Informe de la práctica: Levaduras
Perteneciente a:
María del Carmen Mendoza Niemes
Catedrática:
Ing. Karina Ponce
Asignatura:
Sistemas Biológicos Laboratorio
NRC: 5050
Fecha: 11/08/2018
1. Título:
Identificación microscópica de levaduras (células eucariotas) y su reproducción (gemación)
desde una solución de levadura y azúcar.
2. Introducción:
Los hongos son organismos eucariotas que no realizan fotosíntesis. Las plantas y los
animales están estrechamente ligados a ellos ya que se asemejan a los mismos más no se
consideran como parte de ninguno de estos dos grupos. (Audesirk, Audesirk, Byers, 2013).
Existe una gran variedad de hongos. Su cantidad se encuentra alrededor de 100.000
especies de hongos . Sin embargo, esta cantidad representa únicamente una fracción del
valor real de la diversidad de estos organismos. Las especies de hongos se clasifican en
cinco: Chytridiomycota, Glomeromycota, Zygomycota, Basidiomycota y Ascomycota.
(Audesirk, Audesirk, Byers, 2013).
Las levaduras forman parte del grupo de Ascomycota (Hongos en saco). Las levaduras
difieren de otros hongos ya que no están compuestas por hifas. Son unicelulares y se
reproducen de forma no sexual por gemación. El brote involucra una distribución desigual
del citoplasma durante la citocinesis. (Mader, 2008).
Las levaduras, como Saccharomyces cerevisiae, se utilizan durante la producción de vino y
cerveza debido a que durante su fermentación, producen alcohol. (Mader, 2008) Esta
fermentación se da en azúcares o fuentes de carbono y su crecimiento sobre diferentes
fuentes de nitrógeno , vitaminas, perfiles de crecimiento a diferentes temperaturas y a altas
concentraciones de azúcar, hidrólisis de úrea y resistencia a antibióticos.( Kurtzman, 1999).
También son útiles para que el pan se eleve gracias al dióxido de carbono que emiten.
(Mader, 2008).
Figura 1: Visualización de productos elaborados
mediante la fermentación.
Fuente: [Link]
con-quesos/
3. Hipótesis:
La muestra tomada de una solución de levadura y azúcar, al ser observada
microscópicamente, presenta una forma de reproducción asexual llamada gemación.
La muestra tomada de una solución de levadura y azúcar, al aplicarle una tinción
simple con azul de metileno y posteriormente ser observada de forma microscópica,
presenta morfología ovoide y forma de reproducción asexual, llamada gemación.
4. Objetivos:
4.1 Objetivo General:
Identificar de forma microscópica levaduras (células eucariotas) y su reproducción
(gemación) desde una solución de levadura y azúcar.
4.2 Objetivos Específicos:
Distinguir estructuras de levaduras de forma microscópica en base a bibliografía
confiable.
Debatir con criterio sobre la reproducción de levaduras por gemación en base a
fundamentos confiables y comprobados.
Interpretar los efectos de las levaduras mezcladas con azúcar, utilizando bibliografía
confiable.
5. Materiales:
5.1 Reactivos:
Azul de metileno.
Azúcar.
Alcohol potable al 96%.
Alcohol antiséptico.
Agua destilada.
5.2 Materiales de protección personal:
Mandil.
Guantes.
5.3 Insumos:
Placas portaobjetos.
Pipetas desechables.
Mecheros de alcohol.
Papel especial para microscópios.
Algodón y fósforos.
Hisopos de madera estériles.
Vaso de precipitación de 500ml.
Vasos de precipitación de 50ml.
Bandeja para tinciones.
5.4 Equipos:
Microscopios ópticos de campo claro( lentes objetivo de 4X, 10X y40X)
6. Procedimiento:
Preparación de montaje de muestras para observación por gemación.
1. Con la ayuda de una pipeta desechable, se vertió una gota de solución en una placa
portaobjetos y cubrir con una placa cubreobjetos.
