores expresados como g/ 100 g de helado.
** Expresados como g de glucosa/100 g de helado.
a-e Valores de las medias en la misma fila (correspondientes al mismo parámetro) no seguidos de una letra común fueron significativamente
diferentes (P<0,05).
116
Los valores de los distintos componentes en las fórmulas de helado
desarrolladas por nosotros en este estudio están comprendidos dentro de los
amplios rangos de valores descritos en la bibliografía. No obstante, como
resultado de las variaciones introducidas en las fórmulas, los helados
desarrollados en este trabajo presentaron algunas diferencias significativas
entre sí en relación con los contenidos de algunos componentes concretos.
Dado que se trató de ajustar y normalizar los contenidos de humedad de las
distintas fórmulas, los valores de los contenidos de humedad y extracto seco
de las 8 fórmulas no difirieron de un modo significativo, situándose los valores
de los contenidos de humedad entre un 60,20 % (fórmula control) y un 62,93
% (fórmula nº 3).
117
como azúcares totales con la técnica que hemos empleado. Como era de
esperar, las formulaciones que contienen sacarosa poseen un contenido en
azúcares totales significativamente (P<0,05) más elevado que las fórmulas en
las que el azúcar fue sustituido por los edulcorantes no carbohidratos.
Humedad (%)
63
62,5
62
61,5
61
60,5
60
59,5
59
58,5
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Figura 4.3. Contenido en humedad de las formulaciones de helado.
Extracto seco (%)
40
39,5
39
38,5
38
37,5
37
36,5
36
35,5
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Figura 4.4. Contenido en extracto seco de las formulaciones de helado.
118
Grasa total (%)
7,00
6,00
5,00
4,00
3,00
2,00
1,00
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Figura 4.5. Contenido en grasa de las fórmulas de helado.
Proteína bruta (%)
12,00
10,00
8,00
6,00
4,00
2,00
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Figura 4.6. Contenido en proteína bruta de las fórmulas de helado.
119
Cenizas totales (%)
2,50
2,00
1,50
1,00
0,50
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Figura 4.7. Contenido en cenizas totales de las fórmulas de helado.
Carbohidratos totales (g de
gluosa/100 g)
30,00
25,00
20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Figura 4.8. Contenido en carbohidratos totales de las fórmulas de helado.
120
Composición química de las formulaciones de helado (%)
35,00
25,00
20,98 20,67
19,84 19,62
20,00
15,00
11,79 11,93
10,02 10,63
10,00
6,40 6,32 6,57
5,05 5,24 5,21 5,13 4,854,82 4,94
5,00 4,15 4,16
2,14 2,10 2,28 2,27
1,05 0,75 1,09 1,09
0,00
Formul. Control Formul. 1 Formul. 2 Formul. 3 Formul. 4 Formul. 5 Formul. 6 Formul. 7
121
Tabla 4.14. Valores de los parámetros composicionales y fisicoquímicos aportados en bibliografía para helados de diferente
naturaleza.
Objeto del estudio Contenid Contenid Conteni Conteni Conteni Valor Valor % / Overr L* a* b* Referencia
o de o de do de do de do en de pH de Velocidad un
humedad grasa proteín cenizas carbohi acidez de (%)
a bruta dratos (% derretimie
ácido nto % min‐1
láctico)
(a 120’)
122
Características 60,29‐ 10,49‐ 1,40‐1,52 26,11‐ 89,16‐ ‐0,83‐ 14,1 Fuangpaib
sensoriales de un 60,30 18,95 g/ min 30,59 91,05 ‐1,06 5‐ oon y
helado de leche de coco 14,8 Kijroongro
con distintas mezclas de 6 jana, 2015
edulcorantes de bajo
índice glucémico
123
de un helado de vainilla
Modificación del perfil 36,2‐36,4 9,7‐9,9 3,9‐4,1 0,7 6,6‐ 0,16‐ 15,3‐16,5 75,2‐ Nadeem y
de ácidos grasos de la 6,7 0,18 min 80,6 col., 2015
leche con sales de calcio
y su empleo en helados
124
estabilizantes para col., 2013
helado
Efectos de la adición de 59,99‐ 4,15‐6,90 4,39‐ 1,02‐ 5,07‐ 0,17‐ 5,1‐8,38 35,08‐ Kavaz
endrinas (Prunus 61,14 5,29 1,25 6,60 0,87 41,76 Yuksel,
spinosa L.) en la calidad 2015
de los helados
