Capítulo 2

Anti Streptolisina O (ASTO- ASLO-ASO)

OBJETIVOS

- Establecer correlación clínico patológica a partir de los

resultados obtenidos en el desarrollo de la prueba.

- Diferenciar la prueba de ASTO de otras pruebas Estreptococcicas.

- Asociar la prueba de ASTO con la condición del paciente.

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2.1. Generalidades.
La Anti-Streptolisina O es el conjunto de anticuerpos específicos tipo IgG frente

a la estreptolisina O, un enzima extracelular producido por estreptococos del

grupo A de Lancefield β-hemolítico (Streptococcus pyogenes). La anti-

estreptolisina puede detectarse desde una semana a un mes después de la

infección del estreptococo. Streptococcus pyogenes causa una amplia

variedad de infecciones en las vías respiratorias altas tales como la faringitis

aguda. Otras manifestaciones de infección por Streptococcus pyogenes

incluyen glomerulonefritis, fiebre reumática, endocarditis bacteriana y fiebre

escarlata. El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el

resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de

laboratorio.

La estreptolisina O es una hemolisina extracelular que se libera a los tejidos

durante la infección streptococcica y provoca la formación de anticuerpos

capaces de bloquear su efecto hemolítico. El 90% de los pacientes con

faringitis estreptocóccicas presentan títulos elevados de ASTO. Estos se

producen a la semana de iniciada la infección, alcanzando su pico máximo a

las 3-4 semanas, recuperándose los valores basales entre 6 meses a 1 año

después, cuando exista ausencia de complicaciones o reinfección. Un

aumento de título de un 30%, con intervalo de una a dos semanas, tiene valor

clínico.
Los títulos muy altos están asociados al estado de portador crónico faríngeo.

También en el 80-85% de los pacientes con fiebre reumática aguda (dentro de

los dos primeros meses) y en el 95% de glomerulonefritis aguda. El aumento

de título no está ligado con la severidad.

Cuando el ASTO se combina con Antihialuronidasa y anti-Dnasa B, se

aumenta la sensibilidad en el diagnóstico de faringitis estreptocóccica.

La prueba de ASTO es útil en el diagnóstico de la fiebre reumática aguda y

glomerulonefritis aguda.

El ASTO suele aparecer Aumentado en pacientes que presentan Cólera,

tuberculosis, septicemias o hepatitis viral, mientras que en Artritis

Reumatoidea (AR), Artritis Reumatoidea Juvenil (AIJ) y fiebre reumática puede

aparecer disminuido y se encontrarse resultados falsos positivos cuando el

paciente presenta aumento de beta lipoproteínas producidas por enfermedad

hepática.

2.2. Correlación clínica.

El ASTO suele asociarse con mayor prevalencia en los pacientes con Fiebre

Reumática (FR), el cual es un trastorno inflamatorio en pacientes susceptibles

respuestas autoinmunes, que se ponen en contacto con el estreptococo beta

hemolítico; afectando principalmente las articulaciones, tejido celular

subcutáneo (debajo de la piel) y corazón.

En este último suele afectar pericardio (pericarditis), miocardio (miocarditis),

siendo los pacientes entre los 5 – 15 años los más afectados.

Existen cepas de Estreptococcus pyogenes que contienen proteínas M y

poderosas cápsulas de ácido hialurónico, las cuales favorecen su virulencia y

lo hacen resistente a la fagocitosis.

En países subdesarrollados la fiebre reumática representa un problema de

salud pública, siendo la causa más común de cardiopatía en pacientes entre

los 5 y 30 años de edad y representa la principal causa de muerte por

enfermedades cardíacas en pacientes menores de 45 años.

La inmunopatología de la fiebre reumática inicia cuando la proteína M es

reconocida por el Macrófago, desencadenando su activación, pudiendo este

presentarla en forma de Antígeno a los Linfocitos T CD4+, liberando gran

cantidad de Citocinas pro inflamatorias y acumulándose en las válvulas

cardíacas de los pacientes afectados. Esta respuesta celular, activa a los

Linfocitos B productores de Anticuerpos.

Las manifestaciones clínicas se evidencian luego de 2 a 3 semanas e

incluyen alteración del estado general del paciente, astenia, adinamia,

anorexia e hipertermia que por lo general no excede los 38 o 38.5 grados.

Suele aparecer en los pacientes los siguientes signos:

-Artritis: con artralgia, inflamación, enrojecimiento, incapacidad funcional,

migratorias y autolimitadas. Las articulaciones de mediano calibre son las más

afectadas (rodillas 75%, tobillos 50%). Algunos pacientes suelen exhibir

poliartralgias y poliartritis migratorias.

