TEMA 20: TOMA DE MUESTRAS EN EL LABORATORIO PARA REALIZACIÓN DE ANALISIS

CLINICOS. PREPARACIÓN Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS PARA SU ANALISIS INMEDIATO O

DIFERIDO.

1. INTRODUCCIÓN

La obtención de muestras biologicias, su procesamiento y conservación (si procede) son el

primer paso en las determinaciones de Analisis Cínicos.

Las muestras biológicas se pueden definir como todas aquellas sustancias liquidas, solidas e
incluso gaseosas que se obtienen de los fluidos o tejidos corporales para su determinación y
estudio, con el objeto de detectar patologías, confirmar un diagnostico o seguir la evolución de
un proceso o de un tratamiento. Las principales son sanre, orina, heces, liquidos corporales y
otros (esputos, exudados, cortes de tejido, etc.)

Sobre cada sustancia a analizar se pueden realizar diveros tipos de determinaciones:

- Hematologicas: se determinan parametors relacionados con las células sanguíneas asi

como las características especificias de la sangre (velocidd de sedimientaión, Hg, etc.)
- Bioquimicas: se investigan los metabolitos y sustancias presentes en la muestra
(glucosa, urea, proteínas, etc.)
- Microbiologicas: se busca la presencia de aentes biológicos productores de
enfermedades infecciosas (bacterias, hongos, virus…)
- Inmunológicas: consiste en la investigaci´n de antígenos y anticuerpos que aparecen en
diversas enfermedades, infecciosas o no. Se llaman serológica si la muestra es suero
sanguíneo.

2. NORMAS GENERALES EN LA FASE PREANALÍTICA

Recibe el nombre de fase preanalitica el conjunto de etapas del trabajo de laboratorio que
abarcan desde la recogida de la muestra hasta el análisis propiamente dicho. Estas estapas
incluyen:

2.1 Solicitud

Los volantes de solicitus o formularios de solicitud son los documentos en formato papel o
informatizado que deben ser cumplimentados debidamente por el facultativo indicando el
estudio analítico que se requiere. Cada muestra debe ir acompañada de un volante
cumplimentado con una serie de datos como la identificación de la petición, el tipo de
petición, datos del paciente, datos administrativos, pruebas o estudios que se solicitan y sobre
que muestra, etc.

2.2 Etiquetado

Es fundamental la identificación de las muestras biológicas. Puede ser manual (+ errores) o

impresa (numeración correlativa y con códigos de barras).

2.3 Obtención

Las muestras deben obtenerse en condiciones de máxima asepsia y deben eeguir las normas
de seguridad e higiene.
Desde el punto de vista de la seguridad se deben evitar daños y riesgos en el paciente y en el
personal sanitario que extrae la muestra, se debe informar al paciente del procedimiento al
que se le va a someter y se deben utilizar dispositivos de obtención adecuados.

Desde el punto de vista de la calidad de la muestra esta debe ser homogénea, representativa
del proceso patológico, y se debe asegurar la viabilidad de la muestra evitando su
contaminación utilizando recipientes de muestras adecuados, limpos y esteriles además de
utilizar conservantes cuando sea necesario.

2.4 Transporte

Puede ser:

- Realizado por el propio paciente cuando las muestras son tomadas en el propio domicilio.

- Intracentro y realizado por personal sanitario

- Intercentro y realizado por personal no sanitario. En este caso los recipientes deben ser
estancos, herméticos, opacos y aislantes térmicos.

Para el transporte de muestras infecciosas entre laboratorios la muestra introducida en su

contenedor debe ser transportada utilizando recipientes especiales que sigun normativas
internacionales del transporte de sustancias biopeligrosas. Los contenedores usados en este
caso son:

- Recipiente primario: es el que contiene a la muestra. Deben ser estancos y estar

correctamente indentificados.
- Recipiente secundario: tiene que ser estanco y ha de llevar material absorbente entre
el y el recipiente primario en cantidad suficiente para absorber todo el liquido en caso
de dearramamiento. Si no hay recipiente terciario, el recipiente de protección tiene
que llevar una etiqueta con la frase “muestra de diagnostico” y el resto de pictogramas
reglamentarios, según lo que contenga el paquete.
- Recipiente terciario: tiene que ser resistente a roturas y golpes. Tiene que llevar
unaetiqueta en la que figuren las direcciones del remitente y del laboratorio
destinatario, asi como otra con la frase “muestra de diagnostico”.

