UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA

FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

REMOCION BIOLOGICA
AUMENTADA DEL FOSFORO Y
NITROGENO

INTEGRANTES:
✓ Cuadros Muñoz Clayde
✓ Aguado Huaylla Wilfredo

✓ Quispe Pinto Hamilton

DOCENTES: JAIME ANTONIO MARTÍNEZ
HERNÁNDEZ

CICLOS: IX – “C”
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

REMOCION BIOLOGICA AUMENTADA

DEL FOSFORO Y NITROGENO

INDICE
 RESUMEN

 INTRODUCCION

 MATERIALES Y METODOS

 RESULTADOS Y DISCUSION

 CONCLUSIONES

 BIBLIOGRAFIAS
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

REMOCIÓN BIOLÓGICA DE NITRÓGENO

Y FÓSFORO

RESUMEN
Este trabajo muestra los resultados experimentales de una serie de procesos
biológicos unitarios para la remoción conjunta de materia orgánica (MO),
nitrógeno (N) y fósforo (P), empleando un sustrato sintético similar al agua
residual doméstica de concentración media. Se utilizó un sistema tipo A2O
(anaerobio-anóxico-aerobio), que se desarrolló en dos etapas. La etapa
preliminar duró 60 días y comprendió, además de la aclimatación del lodo
biológico, el ensayo de espuma de poliuretano, como material de soporte en la
etapa aerobia. La etapa secundaria duró 280 días más, en los que el sistema
alcanzó una estabilidad, lográndose un aumento notable en las eficiencias
promedio de remoción de 92,5 % en materia orgánica, 87,7 % en nitrógeno y
83,5 % en fósforo. Se realizó un seguimiento permanente a parámetros tales
como el oxígeno disuelto (OD) y el potencial de óxido reducción (ORP), que
variaron de acuerdo con el proceso correspondiente a cada unidad de
tratamiento, y el pH, que permaneció en valores superiores a 7,2 unidades,
garantizando la viabilidad del proceso de nitrificación- desnitrificación.
Adicionalmente, se realizó un estudio hidráulico con trazadores para evaluar el
efecto del material de soporte en el régimen hidráulico de la unidad aerobia.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

INTRODUCCIÓN
Más recientemente, se han incorporado procesos tendientes a mejorar la
remoción de nitrógeno (N) y fósforo (P) presentes en aguas residuales, ante
todo del sector residencial. Sólo a finales de los años ochenta y principios de los
noventa se observaron los efectos negativos de las descargas de AR con
aportes de N y P, por lo que el interés en la remoción de estos nutrientes se ha
visto reflejado en un incremento del número de proyectos de investigación. Los
estudios incluyen modificaciones a las tecnologías convencionales e
innovaciones en los arreglos de los procesos biológicos unitarios dinámicos y
estáticos, en los que se han alcanzado remociones altas de ambos nutrientes,
pero en pocos se analizan los aspectos hidráulicos en las unidades de
reacción y su relación con las eficiencias de remoción.

La problemática asociada a la presencia de nutrientes (N y P) radica ante todo

en la eutrofización de corrientes naturales, entre las que se cuentan los lagos
y embalses. Además, el N genera efectos negativos, como la reducción de la
concentración de oxígeno disuelto (OD) en aguas receptoras y su
consecuente toxicidad para la vida acuática, la disminución de la efectividad
del proceso de des infección con cloro, lo que implica un riesgo para la salud
pública, y peor aun un menor potencial de reutilización del agua residual

El tiempo de retención celular TRS es una de las mayores difi- cultades

relacionadas con el proceso de remoción simultánea de nitrógeno y fósforo,
puesto que tiene que ver tanto con las bacterias que oxidan el N, así como
con las encargadas de eliminar P. La re- moción de fósforo requiere contar
con bajos TRS, y lo contrario ocurre para la remoción de N que, debido a la
baja tasa de crecimiento de las bacterias nitrificantes, requiere altos valores de
TRS Por lo anterior, se planteó utilizar una cámara aerobia acompañada de un
medio de soporte inerte sobre el cual pueda darse el crecimiento de biomasa
adherida y se logre completar la actividad propia de los organismos
nitrificantes.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

MATERIALES Y MÉTODOS
La investigación fue realizada en el laboratorio de Biotecnología Ambiental, del
Grupo de Ingeniería y Gestión Ambiental de la Universidad de Antioquia. Para el
desarrollo del proceso, se utilizó un tren de tratamiento biológico compuesto por
tres cámaras: anaerobia, anóxica y aerobia similar al descrito en trabajos como el
de Baeza et AL. [8] y Ferreira [17]. La figura 1 ilustra el montaje experimental
empleado durante la fase de investigación. La última cámara incluye un medio de
soporte (espuma de poliuretano al comienzo y Anoxkaldnes en la etapa
posterior), cuyo propósito fue el de garantizar el crecimiento por adherencia de las
bacterias nitrificantes, de acuerdo con metodologías empleadas por diferentes
investi- gadores en la eliminación simultánea de MO, N y P

Figura 1. Montaje experimental (proceso A2/O) empleado durante la fase

de investigación
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Montaje e inoculación de reactores (cámaras). Los reactores se

diseñaron de acrílico con volúmenes variables de trabajo, así: cámara
anaerobia 24,5 L, anóxica 49 L y aerobio 73,5 L. El tiempo de retención hidráulico
fue fijado, con base en trabajos previos , en 10 horas y la edad de lodos estuvo
cercana a 20 días. Al final del proceso biológico se situó un sedimentador
secundario para recirculación continua de lodos de retorno hacia la cámara
anaeróbica. Los reactores se inocularon con lodos activos provenientes de la
planta de tratamiento de aguas residuales de San Fernando (Medellín,
Colombia). Antes de proceder a la inoculación, el lodo fue diluido hasta alcanzar
una concentración de sólidos totales aproximados por cámara de 3.000 mg/L
[33].

Selección del material de soporte. Al principio de la experimentación

se aplicó un total de 1.700 cubos de 2 cm de lado de espuma de po-
liuretano en la cámara aerobia, que ocupaban un volumen correspondiente
al 20 % del volumen total, siguiendo pautas planteadas en plantas de tratamien-
to de aguas residuales en Alemania y en trabajos previos donde se utilizó
Linpor (soporte sintético) como medio de soporte [14]. La espuma fue
seleccio- nada inicialmente por poseer alta porosidad y área superficial, bajo
valor económico y sobre todo por su disponibilidad. A finales del mes 2 de
operación, debido a problemas de desgaste mecánico sufrido por la espuma,
se procedió a reemplazar el material por una mezcla de soportes Anoxkaldnes
(k1 y k3), el cual se utilizó durante el resto de la experimentación (hasta el día
410).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Preparación del agua residual sintética. En la tabla 1 se presentan las

características del sustrato utilizado, que corresponden a las de un agua
residual doméstica de concentración media, adoptado de trabajos previos

Tabla 1. Componentes del agua residual sintética

Material Cantidad Unidade

s
Suero de 0,326 mg/L
leche
Sucrosa 0,49 mg/L
Acetato de 1,12 mg/L
sodio
Fosfato 0,45 mg/L
ácido de
potasio
Urea 2,4 mg/L
Solución de 0,3 mL/L
elementos
menores [25,
26, 27]

El agua residual preparada alcanza valores promedio de 192 mg DBO/L; 450 mg

DQO/L; 40 mg NTK/L y 8 mg PT/L.

