LDL COLESTEROL
TRIGLICERIDOS
VLDL COLESTEROL
SIGNIFICACION CLINICA
El contenido aproximado de colesterol en cada
familia de lipoproteínas es (en % por unidad de
peso):
1% en los quilomicrones
18% en las VLDL
50% en las LDL
23% en las HDL.
Dado que cada familia posee distinta actividad
biológica, el significado clínico de un aumento de
colesterol depende de la o las lipoproteínas que se
encuentran en exceso.
los mecanismos reguladores de los niveles
plasmáticos de lipoproteínas son muy complejos y
pueden ser afectados por múltiples factores
(genéticos, ambientales, fisiológicos o patológicos),
siendo posible encontrar valores de colesterol total
cercanos al rango normal acompañados de
alteraciones en las fracciones lipoproteicas
SIGNIFICACION CLINICA
Las HDL y las LDL han sido las más estudiadas por su importante actividad
biológica:
- las LDL, producto del metabolismo de las VLDL en plasma, son las
encargadas del transporte del colesterol exógeno (y en mucho menos
proporción, endógeno) hacia el interior de las células;
- las HDL, sintetizadas en el hígado, remueven el colesterol no utilizado por
las células (dentro de ciertos límites de concentración), transportándolo hacia
el hígado para su degradación.
LDL COLESTEROL
SIGNIFICACION CLINICA
El exceso de colesterol de LDL con respecto a un valor crítico (1,9 g/l) debe
ser considerado como factor de riesgo para el desarrollo de enfermedad
cardíaca coronaria, considerando que el efecto protector de las HDL sólo
parece tener relevancia dentro de cierto rango de concentraciones de
colesterol circulante.
Valores aislados de colesterol de HDL o de LDL no pueden tomarse como
índices predictivos de riesgo, sino que es necesario conformar un perfil
lipídico con los valores de colesterol total, colesterol de HDL y colesterol de
LDL.
ANALIZO ES NO LDL
CT = HDL + LDL + VLDL
LDL COLESTEROL LDL = CT – HDL – VLDL
LDL = CT – NO LDL
FUNDAMENTO SEDIMENTO = CT - SOBRENADANTE
LDL = CT – NO LDL
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL o β-lipoproteínas) se separan del suero
precipitándolas selectivamente mediante el agregado de polímeros de alto peso
molecular.
Luego de centrifugar, en el sobrenadante quedan las demás lipoproteí nas (HDL y
VLDL); el colesterol ligado a las mismas se determina empleando el sistema
enzimático Colesterol oxidasa/ Peroxidasa con colorimetría según Trinder
(Fenol/4-AF).
Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se
obtiene el colesterol unido a las LDL.
REACTIVOS PROVISTOS
Reactivo A (Reactivo Precipitante): solución 1 g/l de sulfato de polivinilo disuelto
en polietilenglicol (PM: 600) al 25%, pH 6,7
ANALIZO ES NO LDL
CT = HDL + LDL + VLDL
LDL COLESTEROL LDL = CT – HDL – VLDL
LDL = CT – NO LDL
FUNDAMENTO SEDIMENTO = CT - SOBRENADANTE
LDL = CT – NO LDL
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL o β-lipoproteínas) se separan del suero
precipitándolas selectivamente mediante el agregado de polímeros de alto peso
molecular.
Luego de centrifugar, en el sobrenadante quedan las demás lipoproteí nas (HDL y
VLDL); el colesterol ligado a las mismas se determina empleando el sistema
enzimático Colesterol oxidasa/ Peroxidasa con colorimetría según Trinder
(Fenol/4-AF).
Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se
obtiene el colesterol unido a las LDL.
REACTIVOS PROVISTOS
Reactivo A (Reactivo Precipitante): solución 1 g/l de sulfato de polivinilo disuelto
en polietilenglicol (PM: 600) al 25%, pH 6,7
PROCEDIMIENTO
SEPARACON FRACCION
En un tubo de Kahn, colocar: SOBRENAD NO LDL
Muestra 200 ul
Reactivo A 100 ul
Homogeneizar durante 20 segundos
Dejar 15 minutos en un baño de agua a 20-25o C.
Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m.
Separar inmediatamente el sobrenadante.
SEDI LDL
Usar el sobrenadante como Muestra para el ensayo colorimétrico
COLORIMETRICO
En 3 tubos marcados B, S y D colocar:
Blanco Standar Muestra
Sobrenadante - - 50 ul
Standard - 10 ul –
Reactivo Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar e incubar 10 minutos a 37°C
Leer a 505 nm en espectrofotómetro o en colorímetro con filtro verde (490-530
nm), llevando a cero con el Blanco.
