COLOR
Spectrophotometric—Single-Wavelength Method (PROPOSED)
Espectrofotométrico: método de longitud de onda única (PROPUESTO)
Discusión General
El color se determina espectrofotométricamente a una longitud de onda entre 450 y 465 nm, con soluciones de platino-cobalto
como estándares.1–3 El color verdadero de muestras reales y los estándares de platino-cobalto siguen la ley de Beer.
Aplicación: El método espectrofotométrico de platino-cobalto es aplicable a aguas naturales, potables y residuales, tanto doméstico
e industrial.
Interferencia: La interferencia principal proviene de la presencia de partículas coloidales y en suspensión que absorben o dispersan
la luz en la longitud de onda del método espectrofotométrico. Mientras que en 2120B se pueden realizar mediciones de color sin
eliminar el material particulado siempre que se registren como "CU aparente", el 2120C requiere la eliminación del material
particulado antes de la determinación del color.
La absorbancia de la luz de la materia orgánica depende del pH; sin embargo, la variación en la absorbancia es pequeña para el
rango de pH de la mayoría de las aguas. Debido a que las mediciones de color se realizan por razones estéticas, preferiblemente no
ajuste el pH de la muestra siempre que esté entre 4 y 10. Si se ajusta el pH, ajústelo a 7 y anótelo. Además, el pH puede afectar la
solubilidad de las sustancias, que luego pueden interferir con la medición del color si se forman partículas.
Nivel de detección del método: el color mínimo detectable depende en la longitud de la ruta de la celda. Elija un tamaño de celda
que proporcione una absorbancia dentro del rango que resulte en una buena precisión y linealidad de respuesta.
Este rango depende de la calidad del espectrofotómetro. Si se usa una celda de 50 mm en el rango de longitud de onda de 450 a
465 nm, entonces una absorbancia de 0.005 produce un color mínimo detectable de 1 CU. Con los espectrofotómetros más nuevos,
se puede obtener un nivel de detección de método de 2 CU con una longitud de trayectoria de 25 mm. Diluya las muestras con color
intenso para que estén dentro del rango de la curva estándar. Las lecturas de absorbancia deben estar dentro del rango de 0,005 a
0,8.
2. Aparato
a. Espectrofotómetro: elija una longitud de onda entre 450 y
465 nm. Utilice celdas de vidrio combinadas que proporcionen un paso de luz de al menos 25 mm. Pueden usarse celdas con
longitudes de trayectoria de 40, 50 o 100 mm. La ley de Beer permite la flexibilidad de seleccionar la longitud de la ruta de la celda.
Conjunto de filtro y filtro: Conjunto de filtro y filtro (para medidas de color verdadero): Utilice un filtro de membrana de celulosa de
0,45 m de diámetro de poro de 22 o 47 mm de diámetro. También se pueden utilizar filtros de fibra de vidrio. Enjuague los filtros
antes de usarlos y controle los filtros en blanco. Pueden ser necesarios filtros de poros más pequeños de 0,2 o 0,22 mo incluso
ultrafiltración para eliminar las partículas coloidales de determinadas muestras, como los óxidos de Mn o Fe u otros coloides. Utilice
un conjunto de vidrio, TFE o acero inoxidable para sujetar los filtros seleccionados.
3. reactivos
Agua libre de orgánicos: agua de reactivo Tipo I (ver Sección 1080) o agua equivalente. Úselo para todos los procedimientos de
preparación estándar y otros.
a) Cloroplatinato de potasio (K2PtCl6), grado analítico.
b) Cloruro cobaltoso (CoCl2 6H2O), grado analítico.
c) Ácido clorhídrico (HCl), grado analítico.
d) Hidróxido de sodio (NaOH), grado analítico.
4. Elaboración de estándares
Disuelva 1.246 g de cloroplatinato de potasio y 1.00 g de cloruro cobaltoso cristalizado en agua con 100 mL de HCl concentrado y
diluya a 1000 mL. Esta solución madre tiene un color de 500 unidades de color (CU). Los estándares de platino-cobalto de 500 CU
están disponibles comercialmente y son adecuados para su uso como estándar primario.
Prepare estándares que tengan CU de 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50 y 100 diluyendo 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 8.0, 10.0 y 20.0 mL de
estándar de color de stock con agua en Matraces aforados de 100 mL. Transfiera a tubos Nessler para usar como patrones. Proteja
los estándares contra la evaporación y la contaminación cuando no estén en uso. Manténgase en la oscuridad cuando no esté en
uso y consérvelo solo durante 1 mes.
Deje que el espectrofotómetro se caliente de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Elija una longitud de onda entre 450 y
465 nm para desarrollar la curva estándar; una buena elección es 456 nm. La absorbancia de Pt-Co tiene una absorbancia máxima
amplia dentro de este rango de longitud de onda. Utilice celdas de espectrofotómetro emparejadas. Llene una celda con agua para
poner a cero el instrumento. Lea la absorbancia para cada estándar de color y prepare una curva estándar de CU versus
absorbancia.
5. Curva estándar espectrofotométrica
Las curvas de color pre-programadas están disponibles con algunos espectrofotómetros. Las curvas se pueden verificar mediante el
uso de los estándares preparados en 2120C.4.
Preparación de la muestra: Ver 2120B.5b Compruebe el pH de la muestra. Si está fuera del rango de 4 a 10, preferiblemente ajuste
la muestra a pH 7 y observe el ajuste. Si se va a medir el color verdadero, lave el filtro de membrana y el conjunto del filtro pasando
al menos 50 ml de agua a través del filtro. Filtrar aproximadamente 25 mL de muestra y desechar el filtrado. Filtrar una porción
adicional de aproximadamente 50 mL a través del mismo filtro y conservar para análisis.
Medición espectrofotométrica: deje que el espectrofotómetro se caliente de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Establezca la longitud de onda en la misma configuración utilizada para desarrollar la curva estándar; asegúrese de que la longitud
de la ruta de la celda sea la misma que la utilizada para la curva estándar. Llene una celda del espectrofotómetro con agua y ponga a
cero el instrumento. Enjuague la otra celda con muestra y luego vuelva a llenar. Coloque la celda en el espectrofotómetro y lea la
absorbancia. Repita para las muestras restantes. Determine el color de la muestra utilizando lecturas de absorbancia y la curva
estándar que relaciona la absorbancia y la CU. Para espectrofotómetros con curvas de calibración pre-programadas para color,
ponga a cero el instrumento y tome medidas de muestra de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
