Uso de las determinaciones de progesterona en el manejo reproductivo de la

perra
1° Congreso de Ciencias Veterinarias
M en MVZ Rafael Eduardo Paz Benito

INTRODUCCIÓN
La progesterona es una hormona esteroide derivada del colesterol que se produce principalmente
en el cuerpo lúteo de los mamíferos después de la ovulación, en la placenta de algunas especies y
en concentraciones menores en las glándulas adrenales. Su función principal es mantener y lograr
el éxito la gestación, incrementando las secreciones de las glándulas endometriales, el cierre del
cérvix, la quiescencia uterina y la inmunosupresión local del mismo, además suprime el celo e inhibe
el desarrollo folicular y la conducta sexual. Esta hormona es idéntica en todas las especies y presenta
las características de ser liposoluble, termoestable y no digestible, entre otras.

En la mayoría de las especies domésticas, la determinación de los niveles de progesterona son de

gran utilidad en el diagnóstico de gestación, ya que en este periodo dicha hormona presenta un
incremento considerable y sostenido por más tiempo que en un ciclo sin gestación. En este último
caso, solamente durante el diestro se observan niveles elevados de progesterona, etapa que en
general tiene una duración promedio de 12 a 15 días. Sin embargo, la perra presenta ciertas
particularidades fisiológicas en su ciclo estral, que permiten utilizar esta herramienta para
determinar el momento de la ovulación.

Una de las características importantes del ciclo estral de la perra es que la progesterona se produce
en mayor cantidad desde que inicia el estro, antes de que se presente la ovulación, y permanece
elevada durante el diestro, manteniéndose así en caso de haber una gestación. Otra característica
propia de las perras es que el diestro tiene una duración mayor que la gestación; motivo por el cual
la medición de dicha hormona no es útil como diagnóstico de gestación en esta especie.

La importancia de las determinaciones de progesterona sérica en esta especie, radica en el que

permiten tener mayor certeza del momento en el cual se lleva a cabo la ovulación, con lo que se
puede decidir el momento en el cual llevar a cabo el servicio por monta o por medio de inseminación
artificial, sobre todo en situaciones en las que se tiene acceso a un número limitado de servicios o
cuando se realizan manejos con semen refrigerado o congelado, en donde es mayor la probabilidad
de muerte espermática.

Esta herramienta debe utilizarse de forma adecuada, basándose siempre en la historia clínica, el
examen físico, los signos clínicos y debe apoyarse en todo momento en la citología vaginal
exfoliativa, para evitar manejos inadecuados que solamente provocan gastos innecesarios. El
manejo adecuado de esta técnica incrementa hasta en un 30% el éxito de la inseminación artificial,
en comparación con los casos en los que solamente se utiliza la citología vaginal exfoliativa.

Otro factor importante a tomar en cuenta es que las determinaciones de progesterona deben
realizarse en forma seriada, ya que una muestra aislada es de menor valor diagnóstico, pero esto
depende de cada caso en particular y del resultado de la muestra previa.

PATRONES DE SECRECIÓN DE PROGESTERONA EN LA PERRA

Antes de realizar una determinación hormonal, se debe realizar el seguimiento por citología vaginal
para detectar el estro, ya que es durante esta etapa en la que se presenta un incremento gradual
en el patrón de secreción de progesterona y para poder utilizar esta herramienta, se requiere
conocer el patrón de secreción de la hormona, y así saber el momento adecuado para tomar las
muestras.

La secreción de progesterona se presenta en forma de pulsos como el resto de las hormonas y su

concentración basal en sangre durante el anestro es menor a 0.5 ng/ml. Durante el proestro fluctúa
entre los 0.5 a 1 ng/ml, una vez que los folículos han alcanzado un estado de desarrollo avanzado,
en el estro, comienza la luteinización parcial y la progesterona incrementa a más de 1 ng/ml
alcanzando los 30 ng/ml al final de esta etapa, alcanzando rápidamente los 40 a 90 ng/ml durante
el diestro o la gestación. Se ha observado que el patrón de secreción en el estro aumenta
aproximadamente 1 ± 0.3 ng/ml al día hasta llegar a 10 ng/ml, posteriormente el incremento diario
es mayor.
Alrededor del pico de LH se pueden encontrar valores de 2 a 4 ng/ml y los niveles séricos que indican
la ovulación son de 4.0 a 10.0 ng/ml, siendo el promedio 7.0 ng/ml.