Estudio de la calidad 58,88‐ 10,02‐ 3,64‐ 0,66‐ 23,32‐ 0,19‐ 0,61‐0,66 67,74‐ Nayeem
funcional, antioxidante 62,36 11,07 4,17 0,72 25,06 0,27 mL/min 70,84 Ali y col.,
y sensorial del helado 2016
con semilla de granada
en polvo
125
de la grasa láctea
Helado de mangaba 71,64‐ 3,65‐6,68 1,89‐ 0,48‐ 13,22‐ 4,61‐ 5,26‐ 22,45‐ 5,93‐ 18,12‐ ‐ Santos y
(Hancornia speciosa 79,04 2,52 0,58 20,18 4,94 6,40 48,28 8,81 20,18 0,52 Silva, 2012
Gomez) con sustitutos ‐ ‐
de la grasa y azúcar 0,23
Efecto de la adición de 63,20‐ 9,55‐10 3,37‐ 0,82‐ 15,30‐ 6,49‐ 0,23‐ 80‐100% 19,00‐ 75,50‐ ‐4,28‐ 17,7 Temíz y
melaza (pekmez) sobre 68,8 4,19 1,02 22,39 6,72 0,41 30,67 89,50 7‐ Yesilsu,
las propiedades físicas, Tras 75’ +0,84 26,9 2010
químicas y sensoriales 2
del helado
Efectos de la adición de 65,40‐ 4,2‐4,6 0,88‐ 6,20‐ 0,12‐ 0,36‐0,50 28,2‐ 86,2‐ ‐6,69‐ 8,06 Yanguilar,
harina de banana verde 66,98 1,17 6,49 0,2 g/min 40,5 88,5 +1,62 ‐ 2015
sobre las propiedades 10,4
físicas, químicas y 5
126
sensoriales del helado
127
IV.3.2. PARÁMETROS FISICOQUÍMICOS
128
Tabla 4.15. Valores de los parámetros físico-químicos de las distintas formulaciones de helado. Los valores mostrados en la
tabla son las medias ± las desviaciones estándar de tres réplicas de cada formulación.
Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación Formulación
Tipo de análisis
control 1 2 3 4 5 6 7
pH 6,92±0,06a 6,90±0,01a 6,83±0,01b 6,84±0,01bc 6,89±0,01a 6,86±0,01bc 6,82±0,01a 6,82±0,01c
Acidez* 0,14±0,00d 0,17±0,01c 0,26±0,02b 0,25±0,00b 0,14±0,00d 0,15±0,00cd 0,29±0,02b 0,25±0,02b
L* 76,25±0,40c 76,69±0,54c 83,60±1,07a 79,32±1,42b 74,16±0,24d 71,50±1,09e 80,52±0,68b 79,62±0,75b
a* 1,30±0,28c 0,26±1,29b 0,19±0,0,13ab 0,95±0,21a 1,19±0,49a 0,94±0,58a 0,55±0,14ab 0,77±0,20ab
b* 13,59±1,04b 14,60±1,46b 13,64±0,22b 18,08±1,60a 14,45±0,52b 13,31±0,58b 15,08±0,55b 14,36±0,29b
Sólidos solubles
32±1,58a 32,20±0,84a 27,26±1,14c 29,60±1,14b 32,40±1,14a 34,00±0,71a 26,60±1,14c 23,00±0,71d
(°Brix) (%)
129
pH
6,92
6,90
6,88
Valor de pH
6,86
6,84
6,82
6,80
6,78
6,76
Formulaciones de helado
Figura 4.10. Valores de pH en las 8 formulaciones de helado
Acidez titulable
0,30
0,25
Porcentaje
0,20
0,15
0,10
0,05
0,00
Formulaciones de helado
Figura 4.11. Valores de la acidez titulable en las 8 formulaciones de helado
130
En relación con el contenido en sólidos solubles, expresado en ºBrix, se
observaron diferencias significativas entre las formulaciones. En general, y
como cabía esperar, las formulaciones elaboradas sin sacarosa presentan un
contenido significativamente menor de sólidos solubles, lo cual concuerda con
el hecho de la sacarosa es el sólido soluble por naturaleza en las fórmulas de
helado.
131
Sólidos solubles (°Brix)
35,00
30,00
25,00
Porcentaje
20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
Formulaciones de helado
Figura 4.12. Valores del % de sólidos solubles en las 8 formulaciones de helado
% de derretimiento
100,00
90,00
80,00
Porcentaje
70,00
60,00
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
Formulaciones de helado
Figura 4.13. Valores del % de derretimiento en las 8 formulaciones de helado
132
En relación con los parámetros del color, los valores del parámetro L*
(luminosidad) oscilaron entre 71,50 en la formulación nº 7 y 83,60 en la
formulación n º2. Los valores del parámetro a* (intensidad de rojo) oscilaron
entre 0,19 (en la formulación nº 2 y 1,30 en el helado control, Finalmente, los
valores del parámetro b* (intensidad del amarillo) oscilaron entre 13,31 en la
formulación nº 5 y 18,08 en la formulación nº 3. En los tres parámetros se
detectaron diferencias significativas (P<0,05) entre las formulaciones
analizadas, si bien no nos ha sido posible asociar estas diferencias de un
modo razonado con las diferencias en los componentes entre las distintas
formulaciones.
