REPÙBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA
MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA LA EDUCACIÒN
UNIDAD EDUCATIVA NTRA SRA DE LA CONSOLACIÓN
BARCELONA_ESTADO ANZÒATEGUI
3er año “B”
ADN Y ARN
DOCENTE:
Dixon Perfecto
AUTOR:
#14.Estafania Chacin
Barcelona, abril de 2020
INTRODUCCION
A principios del siglos XX, se descubrió que la información genética de la herencia
radica en dos moléculas, los ácidos nucleícos, llamados ADN acido
desoxirribonucleico y ARN ácido ribonucleico. El ADN se encuentra en los genes,
que a su vez, son segmentos de cromosomas. La función del ácido
desoxirribonucleico, además de ser el material de la herencia, es controlar todas
las actividades celulares. Por esta razón al ADN, se le ha llamado la molécula
maestra.
Los ácidos nucleícos son polímeros de gran tamaño que, al igual que los
polisacáridos y las proteínas, están compuestos por unidades químicas más
pequeñas, unidas unas con otras, formando largas cadenas. En caso de los
ácidos nucleícos, cada unidad que se repite recibe el nombre de nucleótido. Los
ácidos nucleícos son compuestos formados por carbono, hidrogeno, oxigeno,
nitrógeno y fosforo y deben su nombre a que, por una parte, químicamente son
ácidos y, por otra, fueron encontrados por primera vez en los núcleos
Como es lógico la rapidez con que se suceden las innovaciones de toda índole
tanto científicas como humanísticas resulta difícil adaptarse a los avances
alcanzados, en los momentos actuales, que se dan a nivel mundial, que coloca
esta ciencia entre las primeras con más descubrimientos y logros.AL hacer este
estudio, se ha tenido en cuenta los progresos de la Biología y de la Genética con
un tema tan interesante como lo es la estructura del ADN y ARN.
ARTUR KORNBERG Fue un bioquímico estadounidense. Nacido en Brooklyn el 3
de marzo de 1918, estudió en el City College de Nueva York y obtuvo el título de
graduado en Medicina por la Universidad de Rochester en 1941, siendo después
alumno interno en el Strong Memorial Hospital en Rochester.Desde 1942 hasta
1952 trabajó en los laboratorios de los Nacional Institute of Health (NIH), haciendo
algunas estancias en otros centros de investigación. Una de ellas fue en la
Universidad de Nueva York para trabajar con Severo Ochoa, con quien
compartiría, posteriormente, el Premio Nobel de Fisiología o Medicina (1959).
Duplicación del ADN
Se dieron muchas hipótesis sobre cómo se duplicaba el ADN hasta que Watson y
Crick propusieron la hipótesis semiconservativa (posteriormente demostrada por
Meselson Y Stahl en 1957), según la cual, las nuevas moléculas de ADN formadas
a partir de otra antigua, tienen una hebra antigua y otra nueva.
MECANISMO DE DUPLICACIÓN DEL ADN EN PROCARIONTES
Hay que recordar que el ADN es cerrado y circular y ocurre en tres etapas:
1ª etapa: desenrrollamiento y apertura de la doble hélice en el punto ori-c.
Intervienen un grupo de enzimas y proteínas, cuyo conjunto se
denomina replisoma.
Primero: intervienen las helicasas que facilitan en desenrrollamiento
Segundo: actúan las girasas y topoisomerasas que eliminan la tensión
generada por la torsión en el desenrrollamiento.
Tercero: actúan las proteínas SSBP que se unen a las hebras molde para
que no vuelva a enrollarse.
2ª etapa: síntesis de dos nuevas hebras de ADN.
Actúan las ADN polimerasas para sintetizar las nuevas hebras en sentido
5´-3´, ya que la lectura se hace en el sentido 3´-5´.
Intervienen las ADN polimerasa I y III, que se encargan de la replicación y
corrección de errores. La que lleva la mayor parte del trabajo es la ADN
polimerasa III
Actuá la ADN polimerasa II, corrigiendo daños causados por agentes
físicos.
La cadena 3´-5´ es leída por la ADN polimerasa III sin ningún tipo de
problemas (cadena conductora). En cambio, la cadena 5´-3´ no puede ser
leída directamente, esto se soluciona leyendo pequeños fragmentos
(fragmentos de Okazaki ) que crecen en el sentido 5´-3´, los cuales se
unirán más tarde. Esta es la hebra retardada, llamada de esta forma porque
su síntesis es más lenta.