Equipos adicionales. En la operación del sis- tema propuesto, se emplearon otros

equipos adicio- nales, como bombas peristálticas para alimentación y recirculación
interna de líquidos y sólidos (marca Cole Palmer), medidor de pH (marca SCHOTT)
y un medidor de oxígeno (HACH HQ20). Las mediciones de las variables DQO,
formas de nitrógeno (nitró- geno total, nitritos, nitratos y nitrógeno amoniacal),
formas de fósforo (fósforo total y fosfatos) fueron llevadas a cabo con el uso de
un equipo Nanocolor (500B). Otras variables como sólidos suspendidos (totales
y volátiles), DBO, entre otras, fueron medidas de acuerdo con métodos
estandarizados (Standard Methods 19a edición 1995 APHA, AWWA, WEF).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Estudio hidráulico (prueba de traza- dores). En el estudio de los

factores hidráulicos, se utilizó como trazador una dosis instantánea de 707
mg de LiCl correspondientes a 113,2 mg Li+. El litio fue seleccionado sobre
otros trazadores como la rhodamina WT y B por su baja acumulación en el
sistema, por no ser tóxico y no ser absorbido por los microorganismos, y se
siguió el método recomen- dado por Arroyave y González [6]. La evaluación
hidráulica fue realizada en la cámara aerobia (con presencia de biomasa en
suspensión y material de soporte Anoxkaldnes), dado que, además de ser la
de mayor volumen útil de trabajo (73,5 L), operó con aireación externa que
mejora la mezcla de contami- nantes dentro de ella. Se tomaron muestras a
inter- valos de 20 minutos durante las primeras dos horas y una cada hora en lo
sucesivo, hasta completar el tiempo total de 26,1 horas, correspondientes a
un periodo equivalente a tres veces el tiempo de resi- dencia teórico del
reactor [24], además de operarse el reactor a un caudal promedio de 120
mL/min. Las muestras fueron analizadas por espectrofotometría de absorción
atómica.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Crecimiento e inmovilización de Microorganismos

Las bacterias del género Pseudomonas pseudoalcaligenes (PAC) se cultivaron
en caldo cetrimida (Nico et al., 2012). El cultivo creció con agitación continua
(150 rpm) a 33ºC hasta alcanzar la fase exponencial (DO 600nm 0,8).

La obtención de capsulas de microorganismos se realizó con la técnica de

inmovilización en polímeros, a través de la cual se diseñaron esferas que
contenían al microorganismo en una unidad: la cápsula (PAC ó CV). Se formó
una emulsión que combinó los microorganismos resuspendidos en medio
fresco y alginato al 2 % p/v en relación 1:10 siguiendo el protocolo descripto
por Shoebitz et al., 2012.

Tratamientos de remoción biológica

Se utilizaron los siguientes tratamientos: PAC, CV, y su combinación (PAC+CV),
mantenidos en cámara de cultivo con temperatura (30 º C ± 2), fotoperiodo
(16-8 h), y en aireación constante durante todo el ensayo.

Se llevó a cabo un ensayo de 168 h de duración para determinar la evolución

en la remoción biologica de ambos nutrientes a evaluar. Los microorganismos
fueron inmovilizados dentro de una matriz tridimensional biodegradable, y
colocados en erlenmeyer que contenían un medio Bold´s Basal (BB)
modificando las concentraciones de N y P, con el objetivo de alcanzar niveles
típicos en aguas residuales provenientes de la gestión de RSU.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Biofertilización
Se utilizaron semillas de Solanum lycopersicum de la variedad comercial Río
Grande. Las semillas se desinfectaron superficialmente sumergiéndolas
durante 15 min en una solución que contiene hipoclorito de sodio 30% y Tritón
X-100 0,1% y se lavó 2 veces con agua destilada estéril. Se cultivaron en
bandejas alveoladas conteniendo arena/vermiculita (1:1).

Se realizó la inoculación con los microorganismos inmovilizados recuperados

a los 7 días, en plántulas de tomate de 3 días, a los que se evaluaron los
parámetros de promoción del crecimiento a los 30 días. Las microcápsulas
recuperadas fueron colocadas junto a las plántulas de tomate y fueron
mantenidas en cámara de cultivo Sanyo modelo MRL-350 durante todo el
ensayo con un fotoperiodo de 12 h de luz a la temperatura de 20-25ºC y
humedad relativa de 85 %. Se regaron con H2O (d) y una vez por semana con
solución Hoagland (0,25% p/v) (Hoagland & Arnon, 1938).

Para la evaluación del efecto sobre la promoción del crecimiento, se secó el

material durante 48 hs con estufa a 80 ºC. Luego se realizó un pesaje de la
biomasa total, aérea y radical de los diferentes tratamientos.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En la figura 1 se puede observar una reducción mayor en el contenido de P a
las 12 hs en el tratamiento donde bacteria y alga coexistieron (54,1 %). A las 48
hs alcanzó valores del 64 al 75 % para los distintos tratamientos. La
combinación PAC + CV resultó ser la más efectiva en la remoción a lo largo del
ensayo.

Evolución del contenido de P (ppm de P) en medio BB modificado para

tratamiento con PAC (círculos), CV (triángulos) y combinación con PAC + CV
(cuadrados).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

En la figura 2, se puede ver que la combinación PAC + CV mostró el mayor

porcentaje de remoción de N- NO3 entre los tratamientos a partir de las 12 hs,
y alcanzó la máxima tasa de reducción a las 48 hs.

Evolución del contenido de NO3 (ppm de NO3) en medio BB modificado para

tratamiento con PAC (círculos), CV (triángulos) y combinación con PAC + CV
(cuadrados).

En cuanto a la respuesta de plantas de tomate a la biofertilización con las

cápsulas, se observó un leve aumento de entre un 3 a 7 % en el peso aéreo
respecto al tratamiento control, que no resultó en diferencias
estadísticamente significativas.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Sin embargo en la parte radical los resultados fueron más evidentes, como se
aprecia en la Figura 3, donde se registraron incrementos de entre 20 a 23 %
en el peso seco radical sobre el tratamiento control.

Figura 3. Promoción del crecimiento obtenido de la biofertilización en Tomate

(Var. Río grande) con cápsulas recuperadas del ensayo de remoción de
nutrientes a los 30 días de la siembra Aumentos de entre 20 a 23 % en el peso
seco radical sobre el tratamiento control, para aquellas plantas biofertilizadas
con capsulas de tratamientos con PAC en su interior.

Objetivo particular:
Al término del tema el participante conocerá los mecanismos biológicos de
remoción de fósforo y nitrógeno, así como la operación de los sistemas de
tratamiento correspondientes.

