ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO
Márquez D., Cantillo A., Santamaría J., Álvarez P., Hernández J*.
*Universidad De Cartagena
Facultad De Ciencias Farmacéuticas
Programa De Química Farmacéutica
RESUMEN
En esta práctica de laboratorio realizada, acerca del estudio y manejo del microscopio se utilizaron
distintas muestras con las cuales vamos a identificar la estructura de cada una de ellas, aprenderemos a
manejar el microscopio y como está formado, para la identificación de estas estructuras utilizamos el
microscopio óptico. Con las distintas muestras analizadas (lana, insecto, agua de charca, polen) se logró
identificar sus estructuras y también pudimos observar que cuando los objetivos del microscopios eran
rotados las observaciones cambiaban (se acercaban o se alejaban, se veían borrosas o más nítidas.), más
que observar las materiales, identificamos todas las partes del microscopios, cada una de sus funciones
y como utilizarlas. Nuestros resultados los comparamos con los de otro grupo con los cuales nos dimos
cuenta que coincidíamos en nuestras observaciones en lo único que difieren ambos resultados es que
ellos poseían un material distinto al nuestro.
Palabras claves: microscopio.
1. INTRODUCCION fig.1
El microscopio es un instrumento que sirve para
ver objetos demasiados pequeños para ser vistos
con claridad por el ojo humano.
En esta práctica realizada pudimos trabajar y
aprender las partes del microscopio. Está fue la
herramienta fundamental para realizar nuestras
observaciones ya que el microscopio permite
observar objetos que son demasiado pequeños
para ser observados a simple vista. El tipo más muestra de polen con objetivo 4x.
común y el primero que se inventó es el
microscopio óptico. Se trata de un instrumento Después este mismo material fue observado con el
óptico que contiene dos o más lentes que permiten objetivo de 40x con el cual observamos con el
obtener una imagen aumentada del objeto y que objetivo de 40x solo pudimos observar mucho más
funciona por refracción. de cerca y notamos que había más esferas de
polen también notamos que el polen se encontraba
OBJETIVO arriba de las antenas de la flor y que estas antenas
Con esta práctica de laboratorio buscamos tenían como orificios en forma de pentágonos.
aprender las técnicas de manejo del microscopio, Nos dimos cuenta que para para poder observar se
también nos ayudara para nuestra formación como necesita primero acercar el objetivo al
químicos farmacéuticos ya que de esta forma portaobjetos y posteriormente, enfocar el objetivo
vamos ganando experiencia para un futuro al hasta que aparezca la imagen. (Fig.2)
igual que también podemos poner en práctica las fig.2
teorías dadas en el aula de clases.
2. Materiales
• Porta-objetos
• Cubre-objetos
• Flores con polen
• Insecto
• agua de charca
• Lana Muestra de polen observada con el objetivo de
• Microscopiosteros o pipetas Pasteur 40x.
• Pinzas de dicción
• Papel limpia objetos Y por último analizamos la muestra con el último
objetivo requerido que fue el de 10x con este
3. METODOS objetivo se obtuvo una mejor imagen que el de 4x
Primeramente se toma un porta-objetos que se pero menor a la de 40x y lo que vimos fue que el
encuentre totalmente limpio, se coloca sobre el la polen son pequeñas circunferencias y que
primera muestra (flores con polen) luego se podemos encontrar miles de este polen en las
procede a colocar el cubre-objetos sobre la antenas de la flor.( Fig.3)
muestra. Enseguida se coloca en la platina del fig.3
microscopio, se ubica el objetivo con el cual se polen
quiere observar la muestra. Primero tomamos el
objetivo de 4x y lo que observamos fue que las
flores poseían unas esferas que eran el polen estas
tenían por todo el borde unas especias de pullitas
(fig.1)
observado con el objetivo de 10x.