2.5 Conservación

Se denomina conseración de muestras a los procedimientos que van dirigidos a prologar la

vaibilidad de la muestra y por tanto retrasar su deterioro. Se puede realizar en 2 momentos.

- Antes del análisis: fundamental para que la muestra no se deteriore y asegurar la calidad de
los resultados analíticos.

- Después del análisis: para realizar determinaciones analíticas extras en el caso que fuese
necesario. Solo pueden realizarse en muestras que soporten la congelación .

La conservación de las mmuestras es necsario para prevenir la muerte de las células, cambios
bioquímicos, crecimiento microbiano, que la luz desencadene procesos fotoqimicos que
alteren distintos compuestos analizables, evaporación de gases y que se produzcan fenómenos
osmóticos entre las células y el medio que las rodea.

Se puede realizar de distinas maneras:

 Refrigerando la muestra (4ºC)

  Congelando la muestra (cuando no contiene células: se pueden conservar muestras
hasta varios meses después de su análisis.
 Añadiendo conservantes
 Tapando adecuadamente los contenedores donde se introducen las muestras.
 Protegiendo de la luz

3. MUESTRAS DE SANGRE

Es una de las muestras que más e analiza en los laboratorios por su facilidad de obtención y
por su utilidad clínica. En la sangre se realizan todo tipo de determinaciones. Pueden hacerse
sobre sangre total o bien sobre suero o plasma sanguíneo.

El plasma es el liquido extracelular de la sangre y se obtiene por centrifugación de esta una vez
que se le ha añadido una sustancia anticoagulante y posterior separación de la capa celular. Si
no se añade anticoagulante, la sangre coagula al extraerse, y al centrifugar se obtiene una
fracción liquida desporvista de fibrinógeno y factores de la coagulación llamada suero
sanguíneo.

En general la sangre total se utiliza para determinaciones hematológicas (recuento celular),

bioquimicos (glucemia, colesterolemia in situ) y microbiológicas (hemocultivo), el suero para
pruebas bioquímicas, serológicas y algunas hematológicas (estudio del hierro) y el plasma para
estudios hematológicos de coagulación.

La sangre a extraer puede ser venosa, capilar o arterial y para la mayoría de las
determinaciones no hay diferencias entre sangre venosa y arterial, por lo que suele utilizarse
aquella por su facilidad en la obtención. Pero algunas en algunas determinaciones si existen
diferencias entre ambos tipos de sangre, como los gases sanguíneos donde lo más adecuado es
sangre arterial.

3.1 Punción venosa (Flebotomia)

Es la técnica de recogida sanguínea más habitual. El lugar preferente para la venopunción es la

región antecubital ( venas cubital media, basílica y cefálica), ya que aquí la piel es fina y móvil y
las venas son de grueso calibre y relativamente superficiales. La vena cubital media es la que se
usa con más frecuencia por ser grande y la menos dolorosa. Como segunda elección esta la
vena cefálica y luego la basilica. Cuando no es posible la punción en la zona antecubital hay
que buscar otros puntos. Por ejemplo en las venas superficiales del dorso de la mano o pie
(ancianos o pacientes con multiples extracciones, etc.). también en la superficie flexora del
antebrazo, área de la muñeca encima del pulgar, nudillos de los dedos pulgar o índice, etc.

3.1.1 Equipos y reactivos

- Agujas: la elección depende de la cantidad de sangre a extraer y de las características del

paciente. Las m´s usadas son las de los calibres 19, 20 y 21.