Eliminación biológica de fósforo (ebf)

Actualmente, es bien conocido que se necesita una secuencia de fases
anaerobia/aerobia para que el proceso se lleve a cabo, ya que los
microorganismos involucrados emplean un mecanismo metabólico alterno
que se activa bajo estas condiciones.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Aspectos metabólicos
En general el contenido típico de fósforo en los microorganismos presentes en
un sistema de tratamiento convencional de aguas resuiduales (AR) fluctúa
entre 1.5 y 2% del peso seco. Sin embargo, el grupo de bacterias capaces de
eliminar fósforo de las AR, conocido como "acumuladoras de fosfato" (BAF),
se caracteriza por almacenar altas concentraciones de fósforo en forma de
gránulos de polifosfatos (poli-P) y su contenido fluctúa entre 3 y 6% del peso
seco de la biomasa (Sedlack, 1991). Se trata de microorganismos aerobios que
obtienen su energía (ATP) a través de la vía metabólica del ciclo de los ácidos
tricarboxílicos y cadena respiratoria, empleando oxígeno como aceptor de
electrones (Figura 6.1). Sin embargo, cuando estos organismos son sometidos
a una secuencia de condiciones anaerobias / aerobias, activan un mecanismo
metabólico de sobrevivencia para competir con otros grupos de bacterias
facultativas por la materia orgánica (MO) bajo condiciones anaerobias. Las
bases para explicar dicho mecanismo fueron propuestas por Nicholls y Osborn
(1979).

Recientemente Varios modelos han sido desarrollados, pero según un estudio

crítico hecho por Doria-Serrano et al.,(1992), son dos los que parecen estar
mejor apoyados por datos experimentales: Comeau-Wentzel (1986) y Mino
(1987) modificado por Wentzel (1991). El mecanismo de EBF consiste en
consumir material carbonoso de fácil asimilación, principalmente ácidos
grasos volátiles (AGV) de cadena corta (p.e. acetato) para transformarlo y
almacenarlo durante dicha fase anaerobia como poli-ß-hidroxibutirato (PHB)
(Figura 6.2). Durante la transformación y almacenamiento de MO, las BAF
necesitan energía que obtienen a partir de la hidrólisis de poli-P. Durante este
proceso se genera y liberara al medio ortofosfatos (representado como Pi en
la Figura 6.2). Ambos modelos anteriormente mencionados, concuerdan en
las reacciones involucradas en la síntesis de PHB y en la importancia del poli-
P en el proceso. La diferencia entre un modelo y otro es el origen del NADH
necesario para la reducción del acetoacetil CoA (Figura 6.2).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Metabolismo aerobio de respiración de las BAF en condiciones

normales de aerobiosis

Modelos metabólicos para el proceso de EBF. A

 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Posteriormente, cuando estas mismas BAF se someten a condiciones

ambientales propicias, es decir, en presencia de O2 , entonces, la MO que
almacenaron en forma de PHB es retransformada a acetil CoA (Figura 6.3),
mismo que es reincorporado al ciclo de los ácidos tricarboxílicos y cadena
respiratoria para su degradación . A través de esta vía, se produce la energía
necesaria para reactivar todo el metabolismo celular, incluyendo el
crecimiento. Es entonces, cuando ocurre la verdadera separación del fósforo
del AR, ya que las BAF consumen el fósforo presente en el AR en una
proporción mayor a la concentración excretada durante la fase anaerobia,
para emplearlo tanto en la generación de ATP, como para recargar las reservas
energéticas en forma de poli-P; como una estrategia de sobrevivencia ante la
posibilidad del establecimiento de otro periodo anaerobio. La eliminación del
fósforo del sistema se hace a través de la extracción de los lodos de exceso.

Síntesis y degradación de PHB a partir de acetato y reincorporación a la vía de

degradación de MO de las BAF
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

El esquema de la figura 6.4 muestra de una forma simplificada el consumo y

transformación de MO en PHB y la consecuente excreción de fosfatos en
condiciones anaerobias y; la posterior degradación de PHB, la producción de
energía en forma de ATP y poli-P y el consumo de ortofosfatos.

Anaerobiosis Aerobiosis

Matriz
MO PO - OD CO + H O PO -

energía energía
PHB Poli-P OD PHB Poli-P
Bacteria

Figura 6.4 Esquema que representa el funcionamiento de la vía metabólica

alterna que encienden las BAF bajo condiciones de estrés

Si se representa gráficamente el mecanismo de EBF con base en la

concentración de los nutrimentos involucrados, se observa que:

Comportamiento típico de los nutrimentos dentro de un SBR durante la EBF.

 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Microbiología
Se han realizado varios estudios sobre la microbiología del proceso para
conocer cual o cuales son los organismos denominados "acumuladores de
fosfato". Al respecto, Doria- Serrano et al. (1992), presentan una breve
recopilación de la información existente y mencionan que una parte de los
investigadores dedicados al estudio de este proceso; entre los que destacan
Wentzel et al. (1986), quienes consideran a las bacterias del género
Acinetobacter como responsables de la EBF. Sin embargo, se sabe que la
cantidad de acetato (sustrato empleado por Acinetobacter) es pequeña en el
influente de una planta de tratamiento puesto que la MO está constituida
frecuentemente por moléculas más complejas. Al respecto, Doria-Serrano et
al. (1992), mencionan que algunos autores consideran que la MO es primero
transformada por microorganismos fermentativos en ácidos grasos de bajo
peso molecular, entre los cuales se encuentra el acetato y posteriormente
éstos son asimilados por las BAF.

Actualmente, en muchos microorganismos, además de Acinetobacter, se ha

encontrado la capacidad de almacenar y eliminar fósforo; entre los cuales se
encuentran Pseudomonas vesicularis, Klebsiella pneumoniae, Micrococcus,
Aeromonas hydrophila, Arthrobacter globiformis, Moraxella sp. y
Enterobacter sp. . Algunas de estas bacterias son estrictamente aerobias y
otras fermentativas; algunas utilizan acetato como fuente de carbono, pero la
mayoría también puede metabolizar glucosa y otras moléculas orgánicas
(Doria-Serrano et al., 1992).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Factores que afectan la EBF

Oxígeno disuelto y óxidos de nitrógeno
El consumo y almacenamiento de MO solamente puede ocurrir en
condiciones anaerobias ya que en presencia de óxidos de nitrógeno
(condiciones anóxicas1), estos sustratos pueden ser usados como aceptores
de electrones en ausencia de oxígeno disuelto (Ecklenfelder Jr. , 1985).

Por otra parte, Kerrn-Jespersen y Henze (1993), mencionan que diversos

autores reportan como posible la captura de fósforo tanto en condiciones
aerobias como anóxicas ya que, como se ha mencionado antes, el nitrato
puede ser empleado como aceptor de electrones. Al respecto, estos mismos
autores encontraron que el consumo de fósforo es más rápido en condiciones
aerobias que en condiciones anóxicas.

Este hecho también ha sido observado por Comeau et al., (1987) quienes
explican que la producción de energía que resulta de la degradación del PHB
ó PHV es menor en condiciones anóxicas que en condiciones aerobias. Sin
embargo, Kerrn-Jespersen y Henze (1993) observaron que bajo condiciones
aerobias todas las BAF capturan fósforo del medio, mientras que en
condiciones anóxicas sólo una parte de las BAF asimilan fósforo.

Recientemente, Wanner et al. (1992) y Bortone et al. (1994), han diseñado y

probado de manera exitosa dos diferentes procesos de eliminación de materia
orgánica y nutrimentos empleando una fase anóxica en vez de una aerobia
para llevar a cabo el consumo de ortofosfatos y desnitrificación.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Temperatura
Randall et al (1992) hacen una recopilación de la información que diferentes
investigadores reportan sobre la temperatura óptima del proceso y
encontraron que los valores son muy diferentes. Sin embargo, la gran variedad
de especies capaces de acumular fósforo, incluye microorganismos psicrófilos,
mesófilos e incluso termófilos. Por lo tanto la temperatura óptima dependerá
del grupo dominante dentro del sistema. Lo cual, a su vez, depende del tipo
de cultivo inicial y de las condiciones de operación.