Espacio CIE Lab de color en helado de leche y castaña
Formul. Control
90,00
80,00
70,00
Formul. 7 60,00 Formul. 1 L* (luminosidad)
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00 a* (coordenadas rojo/verde (+a
0,00 indica rojo, ‐a indica verde)
Formul. 6 ‐10,00 Formul. 2
b* (coordenadas amarillo/azul
(+b indica amarillo, ‐b indica
azul)
Formul. 5 Formul. 3
Formul. 4
Figura 4.14. Valores de los parámetros del color en las 8 formulaciones de helado.
133
IV.4. DETERMINACIÓN DEL PERFIL DE ÁCIDOS GRASOS TOTALES DE
LAS FORMULACIONES DE HELADO
134
los helados elaborados con grasa láctea, el contenido de ácido linoleico
supere a los de los ácidos cáprico y butírico.
En las formulaciones en las que la grasa láctea fue sustituida por aceite
de oliva (números 4, 5, 6 y 7), el perfil de ácidos grasos fue
significativamente diferente. En estas formulaciones el ácido graso
mayoritario fue el oleico (C18:1), seguido a gran distancia del palmítico
(C16:0), linoleico (C18:2), esteárico (C18:0), palmitoleico (C16:1) y linolénico
(C18:3); en contra de lo que ocurría en la grasa láctea, los ácidos grasos
saturados de cadena corta/media (del C4:0 al C15:0) estuvieron ausentes o
presentes en cantidades traza. Este perfil coincide básicamente con el
descrito en la literatura para el aceite de oliva (Contiñas y col., 2008). Sin
embargo, en comparación con el perfil de ácidos grasos del aceite de oliva
virgen descrito en la bibliografía (Contiñas y col, 2008), las grasas de los
helados de estas formulaciones presentaron un contenido en ácido oleico
ligeramente menor (63-64% frente al 77% del aceite de oliva virgen) y unos
contenidos en ácido palmítico (16-17 % frente al 11-12% del aceite de oliva)
y linoleico (13% frente a un 5 % en el aceite de oliva) notablemente
superiores. De nuevo, la presencia de la grasa proveniente de la castaña,
rica en ácido linoleico, y con porcentajes importantes de ácido palmítico,
podría ser la responsable de estas ligeras discrepancias.
135
Tabla 4.16. Composición de ácidos grasos (% de los metil-ésteres totales) de la grasa total de las ocho formulaciones de helado
estudiadas. Los valores son la media ± desviación estándar de tres réplicas de cada formulación.
136
MUFA 26,00±0,14c 26,21±0,07c 25,30±0,78c 26,10±0,21c 65,55±0,14a 65,55±0,07a 63,25±1,70b 63,40±0,28b
PUFA 4,10±0,07d 5,05±0,21c 4,65±0,57cd 5,05±0,14c 14,75±0,07a 14,60±0,00ab 14,45±0,28ab 14,05±0,21b
∑n‐6 3,50±0,00d 4,35±0,14c 4,00±0,49cd 4,35±0,21c 13,85±0,07a 13,70±0,00ab 13,60±0,28ab 13,20±0,14b
∑n‐3 0,50±0,00c 0,55±0,07bc 0,55±0,07bc 0,60±0,00b 0,70±0,00a 0,70±0,00a 0,70±0,00a 0,60±0,00b
SFA/UFA 2,32±0,00a 2,19±0,07b 2,33±0,00a 2,21±0,07b 0,24±0,00c 0,24±0,03c 0,28±0,05c 0,29±0,02c
PUFA/SFA 0,06±0,00c 0,07±0,00c 0,07±0,00c 0,07±0,00c 0,75±0,05a 0,73±0,15a 0,65±0,07ab 0,62±0,04b
∑n6/∑n3 7,0±0,00a 7,90±0,32b 7,27±0,49b 7,25±0,29b 19,78±0,14c 19,57±0,05c 19,42±0,31c 22,01±0,17d
SFA: suma de los ácidos grasos saturados; UFA: suma de los ácidos grasos insaturados; MUFA: suma de los ácidos grasos monoinsaturados, PUFA: suma de
los ácidos grasos poliinsaturados; ∑n-6: suma de los ácidos grasos n-6; ∑n-3: suma de los ácidos grasos n-3; SFA/UFA: ratio suma de los ácidos
saturados/suma de los ácidos grasos insaturados; PUFA/SFA: ratio suma de ácidos grasos polinsaturados/suma de los ácidos grasos saturados; ∑n6/∑n3:
ratio suma de los ácidos grasos n-6/suma de los ácidos grasos n-3.
a-d Valores de las medias en la misma fila (correspondientes al mismo parámetro) no seguidos de una letra común fueron significativamente diferentes
(P<0,05).