- Jeringas o tubos de vacio: las jeringas son de plástico desechable de un solo uso y se usan en
personas con venas finaso de paredes frágiles (pediatría). En el sistema de tubos de vacio, una
aguja se adosa a un adaptador especial que permite acoplar los tubos. El volumen de sangre
que se extrae depende del tamaño del tubo y del vacío existente. Este es el método más
usado.
- anticoagulantes: las determinaciones que precisan como muestra sangre total o plasma
necesitan la adición de anticoagulantes en las jeringas o tubos de vacio. Suelen venir
incorporados a los tubos de vacio y se identifican mediante el color del tapon del tubo según
un código internacional.

Si no lleva anticoagulante el tapon es de color rojo, se utiliza para estudios BQ en suero.

EDTA: tapon ivoleta. Quela el calcio inhibiendo el proceso de coagulación. Se utiliza para
hemograma, recuentos celulares y formula leucocitaria.

Heparina: tapon verde. Neutraliza la trombina y otros factores de coagulación. Se utiliza para
gasometrías.

Citrato sódico: evita la ionización del calcio e impide su unión a los factores de coagulación.
Azul claro (1/9) para estudios de coagulación en plasma sanguíneo. Tapon negro (1/4)
determinación de VSG en plasma sanguíneo.

Fluoruro sódico: tapon gris. Conservante de la glucosa para muestras de suero. Evita el
consumo de glucosa por parte de los hematíes.

- Resto del material: compresor de goma elástica, desinfectante, gasas y esparadrapo.

3.1.2 Técnica para la punción venosa

- preparación del pacinte: comporbar datos, identificación, comprobar si esta en ayunas,

sosiego y colocación correcta del paciente.

- selección del lugar de punción

- colocación del compresor: estasis del retorno venosa para facilitar la punción. Se debe
colocar entre 7,5 y 10 cm por encima del lugar deextracción. No dejar puesto más de 2 min.

- limpieza de la zona de extracción: alcohol 70º o Hibitane (etanol + clorhexidina)

- Inspección de la aguja y la jeringa o tubo de vacio

- Realización de la punción: si es con tubos de vaio el tubo debe llenarse hasta que se agote el
vacio y cese el flujo de sangre. Se saca del soporte y se invirte 2 o 4 veces con suavidad para
mezclar la sangre con el anticoagulante. Si se realiza on jeringa se llenan los tubos haciendo
que resbale la sangre por las paredes o pinchandolos si son tubos de vacío.

El orden de llenado es:

1º Hemocultivo

2º BQ: rojo. Suero

3º Coagulación: azul

4º Hemograma EDTA (Violeta)

5º Gasometria Heparina (verde)

- pasos finales: una vez realizada la extracción, l paciente puede abrir la mano y se afloja el
ompresor para que se normalice la circulación. Se toma una compresa de gasa impregnada de
desinfectante y se aplica sobre la aguja, que se saca con cuidado. Esta compresa ha de
mantenerse firmemente durante unos 10 minutos para evitar la hemorragia. La aguja se quita
de la jeringa o tubo de vacio y se deposita en un contenedor especial. Por ultimo, se anota en
el volante quien extrae la sangre, hora y lugar de la extracción.

3.1.3 Precauciones especiales

- Debe evitarse pinchar en areas dond haya cicatrices extensas o quemaduras. En caso de
mastectomía nunca debe pincharse en el brazo donde se realizó.

- Las muestras obtenidas con hematomas pueden dar resultados erróneos. En caso de no
haber otra vena disponible, se obtendrá la muestra del segento de la vena distal al hmatoma.

- si el paciente tiene instaurada terapia intravenosa, la muestra de sangre venosa se obtiene

del brazo opuesto.

- para evitar los hematomas se debe evitar atravesar la vena. No obstante, la aguja ha de
atravesar la pared superior de dicha vena totalmente, ya que, de nose rasi, la sangre escapa
hacia los tejidos blandos que rodean la vena. También es importante quitar el compresor antes
que la aguja.