La ADN polimerasa III es incapaz de iniciar la síntesis por sí sola, para esto
necesita un cebador (ARN) que es sintetizado por una ARN polimerasa
(=primasa). Este cebador es eliminado posteriormente.
3ª etapa: corrección de errores.
La enzima principal es la ADN polimerasa III, que corrige todos los errores
cometidos en la replicación o duplicación. Intervienen otros enzimas como:
Endonucleasas que cortan el segmento erróneo.
ADN polimerasas I que rellenan correctamente el hueco.
ADN ligasas que unen los extremos corregidos
Duplicación del ADN en eucariotas
Es similar a la de los procariontes, es decir, semiconservativa y bidireccional.
Existe una hebra conductora y una hebra retardada con fragmentos de Okazaki.
Se inicia en la burbujas de replicación (puede haber unas 100 a la vez).
Intervienen enzimas similares a los que actúan en las células procariontes y otros
enzimas que han de duplicar las histonas que forman parte de los nucleosomas.
Los nucleosomas viejos permanecen en la hebra conductora.
TRANSCRIPCIÓN (SÍNTESIS DE ARN)
El ARN se sintetiza generalmente de la DNA. La síntesis requiere generalmente
una o más enzimas como la polimerasa de ARN. El cabo de la DNA se utiliza
como un patrón o guía en los cuales se forme el ARN. Desde el ARN forma las
proteínas, ésta es la manera que la DNA mantiene el proyecto original para todas
las proteínas sin dejar el núcleo.
En una primera etapa, una enzima, la ARN-polimerasa se asocia a una región del
ADN, denominada promotor, la enzima pasa de una configuración cerrada a
abierta, y desenrolla una vuelta de hélice, permitiendo la polimerización del ARN a
partir de una de las hebras de ADN que se utiliza como patrón.
La ARN-polimerasa, se desplaza por la hebra patrón, insertando nucleótidos de
ARN, siguiendo la complementariedad de bases, recordemos que en el ARN la
timina se reemplaza por el uracilo, de forma que cuando encontremos una
Adenina esta se apareará con el Uracilo, por ejemplo:
Secuencia de ADN: 3'... TACGCTA...5'
Secuencia de ARNm: 5'...AUGCAU...3'
Cuando se ha copiado toda la hebra, al final del proceso, la cadena de ARN queda
libre y el ADN se cierra de nuevo, por apareamiento de sus cadenas
complementarias. De esta forma, las instrucciones genéticas copiadas o
transcritas al ARN están listas para salir al citoplasma.
SISTESIS PROTEICA
La biosíntesis de proteínas o síntesis de proteínas es el
proceso anabólico mediante el cual se forman las proteínas. El proceso consta de
dos etapas, la traducción del ARN mensajero, mediante el cual
los aminoácidos del polipéptido son ordenados de manera precisa a partir de la
información contenida en la secuencia de nucleótidos del ADN, y las
modificaciones postraduccionales que sufren los polipéptidos así formados hasta
alcanzar su estado funcional. Dado que la traducción es la fase más importante, la
biosíntesis de proteínas a menudo se considera sinónimo de traducción.
Fases de las síntesis de proteínas
La realización de la biosíntesis de las proteínas, se divide en las siguientes
fases:
Fase de activación de los aminoácidos.
Fase de traducción que comprende:
Inicio de la síntesis proteica.
Elongación de la cadena polipeptídica.
Finalización de la síntesis de proteínas.
Asociación de cadenas polipeptídicas y, en algunos casos, grupos
prostésicos para la constitución de las proteínas.
Fase de activación de los aminoácidos
Mediante la enzima aminoacil-ARNt-sintetasa y de ATP, los aminoácidos pueden
unirse ARN específico de transferencia, dando lugar a un aminoacil-ARNt. En este
proceso se libera AMP y fosfato y tras él, se libera la enzima, que vuelve a actuar.
Inicio de la síntesis proteica
En esta primera etapa de síntesis de proteínas, el ARN se une a la subunidad
menor de los ribosomas, a los que se asocia el aminoacil-ARNt. A este grupo, se
une la subunidad ribosómica mayor, con lo que se forma el complejo activo o
ribosomal.