137
Se puede constatar, en definitiva, que la sustitución de la grasa láctea
por aceite de oliva modifica sustancialmente el perfil de ácidos grasos de la
grasa de los helados, aumentando la proporción de ácidos grasos
insaturados, y por tanto el carácter saludable de la grasa. Tal extremo se
aprecia claramente al comparar los parámetros que muestran la relación
entre los diferentes grupos de ácidos grasos. El valor de la relación ácidos
grasos saturados totales (SFA)/ácidos grasos insaturados totales (UFA) pasó
de 2,19-2,33 en los helados elaborados con grasa láctea a 0,24-0,29 en los
elaborados con aceite de oliva. Otro índice importante revelador del carácter
saludable de la grasa es la relación ácidos grasos poliinsaturados totales
(PUFA)/ácidos grasos saturados totales (SFA), que pasó de 0,06-0,07 en los
helados de grasa láctea a cifras de 0,62-0,75 en los helados fabricados con
aceite de oliva. El Departamento Británico de Salud (UK Department of
Health, 1994) recomienda valores de la relación PUFA/SFA superiores a
0,4. En base a esta cifra, y atendiendo a esta recomendación, los helados
elaborados con aceite de oliva cumplirían esta exigencia, pero no así los
helados elaborados con grasa láctea.
138
recomendaciones se hacen para el global de la dieta y en tal sentido hay que
interpretarlas.
SFA (suma de los ácido grasos saturados)
80,00
60,00
%
40,00
20,00
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Formulaciones de helados
Figura 4.15. Valores de la suma de los ácidos grasos saturados (SFA) en las
8 muestras de helado analizadas.
UFA (suma de los ácidos grasos insaturados)
90,00
80,00
70,00
60,00
%
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Formulaciones de helado
139
MUFA (suma de los ácido grasos monoinsaturados)
70,00
60,00
50,00
40,00
%
30,00
20,00
10,00
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Formulaciones de helado
PUFA (suma de los ácidos grasos poliinsaturados)
15,00
10,00
%
5,00
0,00
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
Control 1 2 3 4 5 6 7
Formulaciones de helado
140
Valores de los diferentes grupos de ácidos grasos en las formulaciones
de helado confeccionadas (%)
90,00
80,00
70,00
60,00
50,00
%
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
Formul. Formul. 1 Formul. 2 Formul. 3 Formul. 4 Formul. 5 Formul. 6 Formul. 7
Control
Formulaciones de helado
SFA (Suma de los ácidos grasos saturados) UFA (Suma de los ácidos grasos insaturados)
MUFA (Suma de los ácidos grasos monoinsaturados) PUFA Suma de los ácidos grasos poliinsaturados)
∑ n3 (Suma de los ácidos grasos n-3) ∑n6 (Suma de los ácidos grasos n-6)
Figura 4.19. Valores (%) de los diferentes grupos de ácidos grasos (saturados, insaturados, monoinsaturasdos, poliinsaturados, n-3 y n-6
en las 8 muestras de helado estudiadas.
141
IV.5. PERFIL DE COMPUESTOS AROMÁTICOS VOLÁTILES DE LAS
FORMULACIONES DE HELADO
142
presentes en la harina de castaña pueden proceder de la degradación
autoxidativa de ácidos grasos insaturados, especialmente oleico (C18:1; origen del
heptanal), linoleico (C18:2; origen del hexanal) (Amorini y col., 2001), que se
encuentran en cantidades importantes en las castañas frescas (Pires Borges y
col., 2007).
143
Tabla 4.17. Resumen del contenido de compuestos volátiles en formulaciones de helado. Los valores son la media ±
desviación estándar de tres réplicas de cada formulación.
Compuestos Control Formul. 1 Formul. 2 Formul. 3 Formul. 4 Formul. 5 Formul. 6 Formul. 7 Sig.
