Identificación de

ENTEROBACTERIAS
Angie Daniela Gamboa - Daniel Santiago Hortua
Grupo 5
La familia Enterobacteriaceae es el grupo más grande y heterogéneo
de bacilos gramnegativos con importancia clínica. Se han descrito 50
géneros y cientos de especies y subespecies. Estos géneros se han
clasificado en función de sus
propiedades bioquímicas y estructura antigénica

2
ENTEROBACTERIACEAE
✗ Bacilos Gram negativos, No fastidiosos
✗ Fermentadores de glucosa
✗ Reductores de nitrato a nitritos.
✗ Aerobios y anaerobios facultativos
✗ Catalasa + ve, (excepto Shigella dysenteriae 1)
✗ Oxidasa negativos
✗ Moviles (excepción Shigella, Klebsiella, Salmonella
gallinarum-pullorum)

3
4
 PROPIEDADES BIOQUÍMICAS

1
Quotations are commonly printed as a means
of inspiration and to invoke philosophical
thoughts from the reader.
Medios para enterobacterias
Medios de Medios de Moderadamente Medios de
enriquecimiento aislamiento selectivos
identificación
- Caldo tetrationato de No selectivos - Salmonella
Mueller y Kauffman -Shigella agar - Buenos Aires
- Caldo selenito de - Agar nutritivo (SS) modificado (BAM)
Leifson - Agar sangre - Desoxicolato - Triple azúcar hierro
- Agua Peptonada - Agar chocolate citrato agar (DCA) (TSI)
Alcalina - Agar Hektoen - Doble Azúcar hierro
Poco selectivos o Kligler Iron Agar
Muy selectivos - Lisina hierro Agar
Medios de - Mac Conkey (MC),
(LIA)
- Eosina azul de - Agar verde
transporte metileno (EMB) brillante (VB) - Ornitina-Agar
- Agar bismuto - Otros
- Desoxicolato de
- Medio de Cary y Blair sulfito (BiSA).
Leifson (DL).
- Medio de Stuart
Medios de
Enriquecimiento
8
 Caldo tetrationato de
muller y kauffman
El medio de cultivo contiene peptona que
provee los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, y carbonato de
calcio que neutraliza y absorbe
metabolitos tóxicos. La selectividad está
dada por la presencia de sales biliares y
tetrationato que inhiben el desarrollo de
microorganismos Gram positivos y
algunas enterobacterias

9
 Caldo selenito de
Leifson
La lactosa es el carbohidrato
fermentable, en tanto que el selenito
de sodio es la sustancia inhibidora
que frena el crecimiento de bacterias
Gram positivas y de la mayoría de
bacterias presentes en la flora
intestinal, especialmente de la
Familia Enterobacteriaceae. El
fosfato de sodio es el amortiguador
que estabiliza el pH del medio

10
Agua Peptonada
Alcalina
Las peptonas proporcionan nitrógeno,
vitaminas, minerales y aminoácidos
esenciales para el crecimiento. El
cloruro sódico suministra electrolitos
esenciales para el transporte y el
equilibrio osmótico y estimula el
crecimiento de Vibrio cholerae.
Se puede afirmar que elevando el pH
del medio llevándolo a la alcalinidad, se
inhibe la mayor parte de la flora no
deseada de fondo, dejando intacta la
viabilidad de la especie Vibrio

11
Medios de
aislamiento
12
Agar nutritivo
La pluripeptona y el
extracto de carne constituyen la
principal fuente de carbono y otros
nutrientes que aportan al
desarrollo bacteriano. El agregado
de NaCl mantiene el equilibrio
osmótico y el agar es el agente
solidificante.

13
NO SELECTIVOS

Agar sangre
Con la liberación de
enzimas que rompen la membrana
del eritrocito, se puede ver
hemólisis parcial (alfa) halo verde,
hemólisis total (beta) halo
transparente, y no hemólisis
(gamma) sin halo

14
Agar chocolate

Este medio está compuesto por una

15
POCO SELECTIVOS

Mac Conkey
El indicador rojo neutro
permite la identificación de la
fermentación, cuando es
morada, si no fermenta la
lactosa se pone amarillo, y si no
crece fue inhibido por sales
biliares y cristal violeta

16
Eosina azul de
metileno (EMB)
Es nutritivo por la presencia de
peptona que favorece el desarrollo
microbiano. La diferenciación entre
organismos capaces de utilizar la
lactosa y/o sacarosa, y aquellos que
son incapaces de hacerlo, está dada
por los indicadores eosina y azul de
metileno; éstos ejercen un efecto
inhibitorio sobre una amplia
variedad de bacterias Gram
positivas
17
Desoxicolato de Leifson (DL)
Por la presencia de desoxicolato y
citrato se inhibe el crecimiento de
los microorganismos Gram-positivos
y parcial o totalmente el de
numerosos Coliformes. Los que sean
capaces de fermentar uno o los dos
azúcares darán lugar acolonias de
color rojo y los que no darán colonias
incoloras.
La Salmonella yShigella presentan
colonias incoloras o ligeramente
rosadas