PH
Tracy y Flammino (1985) encontraron que el consumo de ortofosfatos es
óptimo en el intervalo de pH entre 6.6 y 7.4 . A valores menores el crecimiento
de los microorganismos disminuye y a valores mayores a 8.0 se sabe que el
fósforo precipita en presencia de carbonatos y/ó bicarbonatos, como fosfato
de calcio.

Afortunadamente, la mayoría de las AR municipales presentan valores de pH

dentro de este intervalo. La acidez en AR de tipo industrial puede representar
un problema para la EBF.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Eliminación biológica de nitrógeno por procesos diferentes

al de nitrificación y desnitrificación convencional.
Revisión del ciclo del nitrógeno
presenta un esquema del ciclo biológico del nitrógeno que incluye los cinco
procesos principales: la asimilación, la mineralización (amonificación), la
nitrificación, la desnitrificación y la fijación

Figura 6.1 Ciclo biológico del nitrógeno (esquema adaptado de Ralph, 1974).

Desnitrificación
Nitrógeno molecular (N2)
Fijación

Materia orgánica en el agua y el suelo

Amonificación

Microorganismos Animales

Asimilación Asimilación

Dsnitrificación asimilatoria
Nitratos Ion amonio
Nitrificación (NH +)
(NO3-)
Mineralización

La asimilación
La asimilación es el proceso de utilización de las formas inorgánicas del
nitrógeno para el crecimiento de microorganismos. La principal forma
asimilable del nitrógeno es el NH4+ , pero ciertos microorganismos son
capaces de asimilar los iones de oxido de nitrógeno (N- NO3-). (Ralph, 1974;
Knowles, 1982).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

La mineralización
La mineralización se refiere a la generación de formas inorgánicas del
nitrógeno a partir de la degradación de compuestos orgánicos tales como
urea, proteinas, aminoácidos, etc. Las formas inorgánicas así generadas
pueden subsecuentemente ser asimiladas

Cuando el producto final de la mineralización es el ion NH4+, el proceso es

conocido como amonificación (Ralph, 1974; Knowles, 1982).

La fijación
La fijación implica la transformación del nitrógeno molecular (N2) del aire en
NH4+ , para su asimilación e incorporación (fijación) a la biomasa. Este proceso
esta limitado a un pequeño grupo de microorganismos:

1) Las bacterias fijadoras de nitrógeno, entre las cuales los géneros más
importantes son
Azotobacter y Clostridium

2) Las algas verde azules o cyanobacterias cuyos géneros principales son

Annabaena et Nostoc
3) Las bacterias simbióticas del género Rhizobium que viven en simbiosis con
las plantas, como por ejemplo las leguminosas.

La nitrificación
La nitrificación es el proceso biológico de utilización y transformación de NH4+
en NO3- por la acción de microorganismos aeróbios que utilizan el oxígeno
disuelto en el agua para oxidar el ion amonio. La nitrificación se lleva a cabo
en dos etapas. En primer lugar las bacterias nitrosas (del genero
Nitrosomonas) utilizan y transforman el ion amonio (NH4+) en nitritos
(fenómeno conocido como nitritación).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Transformaciones del nitrógeno por procesos diferentes al

de nitrificación y desnitrificación convencional
Revisión de los estudios efectuados en suelos y en plantas
de tratamiento de aguas residuales
Las transformaciones fisico-químicas y biológicas del nitrógeno (N) han sido
más estudiadas en suelos que en los procesos de tratamiento de aguas
residuales. En los años 60, como consecuencia del crecimiento de la población
mundial, se hicieron grandes esfuerzos para conservar la fertilidad
(productividad) de los suelos de cultivo y forestales para evitar la erosión. A
partir de los estudios realizados se observó que dicho problema

Nitrificación y desnitrificación simultánea

De todos los procesos no convencionales de transformación del nitrógeno en
forma gaseosa, aquel que es cada vez más conocido y estudiado corresponde
a la nitrificación y desnitrificación simultánea (NDS). En este proceso las
condiciones aerobias y de anoxia para activar el metabolismo de nitrificación
y de desnitrificación (respectivamente), están dadas no por rectores
diferentes, ni por una aireación secuencial dentro del mismo reactor, sino más
bien, por la formación de microzonas anóxicas en el interior de los consorcios
bacterianos presentes en un reactor en aireación. En dichas microzonas, el
oxígeno no es capaz de penetrar pero los NOx generados por las bacterias
nitrificantes si lo son (Masuda et al., 1991).

La nitrificación y desnitrificación simultánea puede presentarse en sistemas

con biomasa fija y también en sistemas con biomasa suspendida, al interior de
los floculos biológicos los nitratos producidos por las bacterias nitrificantes en
las capas más superficiales de la biopelícula pueden penetrar hacia las capas
más profundas, en donde la concentración en oxígeno es muy pequeña (o no
hay oxígeno disuelto) ya que este es consumido en las capas más superficiales.
En estos microambientes sin oxígeno molecular,
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

las bacterias desnitrificantes utilizan los nitritos y nitratos como aceptores de

electrones y los transforman en nitrógeno molecular (N2) (Figura 5.2) el cual
escapa del sistema con el efluente gaseoso. reporta un comportamiento
similar para los fóculos de lodos activados en una planta de tratamiento que
es poco aireada y contiene concentraciones muy bajas de oxígeno disuelto. En
este caso, coexisten en el interior de los flóculos una zona aerobia (exterior)
para la nitrificación y una zona anaerobia (más bien anóxica) que se encuentra
en el interior del flóculo en donde ocurre la desnitrificación.

Esquema teórico de la nitrificación y desnitrificación simultanea en una

biopelícula aireada

Desnitrificación autótrofa aerobia por microorganismos

nitrificantes
Algunos han observado que entre varios microorganismos nitrificantes (u
oxidadores de amonio), que han sido aislados del suelo, existe la capacidad de
desnitrificar sin necesidad de degradar materia orgánica (es decir que son
microorganismos autótrofos) cuando se encuentran bajo condiciones
limitantes de oxígeno (aproximadamente a 1.0 mg O2/L). Se trata de bactérias
autótrofas nitrificantes facultativas. Entre las cuales se encuentran
Nitrosomonas europeae y Nitrosomonas eutropha, habiendo sido probado
que ambas transforman los nitritos (NO2-) en nitratos (NO3-) en presencia de
una alta concentración de oxígeno disuelto (OD) (nitratación).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Pero sin embargo, bajo condiciones limitantes de oxígeno (1.0 mg/L), estos
microorganismos utilizan el ion amonio (NH4+) como fuente de energía
(donador de electrones) y los nitritos NO2- (generados luego de la nitrificación)
como aceptores de electrones, los cuales son reducidos a formas gaseosas del
nitrógeno, como el N2 (Bock et al., 1995) y el N2O

NH4+ + NO2- N2 + 2H2O

Recientemente, Helmer et al. (1999), reportaron que en un sistema de

biodiscos que trata (nitrifica) los lixiviados de un depósito sanitario, se
presenta además de una nitrificación completa de la alta carga nitrogenada
(300 mg N-NH4+/L), una perdida de aproximadamente el 60% del nitrógeno
(soluble), el cual es transformado por la acción de microorganismos
nitrificantes en N2 sin consumo de DQO y bajo condiciones aerobias de
aproximadamente 1.0 mg OD/L . Dichos autores han reportado también que
cuando la concentración de oxígeno aumenta la formación de N2 se detiene y
por el contrario la concentración de nitratos (NO3-) aumenta en el efluente.