Aldehídos
Hexanal 17,8±6,84bc 22,8±5,95abc 15,2±3,20c 16,7±0,47c 14,3±6,36c 25,9±7,03abc 29,1±0,78ab 31,3±0,49a 0,042
Heptanal 1,4±0,14bc 1,7±0,28abc 1,5±0,68bc 1,1±0,20c 1,2±0,52c 1,4±0,04bc 2,5±0,16a 2,2±0,23ab 0,032
Alcoholes
2-Etil-1-hexanol 0,5±0,19 0,4±0,17 0,4±0,02 0,1±0,28 0,4±0,19 0,6±0,16 0,7±0,39 0,7±0,30 0,825
2-Heptanona 24,2±15,47a 24,1±11,91a 17,8±4,29a 18,1±4,00a 0,7±0,26b 0,7±0,30b 0,5±0,13b 0,8±0,50b 0,022
2-Nonanona 5,9±2,45a 6,1±1,84a 4,6±1,49a 4,9±1,51a ndb ndb 0,1±0,01b ndb 0,002
3-Hepten-2-ona 0,1±0,00b 0,3±0,00b 0,7±0,00b 0,10±0,10b 0,6±0,28b 0,7±0,51b 6,2±2,31a 6,3±0,25a 0,000
Ésteres
Triacetato de glicerina (Triacetin) 0,7±0,18a 0,2±00cd nd 0,3±0,04c 0,4±0,17bc 0,6±0,04ab nd 0,7±0,16a 0,000
Acetato de cis-3-hexen-1-ol 0,0±0,01c ndc ndc 0,1±0,01c 1,9±0,79b 2,7±0,19a 1,7±0,06b 1,7±0,32b 0,000
Éteres
Anetol 28,4±18,12 23,6±18,52 36,2±5,21 33,6±5,69 58,8±9,95 39,4±7,43 37,1±1,06 34,1±5,83 0,207
Estragol 2,8±2,08 2,2±1,87 3,4±0,47 3,1±0,62 4,8±0,31 3,6±0,93 3,3±0,34 3,1±0,81 0,579
Eucaliptol 1,1±0,62 1,1±0,01 1,1±0,01 1,2±0,12 0,9±0,41 0,8±0,39 1,1±0,06 1,0±0,05 0,899
Compuestos azufrados
Dimetil sulfona 0,7±0,44b 0,5±0,01b 1,5±0,78ab 1,4±0,50ab 0,5±0,52b 0,7±0,08b 2,2±0,17a 1,9±0,21a 0,020
Furanos
2-Pentilfurano 1,9±0,01ab 2,8±0,39a 1,5±0,22ab 1,1±0,18b 1,7±1,46ab 1,3±0,08b nd nd 0,010
144
Hidrocarbonados aromáticos
β-Ocimeno 1,9±0,37a 1,8±0,23a 1,4±0,29a 1,7±0,18a 2,5±0,18a 2,4±1,09a 1,8±0,09ᵃ 1,5±0,08a 0,292
o-Xileno 0,2±0,21c 0,3±0,04c 1,3±0,08a 1,6±0,16a 0,6±0,26ab 0,6±0,06ab 0,6±0,12ab 0,7±0,15b 0,000
Etilbenceno 1.4±0.08 0.6±0.01 1.5±0.92 2.3±0.14 0.6±0.28 0.3±0.02 1.9±1.34 1.8±1.23 0,183
Hidrocarbonados no aromáticos
Octano 1,5±0,74 2,4±0,53 3,5±0,22 3,6±1,20 nd 1,6±0,11 2,6±0,55 3,9±2,55 0,070
145
Los aldehídos y los alcoholes de cadena lineal presentes en los helados
pueden originarse también a partir de la grasa láctea, como consecuencia de
fenómenos lipolíticos y de -oxidación de ácidos grasos insaturados (Rinaldi y
col., 2014). Barrefors y col. (1995) comprobaron que muestras de leche cruda con
olores de oxidación presentaban concentraciones de hexanal significativamente
más altas que otras no alteradas. Por su parte, Shiota y col. (2004) observaron
correlaciones positivas entre aldehídos lineales derivados de la degradación del
ácido oleico (heptanal, octanal y nonanal) y la intensidad de olores anómalos
oxidativos de helados preparados con grasa láctea sometidos a un proceso de
foto-oxidación. El hecho de que en el presente estudio los mayores contenidos en
hexanal y en heptanal se hayan determinado en helados formulados con aceite de
oliva es indicativo de que estos volátiles se han generado igualmente a partir de
este ingrediente, más rico en ácidos oleico (en torno a un 75% p/p) y linoleico que
la grasa láctea. Los aldehídos de cadena lineal como el hexanal o el heptanal
pueden tener un gran impacto en el aroma debido a su bajo umbral de
percepción en comparación con el de alcoholes y cetonas (Forss, 1972). Estos
compuestos han sido descritos como responsables de notas a verde y herbáceas
en las harinas de castaña, atribuyéndoseles también los matices grasos y a frutos
secos que caracterizan el aroma de las castañas asadas (Krist y col., 2004; Cirlini
y col., 2012).
146
en el resto de los helados (Tabla 4.17). Este volátil, identificado tanto en harina de
castaña (Cirlini y col., 2012) como en castañas asadas (Krist y col., 2004),
además de en leche cruda (Moio y col., 1993), puede generarse a partir de la
degradación oxidativa del ácido oleico, muy abundante en el aceite de oliva.
Desde el punto de vista sensorial, el alcohol 1-octanol ofrece matices aromáticos
de cera, en tanto que el 1-octen-3-ol es responsable de aromas o gustos terrosos
o a setas (Krist y col., 2004; Cirlini y col., 2012).