-Carditis: Es la manifestación más grave que puede producir desde

manifestaciones leves hasta la muerte del paciente durante la fase aguda o

dejar secuelas cardiacas. Suele manifestarse por dolor pericárdico,

exacerbado por los movimientos respiratorios, movimientos laterales y de

flexión del tronco, así como con el decúbito dorsal, pudiéndose evidenciar

como un frote pericárdico. Esta provoca insuficiencia cardíaca con taquicardia,

ritmo de galope, disnea, hepatomegalia congestiva, plétora yugular y

cardiomegalia.

-Corea (Corea de Sydenham): Se manifiesta por movimientos involuntarios,

debilidad muscular y trastornos emocionales como consecuencia de ataque al

sistema nervioso central, fundamentalmente en el extrapiramidal.

Suele aparecer descoordinación de movimientos en miembros superiores y

músculos de la cara, ocasionando alteraciones del habla; suelen desaparecer

durante el sueño y reaparecer cuando el paciente está en reposo, interfiriendo

con la actividad voluntaria de este. La debilidad muscular se evidencia cuando

se le solicita al paciente que apriete las manos del médico. Los cambios

experimentados en este son llanto e inquietud, desesperándose al no poder

controlar los movimientos de sus manos o cara. La corea es variable en

duración de semanas o meses y no se aprecian secuelas.

.- Nódulos subcutáneos: Aparecen después de las primeras semanas y son

llamados nódulos de Meynet, caracterizándose por ser firmes e indoloros y

 presentarse en superficies de extensión articular y suelen durar pocas

semanas.

.- Eritema marginal: Son manchas redondeadas y confluentes, de borde

eritematoso, no pruriginosas, preferiblemente en el tronco, migrando a otros

sitios del cuerpo.

El proceso reumático en el paciente afectado tiene una duración entre 3

semanas a 6 meses, siempre y cuando no exista reinfección con el

Streptococcus pyogenes.

El diagnóstico de la Fiebre Reumática fue propuesto por T. Duckett Jones en

1944, quien estableció los criterios mayores y menores a seguir. Luego estos

fueron revisados en 1992 y tienen vigencia en la actualidad (TABLA 1).

Tabla 1. Criterios de Jones para fiebre Reumática.

Criterios mayores Criterios menores

Carditis Artralgia

Poliarttritis Fiebre

Corea Proteína C-Reactiva Elevada

Nódulos subcutáneos

Eritema marginado
Cuadro realizado por el autor. Engelbert Peña Merlano
Las Secuelas para el corazón en los pacientes afectados son Insuficiencia

mitral (19%); doble lesión mitral (53%); estenosis mitral (23%.) y la valvulopatía

aórtica (12%).

Tratamiento:

-Reposo en cama de 6 a 8 semanas, que es el tiempo que habitualmente dura

el brote reumático.

-Penicilina procaína 800,000 U.I. IM c/24 horas/10 días.

-En alergia a la penicilina, eritromicina 250 mg c/6 horas o 500 mg c/8 horas/10

días.

- Sulfametoxipiridacina 1 g por V.O. el primer día seguido de 500 mg c/24

horas/ 10 días.

-Ácido acetilsalicílico: 4 a 6 g en 24 horas repartidos en 4 tomas X 6 a 8

semanas.

Se recomienda usar prednisona a razón de 40 a 60 mg/día, repartidos en 3

dosis durante 21 días; posteriormente se disminuye la dosis paulatinamente 5

mg cada 2 días hasta alcanzar 30 mg; después se reduce 2.5 mg c/2 días

hasta suspender el tratamiento. Otra forma de retirarla es disminuir 2.5 mg c/2

días a partir del día 22 hasta suspenderlo. Lo mismo que el ácido

acetilsalicílico, son irritantes de la mucosa gástrica, recomendándose el uso de

antiácidos entre las tomas del esteroide para no afectar su absorción.

Referencias:
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María Chacón, Luis Pérez-Ybarra, Hilary Rivero, Sheryl Straga y Juan Luis-León.
Valores referenciales de antiestreptolisina O y portadores asintomáticos de
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Linares Alcántara, Venezuela. Rev Chilena Infectol 2015; 32 (6): 689-694.

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9.1. Determinación cualitativa y cuantitativa de

Antiestreptolisina O (ASTO)

9.1.1. Principio

La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex

recubierto con estreptolisina frente a los sueros problema. La presencia o

ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o ausencia de

ASLO en las muestras ensayadas a niveles significativos.

La anti-estreptolisina O (ASO) sérica tipo IgG con 200 UI/mL o valores

mayores, provoca una aglutinación de las partículas de látex recubiertas con

estreptolisina.