Elongación de la cadena polipeptídica
El complejo ribosomal tiene dos centros o puntos de unión. El centro P o centro
peptidil y el centro A. El radical amino del aminoácido inciado y el radical carboxilo
anterior se unen mediante un enlace peptídico y se cataliza esta unión mediante la
enzima peptidil-transferasa.
De esta forma, el centro P se ocupa por un ARNt carente de aminoácido.
Seguidamente se libera el ARNt del ribosoma produciéndose la translocación
ribosomal y quedando el dipeptil-ARNt en el centro P.
Al finalizar el tercer codón, el tercer aminoacil-ARNt se sitúa en el centro A. A
continuación se forma el tripéptido A y después el ribosoma procede a su segunda
translocación. Este proceso puede repetirse muchas veces y depende del número
de aminoácidos que intervienen en la síntesis.
Finalización de la síntesis de proteínas
En la finalización de la síntesis de proteínas, aparecen los llamados tripletes sin
sentido, también conocidos como codones stop. Estos tripletes son tres: UGA,
UAG y UAA. No existe ARNt tal que su anticodón sea complementario. Por ello, la
síntesis se interrumpe y esto indica que la cadena polipeptídica ha finalizado.
DIFERENCIAS ENTRE SÍNTESIS DE PROTEÍNAS, TRANSCRIPCIÓN
(SÍNTESIS DE ARN) Y DUPLICACIÓN DEL ADN.
La transcripción es uno de los procesos fundamentales que ocurre con nuestro
genoma. Es el proceso de convertir el ADN en el ARN. Usted debe haber oído
hablar del dogma central, que va del ADN, al ARN, a la proteína. Bueno, la
transcripción se refiere a la parte primera de ir del ADN al ARN. Y transcribimos
ADN al ARN en lugares específicos. Los lugares más populares son los que
codifican genes codificadores de proteínas. Pero hay mucha otra cantidad de ARN
que es transcrito, como ARN de transferencia y ARN ribosomal, que tienen otras
funciones que son genómica tambien.
El proceso de replicación, autorreplicación, duplicación o autoduplicación
de ADN es el mecanismo que permite al ADN duplicarse (es decir, sintetizar una
copia idéntica). De esta manera de una molécula de ADN única, se obtienen dos o
más "réplicas" de la primera y la última. Esta duplicación del material genético se
produce de acuerdo con un mecanismo semiconservador, lo que indica que los
dos polímeros complementarios del ADN original, al separarse, sirven de molde
cada una para la síntesis de una nueva cadena complementaria de la cadena
molde, de forma que cada nueva doble hélice contiene una de las cadenas del
ADN original. Gracias a la complementación entre las bases que forman la
secuencia de cada una de las cadenas, el ADN tiene la importante propiedad de
reproducirse idénticamente, lo que permite que la información genética se
transmita de una célula madre a las células hijas y es la base de la herencia del
material genético.
Y finalmente El ARN de transferencia, ARN transferente o ARNt (tRNA en inglés)
es un tipo de ácido ribonucleico que tiene una función importante en la síntesis
proteica. Es aquel que transfiere las moléculas de aminoácidos a los ribosomas,
para posteriormente ordenarlos a lo largo de la molécula de ARN
mensajero (ARNm); estos aminoácidos se unen por medio de enlaces peptídicos
para formar proteínas durante el proceso de síntesis de proteínas. Cada tipo de
ARNt se combina específicamente con 1 de los 20 aminoácidos que se van a
incorporar en las proteínas. Existe una molécula de ARNt para cada aminoácido,
con una tripleta específica de bases no apareadas, el anticodón, codón y el ARN
(ribosomal).
La replicación del ADN se produce en la preparación para la división celular,
mientras que la transcripción ocurre en la preparación para la traducción de
proteínas. La replicación es importante para regular adecuadamente el crecimiento
y la división de las células. El ADN no se replicará si la célula carece de ciertos
factores de crecimiento, manteniendo así la tasa de división celular bajo control.
La transcripción es el método para regular la expresión génica. Aunque todas
nuestras células contienen copias de todos nuestros genes, cada célula sólo
expresa los genes que son necesarios para sus funciones específicas. La
transcripción sólo se produce cuando un gen está “encendido”.