147
contribuyente en el perfil aromático de diferentes variedades de queso (Curioni y
Bosset, 2002).
148
helado analizadas en el presente estudio se ha de atribuir al aroma de anís
empleado en la preparación de todas las formulaciones.
El 2-pentilfurano fue el único volátil dentro del grupo de los furanos detectado en
el presente estudio. Este compuesto se encontró en abundancias
significativamente (P < 0,05) mayores en el helado 1 (elaborado con goma tara)
que en las formulaciones 3, 5, 6 y 7 (Tabla 4.17). Los furanos, junto con otros
compuestos heterocíclicos volátiles presentes en la harina de castaña, pueden
originarse durante la obtención de este producto a partir de la degradación
térmica y la reordenación de carbohidratos vía reacción de Maillard (Krist y col.,
2004; Cirlini y col., 2012). Debido a su agradable sabor y aroma afrutado o
vegetal, los furanos como el 2-pentilfurano se producen sintéticamente a escala
industrial para incorporarlos como agentes aromatizantes en alimentos y bebidas
(Bruche y col., 1995, Blank y Fay, 1996).
149
helados 4 y 5 (elaborados con aceite de oliva) que en el resto de las formulaciones,
no estando presente en los helados 6 y 7. Los terpenos son compuestos
mayoritarios o muy abundantes en la fracción aromática de las castañas frescas,
pero parecen perderse durante el proceso de producción de harina (Krist y col.,
2004; Cirlini y col., 2012). Los volátiles -pineno, -pineno, D-limoneno y p-
cimeno han sido identificados en castañas frescas y asadas (Krist y col., 2004;
Cirlini y col., 2012), en tanto que los monoterpenos (D-)limoneno y -ocimeno se
han detectado en harinas de castaña (Cirlini y col., 2012; Dall’Asta y col., 2013).
Por otra parte, en leche y en quesos se han identificado terpenos como el -
pineno, el -pineno o el limoneno, presumiblemente procedentes de los pastos o
de los forrajes con los que se alimenta el ganado (Barron y col., 2007). Estos
compuestos son estables frente a los tratamientos de pasterización (Cornu y col.,
2005). Los monoterpenos son volátiles de alto impacto aromático presentes en
una amplia variedad de plantas y frutas. Estos compuestos se emplean en las
industrias farmacéutica, cosmética y alimentaria, en esta última como agentes
aromatizantes y saborizantes. Los pinenos y los ocimenos se caracterizan por sus
aromas herbáceos, en tanto que el limoneno ofrece notas aromáticas a cítricos
(Cirlini y col., 2012).
150
Las figuras 4.20 a 4.27 muestran los perfiles de compuestos volátiles
identificados en los helados control y en cada una de las formulaciones
preparadas con ingredientes saludables. En la figura 4.28 se expone una
comparativa de las abundancias de los principales compuestos volátiles que
mostraron diferencias significativas entre las distintas formulaciones (hexanal,
heptanal, 1-octanol, 1-octen-3-ol, 2-heptanona, 2-nonanona, 3-hepten-2-ona,
hexanoato de etilo, -pineno y D-limoneno).
Formulación control
30
25
20
15
%
10
5
0
Triacetato de…
Acetato de cis-3-…
Dimetil sulfona
2-Heptanona
2-Nonanona
Anetol
o-Xileno
Etilbenceno
Octano
Hexanal
Heptanal
2-Etil-1-hexanol
1-Octen-3-ol
Eucaliptol
1-Octanol
3-Hepten-2-ona
Estragol
2-Pentilfurano
D-Limoneno
β-Ocimeno
Decano
a-Pineno
Nonano
Hexanoato de etilo
Compuestos
151
%
%
10
15
20
25
30
0
5
0
5
10
15
20
25
30
35
40
Hexanal
Hexanal
Heptanal
Heptanal
2-Etil-1-hexanol
2-Etil-1-hexanol
1-Octanol 1-Octanol
1-Octen-3-ol 1-Octen-3-ol
2-Heptanona 2-Heptanona
2-Nonanona 2-Nonanona
3-Hepten-2-ona 3-Hepten-2-ona
Hexanoato de etilo Hexanoato de etilo
