CÓDIGO:
UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA FDOC-090
VERSIÓN: 01
EMISIÓN:
02/03/2020
GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO PÁGINA
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FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO: BACTERIOLOGÍA
PROGRAMA: BACTERIOLOGÍA
NOMBRE DEL CURSO: BACTERIOLOGÍA I
IDENTIFICACION DEL GENERO STREPTOCOCCUS SPP Y
NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
ENTEROCOCCUS SPP
1. OBJETIVOS
Reconocer la importancia clínica de estos microorganismos en el área de la salud.
Conocer los fundamentos de los procedimientos llevados a cabo para el aislamiento de este grupo
de bacterias.
2. INTRODUCCIÓN
El género Streptococcus es un grupo formado por diversos cocos grampositivos que normalmente se
disponen en parejas o en cadenas. La mayoría de las especies son anaerobios facultativos, y algunos
crecen únicamente en una atmósfera enriquecida con dióxido de carbono (crecimiento
capnofílico). Sus exigencias nutricionales son complejas, y su aislamiento requiere el uso de medios
enriquecidos con sangre o suero. Son capaces de fermentar hidratos de carbono, proceso que
produce ácido láctico, y son catalasa-negativos, a diferencia de las especies del género
Staphylococcus.
Un gran número de especies estreptocócicas destaca por su papel como patógenos humanos.
Lamentablemente, la diferenciación de las especies que componen este género es complicada debido
a que se utilizan los tres sistemas diferentes parcialmente coincidentes enumerados a continuación
para clasificar a estos microorganismos 1) propiedades serológicas: grupos de Lancefield
(inicialmente, A a W); 2) patrones hemolíticos: hemólisis completa (beta), hemolisis incompleta (alfa)
y ausencia de hemólisis (gamma), y 3) propiedades bioquímicas (fisiológicas).
Las especies de Streptococcus que producen enfermedades son:
Streptococcus del grupo A: Streptococcus pyogenes producen amigdalitis e impétigo.
Streptococcus del grupo B: Streptococcus agalactiae producen meningitis en neonatos y
trastornos del embarazo en la mujer.
Neumococo: Streptococcus pneumoniae es la principal causa de neumonía adquirida en la
comunidad.
Streptococcus viridans es una causa importante de endocarditis y de abscesos dentales.
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SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente
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ENTEROCOCCUS
Los enterococos («cocos entéricos») se clasificaron previamente como estreptococos del grupo D
debido a que poseen el antígeno de la pared celular del grupo D, un ácido teicoico con glicerol que se
asocia a la membrana citoplásmica. A pesar de este dato, se observó que estos microorganismos
diferían de los restantes estreptococos del grupo D (conocidos como estreptococos del grupo D no
enterocócicos p. ej., Streptococcus bovis). Los grupos enterocócicos y no enterocócicos se
diferenciaron inicialmente por sus propiedades fisiológicas y a través del análisis de ácidos nucleicos.
En el año 1984, los enterococos se clasificaron en el nuevo género Enterococcus, el cual consta
actualmente de 29 especies. Las especies que se aíslan con una mayor frecuencia y que son
clínicamente las más importantes son Enterococcus faecalis y Enterococcus faecium. Enterococcus
gallinarum y Enterococcus casseliflavus también constituyen frecuentes colonizadores del aparato
digestivo del ser humano y revisten importancia debido a su posible confusión con E, faecium
resistente a vancomicina, aunque rara vez se asocian a enfermedad en el ser humano.
3. PROCEDIMIENTO
Limpiar el área de trabajo.
Marcar las cajas con la fecha, origen de la muestra.
Tomar una muestra de las amígdalas con un escobillón estéril.
Realizar un Gram directo.
Sembrar por agotamiento en Agar sangre.
Incubar 37º C de 24 a 48 horas con atmosfera de 5-10% de CO2
IDENTIFICACION DE GÉNERO Y ESPECIE
Las colonias sospechosas de Streptococcus son redondas, lisas, pequeñas, blancas, pueden
formar o no zonas de hemolisis.
GRAM DE LAS COLONIAS: Realizar un Gram de las colonias sospechosas.
PRUEBA DE LA CATALASA: Es una para identificar género.
PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LA BACITRACINA, OPTOQUINA Y TRIMETROPRIM
SULFA: es una prueba para identificar especie, se utiliza en el laboratorio para diferenciar
especias de Streptococcus.
PRUEBA DE CRECIMIENTO EN BILIS Y CRECIMIENTO EN NaCl AL 6.5%: se utiliza en
el laboratorio para diferenciar especias de Streptococcus.
PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD A LA BACITRACINA
o Utilice un inoculo concentrado del microorganismo a partir de un cultivo de 18 – 48 horas en
agar sangre.
o Siembre uniformemente sobre Agar sangre y coloque un disco de bacitracina, incube de 18 a
24 horas a 37ºC en aerobiosis.
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Lectura: Cualquier halo de inhibición debe ser considerado positivo. Con esta prueba puede
ser identificado presuntivamente se utiliza en el laboratorio para diferenciar especias de
Streptococcus del grupo A (pyogenes) hasta en el 95% de los casos.