Desnitrificación autótrofa aerobia por microorganismos

nitrificantes heterótrofos
Algunos microorganismos oxidan el ion amonio (NH4+) en nitritos (NO2-)
solamente en presencia de una fuente de carbono diferente al CO2
(heterótrofos) y posteriormente, bajo condiciones aerobias con alta
concentración de oxígeno (5 a 7 mg OD/L) reducen los NO2- en N2O sin
consumo de DQO. La bacteria de este tipo que ha sido más estudiada es
Thiosphaera pantotropha (Castignetti y Hollocher, 1984; Robertson, 1988,
Robertson et al.,1995; Arts et al., 1995). Este comportamiento también ha sido
observado para Alcaligenes feacalis
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

DESNITRIFICACIÓN AEROBIA POR CO-RESPIRACIÓN DE O2 Y DE

NOX
El cuarto proceso no convencional de biotransformación y eliminación del
nitrógeno (que aquí describimos) es llevado a cabo por un grupo de
microorganismos desnitrificantes heterótrofos capaces de desnitrificar bajo
condiciones aerobias gracias a su capacidad de utilizar indistintamente el O2 y
los NOx como receptores de electrones (Llyod et al., 1987). Esta capacidad ha
sido reportada para Pseudomonas nautica (aislada del suelo) por Bonin y
Gilewicz (1991) y para Comamonas sp cepa SGLY2 (en aguas residuales) por
Patureau et al. (1997). A diferencia de otros microorganismos desnitrificantes
aerobios, estos microorganismos no son capaces de nitrificar. Patureau et al.
(1997) reportan que cuando se utiliza un cultivo mixto de microorganismos
nitrificantes (obtenidos a partir de un sistema de tratamiento de estiércol de
puerco) en combinación con un microorganismo desnitrificante aerobio
(Comamonas sp) en un reactor aerobio operado en continuo, se obtiene
formación de N2O y de N2 por un proceso de desnitrificación aerobia siempre
y cuando se adicione de forma discontinua una fuente de carbono como
fuente de energía (donador de electrones).

Todos estos procesos descritos anteriormente, fueron observados primero en

los suelos y posteriormente en los sistemas de tratamiento de aguas
residuales. Las investigaciones realizadas en suelos, muestran que la perdida
de nitrógeno también está asociada a una serie de reacciones químicas
agrupadas con el nombre de quimio-desnitrificación (Hutchinson y Davidson,
1993).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

LA QUIMIO-DESNITRIFICACIÓN
La quimio-desnitrificación consiste en una serie de reacciones de oxido-
reducción que llevan a la formación de HNO2, NO y N2O. La reacción más
importante es la destrucción de nitritos, catalizada por valores de pH bajos,
dando como productos finales NO, N2O y N2 (Tiedje, 1994). Hasta ahora este
proceso de quimio-desnitrificación no había sido reportado para los sistemas
de tratamiento de aguas residuales, pero recientemente Garzón-Zúñiga
(2001) ha encontrado que las condiciones ambientales que hacen posible la
quimio-desnitrificación en suelos (acidez, humedad, buena aireación y alto
contenido de materia orgánica) se encuentran también presentes en los
sistemas de biofiltración sobre medio orgánico utilisados en la actualidad para
tratar diferentes efluentes de aguas residuales.

Eliminación biológica de fósforo y nitrógeno en un reactor

discontinuo con biopelícula
Cuando el fósforo y el nitrógeno no son eliminados de las aguas residuales, se
acelera el proceso de eutrofización en los cuerpos de agua receptores
(Vollenveider, 1985 ; Rodrier, 1990). Desde hace tiempo, se emplean métodos
biológicos a nivel industrial para eliminar estos contaminantes. En general se
trata de sitemas continuos con biomasa suspendida que requieren recircular
lodos y/ó el agua residual en tratamiento, dentro de un tren de reactores en
los que se proporcionan las condiciones necesarias para que se efectuen los
diferentes procesos biológicos.

Recientemente, se ha retomado el estudio y utilización de los reactores

discontinuos (SBR), en ellos, el tratamiento se hace por ciclos. Cada ciclo
incluye las siguientes etapas:

• llenado
• periodo de reacción
• sedimentación de lodos
• vaciado del agua tratada
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Estos sistemas presentan como ventaja, que toda la secuencia de reacciónes

ocurre dentro del mismo reactor. Sin embargo, al coexistir diferentes
microorganismos, se presenta una relación de competencia entre las bacterias
acumuladoras de fosfato (BAF) y las bacterias nitrificantes (BN), por el
oxígeno.

Al respecto Hang-Sik et al. (1993) y Bjørn-Rusten & Helge-Eliassen (1993) -al

experimentar en un SBR con biomasa suspendida- reportan que cuando se
presenta una excelente eliminación de fósforo sólo se obtiene nitrificación
parcial y viceversa. No obstante, González-Martínez y Wilderer (1991)
reportan haber obtenido eliminación eficiente de fosfatos y nitrificación
completa empleando un reactor discontinuo con biopelícula (B- SBR).

La inovación de emplear biopelícula en este tipo de sistemas ofrece las

siguientes ventajas:

a) retención de altas concentraciones de biomasa dentro del reactor

b) se elimina la etapa de sedimentación de lodos
c) coexistencia de actividad metabólica aerobia y anóxica en el mismo
ecosistema o biopelícula (Iwai y Kitao, 1994)

Con base en estas observaciones, el objetivo principal de esta investigación es

aprovechar las caracteristicas de los reactores discontinuos que emplean
biopelícula, para acoplar a la eliminación biológica de fósforo el proceso de
eliminación biológica de nitrógeno dentro del mismo sistema, empleando una
secuencia de fases Anaerobia / Aerobia / Anóxica / Aerobia II.

Metodología Teoría
La propuesta de utilizar un periodo de reacción dividido en cuatro etapas, se
basa en las experiencias reportadas para procesos industriales que eliminan
nitrógeno y fósforo en sistemas de lodos activados (Procesos: Biodenipho,
Bardenpho, A²O, etc.),

De acuerdo con estas experiencias, se esperó el siguiente comportamiento

teórico de los contaminantes dentro del "SBR":
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Fase anaerobia
a) captura y almacenamiento de MO
b) liberación de PO4-

Fase aerobia
a) degradación de MO previamente almacenada
b) captura de PO4- en una proporción mayor a la excretada
c) oxidación del N-NH4+ a N-NO3- (Nitrificación)

Fase anóxica
a) reducción desasimilatoria de los NO3- a N2 eliminando así al nitrógeno
del sistema como gas
b) se espera que las BAF liberen una pequeña cantidad de PO4- como
respuesta al comportamiento "condicionado" que presentan ante la
falta de OD
Fase aerobia II
a) Recaptura del P-PO4- liberado en fase anóxica

Patrón de comportamiento teórico durante la eliminación de carbono, fósforo

y nitrógeno en un "B-SBR"
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Unidad experimental
En la presente investigación se utilizó un reactor a escala piloto, de 1000 l de
capacidad, de cama empacada completamente sumergida (Figura 6.2). Como
material de soporte, se emplearon anillos pall de 3.5 pulgadas de diametro. La
aireación se proporcionó con una compresora conectada a tres difusores
colocodados en el fondo del reactor. En la linea de recirculación se colocaron
puertas para monitoreo de pH, O.D., y toma dmuestras. Todas las muestras
fueron de tipo compuesto. Es decir se tomaron a lo largo de un periodo de 15
min (tiempo suficiente para que más de la mitad del volumen del reactor sea
recirculado).