18
MODERADAMENTE SELECTIVOS
Salmonella-Shigella
agar (SS)
Las sales biliares y el verde
brillante inhiben el desarrollo de
una amplia variedad de bacterias
Gram positivas, de la mayoría de
los coliformes y el desarrollo
invasor del Proteus spp.
La lactosa es el hidrato de
carbono fermentable. El tiosulfato
de sodio permite la formación de
SH2 que se evidencia por la
formación de sulfuro de hierro
19
Desoxicolato-citrato
agar (DCA)
Agar Desoxicolato Citrato es una
modificación de la fórmula del Agar
Desoxicolato de Leifson y es ideal para
la investigación de enterobacterias
patógenas en alimentos altamente
contaminados. Es particularmente útil
para aislar Salmonella y muchas
Shigella spp,Los organismos
Gram-positivos, coliformes y muchos
Proteus spp. son altamente inhibidos
por el aumento de la concentración de
citrato de sodio y
desoxicolato de sodio. El citrato férrico
ayuda en la detección de la producción
de H2S
20
Agar Hektoen
posee sales biliares que actúan
inhibiendo el crecimiento de algunas
bacterias, especialmente Gram
positivas y algunas Gram negativas,
también es un medio diferencial por
la presencia de carbohidratos
fermentables como la lactosa, la
sacarosa y la salicina, junto al
sistema indicador de pH,
representado por el azul de
bromotimol y la fucsina ácida
Producción De H2s
Negro, Fermentacion De
Carbohidratos Amarillo, No
Fermentadoras De Carbohidratos
21
Azul Verdosas
MUY SELECTIVOS
Agar verde brillante
(VB)
la pluripeptona y el extracto de
levadura, constituyen la fuente de
nitrógeno, vitaminas y minerales.
La lactosa y la sacarosa son los
hidratos de carbono fermentables,
el rojo fenol es el indicador de pH,
que vira al amarillo cuando hay
producción de ácido a partir de la
fermentación de azúcares

22
Agar bismuto sulfito
(BiSA)
La peptona y el extracto de carne
proporcionan nitrógeno, vitaminas,
minerales y aminoácidos
esenciales para el crecimiento. La
dextrosa es el
carbohidrato fermentable que
proporciona carbono y energía, el
indicador de sulfito de bismuto y el
verde brillante son inhibidores de
bacterias Gram
positivas y miembros del grupo de
coliformes

23
Medios de
identificación
24
Buenos Aires modificado (BAM)
En el medio de cultivo, la peptona
aporta los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, además, es la
fuente de triptófano, y por su contenido
en cistina y cisteína es la fuente de
azufre, necesaria para la producción de
ácido sulfhídrico. La lactosa es el hidrato
de carbono fermentable, la urea es el
sustrato de la enzima ureasa y la fucsina
y el azul de timol son los indicadores de
pH

25
Triple azúcar hierro (TSI)
es un medio de diferenciación
para organismos entéricos gram
negativos basada en su
capacidad para fermentar
dextrosa, lactosa y sacarosa y
para producir sulfuro su
indicador rojo fenol vira a
amarillo si se acidifica el medio
por que se fermento un
carbohidrato

26
Doble Azúcar hierro o Kligler Iron Agar
Es un medio de cultivo utilizado
para la diferenciación de
enterobacterias en base a la
fermentación de lactosa y
glucosa, además de la formación
de ácido sulfhídrico, en caso de
no haber fermentación, el medio
vira a rojo

27
Lisina hierro Agar (LIA)
En el medio de cultivo, la peptona y
el extracto de levadura aportan los
nutrientes para el desarrollo
bacteriano. La glucosa es el hidrato
de carbono fermentable y la lisina
es el sustrato utilizado para
detectar la presencia de las
enzimas decarboxilasa y
deaminasa. El citrato de hierro y
amonio y el tiosulfato de sodio son
los indicadores de la producción de
ácido sulfhídrico

28
Ornitina-Agar
La enzima ornitina
descarboxilasa actúa sobre el
grupo carboxilo del aminoácido
produciendo una amina
llamada putrescina que
alcaliniza nuevamente el medio

29
 MOTILIDAD UREASA VP

CITRATO DE SIMMONS INDOL onpg

30
Fenilalanina Agar
El aminoácido fenilalanina es
sometido a la desaminación oxidativa
catalizada por la enzima fenilalanina
deaminasa para producir ácido
fenilpirúvico y amoníaco. La presencia
del ácido fenilpirúvico se demuestra
con el agregado de cloruro férrico en
medio ácido, con el cual se forma un
quelato de color verdoso entre el
ácido fenil pirúvico y los iones Fe3+

31
Medios de
transporte
32
Medio de Cary y Blair
El medio Cary Blair contiene cloruro de sodio,
tioglicolato de sodio, fosfato disódico, cloruro
de calcio y agar, el cloruro de sodio mantiene
el equilibrio osmótico del medio, el fosfato
disódico y el cloruro de calcio equilibran el
pH. Por su parte, el tioglicolato de sodio
mantiene un bajo potencial de
óxido-reducción, mientras que la pequeña
porción de agar proporciona la consistencia
semisólida

33
Medio de Stuart
El fin del medio de transporte Stuart es
mantener las muestras lo más cercano
a su estado original, hasta que sea
procesada, el glicerofosfato sódico y el
cloruro cálcico es un sistema buffer que
actúa manteniendo el pH y la
osmolaridad

34