PRUEBA DE RESISTENCIA AL TRIMETROPRIM SULFA (SXT)
Utilizando discos de sensibilidad que contenga 1.25mg de trimetroprim y 23.75 mg de
sulfametoxasol obtenidos comercialmente, pueden ser separados los se utiliza en el laboratorio
para diferenciar especias de Streptococcus del grupo A y grupo B de los otros grupos por la
resistencia presentada por estos dos grupos al trimetroprim sulfa. Se utiliza el mismo
procedimiento utilizado para la prueba de susceptibilidad a la bacitracina.
4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS.
Agar sangre de cordero
Escobillones estériles
Colorantes de Gram
Portaobjetos
Microscopios
Mecheros
Sensidiscos de optoquina
Sensidisco de Bacitracina
Cepa de Staphylococcus aureus betahemolítico
Bilis esculina
BHI al 6,5% DE NaCl
Sensidisco de Trimetroprim Sulfa
Peróxido de hidrogeno
5. EQUIPOS DE PROTECCIÓN PERSONAL Y/O COLECTIVA.
Uniforme (zapatos cerrados y elementos de bioseguridad)
Bata
Gorro
Guantes
Gafas protectoras
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6. MANEJO DE RESIDUOS PELIGROSOS.
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7. CUESTIONARIO O ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS.
PRELABORATORIO
¿Cuál es el fundamento de la prueba de CAMP?
¿Investigar que pruebas serológicas se utilizan para identificar Streptococcus y cuál es el
fundamento?
Elabore un esquema completo de identificación del genero Streptococcus.
Presentar un caso clínico relacionado con la práctica de Streptococcus y Enterococcus.
En que consiste la prueba (PYR) para la identificación Streptococcus.
Señale para cada uno de los grupos de los Streptococcus el tipo de hemolisis que producen
(Grupo A, B, C, D(enterococo), D (No enterococo), E, F, G, H, K, L, M, N, Q, grupo Viridans, S
pneumoniae)
¿Cuál es el carácter antigénico que permite dividir a los Streptococcus en los grupos antes
mencionados y en que se fundamenta?
POST- LABORATORIO
CASO CLINICO
Un hombre de 62 años con antecedentes de enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) acude
al servicio de urgencias por presentar fiebre de 40 °C, escalofríos, náuseas, vómitos e hipotensión. El
paciente tenía también expectoración amarillenta que había ido aumentando a lo largo de los 3
últimos días. La frecuencia respiratoria era de 18 rpm, y la presión sanguínea de 94/52 mm Hg. La
radiografía de tórax mostraba un extenso infiltrado inflamatorio en la parte inferior del pulmón
izquierdo que abarcaba el lóbulo inferior y la língula. En varios hemocultivos y cultivos de esputo se
observó el desarrollo de S. pneumoniae. La cepa era sensible a cefazolina, vancomicina y eritromicina,
pero resistente a penicilina.
¿Qué condiciones predisponentes hacen a este paciente más susceptible a la neumonía y a la
bacteriemia producidas por S. pneumoniae?. ¿Qué otros grupos de pacientes son vulnerables a
estas infecciones? ¿Qué otras infecciones causa este microorganismo y qué grupos de población
son más susceptibles?
¿Cuál es el mecanismo responsable con mayor probabilidad de la resistencia a la penicilina?
¿Qué infecciones producen S. pyogenes, S. agalactiae, S. anginosas, S. dysgalactiae y los
estreptococos del grupo viridans?
¿Cuáles son los principales factores de virulencia de S. pneumoniae, S. pyogenes y S. agalactiae?.
S. pyogenes puede producir el síndrome del shock tóxico estreptocócico. ¿Cómo se distingue esta
enfermedad de la producida por los estafilococos?
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¿Qué dos enfermedades no supurativas se pueden desarrollar después de una enfermedad
localizada por S. pyogenes?
8. BIBLIOGRAFÍA
Diagnostico microbiológico. Bailey y Scott. Editorial Panamericana. 2009.
Diagnostico microbiológico. Koneman, Allen. 6ta Edición. Editorial Panamericana. México. 2.006.
El laboratorio en el diagnóstico clínico. Jhon Bernard Henry. Editorial Marban. 20° edición. 2005.
Inmunología (aplicaciones prácticas en hematología y microbiología). Faustina Rubio Campal.
Editorial Paraninfo/Thomson.
Manual de laboratorio clínico diagnóstico. Silvia Amich – María Luisa Salve – Santiago Prieto.
Editorial McGrawHill.
Medical Microbiology. Jawetz.28° Edición. 2020
Microbiología de los Alimentos. Miguel A. Hernández Urzúa. Editorial Panamericana. 2016
Microbiología y Parasitología Humana. Raúl Romero Cabello. Editorial Panamericana. 2018.
Microbiología. Lansing M. Prescott. Editorial McGrawHill.
Microbiología. Murray Patrick. Editorial Elsevier. 8° edición. 2017
Microbiological Research. Jürgen Wendland, PhD. 2.020
PROMIR: Enfermedades Infecciosas. Editorial Panamericana. 2.020
Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia clínica. Mac Faddin, Jean F.
Editorial Panamericana. México. 1991.
Madigan, M. T; Martinko J., Parker J. (2004): Brock biology of microorganisms. Lippincott Williams
& Wilkins, décima edición, 2004
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