“MITOSIS”
INTRODUCCIÓN
La capacidad de reproducción es fundamental para la existencia, propagación y continuación de
las células. Este proceso forma parte de su ciclo de vida y es denominado ciclo celular, el cual es un
conjunto muy ordenado de eventos y comprende esencialmente dos periodos: la interfase y la
división. En general, la mayor parte del tiempo del ciclo corresponde a la interfase y esta se ha
dividido en diferentes etapas que son: fase G1 S y G2.
Además, en diversos tipos celulares se ha descrito una fase “quiescente” o durmiente en la cual las
células no proliferan, se le considera “fuera del ciclo” y se le conoce como GO (G cero). La otra
etapa del ciclo corresponde a la división, la cual se realiza por mitosis en todas las células
somáticas y por meiosis en las células germinales.
La mitosis es un proceso continuo, pero ciertos acontecimientos durante ella permiten identificar
cuatro etapas que se describen de manera breve a continuación y se representan en la Figura 1.
La Profase se caracteriza por la condensación gradual de la cromatina para formar los
cromosomas, los cuales se aprecian al microscopio como estructuras en forma de filamentos. En
la Metafase los cromosomas ya condensados se agrupan en un plano equidistante de los polos del
huso. Durante la Anafase las cromátidas de los cromosomas emigran hacia los polos. En la
Telofase las cromátidas se agrupan en los polos donde comienzan nuevamente a descondensarse.
Durante la mitosis es necesaria la presencia del huso mitótico que asegura la segregación y
emigración adecuada de los cromosomas, ciertas substancias como la colchicina, son capaces de
inhibir la formación del huso mitótico, dando como consecuencia que la división se detenga en la
etapa de metafase. Existen diversas metodologías para el estudio de la mitosis, entre las que se
encuentran la microscopía de fluorescencia y la microscopía electrónica
OBJETIVO
Identificar las diferentes fases de la mitosis en células meristemáticas de raíz de cebolla y observar
el efecto de un agente mitostático.
MÉTODO
1. Una semana antes de realizar esta práctica, coloque una cebolla en un frasco como se aprecia
en la figura 2.
Cambie el agua del frasco cada 24 hrs. Al transportar la cebolla cuide de no maltratar las raicillas.
2. Saque la cebolla del agua y corte la punta de las raicillas que aparecen más obscuras (2 mm de
largo aproximadamente), divida las raicillas en dos lotes de trabajo.
1. Coloque el primer lote en un vidrio de reloj que contenga 3 ml de colchicina al 0.1%,
manténgalas sumergidas durante 1 hora.
2. Coloque el segundo lote en un vidrio de reloj que contenga 3 ml de agua destilada durante el
mismo tiempo y en las mismas condiciones, este servirá como testigo.
3. En un vidrio de reloj limpio deposite las raicillas tratadas con colchicina y en otro las del lote
testigo, etiquetándolos para no confundirse.
4. Cubra las raicillas de ambos vidrios con acetorceína, agregue 4 ml de colorante con la pipeta
graduada.
5. Caliente con el mechero a flama suave (se ve de color azul) hasta que empiecen a salir los
primeros vapores. Evite quemar las raicillas.
6. Si observa que el volumen de acetorceína disminuye quedando las raicillas casi secas, añada
unas gotas de colorante para evitar que se quemen. Deje enfriar.
7. Repita dos veces más los pasos 5 y 6. Adicione 4 ml de colorante en cada calentamiento.
8. Tome una raicilla, deposítela en un portaobjetos limpio y etiquetado.
9. Agregue una gota de acetorceína.
10. Coloque el cubreobjetos.
11. Presione con la goma de un lápiz girando el cubreobjetos.
12. Limpie el exceso de colorante.
13. Enfoque con el objetivo de 40X y determine el índice mitótico en ambos lotes.
RESULTADOS:
*NOTA: Por falta de tiempo no logramos contar las células que entraron en mitosis y por lo tanto
no se contestarán todaslas preguntas siguientes.