El sistema se trabajó con el AR de tipo doméstico que llega a la a la planta de

tratamiento de la Universidad Nacional de México (cuya composición se
muestra en la Tabla 6.1), la biopelícula se hizo crecer empleando un periodo
de reacción dividido en dos fases, una anaerobia y otra aerobia (con una
relación 1/0.5), con la finalidad de inducir el establecimiento selectivo de las
BAF y BN propias del agua residual, dentro del reactor.

Representación esquemática del SBR empleado. Volumen útil (material de

soporte con biomasa adherida) 865 l . Áera superficial para adhesion de
biopelícula 54.04 m² .Tasa de recirculación 54.5 l/min.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Caracterización del agua residual empleada.

Contaminante Concentración
DQOt 205±28 mg/l
DQOs 113±20 mg/l
N-NH4+ 19.5±3.0 mg/l
N-NO3- 2.6±0.5 mg/l
N-NO2- 0.35±0.35 mg/l
P-PO4- 7.8±1.2 mg/l
O.D. 3.8±0.9 mg/l
pH 7.55±0.16
Resultados
A. Efecto de la CO y de la relación DQOt/P-PO4-.

Después de más de 150 días de experimentación, se observó que a valores de

CO entre 35 y 10 g DQOt/m²·d, no se estableció el comportamiento típico de
EBF y solo cuando se empleó un valor cercano a 5 g DQOt/m²·d dicho
comportamiento se presentó. Es decir se eliminó la mayor parte de la MO
(entre 50 y 70%) durante la fase anaerobia y se presentó cierta excreción de
fosfatos, aunque durante la fase aerobia no existía recaptura

Un factor determinante para que se estableciera el comportamiento de EBF

fue la relación DQO/P-PO4- ya que como se puede observar en la figura 6.4C,
al establecer en 16 el valor de esta relación, el porcentaje de excreción de
ortofosfatos

comenzó a aumentar pero la cantidad recapturada en fase aerobia era menor

a la excretada; lo que significa que no existía eliminación real de fósforo, y aún
más, que la concentración final era mayor que la inicial como consecuencia de
la mineralización de del P-orgánico contenido en el agua residual Hasta el
momento se ha visto la importancia de de estos parametros de operación para
activar el proceso de EBF
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

B. Propuesta del comportamiento Microbiológico

Para elucidar lo anterior, es necesario detenerse a observar con detalle el
comportamiento In extenso de cada corrida, bajo diferentes valores de CO. En
la figura 6.4 se ha analizado el comportamiento del sistema con respecto a la
concentración de contaminantes únicamente en el influente, al final de la fase
anaerobia y al final de la fase aerobia (o efluente). Sin embargo, es importante
mencionar que cada conjunto de tres valores, representa el comportamiento
resumido del sistema durante una corrida completa como las que se muestran
en la figura 6.5.

Después de analizar estos resultados, se considera que cuando la CO es

elevada, la concentración de nutrimentos que queda al final de la fase
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

anaerobia, es suficiente para que los microorganismos aerobios (entre los

cuales se encuentran las BAF) crezcan sin limitación y cada vez que se
establecen las condiciones anaerobias, éstos únicamente entran en una
especie de letargo, disminuyendo su metabolismo y en espera de que se
reanuden las condiciones aerobias, para continuar su crecimiento. Pero a
medida que se disminuyó la CO, la cantidad de MO que quedaba al inicio de
la fase aerobia fue disminuyendo (Figura 6.5 A y B) y cuando el valor de CO
llegó a 5 g DQOt/m²·d, la cantidad de MO disponible en fase aerobia se hizo
insuficiente para mantener el desarrollo y sobrevivencia de las bacterias
aerobias.

En este momento, las Bacterias Aerobias, activaron la vía metabólica alterna

de sobrevivencia para capturar MO en condiciones anaerobias e iniciaron una
competencia con las Bacterias Facultativas (BF) por el sustrato; comenzándose
a detectar excreción de ortofosfatos (Figura 6.5 C). Bajo esta condición
limitante de MO, la excreción llegó a ser del 80% tan solo 20 días después
(gráfica D). Con base en estos resultados, se siguió trabajando bajo las mismas
condiciones con la expectativa de enriquecer el medio con Bacterias
Acumuladoras de Fosfatos (BAF) para obtener eliminación real de fosfatos. Sin
embargo, después de tres meses tan solo se eliminaba una concentración
igual a la excretada y únicamente se presentó cierta eliminación real de
fosfatos cuando la concentración inicial de M.O. fue menor al promedio.

C. Eliminación real de fósforo

Con base en esta última observacion, se decidió disminuir aún más la CO del
sistema aumentando la duración del ciclo de tratamiento a 12 h. Sin embargo,
la CO prácticamente no disminuyó ya que durante ese periodo la
concentración de contaminantes se incrementó como consecuencia de la
época de estiaje (Figura 6 A y B I y II). Por lo cual aumentó nuevamente la
duración del ciclo de tratamiento a 24 h, obteniendo así una CO de 3.1 g
DQOt/m²·d .

Con este cambio, el sistema presentó un funcionamiento estable con una

eliminación promedio de fosfatos del 70.6 ± 12.4% y un 88.8 ± 6.0% de la DQOt
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

(Figura 6.6 III A y B). En la figura 6.7, se aprecia el perfil representativo de la

M.O. y P-PO4- a lo largo del tiempo de reacción de cada corrida. Con base en
estos resultados, parece ser que, contrario a lo que la mayoría de los autores
reportan, el estado de estres que necesitan ciertas BH aerobias para activar la
EBF, no esta dado únicamente por el establecimiento de una secuencia de
fases anaerobia / aerobia u óxica. Sino más bien, por la falta de M.O.
disponible durante ésta última etapa.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

D. Nitrificación y Desnitrificación Simultaneas

En la figura 6.9 se observa que durante las primeras 3.5 h de la fase aerobia se
eliminó cerca del 30% del N-NH4+, pero sin que se detecte la presencia de
NO2- ni de NO3- existiendo al final del ciclo un diferencia negativa del 35% en
el balance de masa del N. Este fenómeno ha sido observado con anterioridad
por González-Martínez y Wilderer (1991). Al respecto, Iwai y Kitao mencionan
que en la capas profundas de una biopelícula aerobia, en donde ya no penetra
el oxígeno se presenta desnitrificación.