• La segunda muestra analizada fue la del
insecto (mosquito). Para analizar esta
muestra tomamos solo una pequeña parte
de este y la colocamos sobre un porta-
objeto y luego la cubrimos con el cubre-
objetos y procedimos a analizarla con el
objetivo de 4x y notamos que este insecto fig.6 insecto analizado con el objetivo de
poseía muchos vellos por todo su cuerpo 10x.
en las patas, antenas, tronco.(fig.4)
fig.4 • La tercera muestra analizada fue la del
insecto agua de charca la cual la observamos
primero con el objetivo de 4x(fig.7) con el
cual pudimos ver muchos
microorganismos, muchos sucios
diminutos que no se notaban a simple
vista, habían pequeñas antenas de algún
insecto que estaba en el agua de charca.
Fig.7
(mosquito) analizado con el objetivo de 4x. agua de
charca
Luego analizamos la misma muestra con el
objetivo de 40x y observamos mucho más de cerca
y notamos que en sus alas había como unas
especias de tejidos por así llamarlos, también
pudimos observar que en su aparato bucal poseía
también muchos bellos. (fig.5).
observada con el objetivo de 4x.
Luesgo observamos la muestra con el objetivo de
40x (fig.8) pudimos notar muchos más
componentes que poseía esta muestra y notamos
como unas pequeñas circunferencias que
decidimos denominarlas como microorganismos.
Que por estas razones las personas que tienen una
fig.5 insecto (mosquito) analizado con el objetivo herida a veces se les infectan.
de 40x.
Cuando observamos esta muestra con el objetivo
de 10x (fig.6) nos enfocamos más en sus ojos y
pudimos observar que estos poseían unos ojos
muy grandes que son muy similares a los de las
moscas y que alrededor de ellos tienen muchos
bellos.
Fig,8 agua de charca observada con el objetivo de
40x.
Luego tomamos esta misma muestra y la objetivo de 10x (fig.12) con la que vimos las
analizamos con el objetivo de 10x (fig.9) donde hebras de lana un poco más grandes.
observamos más microorganismos que
posiblemente son los que causan las infecciones.
fig.9
fig.12
lana observada con el objetivo de 10x.
Agua de charca observada con el objetivo de 10x. 4. DISCUSION
Nuestros resultados los comparamos con la de otro
• Y la última muestra analizada fue la de la grupo que al igual que nosotros también realizo la
lana, esta fue observa primero con el práctica y nos dimos cuenta que coincidíamos en
objetivo de 4x (fig.10) con el que vimos nuestros resultados en lo único que no
que en un pequeño trozo de lana hay coincidimos fue con unas de las muestras
muchas hebras. (insectos) ya que fueron distintas. Ellos al igual
que nosotros observamos las cantidades de hebras
de lana que hay en un pequeño trozo, ambos
grupos pudimos observar cantidades de elementos
que se contenían en un pequeña gota de agua de
charca, y con el polen todos vimos esas pequeñas
esferas encima de las antenas de la flor ya que
ambos utilizamos la misma flor de ponche.
5. CUESTIONARIO
fig.10 lana observada con el objetivo de 4x 1). Partes del microscopio y sus funciones
Está conformado por tres sistemas:
Luego se observó con el objetivo de 40x (fig.11) El sistema mecánico está constituido por una serie
con este la muestra se observó mucho más clara de piezas en las que van instaladas las lentes que
también pudimos ver que en el pequeño trozo de permiten el movimiento para el enfoque.
lana habían mucho más hebras que cuando El sistema óptico comprende un conjunto de lentes
utilizamos el objetivo de 4x. dispuestas de tal manera que produce el aumento
Fig.10 de las imágenes que se observan a través de ellas
lana El sistema de iluminación comprende las partes
del microscopio que reflejan, transmiten y regulan
la cantidad de luz necesaria para efectuar la
observación a través del microscopio.