El momento de la ovulación se puede determinar siguiendo el siguiente cuadro:

Correlación de la concentración de progesterona sérica suero con eventos reproductivos

significativos en la perra. El margen de error se estimó ser aproximadamente +/- 1 día.

Progesterona sérica (ng/ml) Eventos

< 1.0 Anestro o proestro

1.0 a 1.9 Ovulación menos de 3 días – se recomienda

seguimiento

2.0 a 2.9 Ovulación menos 2 días

3.0 a 3.9 Ovulación menos 1 día

4.0 a 10.0 Día de la ovulación

Ovulación más 2 días es el día óptimo para el servicio

> 10.0 con epitelio vaginal cornificado Ovulación más 1 a 5 días

10.0 + citología de diestro Diestro

Tomado de: Root Kutztritz M. Use of Commercial Luteinizing Hormone and Progesterone Assay Kits in Canine
Breeding Management en: Concannon P. England G. Verstegen J. Recent Advances in Small Animal
Reproduction. [on line] 2001: [Cited Ene 2010] (5 screens). Available from: http://www.ivis.org. Ithaca, New
York. USA.

Las mediciones de progesterona también son de utilidad para predecir la fecha probable de parto,
ya que éste se produce aproximadamente 12 a 24 horas después de que las concentraciones
descienden a menos de 2 ng./ml, esto permite en algunos casos programar una cesárea a tiempo.

Cuando la medición de progesterona durante la gestación se realiza en forma indirecta, a través de

la detección de algunos de sus metabolitos en heces, se ha observado que los niveles de
progesterona son mayores en las hembras gestantes que en las que no lo están, Sin embargo esto
no se aprecia sí la determinación se realiza en suero, ya que el útero grávido presenta un
metabolismo de progesterona muy aumentado, ocasionando que las concentraciones en sangre
sean similares en ambos casos.
Este descubrimiento supone otra prueba para diagnóstico de gestación, ya que el encontrar
metabolitos de progesterona, se puede confirmar la preñez; sin embargo se considera que este
método es poco práctico en comparación con otros como las técnicas de imagenología que ofrecen
muchas ventajas, pero es útil su aplicación para el seguimiento del ciclo estral y diagnóstico de
gestación en caninos silvestres o salvajes como lobos y zorros, ya que es un método menos invasivo.

PRUEBAS PARA DETERMINACIÓN HORMONAL

Existen varias pruebas por medio de las cuales se puede hacer la determinación hormonal como
radioinmunoanálisis (RIA) y quimioluminiscencia (QL) e enzimoinmunoanalisis ligado a enzima
(ELISA), siendo las de mayor uso los ensayos de ELISA, los cuales se pueden encontrar en forma de
pruebas rápidas en el mercado. La desventaja de la mayor parte de estos kits de diagnóstico, es que
son semi-cuantitativos y revelan un resultado subjetivo que se mide por colorimetría óptica y
detectan valores de 1 ng/ml, entre 2 y 5 ng/ml y más de 5 ng/ml, a diferencia de los ensayos
realizados en laboratorios clínicos en los que se utiliza un espectrofotómetro y se da un resultado
cuantitativo específico.

Las muestras para estos kits deben manejarse con cuidado ya que la hemólisis, ictericia y lipemia,
entre otros factores, pueden alterar el resultado al afectar el color en el revelado de la reacción,
mientras que en las pruebas cuantitativas esto no sucede ya que la matriz se lava del ensayo. En
contraparte una ventaja de estos kits es la rapidez de la prueba ya que el resultado se muestra en
aproximadamente 15 a 20 minutos.

