LABORATORIO DE BIOLOGÍA
ESCUELA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL ECUADOR
LABORATORIO No. 6
MEMBRANAS BIOLÓGICAS Y PROCESOS DE TRANSPORTE:
DIFUSIÓN, ÓSMOSIS
Objetivos:
1. Comprender y distinguir los fenómenos de difusión y ósmosis.
2. Determinar los efectos de la temperatura en la velocidad de difusión.
3. Describir y comprender los efectos de soluciones isotónicas, hipertónicas e
hipotónicas.
Introducción
Todas las células están separadas físicamente del ambiente que las rodea por una
membrana celular que las limita y les permite conservar un medio ambiente interno
adecuado.
Las membranas celulares son estructuras dinámicas y complejas, compuestas
fundamentalmente por lípidos y proteínas que cumplen numerosas funciones,
entre ellas la regulación de la entrada y salida de materiales de la célula.
Las membranas celulares son semipermeables, es decir, permiten el paso de
algunas sustancias e impiden el de otras (esto depende de factores como tamaño
y carga de la sustancia, composición de la membrana etc).
La mayoría de iones y otras sustancias están disueltas en el agua, por lo que éste
es el solvente más importante en los procesos vitales. Las sustancias disueltas en
el agua (como sales o azúcares) son los solutos y la combinación de un solvente y
un soluto es una solución.
Los procesos por los cuales los iones y moléculas se mueven son:
1. Difusión: es el movimiento neto de partículas de una región de alta
concentración a otra de baja concentración, de manera de lograr una
distribución uniforme. Este proceso no requiere gasto de energía.
2. Ósmosis: es un tipo especial de difusión que implica el movimiento de
moléculas del solvente (agua) a través de una membrana semipermeable,
sin gasto de energía. El movimiento neto es de la región de mayor
concentración de moléculas de agua a la de su menor concentración.
3. Diálisis: es la difusión de un soluto a través de una membrana
semipermeable.
4. Transporte activo: es el transporte de una molécula, a través de una
membrana, con gasto de energía, de una región de concentración baja a
otra de concentración alta, es decir, contra el gradiente de concentración.
Ejercicio No. 1
Difusión
La velocidad de difusión depende del movimiento de las moléculas (lo que a su
vez está condicionado por su tamaño, forma, carga eléctrica) y de la temperatura.
Procedimiento
1. Obtenga dos cajas Petri conteniendo agar. Rotúlelas como 1-refrigeración y
2-incubadora. Utilizando un tubo hueco (pipeta Pasteur) haga tres
cavidades homogéneamente separadas en la superficie del agar. Rotúlelos
a, b y c. En cada hueco vierta 3 gotas de las siguientes soluciones:
a)AgNO3, b)KMnO4 y c)K3Fe(CN)6.
2. Anote la hora exacta. Coloque la caja 1 en refrigeración a 5º C. Ponga la
caja 2 en lancubadora a 35 ° C.Después de una hora mida el radio de los
halos que se han formado.
3. Observe que sustancia se difunde a mayor velocidad y como afecta la
temperatura a la velocidad de difusión.
Ejercicio No. 2
Ósmosis
En el siguiente ejercicio se usarán membranas de diálisis de celulosa que son
selectivamente permeables, con las que se puede observar el fenómeno osmótico.
Estas membranas permiten el paso de agua e impiden el paso de moléculas
grandes.
Procedimiento
1. Obtenga 4 vasos de precipitación de 400 ml y numérelos del 1 al 4.
2. En los vasos números 1 al 3 ponga 200 ml de agua destilada. En el vaso
número 4 ponga 200 ml de sacarosa al 30%.
3. Obtenga 4 tubos de diálisis de 15 cm de largo. Doble un extremo de cada
tubo sobre sí mismo y amárrelo fuertemente con hilo. Numere los tubos con
etiquetas del 1 al 4. Llénelos, usando un embudo, con las siguientes
soluciones:
1) 10 ml de agua destilada
2) 10 ml de sacarosa al 15%
3) 10 ml de sacarosa al 30%
4) 10 ml de agua destilada
4. Saque el exceso de aire de cada una de las bolsas. Doble el otro extremo
de cada tubo sobre sí mismo y átelo firmemente con hilo. Enjuague cada
una de las bolsas con agua destilada y séquelas suavemente con papel
secante.