El sistema mecánico lo conforman:
BRAZO.- Es la parte de donde se debe sujetar, las
pinzas el carro el tubo del microscopio y el
revólver. Además sirve para trasladar el
observada con el objetivo de 40x. microscopio de un lugar a otro.
BASE O PIE.- Es una pieza que proporciona
Luego esta misma muestra fue observada con el estabilidad y sirve de soporte a todas las partes del
microscopio. hacia el condensador.
PLATINA.- Es una pieza metálica, cuadrada, que CONDENSADOR.- Es una lente de gran abertura
tiene en su centro una abertura circular por la que que permite dirigir o condensar la mayor parte de
pasará la luz del sistema de iluminación. Aquí se los rayos luminosos en la preparación. En nuestro
coloca el portaobjetos con la muestra a observar. microscopio está integrado en la platina y tiene un
El revólver.- sostiene múltiples lentes, permitiendo diafragma unido en la parte inferior.
al usuario girarlo para lograr diferentes niveles de DIAFRAGMA: Existe un diafragma en el
aumento. condensador, que elimina el exceso de
Carro móvil: posibilita el movimiento de la luminosidad para tener una buena iluminación del
preparación en el eje vertical y en el horizontal. La objeto a observar
preparación se sujeta por un reborde en escuadra y
pestillo 2). tipos de microscopio:
Macrométrico y micrométrico: Son tornillos de El Microscopio invertido el sistema óptico de este
enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia tipo de microscopio está en posición al revés
abajo. El macrométrico lo hace de forma rápida y comparado con un microscopio óptico
el micrométrico de forma lenta. Llevan convencional. La fuente de luz y el condensador
incorporado un mando de bloqueo que fija la están dispuestos sobre la plataforma apuntando
platina a una determinada altura. hacia abajo; y los objetivos y la torrecilla están
debajo de la plataforma apuntando hacia arriba.
El sistema óptico: Las únicas partes que están en una disposición
OCULAR.- Se localiza en la parte superior del normal son el tubo binocular o trilocular, así
tubo ocular y son las lentes que Capta y amplía la mismo la muestra que es colocada sobre la
imagen formada en los objetivos. Los primeros plataforma o platina mecánica. Presenta la ventaja
microscopios eran monoculares, es decir, poseían de poder observar cultivos enteros o grandes
una sola lente. Los microscopios actuales poseen muestras bajo estados más naturales y con
dos oculares, uno para cada ojo y se les llama menores condiciones de estrés.
binoculares. El Microscopio estereoscópico: es un tipo de
OBJETIVOS: Se encuentran incrustados en el microscopio hace posible la visión tridimensional
revolver Son unos pequeños cilindros colocados de los objetos. Consta de dos tubos oculares y dos
en el revolver que proporciona el poder de objetivos pares para cada aumento. Este
resolución del microscopio y determinan la microscopio ofrece ventajas para observaciones
cantidad total de aumento. que requieren pequeños aumentos. El óptimo de
Existen 4 tipos entre los que se encuentran: visión estereoscópica se encuentra entre 2 y 40X o
La lupa (4 X) que sirve para hacer observaciones a aumento total del microscopio.
bajo aumento. Microscopio de campo oscuro. Este microscopio
El objetivo seco débil (10 X) que se utiliza para está provisto de un condensador paraboloide, que
localizar la imagen que se va a observar. hace que los rayos luminosos no penetren
El objetivo seco fuerte (40 X) aumenta la imagen directamente en el objetivo, sino que iluminan
anterior, para poder observar se necesita primero oblicuamente la preparación. Los objetos aparecen
acercar el objetivo al portaobjetos y como puntos luminosos sobre un fondo oscuro.
posteriormente, enfocar el objetivo hasta que Microscopio de contraste de fases. Se basa en las
aparezca la imagen. modificaciones de la trayectoria de los rayos de
El objetivo de inmersión (100 X) es un lente luz, los cuales producen contrastes notables en la
especial para observar imágenes tan pequeñas preparación.