3.2 PUNCIÓN CUTANEA

Se realiza cuando se emplean micrometodos (poca cantidad de muestra) como en el caso de

neonatos, o si hay dificultades para punción venosa. Puede realizarse en el pulpejo del dedo,
lóbulo de la oreja o en el talon del pie (recién nacidos).

La sangre que se obtiene por punción cutánea es una mezcla de sangre de arteriolas, vénulas y
capilares además de liquido intersticial y liquido intracelular, por tanto no es exactamente
sangre capilar aunque a veces se emplee ese termino. Hay diferencias significativas entre las
muestra de punción cutánea y las de punción enosa, ya que los resultados obtenidos para
algunos parámetros como potasio, proteínas totales y canlcio son más altos que en el caso de
punción venosa. También existen diferencias en los recuentos hematológicos y en las pruebas
de coagulación . asimismo el grado de hemolisis es superior en las cutáneas que en las enosas.

Se usan lancetas esteriles y microtubos y capilares heparinizados.

3.2.1 Punción en el talón

Se realiza generalmente en niós menore de 1 año que todavía no caminen. Es básico eviar
puncionar el hueso calcáneo por el consiguiente riesgo de osteocondritis. Para ellos hay que
seguir las reglas siguientes:

- Pinchar en la parte más interna o externa de la superficien plantar del talon, por
dentro de una línea imaginaria trazada hacia atrás desde la línea media del dedo gordo
hasta el talon o bien por fuera de una línea imaginaria trazada hacia atrás desde ele
spacio entre el cuarto y quinto dedo del pie hasta el talon.
- No pinchar a mas de 2,4 mm de profundidad
- No pinchar en la curvatura posterior del talon porque a ese nivel la distancia de la piel
al hueso es menor.
- No pinchar en lugares donde se hallan hecho punciones anteriores que puedan estar
infenctadas.

3.2.2 Punción en el dedo

Se reserva para adultos o niños de más de 18 meses. La punción se realiza en la superficie
palmar de la falange distal de los dedos de la mano, generalmente

3.2.3 Procedimiento para la puncion

- preparación de la zona: favorecer la vasodilatación mediante un ligero masaje o cubrir la zona

durante 3 minutos con un paño húmedo caliente. Posteriormente desinfectar la zona de
punción con alcohol de 70º y secar con una gasa esteril para evitar que los residuos de alcohol
produzcan una hemolisis posterior de la muestra.

- recogida de sangre: después de preparar el punto elegido se sujeta la zona y se punciona con
la lanceta formando un ligero angulo . se han de desechar las dos primeras gotas para eitar la
hemodilución por el liquido tisular. Recoger las siguientes cen el tubo o el capilar si la sangre
fluye normalmente. El flujo de sangre será mayor si se mantiene en posición declive el lugar de
la punción y si se aplica duna presión suave y constante al tejido circundante. No debe
presionarse fuertemente porque puede producir hemolisis y aumentar la cantidd de liquido
tisular que contamina la muestra. Una vez finalizada la recogida se eleva la zona y se hace
presión con gasa esteril hasta que deje de sangrar.

3.2.4 Muestras cutáneas para Ph Y gases sanguíneos

Se recoge en tubos capilares de vidrio heparinizados que han de sellarse para evitar que el
oxigeno del aire aumente los valores de la presión parcial de oxigeno de la muestra.

Los tubos capilares se suelen cerrar insertándolos en un bloque de plastilina y haciéndolos

girar varias veces entre el dedo pulgar y el índice para asegurar el sellado. Una vez sellado uno
de los extremos, se introduce una barra magnética antes de cerrar el extremo opuesto. Con la
barra puede mezclarse la sangre antes del análisis moviendo un iman a lo largo del tubo.