5. Con una balanza de precisión pese cada una de las bolsas y anote los
pesos en la columna marcada 0 minutos de la Tabla 1.
6. Coloque las bolsas en los vasos correspondientes (1-1, 2-2 etc) y deje que
transcurran 20 minutos.
7. Retire los tubos de los vasos, seque suavemente el exceso de agua y
péselos. Anote los datos en la Tabla 1.
8. Repita los pasos 12 y 13 a los 40, 60 y 80 minutos.
Tabla 1. Cambio en el peso debido a ósmosis
Tubo Contenido Peso de Cambio en Cambio Cambio Cambio
Nº bolsa / la bolsa 20’ en el en 40’ en 60’ en 80’
contenido vaso (gr) peso (gr)
1 H2O destilada /
H2O destilada
2 15% sacarosa /
H2O destilada
3 30% sacarosa /
H2O destilada
4 H2O destilada /
30% sacarosa
Ejercicio No. 3
Cambios osmóticos en glóbulos rojos
En la porción líquida de todas las células vivas están disueltas sales, azúcares y
otras sustancias que le dan a dicho líquido alguna presión. Esta se define como la
presión necesaria para detener el flujo de agua a través de una membrana
semipermeable.
Cuando se coloca una célula en un líquido que posee la misma presión osmótica y
por lo tanto concentración idéntica de moléculas de soluto y solvente, no hay
movimiento neto de moléculas de agua al interior o exterior de la célula, se dice
entonces que ese líquido es isotónico en comparación con el líquido intracelular.
En condiciones normales, el plasma sanguíneo humano y todos los líquidos
corporales son isotónicos en relación con las células. Cuando el líquido
circundante tiene una concentración mayor de sustancias disueltas que el interior
de la célula, tendrá también mayor presión osmótica y se dice que es hipertónico
con respecto a la célula. Cuando el líquido circundante tiene una concentración
menor de materiales disueltos, posee presión osmótica menor y es hipotónico con
respecto a la célula.
Procedimiento
1. Obtenga 3 tubos con tapa, numérelos 1, 2 y 3 y haga una marca en cada uno
a los 5 cm desde la base.
2. Llénelos de la siguiente manera:
a. Tubo 1: 5 gotas de sangre. Cloruro de sodio 0.9% hasta completar los 5
cm
b. Tubo 2: 5 gotas de sangre. Cloruro de sodio al 10% hasta completar los 5
cm
c. Tubo 3: haga otra marca desde la base a 0.5 cm. Añada 5 gotas de
sangre. Cloruro de sodio 0.9% hasta la primera marca (0.5 cm). Agua
destilada hasta los 5 cm.
1. Tápelos y mezcle el contenido de cada tubo.
2. Coloque los tubos uno a uno frente al texto de su manual. Si la sangre se ha
hemolizado, podrá leer las letras. Anote sus resultados en la Tabla 4.
3. Obtenga 3 portaobjetos limpios y numérelos. Con una pipeta tome una
pequeña cantidad de cada tubo y coloque una gota sobre cada portaobjetos.
Cambie de pipeta para cada tubo. Ponga un cubreobjetos en cada placa.
Observe con el microscopio. Las células hemolizadas se ven como fantasmas
membranosos. Dibuje y registre sus resultados en la Tabla 4.
Tabla 4. Efecto de las soluciones salinas sobre los glóbulos rojos
Tubo Contenido Lectura a través Apariencia Tipo de solución
No. del tubo microscópica de la (Isotónica, Hipotónica,
solución Hipertónica)
1 NaCl 0.9%
2 NaCl 10%
3 NaCl 0.09%
Preguntas
1. Explique cómo y porqué afecta la temperatura a la velocidad de difusión.
2. ¿Qué es la solución salina fisiológica? ¿Es iso, hiper o hipotónica con
respecto a las células humanas?
3. ¿Cuál es la fuente energía para la difusión?