Preparación de frotis y tinción con azul de metileno u otro colorante simple.
2. Se vertió una gota de solución en otra placa portaobjetos y se fijó con calor
utilizando un mechero de alcohol.
3. Posteriormente, se llevó la muestra a la bandeja de tinción y se tiñó por 30 segundos
con azul de metileno.
4. Se eliminó el exceso de colorante sobre la bandeja de tinción, con la ayuda de una
piceta y secar con ayuda de la llama del mechero.
Observación de placas al microscópio:
5. Se observó la placas al microscopio óptico de campo claro con los objetivos de 4X,
10X, 40X y 100X y se identificó levaduras con su respectiva estructura y
reproducción.
7. Resultados:
Figura 2: Visualización de levadura
Muestra: Solución de levadura y azúcar
Marca de microscopio: Leica
Lente: 4X
Figura 3: Visualización de levadura
Muestra: Solución de levadura y azúcar
Marca de microscopio: Leica
Lente: 10X
Figura 4: Visualización de levadura con
forma esférica.
Muestra: Solución de levadura y azúcar
Marca de microscopio: Leica
Lente: 40X
Figura 5: Visualización de levadura con
forma oval.
Muestra: Solución de levadura y azúcar
Marca de microscopio: Leica
Lente: 100X
Tinción: Simple con azul de metileno
8. Discusión:
Según Madigan, 2008, las levaduras poseen forma oval y esférica. Durante esta práctica de
laboratorio se pudo evidenciar esta teoría ya que, al visualizarse las levaduras en el
microscopio, se pudo constatar su forma esférica en la muestra fresca, mientras que en la
muestra con tinción simple, se pudo evidenciar la forma oval de la misma.
Según Madigan, 2008, las levaduras se reproducen por gemación, donde la nueva célula se
desarrolla como una pequeña yema que crece junto a la célula madre, la cual crece hasta
madurarse y separarse de ella. En esta práctica de laboratorio se pudo constatar esta teoría
ya que al observar la muestra de solución de levadura de pan con azúcar en el microscopio
se visualizaron agrupaciones de dos a tres esferas, lo cual se deduce que correspondían a las
células madres con sus respectivas células hijas en forma de protuberancia.
Según Kurtzman, 1999, las levaduras tienden a proliferarse con mayor facilidad en un
medio concentrado de azúcar, generando movilidad. Durante el estudio de laboratorio
realizado, se pudo constatar esta teoría ya que en la muestra tomada de solución de levadura
sin utilizar tinción, se pudo observar mayor cantidad de células madres con sus respectivas
yemas en su superficie, además de su constante movilidad.
9. Conclusiones:
Dentro de la muestra de solución de levadura con azúcar, las levaduras presentes
poseen forma esférica y ovoide.
Dentro de la muestra de solución de levadura con azúcar, las levaduras presentes se
reproducen por un método asexual llamado gemación, donde la célula madre
desarrolla una yema en su superficie que se desprende de ella una vez alcanzada su
madurez.
Dentro de la muestra obtenida de una solución de levadura con azúcar, las células
presentes se mueven con gran facilidad, además de poseer mayor cantidad de las
mismas.
10. Recomendaciones:
Si se desea observar levaduras en movimiento, se debe realizar una muestra
fresca sin tinción.
Al momento de realizar la tinción con azul de metileno, se debe procurar no
calentar mucho la muestra, para así evitar que se altere su estructura.
11. Bibliografía:
Audesirk T, 2008, La vida en la Tierra, Editorial [Link] Edición, USA.
Mader S, 2013, Laboratory Manual to accompany Biology Mc Graw Hill. Eleven Edition
USA.
Madigan M, 2004. Brock Biologia de los microorganismos. Pearson Prentice Hall, Décima
Edición, España.
Kurtzman, 1999. The Yeast, A Taxonomic Study, J. W. Fell.