TOMA Y ENVÍO DE MUESTRA

Para realizar las pruebas de determinación hormonal es importante conocer las características
fisicoquímicas de la hormona a determinar, el tejido, secreción o excreción corporal en la que se
encuentra y el método adecuado para tomar la muestra.

La prueba se realiza a partir de suero, aunque se puede enviar una muestra de sangre completa que
será procesada por el laboratorio para obtener suero. La sangre es un tejido compuesto por células
como los eritrocitos, leucocitos, plaquetas; y diversas substancias suspendidas como hormonas,
enzimas, proteínas, factores de la coagulación, vitaminas, minerales, etc.; la fracción líquida con
todos estos elementos se conoce como plasma. Para separar la fracción líquida o plasma la muestra
debe tomarse con anticoagulante, que ocasiona la separación de las fracciones celulares, en cambio
cuando se toma una muestra sin anticoagulante, al formarse el coagulo se precipitan los factores de
la coagulación, junto con las células y el fibrinógeno y se puede obtener así el suero, en el cual se
pueden encontrar suspendidas hormonas y enzimas que no participan en la coagulación.

Cuando se trabajan muestras de sangre para determinación hormonal se debe realizar un manejo
adecuado para evitar el consumo enzimático y celular de las hormonas a estudiar, por ello las
muestras se manejan a temperatura ambiente hasta por un máximo de treinta minutos a una hora,
y cuando se requiere conservarlas por periodos de hasta 24 horas, se deben refrigerar a 4º C.

La progesterona es una hormona esteroide, termoestable; se recomienda tomar la muestra de

sangre en un tubo sin anticoagulante, dejar coagular, centrifugar a 2500 revoluciones por minuto
por 5 minutos, retirar el coagulo y conservar el suero a 4º C hasta su envío al laboratorio o bien a -
20º C cuando se requiere conservar por más periodos largos.

Como en cualquier otro estudio de gabinete, la identificación es importante, para evitar confusiones
entre pacientes, días, etc.; la información esencial que debe estar indicada es el nombre, número
de expediente, tatuaje, microchip, etc., especie, raza, género y fecha, y en algunos casos el nombre
de la hormona a determinar.

El material necesario para la toma de muestra son guantes, jeringa de 3 ó 5 ml con aguja calibre 21”,
o bien adaptadores para sistemas al vacío, solución de yodo al 10% o alcohol al 96%, torundas de
algodón, tubos estériles al vacío para colección de sangre, los cuales pueden ser de 2ml, 3ml, ó 4ml,
aunque también existen más grandes de 5ml y 10ml. El volumen requerido para una sola
determinación varía de un laboratorio a otro o de una prueba a otra, y aunque por lo general se
requieren al menos 3 ml de sangre, se debe pedir información al laboratorio antes de tomar la
muestra.
En caso de utilizar tubos se encuentran marcados con diferentes colores para identificar los
diferentes aditivos que contienen, cada uno de los aditivos permite mantener características
específicas, para así poder realizar diferentes pruebas o determinaciones.

En la mayoría de las perras se puede obtener la muestra de sangre con mucha facilidad de la vena
cefálica, aunque en algunos casos es necesario puncionar la vena safena o bien la yugular, sobre
todo en animales muy pequeños; por esto la sujeción y posicionamiento del paciente varía de
acuerdo a la técnica seleccionada.

Se coloca a la paciente sobre una mesa en caso de las perras de talla pequeña, o bien en el piso
cuando son tallas grandes, y se pide al ayudante o al propietario que sujete firme pero gentilmente
la cabeza. Se selecciona el sitio de punción, se rasura el área sobre el vaso sanguíneo y se realiza
asepsia del área.

Cuando el método se realiza con tubos al vacío y adaptadores, la muestra cae directamente al tubo,
pero cuando se utilizan jeringas, se debe colocar la muestra en un tubo, para lo cual se retira la aguja
y se desliza la sangre por las paredes del tubo, lentamente para evitar hemólisis y otros artefactos
que pueden interferir en el resultado.

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