CALCULO DE LOS RESULTADOS LDL
Vol muestra: 200 ul
CALCULO DE LOS RESULTADOS Vol Reactivo Precipitante: 100 ul
XXXLDL Colesterol mg% = D x f f = S VFE VRE VS Vol Sobrenadante: 100 ul
XXX = 2OO mg% x VFE x VRSb x VSt Vol RVO Trabajo Colestat enzimático : 2 ml
VM VRSt VSb Vol final de reacción: 2,1 ml
VFSb = volumen final de extracto = 0,3 ml
VM = volumen de muestra procesada = 0,2 ml
VRSb = volumen de reacción con Sobrenadante = 1.05 ml
VRS = volumen de reacción con Standard = 1,01 ml
VS = volumen de Standard en la reacción = 0,010 ml
VSb = volumen de SOBRENADANTE(extracto) en la reacción = 0,05 ml
Si se emplean volúmenes de Reactivo diferentes de 2 ml el factor varía y debe ser calculado
nuevamente, reemplazando en la fórmula VRE y VRS.
CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS PARA
DETERMINAR LDL
Según la fórmula de Friedewald; CT = HDL + LDL + VLDL
CT = HDL + LDL + TGL /5 VLDL = TGL/5
LDL = CT – T/5 – cHDL
LDL = 153.84 – 88.8/5 – 45
LDL = 153.84 – 17.76 - 45
LDL = 91,08
El resultado de LDL es 91,08%
VALORES DE REFERENCIA
El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee los
siguientes valores de LDL colesterol en relación al riesgo de contraer enfermedad
cardíaca coronaria (ECC):
- Riesgo bajo o nulo (sujetos normales): valores de LDL colesterol menores de 1,29
g/l.
- - Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad de contraer ECC):
valores entre 1,30 y 1,89 g/l.
- - Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer ECC): valores de LDL
colesterol ≥ 1,90 g/l.
LDL-colesterol:
Valores sospechosos a partir de: 150 mg/dL
Valores elevados a partir de : 190 mg/dL
VALORES NORMALES
TRIGLICERIDOS
SIGNIFICACION CLINICA
Triglicéridos: son moléculas conformadas por un "esqueleto" de glicerol al
cual se esterifican cadenas de ácidos grasos. Constituyen un importante
combustible metabólico y se almacenan en cantidades variables en los
adipocitos, donde son suceptibles a la hidrólisis enzimática.
Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también producidos en
forma endógena a partir de los carbohidratos.
Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las hiperlipidemias.
Estas enfermedades pueden tener origen genético o ser secundarias a otras
tales como nefrosis, diabetes mellitus y disfunciones endócrinas.
El aumento de triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en
enfermedades ateroscleróticas.
TRIGLICERIDOS
FUNDAMENTOS DEL METODO
El esquema de reacción es el siguiente:
Triglicéridos lipoprotein lipasa glicerol + ácidos grasos
Glicerol + ATP glicerol kinasa glicerol-1-P + ADP
Glicerol-1-fosfato + O2 GPO H2 O2 + dihidroxiacetonafosfato
2 H2 O2 + 4-AF + clorofenol POD quinonimina roja
TRIGLICERIDOS
PROCEDIMIENTO
1. Extra una muestra de sangre del paciente con el tubo rojo. Centrifugarlo por 10 minutos.
2. En tres tubos marcadas B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
3. Mezclar y esperar 5 minutos en temperatura ambiente.
4. Medir la absorbancia de los tres tubos en 500 nm de longitud de onda.
5. Anotar y calcular los resultados.
TRIGLICERIDOS CALCULOS
RESULTADO
Tubo 1: 0.000
Tubo St: 0.045
Tubo Muestra : 0.020
Trigliceridos (mg/dl) = D x F
F = 200 / Ab St
F = 200 / 0.045
F = 4444
Trigliceridos (mg/dl) = 4444* 0.020
= 88,8 mg/dl
CONVERSION DE UNIDADES
Triglicéridos (g/l) = 0,01 x Triglicéridos (mg/dl)
Triglicéridos (mg/dl) x 0,0113 = Triglicéridos (mmol/l)
TRIGLICERIDOS
VALORES DE REFERENCIA
El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee
los siguientes valores de Triglicéridos:
Deseable: < 1,50 g/l
Moderadamente elevado a elevado: 1,50 - 1,99 g/l
Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
Muy elevado: ≥ 5,00 g/l
LIPOPROTEINAS
Lipoproteínas: Son estructuras formadas por lípidos y proteínas, permiten
que los lípidos sean transportados por la sangre en forma de TAG, colesterol,
etc. Generalmente son medidas cuando existe hipercolesterolemia o
hipertrigliceridemia (concentraciones excesivas de colesterol o TAG en la
sangre).
Para analizar las lipoproteínas deben ser separadas, por ultracentrifugación
de la sangre o por precipitación.
Su medición junto con la de otros lípidos permite el diagnóstico de
hiperlipoproteinemia primaria o secundaria.
FOSFOLIPIDOS
Fosfolípidos: Los fosfolípidos (combinaciones de lípidos con fosfatos) son otro
componente de las membranas plasmáticas. Su presencia en la sangre se
puede determinar mediante métodos químicos (generalmente la medición del
contenido de fosfato) o mediante métodos enzimáticos (hidrólisis de los
fosfolípidos y medición de alguno de los productos resultantes como glicerol,
fosfato, etc.)