como las bacterias. Y se requiere del aceite de Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es
inmersión para lograr una buena observación. la propiedad que tienen algunas sustancias de
El sistema iluminación: emitir luz propia cuando inciden sobre ellas
La fuente luminosa consiste en un espejo o una radiaciones energéticas. El tratamiento del
fuente de luz eléctrica que dirige un haz de luz material biológico con flurocromos facilita la
observación al microscopio. través de una muestra, lo que permite observarla
Microscopios óptico de campo claro: este con mayor claridad.
microscopio está compuesto por dos lentes que
amplían sucesivamente la imagen 7). parte plana del espejo
Microscopio citofometrico: este microscopio La parte plana se utiliza cuando se trabaja con luz
permite la detección de ácidos nucleicos (DNA y artificial o cuando se usa el condensador. Son
RNA) importantes porque ayudan a agrandar las
Microscopio de polarización: se basa en la muestras y nos permite ver más allá del mundo
propiedad de ciertas sustancias que tienen un que vemos y conocemos a simple vista
distinto índice de refracción.
Microscopio de interferencia: sirve para 8). funcionamiento de los microscopios
determinar cambios en el índice de refracción y las eléctricos
variaciones de fase, este microscopio es muy útil Microscopio electrónico de transmisión: emite un
en el estudio invivo de la célula haz de electrones dirigido hacia el objeto cuya
Microscopios ópticos de barrido confocal: este imagen se desea aumentar. Una parte de los
microscopio reconstruya la imagen por ordenador, electrones rebotan o son absorbidos por el objeto y
además realiza una reconstrucción tridimensional. otros lo atraviesan formando una imagen
Microscopio electrónico de transmisión: sirve para aumentada de la muestra. Para utilizar un
ampliar el poder de resolución y no emplean luz microscopio electrónico de transmisión debe
visible sino electrones. cortarse la muestra en capas finas, no mayores de
Microscopio electrónico de alto voltaje o de alta un par de miles de angstroms. Los microscopios
aceleración: en biología este microscopio sirve electrónicos de transmisión pueden aumentar la
para la organización tridimensional de las imagen de un objeto hasta un millón de veces.
estructuras celulares. Microscopio electrónico de barrido la muestra es
3). objetivos secos: recubierta con una capa de metal delgado, y es
Los objetivos secos son aquellos que se utilizan barrida con electrones enviados desde un cañón.
sin necesidad de colocar sustancia alguna. Los Un detector mide la cantidad de electrones
aumentos de los objetivos secos más enviados que arroja la intensidad de la zona de
frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X muestra, siendo capaz de mostrar figuras en tres
y 60X. dimensiones, proyectado en una imagen de TV. Su
4). objetivos de inmersión: resolución está entre 3 y 20 m, dependiendo del
El objetivo de inmersión: son los que se interpone microscopio. Permite obtener imágenes de gran
un líquido entre la preparación y la lente, resolución en materiales pétreos, metálicos y
normalmente se usa liquido transparente, con un orgánicos. La luz se sustituye por un haz de
índice de refracción mayor que el del aire, que sea electrones, las lentes por electroimanes y las
capaz de impedir la desviación de los rayos más muestras se hacen conductoras metalizando su
oblicuos y así la lente recogerá más rayos para la superficie.
formación de la imagen. Diferencia: El microscopio electrónico de
5). aceite de cedro transmisión trabaja de manera similar al
El aceite de cedro se utiliza en los objetivos de microscopio de luz excepto que usa electrones en
inmersión para obtener una buena resolución ya lugar de haz luminosos. Necesita una muestra
que Al colocar el aceite este posee un índice de cortada en porciones de grosor minúsculo para que
refracción similar al del vidrio logramos que no se al bañarla con electrones muchos de ellos puedan
desvíen tantos rayos luminosos. atravesarla (otros serán reflejados, desviados o
absorbidos) y se forme una imagen con ellos en
6). parte cóncava del espejo una pantalla sensible colocada del otro lado. En
La parte cóncava de los espejos se utilizan en los cambio el de barrido se basa también en arrojar
microscopios para ayudar a ver más del mundo en electrones sobre la muestra, pero con la diferencia
el que vivimos. La luz es recogida y se dispara a de que dicha muestra se cubre antes de una
minúscula capa de metal que permite que dichos como las vesículas sinápticas e incluso de gran
electrones se reflejen y se dirijan a un detector que tamaño, como los microorganismos unicelulares.