Los cambios realizados para inducir la EBF, influyeron positivamente sobre la

EBN ya que al aumentar el TRH aerobio de 2.5 h a 5 h 40 min, se permitó el
establecimiento de las BN; ya que el sistema comenzó a nitrificar ligeramente
(Figura 6.8 AB IyII) pués, aún cuando no se elimina visiblemente el N-NH4+ del
efluente, se detecta cierta concentración de NO3 Al respecto Bjørn & Helge
(1993) mencionan que se necesita un TRC aerobio de 12-13 d para obtener
nitrificación completa. Mientras que Hang-Sik et al. (1993) reportan que se
necesita un TRC aerobio de 15 para obtener nitrificación completa en un SBR
que emplea biomasa suspendida. Sin embargo, bajo la forma de operación con
un ciclo de 12 h, se estimó que el TRC del sistema era de 11.6 d. y el TRC
aerobio de tan sólo 5.23 d. Pero al aumentar la duración del ciclo a 24 h y el
TRH aerobio al doble (11h 40min), se presentó nitrificación completa
eliminandose en promedio el 98 ± 2% del N-NH4+ (Figura 6.8 A y B III).
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

E. Bacterias Acumuladoras de fosfato, como Bacterias

Desnitrificantes
Al trabajar el sistema bajo diferentes condiciones de operación reportadas en
Garzón- Zúñiga y González-Martínez (en preparación), se identificó una
relación inversa entre el porcentaje de eliminación de de P-PO4- y la
concentración final de NO3-, pero con eliminación completa de N-NH4+,
(nitrificación completa, Figura 6.10). Pero contrario a lo que se reporta
bibliograficamente para biomasa suspendida, no se presentó una relación
invesra entre la EBF y la nitrificación; aunque si existe una relación de
competencia entre BAF y BN por el OD.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

F. Acoplamiento de la eliminación biológica de P y N

La duración del ciclo de tratamiento y de cada una de las cuatro etapas de
reacción propuestas, se determinó con base en la información obtenida hasta
el momento; quedando de la siguiente forma: un TRH de 36 h, a) fase
anaerobio 10 h. b) fase aerobia de 20 h para asegurar que todo el PHB
almacenado fuera metabolizado. c) fase anóxica corta (3 h) debido a que el
proceso de desnitrificación comienza desde la fase aerobia. fase aerobia II
también corta (3 h) ya que para entonces la MO se ha agotado en el medio y
se esperó que la excresión de fosfatos fuera poco significante. El
Comportamiento de los contaminantes (MO, P y N) durante el ciclo de
tratamiento propuesto se describe a continuación y se ilustra en la figura 6.12.

Fase Anaerobia
a) Captura del 68% de la DQOt
b) Excreción de P-PO4- cercana al 250% de la concentración inicial
c) Ligero aumento de la concentración de N-NH4+ por procesos de
amonificación y reducción de óxidos de nitrógeno
d) Eliminación de NO3- por procesos de reducción
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

Fase Aerobia
a) Eliminación de un 21% adicional de la DQOt, para llegar a un total de
eliminación del 89%
b) Captura de P-PO4- igual al 322% de la concentración inicial, lo cual
representa una eliminación real del 72%
c) Nitrificación del 94% del N-NH4+.
d) Eliminación biológica real del 70% del N inicialmente presente como
NH4+, por desnitrificación simultánea.
Fase Anóxica
a) Excreción poco significativa de P-PO4- (0.8 mg/l)
b) Ligero aumento de la DQOt
c) Ligero aumento del N-NH4+
d) Desnitrificación de los óxidos de nitrógeno. EBN del 85%
Fase Aerobia II
a) Oxidación completa del N-NH4+ a NO2- y NO3-
b) Recaptura del P-PO4- (0.05 mg/l) excretado en fase anóxica
c) Disminución ligera de la DQOt
d) EBF final del 75%; EBN final del 87% y eliminación final del 89% de la
DQOt.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

[Link] de la disminución en la concentración inicial de MO,

sobre la EBF y N.
Se observó que empleando la misma estrategia de operación pero con una CO
de 2.4 g DQOt/m²·d, no se presentó eliminación real de fosfatos (Figura 6.13)
Con esta CO, la concentración inicial de M.O. disminuyó 40%; y por tanto la
cantidad de PHB almacenada por cada BAF. Al iniciar la fase aerobia la
cantidad de P-PO4- y de aceptores de electrones (N-ox) requeridos para
obtener energía, también disminuyó.

Reflejándose en una recaptura de fosfatos apenas igual a la cantidad

excretada. Este fenómeno ha sido observado por Garzón-Zúñiga y Gonzáles-
Marttínez Al requerir las BAF menos aceptores finales de electrones (N-ox)
éstos se acumularon al final de la fase aerobia (Figura 6.13A II).

Sin embargo, el proceso de desnitrificación si ocurrió ya que al iniciarse la fase

anóxica, el 80% de los nitratos fue reducido por Bacterias Desnitrificantes
diferentes a las BAF (Figura 6.13A IV). Por otra parte, no reaparece N- NH4+
durante la etapa anóxica, lo cual indica que la reducción de los N-ox se dirigió
hacia la formación de N2, el cual se eliminó del sistema como gas. Bajo estas
condiciones, la EBN no varió, fue del 83%.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

CONCLUSIONES
 La aplicación de sistemas de tratamiento combinado (A2O), con adición
de material de soporte, permite comprobar la alta eficiencia de
eliminación simultánea de materia orgánica y de nutrientes (N y P) en el
tratamiento de aguas residuales de tipo doméstico.
 Los procesos de eliminación de fósforo requieren no sólo la combinación
de medios (anaerobios-aerobios), sino la purga de lodos controlada y la
presencia y favorecimiento de los organismos removedores de fósforo
(PAO).
 Desde el punto de vista de las variables de operación pH, OD y
temperatura, los sistemas no presentaron variaciones significativas y su
comportamiento posiblemente permitió favorecer PAO sobre GAO, pues
se ha estudiado que los valores de pH superiores a 7,0 y temperaturas
cercanas a 20 ºC son benéficos para las primeras y perjudiciales para las
segundas.
 Los altos valores de eliminación de nutrientes (carbono, nitrógeno y
oxígeno) hacen viable el uso de este sistema de tratamiento para las
aguas residuales domésticas.
 Aunque no pudieron realizarse pruebas moleculares avanzadas sobre la
biomasa adherida al medio de soporte, los resultados sí permiten inferir
que un alto crecimiento de especies nitrificantes está relacionado con los
altos niveles de remoción de nitrógeno en el tren de tratamiento
estudiado.
 La espuma sintética, a pesar de permitir el cre- cimiento de alta
cantidad de biomasa, debe ser más estudiada para el soporte de
fuerzas de corte mecánico, puesto que su costo módico, porosidad y
área superficial la hacen una buena fuente de soporte para el
tratamiento de aguas residuales.
 La presencia del material de soporte no provo- có cortocircuitos o
zonas muertas que pudie- ran obstaculizar la nitrificación en el
reactor AER.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

BIBLIOGRAFÍA
 Arts P.A.M., Robertson L.A. et Kuenen J.G. (1995). Nitrification and
denitrification by Thiosphaera pantotropha in aerobic chemostat
cultures. FEMS Microbiol. Ecol. 18 : 305 - 316.

 Bock, E. Schmidt, I. Stüven, R. et Zart, D. (1995). Nitrogen loss caused by

denitrifiyng Nitrosomonas cells using amonia or hydrogen as electron
donors and nitrite as electron aceptor. Arch. Microbiol. 163 : 16 - 20.