RESUMEN Y ANALISIS DEL TRABAJO DE ARTHUR KORNBERG
Metodología del experimento
Materiales:
El virus ΦX174: que posee una cadena sencilla en forma de lazo cerrado.
Bacteria Escherichia coli: que al ser infectada por el virus QX174 el lazo de la
cadena sencilla de ADN actúa de molde dirigiendo la síntesis enzimática de un
segundo lazo de ADN sintético. Los dos lazos forman una doble hélice anular,
similar a las hélices de ADN que se encuentran en las células bacterianas y en los
organismos superiores.
Enzimas celulares: con la ayuda de esta Kornberg pudo realizar sus
experimentos, estas son usadas como catalizadores.
Enzimas purificadas: ayudan en la sintetización de grandes moléculas en
sistemas libres de células, junto con las coenzimas.
Coenzimas: ayudan en la sintetización de grandes moléculas en sistemas libres
de células.
Bromouracilo: se necesitó cambiar la timina por 5 bromouracilo, que contiene un
átomo de bromo (Br) en el lugar de la timina que lleva un grupo de CH3 siendo
más ligero, para así marcar el ADN sintético.
Átomos radiactivos, para marcar el nucleótido.
Desoxitimidina: compuesto radiactivamente marcado q fue incorporado al ADN
por células de medula ósea y otras células animales, en los primeros ensayos de
Kornberg.
Tubo de ensayo: contenedor de vidrio para realizar mezclas.
Experimentación:
La síntesis del ADN del virus ΦX174, se consiguió a través de los siguientes
pasos:
1. Se utilizó como molde el ADN circular de cadena sencilla, marcado con tritio
del ΦX174.
2. Se le añadieron junto con ADN polimerasa, nucleótidos activados de Adenina,
Guanina, Citocina y, en lugar de Timina, 5 bromouracilo. Uno de los
nucleótidos activados se marcó con fosforo radioactivo. El ADN sintetizado
sobre molde era completo, pero todavía no constituía un lazo cerrado. ´
3. La unión de los extremos del lazo se efectuó añadiendo la enzima de cierre.
4. Ahora se añadió suficiente nucleasa para conseguir la rotura de una de las
cadenas en aproximadamente la mitad de todas las cadenas dobles.
5. Esto dio lugar a una mezcla de lazos dobles completos, lazos del molde, lazos
sintéticos, cadenas lineares del molde y cadenas lineares sintéticas. Puesto
que las cadenas sintéticas contenían 5 bromouracilo eran más pesadas que las
cadenas del molde y pudieron ser separadas que las cadenas molde y
pudieron ser separadas por centrifugación.
6. Los lazos sintéticos fueron ahora aislados y utilizados como moldes para
hacer lazos dobles completamente sintéticos.
7. Para poder marcar el ADN sintético se puede sustituir la timina por 5
bromouracilo, que contiene un átomo de bromo (Br) en el lugar en que la timina
lleva un grupo de CH3, haciendo más ligero el ADN.
Resultados de la investigación
En las experimentaciones de Kornberg y sus colegas tuvieron hallazgos
importantes para lograr su objetivo que luego revolucionaría la ingeniería genética.
Se demostró que el ADN sintético era una molécula con la estructura química
típica del ADN y con la misma proporción de pares Adenina Timina y Guanina-
Citocina que el ADN utilizado como patrón para dirigir la reacción.
Al examinar las propiedades físicas del ADN sintético, observó que tenía la alta
viscosidad, la comparativamente lenta velocidad de sedimentación y otras
propiedades físicas típicas del ADN natural. El ADN nuevo era por tanto como el
natural, una molécula polimérica larga y fibrosa. Además, cuanto mas tiempo se
dejaba incubar la mezcla de los ingredientes activos mayor era la viscosidad del
producto, lo cual era una prueba directa de que el ADN sintético continuaba
creciendo en longitud y en cantidad.
Se realizaron también varias técnicas para comprobar la funcionabilidad del ADN
sintético; una de ellas se le llama „„Análisis del vecino mas próximo‟‟. De este
análisis se dedujo, entre otras cosas, el reconocimiento de un hecho básico sobre
la estructura de la doble hélice, La dirección de la cadena de ADN sintetizada
durante la replicación era opuesta a la de su molde. Por inferencia podemos
concluir que las cadenas de la doble hélice del ADN natural tienen que discurrir en
direcciones contrarios, como propusieron Watson Y Crick.