1. Para calcular el índice mitótico observe al microscopio y revise 100 células de cada lote,
anotando de estas cuántas están en mitosis.
2. Substituya sus datos en la siguiente fórmula:
Índice mitótico = Número de células en mitosis X 100 Número total de células contadas
3. Compare el índice mitótico obtenido en el lote con colchicina y en el lote sin colchicina.
Comente sus resultados.
4. Realice un esquema de un núcleo en interfase y de las cuatro diferentes etapas de las mitosis
observadas durante la práctica.
Figura 1. Ejemplo de
núcleo de célula animal en
inferfase.
Con base en sus resultados y tomando como guía los siguientes enunciados, redacte la discusión
de la práctica:
1. ¿Qué diferencias observó en el índice mitótico y en el número de metafases, entre las raicillas
del lote testigo y las tratadas con colchicina? Explicar a que se deben estas diferencias.
2. Indique cuál es la acción de un agente mitógeno y de uno mitostático. Dé ejemplos de ambos.
Los agentes mitógenos son factores que actúan en el ciclo celular estimulando la división celular.
Pueden estimular la proliferación de muchos tipos celulares; mientras que
3. Defina cuál es la importancia de la meiosis y de la mitosis y en qué tipo de células se realizan.
Importancia de la Mitosis: Sin mitosis no hay división celular, sin división celular, no hay
crecimiento del individuo por lo que no sería un ser vivo. Por tanto como, es fundamental para la
vida. Si no hubiera mitosis además de no haber crecimiento celular, las células que mueren no
serían reemplazadas por lo que el individuo moriría, ya que tu actualmente eres absolutamente
diferente a hace pocos años por lo que has renovado todas tus células, excepto las neuronas que
no se dividen, no hay mitosis neuronal (por eso las personas mayores van perdiendo facultades).
La Meiosis es un mecanismo indispensable para asegurar la constancia del número de
cromosomas en los organismos sexuados. Si la reproducción de gametos se hiciera por mitosis la
fusión de ellos duplicaría el número cromosómico del cigoto. Así la especie humana con 46
cromosomas por célula la unión del óvulo con los espermatozoides daría lugar a un huevo con 42
cromosomas. La mitosis se da en todas las células eucariontes (haploides y diploides.
4. Mencione los eventos que se llevan a cabo en cada fase del ciclo celular (interface y división).
El ciclo celular es el período de crecimiento y división celular, tienen lugar durante el ciclo
vital de una célula. Se divide en dos etapas: Fase M e Interfase.
Interfase: Se denomina así al período que transcurre entre dos Fases M o divisiones
sucesivas. Se compone de varias etapas:
1. Fase G1: Esta etapa comprende el ciclo celular desde el final de la división anterior
hasta el comienzo de la siguiente estapa (Fase S)donde el ADN se replica. Durante
esta etapa la célula aumenta de tamaño, expresa su ADN sintetizando proteínas y
lleva a cabo sus demás funciones celulares. Al final de esta etapa se encuentra lo
que se denomina "Checkpoint" o Punto de restricción, en el cual se comprueba
que la célula cumple los requisitos necesarios para pasar a la siguiente fase. Una
vez llegados a este punto en la célula, pueden ocurrir 2 cosas, que la célula
continúe su ciclo con intención de dividirse (una vez que la célula pasa este punto
ha de dividirse)o puede ocurrir también que la célula entre en un estado de
"latencia" y se aparte del ciclo, de manera que quedaría en un estado funcional
expresando su ADN y realizando funciones de forma indefinida o con posibilidad
de retomar el ciclo celular más adelante (Esto depende de cada célula y tejido).
2. Fase S: En esta etapa tiene lugar la duplicación/replicación del ADN. El ADN por
medio de mecanismos moleculares duplica el número de cromatidas en cada
cromosoma de manera que ahora tiene el mismo número de cromosomas pero
cada cromosoma tiene 2 cromátidas Idénticas (hermanas) que son las que serán
segregadas luego a cada célula hija en la división.