 Bjørn-Rusten and Helge-Eliassen. (1993). Sequencing batch reactors for

nutrient removal at small wastewater treatment plants. 2nd
international specialized conferenceon design and operation of " Small
wastewater treatment plants". Ed. by Hallvard Ødegaard. Trondheim,
Norway. pp. 245-252.

 Bonin P. et Gilewicz M. (1991). A direct demonstration of « co-respiration

» of oxygen and nitrogen oxides by Pseudomonas nautica : some spectral
and Kinetic properties of the respiratory components. FEMS Microbiol.
Lett. 80 : 183 - 188

 Bremner, J. M. et Blackmer, A.M. (1978). Nitrous oxide : emissions from

soils during nitrification of fertilizer nitrogen. Science 199 : 295-296

 Burrell P.C., KellerJ. et Blakcall L.L. (1998). Microbiology of a nitrite

oxidizing bacteria.

 Appl. Env. Microb. 64 (5) 1878 - 18883.

 Castignetti D. and Hollocher T.C. (1984). Heterotrophic nitrification
among denitrifiers.

 Appl. Env. Microbiol. 47 : 620 - 623.

 Council of European Communities. Directive concerning urban waste
water treatment (91/27/I/EEC) Official Journal L135 40. May 1991.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

 Garrido J.M., Campos J.L., Méndez R. et Lema J.M. (1997). Nitrous oxide
production by Nitrifying biofilms in a biofilm airlift suspension reactor.
Wat. Sci. Tech. 36 (1) : 157 :163.

 Garzón-Zúñiga, M.A. et González-Martínez, S. (1996) . Biological

phosphate and nitrogen removal in a biofilm sequencing batch reactor .
Wat. Sci. Tech. 43 (1) :293 - 301.

 Garzón-Zúñiga, M.A. (2001). Mécanismes d’enlèvement de l’azote du

lisier de porc par biofiltration aérée sur tourbe. Tesis de Doctorado,
Departément du génie civil, Université Laval, Québec, Canada.

 Garzón-Zúñiga M.A. & González-Martínez S. (en preparación). Efficiency

loos of Phosphate Removal in a "Biofilm-SBR".

 Gerber A., Villiers R.H., Mostert E.S. and Riet C.J. (1987). The
phenomenon of simultaneous phosphate uptake and release, and its
importance in biological nutrient removal. Biological Phosphate Removal
from Wastewaters, Rome. Pergamon Press, Oxford.

 González-Martínez, S and Wilderer, A. , (1991). Phosphate removal in a

biofilm reactor. Wat. Sci. Tech. vol. 23. pp1405-1415.

 Goreau, T.J., Kaplan, W.A., Wofsy, S.C. McElroy, M.B., Valois, F.W. et
Watson, S.W. (1980). Production of NOx and N2O by nitrifying bacteria at
reduced concentrations of oxygen. Appl. Environ. Microbiol., 40 (3) : 526
- 532.

 Hang-Sik S. et al., (1993). Optimal operating conditions for nutrient

removal in the automaticcontrolled sequencing batch reactor. 2nd
international conference on design and opereation of "Small wastewater
treatment plants" Ed. by Hallvard Ødegaard. Trondheim, Norway.
pp.253-259.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

 Hansen B. P. (1997) . Double delight . Wat. Qual. Intern. May-June : 24 -

25

 Helmer C. et Kunst S. (1998). Simultaneous nitrification/denitrification in

an aerobic biofilm system. Wat. Sci. Techol., 37 (4/5) : 183 - 187.

 Helmer C., Kunst S., Juretschko S., Schmid M.C., Schleifer K.-H., et
Wagner M. (1999). Nitrogen loss in a nitrifying biofilm system. Wat. Sci.
Tech. 39 (7) : 13 - 21

 Henze, M. (1995). Basic Biological Process Chap. 3 pp 55 - 111. (Ed)

Henze M., Harremoes P., Jansen J. C. et Arvin E. Wastewater Treatment
(biological and Chemical processes). Springer
- Verlag, Berlin. 383 p.

 Hutchinson G. L. et Davidson, E. A. (1993). Processes for Production and

Consumtion of Gaseous Nitrogen Oxides in Soil. Ed. in Agricultural
Ecosystem Effects on trace Gases and Global Climate Change. Edited by
Am. Soc. Agronomy ; Crop Sic. Soc. Am et Soil Scie Soc. Am. 677 S.
Madison USA. pp 79 - 93
 Iwai S. & Kitao T. (1994). Wastewater treatment with microbial films.
Technomic Publishing Co. Inc. Lancaster, Pennsylvania 184 pp.

 Kerrn-Jespersen J.P. & Henze M. (1993). Biological phosphorus uptake

under anoxic and aerobic conditions. Wat. Res. vol. 27 No 4 pp 617-624.

 Knowles R. (1982). Denitrification. Microbiol Rev. 46 (1) : 43-70.

 Kshirsagar M., Gupta A.B. et Gupta S.K. (1995). Aerobic denitrification

studies on activated sludge mixed with Thiosphaera pantotropha .
Environ. Tech. 16 : 35 - 43.

 Lipschultz, F., Zafiriou O.C., Wofsy F.C., McElroy, M.B., Valois F.W. et
Watson S.W. (1981). Production of NO and N2O by soil nitrifying bacteria.
Nature (London) 294 : 641 - 643.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA

 Lloyd D., Boddy L. et Davies K.J.P. (1987). Persistence of bacterial

denitrification under aerobic conditions : the rule rather than the
exception. FEMS Microbiol. Ecol. 45 : 185 - 190.

 Masuda, S. ; Watanabe, Y. et Ishiguro, M. (1991) . Biofilm properties and

simultaneous nitrification and denitrification in aerobic rotating
biological contactors . Wat. Sci. Tech. 23 : 1355 - 1363 .

 Menoud p., Wong C.H., Robinson H.A., Farquhar A., Barford J.P. et Barton
G.W. (1999). Simultaneous nitrification and denitrification using
SIPORAXTM packing. Wat. Sci. Technol. 40 (4/5) : 153 - 160.

 Muller N. (1998). Implementing biofilm carriers into activated sludge

process - 15 years of experience. Wat. Sci. Technol. 37 (9) : 167 - 174.

 Nelson, D. W. (1982). Gaseous losses of nitrogen other than through

denitrification. P. 327

- 363. Dans F.J. Stevenson (ed.) Nitrogen in Agricultural Soils . Agron.

Monogr. 22 ASA, Madison, USA.

 Nelson, D. W. et Bremner, J.M. (1970). Gaseous products of nitrite

decomposition in soils.
 Soil Biol. Bioche. 2 : 203 - 215.
 Papen H., von-Berg R., Hinkel I., Thoene B. et Rennenberg H. (1989).
Heterotophic nitrification by Alcaligenes faecalis : NO2-, NO3-, N2O and
NO production in Exponentially Growing Cultures. Appl. Env. Microbiol.
55 (8) : 2068 - 2072.

 Patureau D., Bernet N. et Moletta R. (1997). Combined nitrification and

denitrification in a single aerated reactor using the aerobic denitrifier
Comamonas sp. stain SGLY2. Wat. Res. 31 (6) : 1363 - 1370.
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
 UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE ICA
FACULTAD DE ING. AMBIENTAL Y SANITARIA