mide la intensidad y dirección de dichos • Tinciones positivas: se utilizan Colorantes
electrones, gracias a esto la muestra no tiene que que tiñen al microorganismo y no al medio. Estas
ser tan delgada y la imagen que resulta, a pesar de se puedes dividir en dos, Simples y diferenciales,
no tener tanto aumento como el de transmisión las simples usan un solo colorante. Sirven para
tiene mejor detalle y permite apreciar mejor distinguir formas y las diferenciales Diferenciales
muestras en tres dimensiones. usan un colorante inicial y luego un colorante de
contraste. Sirven para diferenciar distintos tipos de
9). técnicas de microscopia óptica células (Ejemplo: tinción Gram)
Técnicas de preparación utilizadas en la
microscopia óptica: 10). colores complementarios y su utilidad en
Fijación: es toda manipulación sobre un ser vivo, microscopia óptica
o bien sobre parte de él, que tiene por objetivo Los colores complementarios son aquellos que
mantener toda la estructura morfológica sin que sirven para aumentar el contraste entre la célula y
esta sufra tantas alteraciones , de tal forma que sus el medio que las rodea, la utilidad de estos colores
componentes celulares mantengan las mismas en la microscopia óptica seria que al emplearse
características que cuando dicho ser o tejido estos colorantes podríamos distinguir entre tipos
estaban vivos. Es claro que la mayoría de la diferentes de células o para revelar la presencia de
estructura celular se debe a la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como
proteínas y por tanto todo proceso de fijación debe flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares,
tener en cuenta la naturaleza química de éstas, de centros de actividad respiratoria, etc.
forma que el fijador no reacciona con las mismas.
Los tipos de fijadores más utilizados son: formol, 5. CONCLUSIONS
alcohol, ácido acético. Con esta práctica aprendimos a utilizar el
Tinción: es una técnica utilizada para mejorar el microscopio, aprendimos muchas de las partes que
contraste y permite colorear artificialmente los lo conforman y cuáles son sus funciones. También
distintos componentes tisulares. Hay varios tipos aprendimos que con este instrumento podemos
de tinción: observar todas aquellas cosas que no se ven a
• Tinción de Gram: Esta tinción es un simple vista y que muchas veces las vemos como
procedimiento de gran utilidad empleado en los insignificantes, esta práctica fue y será muy útil
laboratorios donde se manejan pruebas para toda nuestra carrera ya que nosotros
microbiológicas. Es definida como una tinción seguiremos utilizando los microscopios.
diferencial, ya que utiliza dos colorantes y
clasifican a las bacterias en dos grandes grupos: 6. BIBLIOGRAFIA
bacterias Gram negativas y bacterias Gram • [Link]
positivas • [Link]
• Tinción de Wright: La tinción de Wright es microscopio-108433
una técnica que se emplea generalmente para la • [Link]
diferenciación de elementos celulares de la sangre
y es clasifica cada como una tinción
policromática, dado que puede teñir compuestos
ácidos o básicos presentes en una célula.
• Tinción negativa: La tinción negativa fue
desarrollada originalmente para microscopia de
luz con el fi n de rodear y delinear las bacterias no
teñidas u otros materiales biológicos. Utilizamos
diferentes métodos de tinción negativa para
evaluar estructuras individuales, tan pequeñas