9.1.2. Reactivos a utilizar

Suspensión de partículas de látex blanco sensibilizadas con anti- estreptolisina

O, azida sódica 0,95 g/L.

C -. Control Negativo: Suero conteniendo menos de 200 IU/mL.

C +. Control Positivo: Suero humano conteniendo más de 200 IU/mL.

9.1.3. Materiales necesarios

.- Reactivo látex ASTO

.- Control positivo

.- Control negativo

.- Láminas de aglutinación (plásticas fondo negro)

.- Cronómetros

.- Pipetas serológicas o automatizadas

.- Solución salina (o.9 % de NaCl)

.- Suero del paciente

.- Rotador automático.

9.1.4. Muestra

Suero fresco recolectado por centrifugación de sangre coagulada. Puede ser

refrigerado entre 2°-8°C durante 48 horas o conservado de manera indefinida

congelado a -20°C.

9.1.5. Procedimientos

9.1.5.1. Técnica Cualitativa:

- Dejar que el reactivo, los controles y la muestra alcancen la

temperatura ambiente (20-30°C).

- Agitar suavemente el vial del reactivo para dispensar y re-suspender

las partículas de látex en la solución tampón. No agite

violentamente.
- Dosificar 0.050 ml (50μl) del suero en una de las secciones de la lámina.

- Dosificar 0.050 ml (50μl) del control positivo y 0.050 ml (50μl)

del control negativo en secciones diferentes de la lámina.

- Añadir una gota del reactivo junto a la gota del suero, del control

positivo y del control negativo.

- Mezclar las gotas con un palillo de manera circular hasta

cubrir toda la superficie de la sección de la lámina.

- Agitar la lámina con un suave movimiento de rotación, ya sea

manualmente o en el rotador automático (60-80rpm) durante 3 minutos.

- Observar la o presencia o ausencia de aglutinación transcurrido

dicho tiempo.

.- Interpretación de los resultados:

La presencia de aglutinación indica un contenido de ASTO en el suero igual

o superior a 200 UI/ml.

La ausencia de aglutinación indica un contenido de ASTO inferior a

200 UI/ml.

9.5.1.2. Técnica semi-cuantitativa:

- Preparación de las diluciones del suero sobre la misma lámina

que tiene las secciones (descritas en el recuadro adjunto).

- Dosificar 0.050 ml (50μl) en las secciones 1 y 2 de la lámina.

- Con la misma pipeta aspirar y expulsar varias veces el suero y la

 solución salina contenida en la sección 2

- Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección 3.

- Realizar la misma operación del paso 3.

- Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección 4

- Realizar la misma operación hasta llegar a la sección 6, en la que

después de realizada la mezcla, se desechan los 0.050 ml (50μl).

- Agitar suavemente el vial de los reactivos y agregar una gota de

este a todas las secciones.

- Mezclar con palillos diferentes cada sección.

- Rotar manualmente o en rotador automático de la misma manera

descrita para la técnica cualitativa.

- Observar la presencia o ausencia de aglutinación transcurrido el tiempo.

.- Interpretación de los resultados

El título aproximado corresponderá a la última dilución en la cual se

observe aglutinación y su valor será según la tabla adjunta.

9.5.1.3. Limitaciones del procedimiento

La lectura de los resultados debe efectuarse a los 3 minutos de

iniciada la reacción.

El exceso de tiempo puede inducir a la interpretación errónea de los

mismos.
 9.5.1.4. Interferencias

La lipemia (5 g/L), la hemoglobina (5 g/L) y la bilirrubina (15 mg/dL) no

interfieren. Los factores reumatoideos pueden interferir (25 UI/mL).

Otros medicamentos y sustancias pueden interferir.

Tabla adjunta ASTO

Sección
Solución salina (μl) 50 50 50 50 50

Suero (μl) 50 50

Mezclar
y transferir (μl) 50 50 50 50 50

Dilución 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32

Concentración UI/ml 200 400 800 1600 3200 6400

 UNIVERSIDAD SIMON BOLIVAR
PROGRAMA DE MEDICINA

INFORME DE LABORATORIO
DETERMINACIÓN DE ANTIESTREPTOLISINA O (ASTO)

FECHA: GRUPO: SUBGRUPO:

NOMBRES Y APELLIDOS:

RESULTADO OBTENIDO:

ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS.

1. Por qué el ASTO no es prueba Gold estándar en infección Streptococcica?

2. Que interpretación hace de las pruebas Streptococcicas distintas al ASTO?

3. Hacer un mapa conceptual de la glomerulonefritis post Streptococcica.

4. Cuál es el tratamiento para un paciente que presenta el ASTO elevado?

5. Por qué en los niños el ASTO muchas veces no es una prueba útil?