Sin embargo la exactitud del análisis de la frecuencia de vecinos más próximos no
puede ser, aunque este se efectué con el mismo cuidado, superior al 98 por
ciento. Consecuentemente, continuaron desconfiados respecto a la precisión de la
copia de cadenas conteniendo, según la longitud de los genes 1.000 o más
nucleótido
Su objetivo fue lograr la síntesis de ácidos nuclèicos fuera de la célula viva,
utilizando como patrón ADN natural, generando así un ADN completamente
sintético que posea las mismas propiedades que el material nativo.
¿CÓMO SE COMPROBO FINALMENTE QUE EL ADN SINTETICO ERA
FUNCIONAL?
ADN sintético u oligonucleótido, el ácido desoxirribonucleico, mejor conocido como
ADN, es el material biológico que sirve de archivo e instructivo genético para el
funcionamiento de toda célula. Se comprobó finalmente que el ADN sintético era
funcional al comprobar que el cultivo se reproducía
¿CUÁL ES LA CARACTERISTICAS PRINCIPAL DE LA ENZIMA ADN
POLIMERASA QUE PERMITE POSTULAR EL MODELO DE DUPLICACION
DISCONTINUA?
Las polimerasas son enzimas cuya función está relacionada con los procesos de
replicación y transcripción de los ácidos nucleicos. Existen dos tipos
fundamentales de estas enzimas: la ADN polimerasa y la ARN polimerasa.
La ADN polimerasa es la encargada sintetizar la nueva cadena de ADN durante el
proceso de replicación, adicionando nuevos nucleótidos. Son enzimas grandes,
complejas, y difieren en su estructura dependiendo si se encuentra en un
organismo eucariota o en uno procariota.
Características y estructura
La ADN polimerasa en una enzima que trabaja en dirección 5’-3’, y trabaja
mediante la adición de nucleótidos al extremo terminal con el grupo –OH libre.
Una de las consecuencias inmediatas de esta característica es que una de las
cadenas podrá sintetizarse sin ningún inconveniente, pero ¿qué pasa con la hebra
que necesita ser sintetizada en sentido 3’-5’?
Esta cadena se sintetiza en lo que se conoce como fragmentos de Okazaki. Así,
se sintetizan pequeños segmentos en dirección normal, 5’-3’, que posteriormente
son unidos por una enzima llamada ligasa.
Estructuralmente, las ADN polimerasas tienen en común dos sitios activos que
poseen iones metálicos. En ellos encontramos aspartato y otros residuos de
aminoácidos que coordinan los metales.
Aplicaciones
Una de las técnicas más usadas en los laboratorios de biología molecular es la
PCR o reacción en cadena de la polimerasa. Este procedimiento saca provecho
de la capacidad de polimerización de la ADN polimerasa para lograr amplificar, en
varios órdenes de magnitud, una molécula de ADN que deseamos estudiar.
En otras palabras, al final del procedimiento tendremos miles de copias de nuestro
ADN blanco. Los usos de la PCR son muy variados. Se puede aplicar para a la
investigación científica, al diagnóstico de algunas enfermedades o incluso en
ecología.
CONCLUSION
El Doctor Arthur Kornberg: basó su trabajo sobre un estudio anterior realizado por
él mismo, en el cual, a partir de 60 Kg de Escherichia coli, logró obtener
miligramos de una enzima que él denominó ADN polimerasa; ésta era capaz de
sintetizar una nueva cadena de ADN a partir de una cadena existente empleando
nucleótidos trifosfato.
Esta enzima cataliza la producción de nuevas cadenas de ADN, además mostró
cómo una sola hebra de ADN forma nuevas cadenas de nucleótidos, y demostró la
estructura de doble hélice del ADN
Podemos concluir con que Kornberg descubrió una enzima en la bacteria intestinal
Escherichia coli, la ADN polimerasa, con la cual sintetizó por primera vez ácido
desoxirribonucleico (ADN ) en el tubo de ensayo, lo que le valió el Nobel que
compartió con su maestro y amigo el científico Severo Ochoa.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
MAZPARROTE, Serafín. (1998). Biología 9no grado Educación Básica.
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file:///C:/Users/Trabajo/Downloads/260168428-EXPERIMENTO-DE
KORNBERG.pdf