Triacetato de… Triacetato de…
Acetato de cis-… Acetato de cis-3-…
Anetol Anetol
Estragol Estragol
Formulación 1
Eucaliptol Eucaliptol
Compuestos
Formulación 2
Compuestos volátiles
2-Pentilfurano 2-Pentilfurano
a-Pineno a-Pineno
D-Limoneno D-Limoneno
β-Ocimeno β-Ocimeno
o-Xileno o-Xileno
Etilbenceno Etilbenceno
Octano Octano
Nonano
Figura 4.21. Compuestos volátiles identificados en la formulación 1
152
% %
0
10
20
30
40
50
60
70
0
5
10
15
20
25
30
35
Hexanal Hexanal 40
Heptanal Heptanal
2-Etil-1-hexanol 2-Etil-1-hexanol
1-Octanol 1-Octanol
1-Octen-3-ol 1-Octen-3-ol
2-Heptanona 2-Heptanona
2-Nonanona 2-Nonanona
3-Hepten-2-ona 3-Hepten-2-ona
Hexanoato de etilo Hexanoato de etilo
Triacetato de… Triacetato de…
Acetato de cis-3-… Acetato de cis-3-…
Anetol Anetol
Estragol Estragol
Eucaliptol Eucaliptol
Dimetil sulfona Dimetil sulfona
Formulación 4
Formulación 3
Compuestos volátiles
Compuestos volátiles
2-Pentilfurano 2-Pentilfurano
a-Pineno a-Pineno
D-Limoneno D-Limoneno
β-Ocimeno β-Ocimeno
o-Xileno o-Xileno
Etilbenceno Etilbenceno
Octano Octano
Nonano Nonano
Decano Decano
153
%
%
0
5
10
15
20
25
30
35
40
10
15
20
25
30
35
40
45
0
5
Hexanal
Hexanal
Heptanal
Heptanal
2-Etil-1-hexanol
2-Etil-1-hexanol
1-Octanol
1-Octanol
1-Octen-3-ol
1-Octen-3-ol
2-Heptanona
2-Heptanona
2-Nonanona 2-Nonanona
3-Hepten-2-ona 3-Hepten-2-ona
Hexanoato de… Hexanoato de etilo
Triacetato de… Triacetato de…
Acetato de cis-… Acetato de cis-…
Anetol Anetol
Estragol Estragol
Eucaliptol Eucaliptol
Dimetil sulfona Dimetil sulfona
Formulación 6
Formulación 5
Compuestos volátiles
Compuestos volátiles
2-Pentilfurano 2-Pentilfurano
a-Pineno a-Pineno
D-Limoneno D-Limoneno
β-Ocimeno
β-Ocimeno
o-Xileno
o-Xileno
Etilbenceno
Etilbenceno
Octano
Octano
Nonano
Nonano
Decano
Decano
154
%
10
15
20
25
30
35
40
0
5
Hexanal
Heptanal
2-Etil-1-hexanol
1-Octanol
1-Octen-3-ol
2-Heptanona
2-Nonanona
3-Hepten-2-ona
Hexanoato de…
Triacetato de…
Acetato de cis-…
Anetol
Estragol
Eucaliptol
Dimetil sulfona
Formulación 7
Compuestos volátiles
2-Pentilfurano
a-Pineno
D-Limoneno
β-Ocimeno
o-Xileno
Etilbenceno
Octano
Nonano
Figura 4.27. Compuestos volátiles identificados en la formulación 7
Decano
155
Comparativa de las abundancias de los principales compuestos volátiles que mostraron
diferencias significativas entre las distintas formulaciones de helado
35,0
30,0
Formul.
Control
25,0 Formul. 1
(%)
20,0 Formul. 2
Formul. 3
15,0
Formul. 4
10,0
Formul. 5
5,0 Formul. 6
Formul. 7
0,0
Compuestos volátiles
Figura: 4.28. Comparativa de las abundancias de los principales compuestos volátiles que mostraron diferencias
significativas entre las distintas formulaciones de helado
156
IV.6. CALIDAD MICROBIOLÓGICA DE LAS FORMULACIONES DE
HELADO DESARROLLADAS
157
Tabla 4.18. Recuentos (log. U.F.C./g) de los diferentes grupos microbianos en las formulaciones de helado desarrolladas. Los
valores son las medias ± desviaciones estándar de tres réplicas de cada formulación.
158
4
3,5
2,5
1,5
0,5
0
Formul. Formul. 1 Formul. 2 Formul. 3 Formul. 4 Formul. 5 Formul. 6 Formul. 7
Control
bacterias mesófilas bacterias psicrótrofas bacterias halotolerantes
Entrobacterias bacterias lácticas mohos y levaduras
Figura 4.29. Valores medios de los recuentos (log. U.F.C./g) de los diferentes grupos microbianos en las formulaciones de
helado desarrolladas.
.
159
Los recuentos de bacterias aerobias psicrotrofas totales oscilaron entre
1,11 y 3,36 log. U.F.C./g, los de bacterias lácticas entre 0,43 y 3,33 log.
U.F.C./g, y los de bacterias halotolerantes entre 1,75 y 2,83 log. U.F.C./g.