3. Fase G2: Es la última etapa antes de la Fase M. La célula sigue llevando a cabo sus
funciones celulares, y aumenta de tamaño. Al final de esta etapa hay una
comprobación del ADN para saber que la célula es apta para dividirse, en caso
contrario esta fase se alarga y se intenta arreglar el daño que pueda haber, si lo
consigue la célula entrará en Fase M y se dividirá, si no le es inducida la apoptosis
o muerte celular programada. En esta fase la célula toma una forma alargada
como de frijol
Fase M: Esta es la etapa en la que se lleva a cabo la división celular en 2 y 4 células,
dependiendo de si hablamos de mitosis o meiosis respectivamente.
Mitosis, es el proceso por el cual la célula lleva a cabo la división durante su fase M
dando como resultado 2 células hijas con material genético idéntico. Esta división
ocurre en muchos organismos unicelulares y en las células somáticas de los
organismos pluricelulares. La mitosis tiene 2 eventos, División y Citocinesis. La
división a su vez se subdivide en 5 etapas que cronológicamente ordenadas
serían Profase, Pro-Metafase, Metafase, Anafase y Telofase. A su vez ya está
ocurriendo el proceso u evento de citocinesis.
1. Profase, la célula comienza a perder la envuelta nuclear y el ADN que hay en él
comienza a condensarse para acabar dando lugar a los cromosomas tal o
como los conocemos.
2. Pro-Metafase, Estadío intermedio en el que el núcleo celular ha desaparecido
totalmente y se han condensado los cromosomas que comienzan a ordenarse.
3. Metafase, Los cromosomas se han colocado en la placa de división (en el
centro de la célula) todos en línea uno sobre otro. Ahora el Huso
mitótico,pequeños microtúbulos, se adhieren al centro de cada cromosoma.
4. Anafase, En esta fase los microtúbulos tiran del cromosoma separándolo en 2
cromatidas hermanas, dos cromosomas completamente independientes con
la misma información el uno respecto al otro, atrayéndolo hacía los
polos/extremos de la célula.
5. Telofase, Si todo ha ido bien en las etapas anteriores el material genético está
repartido de forma equiparativa. Ahora a través de vesiculas disueltas en el
citoplasma vuelve a formarse el núcleo esta vez 2 (uno para cada grupo de
cromosomas), y los cromosomas en sí vuelve a descompactarse dando lugar a
ADN funcional.
6. Citocinesis. Comienza ya durante la etapa de Anafase, y se define en células
animales como un anillo de actina que se coloca en la cara interna de la
membrana celular a la altura de la placa de división, y por estrechamiento
contínuo se va haciendo cada vez más pequeño, extrangulando a la célula que
acaba por dar 2 células hijas. En Células vegetales en vez de anillo de actina se
forma una pequeña red de microtúbulos donde se va acumulando celulosa y
material de la pared vegetal que acaba por cerrarse dando lugar a células hijas
(en este caso permanecen unas aperturas de comunicación entre las dos
células hijas a través de esa pared llamadas plasmodesmos).
En la Figura 4 se muestra una fotografía en la que se advierten diferentes etapas de la mitosis.
CONCLUSIONES
Con base en sus resultados y discusión, indique cuáles serían las conclusiones de esta práctica.
Faltó tiempo para una observación más profunda y lo que pudimos obtener son las imágenes que
se presentan al principio de los resultados.
BIBLIOGRAFÍA
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Célula. Omega. España. Se sugiere revisar los siguientes vínculos: Figura 9-14 Multiple-
fluorescent-probe microscopy. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26880/figure/A1740/?
report=objectonly
Figura 18-8 The course of mitosis in a typical animal cell.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26931/figure/A3346/?report=objectonly
Karp, G. 2009. Biología Celular y Molecular: conceptos y experimentos. McGraw Hill. México.
Segura-Valdez, M. L., Cruz-Gómez, S.J., López-Cruz, R., Zavala, G.l., Jiménez-García, L.F. 2008.
Visualización de la mitosis con el microscopio de fuerza atómica. Revista Especializada en Ciencias
Químico-Biológicas. 11: 87-90. Disponible en Internet:
http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=43211934003