Los mohos y levaduras estuvieron ausentes (ausencia en 0,2 gramos) en
cuatro formulaciones y mostraron recuentos muy bajos en las cuatro
restantes (entre 0,18 y 1,22 log. U.F.C./g).
160
implementar medidas y protocolos de higiene en la elaboración y
manipulación (Varman y col., 2006; Ambily y Beena, 2012; Abou El-Khair y
col., 2014). Ante la baja calidad higiénica de los helados, son por otra parte
también numerosos los autores que claman por la intervención de las
autoridades reguladoras (De Farias y col., 2006; Yusuf y col., 2013) y por
un imperativo legal que obligue a la implantación de sistemas de Análisis de
Peligros y Puntos Críticos de Control (APPCC ó HACCP) (Caglayanlar y col.,
2009). De hecho, algunos trabajos realizados específicamente con esta
finalidad (Kokkinakis y col., 2008) demuestran que la calidad
microbiológica de los helados mejora notablemente tras la implantación de
sistemas de APPCC. La presencia de patógenos en una proporción
significativa de las muestras analizadas en algunos estudios (Varnan y col,
2006; Ahmed y col, 2009; Yusuf y col., 2013; Jadhav y Raut, 2014)
convierten a estos productos en un peligro real para la salud pública en
estos países y alertan, efectivamente, sobre la necesidad de la toma de
medidas por parte de elaboradores y de autoridades sanitarias.
161
Tabla 4.19. Recuentos de los diferentes grupos microbianos y especies concretas en diferentes tipos de helado (log. U.F.C./g)
Objeto del estudio Microbio Micro Micro Microbi Mohos Enter Enter Colifo Staphyloco Salmo Listeria E. coli Referencia
ta biota biota ota y ococo obact rmes ccus aureus nella monocy
aerobia psicro láctic halotol levadur s erias spp. togenes
mesófila trofa a erante as
total
162
comercializados en Bursa, 0/92 2009
Turquía
Determinación de la calidad 3,0‐8,0 < 2,3‐ < 2,3‐ < 2,3‐ < 2,3‐ < 2,3‐ Staphyloco 2/100 2/100 Erol y col.,
microbiológica de los 7,0 6,0 6,0 7,0 7,0 ccus 1998
helados en Ankara, Turquía coagulasa
(+)
< 2,3‐5,0
163
Calidad microbiológica de 2,48‐6,78 2,0‐ Mathews
los helados vendidos en 6,70 y col.,
Gaborone, Botswana 2013
Para los grupos microbianos se ofrecen los rangos de los valores de recuentos proporcionados en el estudio. Para las especies microbianas concretas se
ofrece generalmente el número de muestras positivas sobre el total de muestras analizadas (/).
164
IV.7. EVALUACIÓN SENSORIAL DE LAS FORMULACIONES DE HELADO
CONTROL Y DE LAS PREPARADAS CON DIFERENTES INGREDIENTES
SALUDABLES
0
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
control 1 2 3 4 5 6 7
Fórmulas de helados
6
5
4
3
2
0
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
control 1 2 3 4 5 6 7
Fórmulas de helados
165
7
0
Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul. Formul.
control 1 2 3 4 5 6 7
Fórmulas de helados
7
6
5
4
3
9)
2
1
0
Fórmulas de helado
Suma de las
17 19 18 20 17 18 26 25
ordenaciones
Test de Friedman (Ftest)*=13,2
*Ftest = Valor de referencia calculado en función del número de muestras, el número de
panelistas y el nivel de significación () asumido.
166
Suma de las ordenaciones para las fórmulas de helados
Formul.
control
30
Formul.
25 Formul.
25 17
7 20 1
15 15 (Ftest)
*=13,2
10
5
Formul. Formul. Suma
6
26 0 22
2 de las
ordena
ciones
17
21
Formul. Formul.
5 3
19
Formul.
4
167
elaboradas con el edulcorante acalórico (eritritol+estevia). De acuerdo con el
orden de preferencia, la formulación preparada con aceite de oliva y goma de
tara fue valorada con puntuaciones similares a las asignadas al helado
control.
168
Biplot (ejes F1 y F4: 60,07 %)
4
2 Aroma
415
199
F4 (9,99 %)
245 Textura
321
0
508 801
Color 769
Sabor
672
-2
-4
-6 -4 -2 0 2 4 6
F1 (50,08 %)
169
sustitución gradual de sacarosa por estevia en la elaboración de un helado
originaba un descenso en la viscosidad de la mezcla y una mayor velocidad de
fusión. Adicionalmente, este edulcorante presenta con frecuencia un sabor y
un regusto un tanto amargos.
170
suplir las propiedades funcionales del azúcar (American Dietetic Association,
2004).
171
CONCLUSIONES
172
CONCLUSIONES
173
ocimeno, procedentes de las castañas o de la leche, estuvieron presentes en la
mayoría de las formulaciones.
174
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