Estas muestras deben colocarse durante su transporte en un recipiente que contenta agua con
hielo para evitar que se produzcan cambios en el pH y en la PO2

3.2.5 Complicaciones de la punción cutánea

Las dos principales son la osteocondritis del calcáneo y los microabscesos de la piel. También
puede haber focos de calcificación de la piel del talon en recién nacidos que han sufrido
numerasas punciones en esa zona, aunque suelen desaparecer por si solos. En los dedos puede
aparecer infección y gangrena.

3.3 PUNCION ARTERIAL

Esta indicada para la determinación de pH y gases en sangre.

3.3.1 Preparación el paciente

Antes de la punción el paciente debe estar sentado y en reposo (por lo menos 10 minutos),
salvo caso de urgencia. Debe abstenerse de fumar o tomar broncodilataradores y
vasodilatadores y de recibir oxigenoterapia (si su estado lo permite)

3.3.2 Realización de la punción

La puncion se realiza sin compresor y con aguja y jeringa heparinizada. La presión arterial hace
que la jeringa se llene sola generalmente. En cuanto a la arteria a seleccionar, las posibilidades
son varias:
 - Arteria radial: es la más usada porque es una arteria pequeña de fácil acceso.
- Arteria humeral: es más grande pero más difícil de pinchar. Además esta cerca del
nervio mediano y existe peligro de alcanzarlo.
- Arteria femoral: es accesible y de mayor tamaño. La punción se realiza en la parte
superficial del muslo, cerca de la ingle. Hay mayor riesgo de infección, de hemorragia y
posible existencia de trombos.

3.3.3 Factores de la toma que influyen elos resultados

- Dilución con heparina: si se usa heparina en forma liquida en exceso se puede acidificar la
muestra de sangre. Por ello es importante que el volumen de sangre estraidose sea
estandarizado. Tiene que haber una correcta proporción heparina y sangre. Este problema no
existe usando jeringas con heparina en polvo.

- Burbujas de aire: pueden alterar la PO2.

- Refrigeración: hay que eliminar o limitar los procesos metabólicos para que la muestra de
sangre se mantenga en su estado actual. Ello se logra refrigerando la muestra por inmersión en
un recipiente de agua con hielo después de su extracción, de forma que se enfrie rápidamente
y disminuya la actividad metabólica de los leucocitos que son los que consumen más oxigeno.

- Tiempo: la muestra debe ser entregada en el laboratorio para su análisis antes de 15 minutos
después de extraerla o conservar en hielo si esto no es posible.

- Coagulos: tienden a formarse cuando resulta difícil la punción y la sangre no se mezcla bien
con la heparina o queda estancada en la aguja. También se forman cuando la jeringa contiene
una cantidad inadecuada de heparina.

3.3.4 Complicaciones de la punción arterial

- Hematoma: para prevenirlos hay que aplicar presión después de sacar la aguja en el lugar de
la extracción y manterla durante al menos 5 minutos.

- Arteroespasmo: es un reflejo de constricción transitorio de una arteria en respuesta al dolor.

- Trombosis: se forman cuando se deja una aguja colocada mucho tiempo en el mismo sitio
pero raramente en una puncion arterial aislada.

3.4 PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS SANGUÍNEAS

El procesamiento es el periodo comprendido entre la recogida de la muestra y su analsis.

Comprende varias etapas:

- Centrifugación:

Si es para plasma, la muestra debe centrifugarse antes de una hora desde su extracción
durante 10 minutos a unas 3000 r.p.m

Si es para suero, la sangre se deja coagular en el tubo a temperatura ambiente al menos 15

minutos. Se centrifuga después igual que el anterior.

- almacenamiento de muestras: depende del tipo de determinación que se va a realizar. Si la

muestra de suero o plasma no va a ser analizada en un plazo de 3-4 horas ha de ser refrigerada
o congelada después de centrifugarse y separarse de la fracción celular.
- Transporte de muestras: si la muestra se va a analizar en el mismo entro sanitario en el que
se ha obtenido, debe recibirse lo antes posible para completar su procesamiento. Mientras
que la muesetra este en transito se debe evitar la agitación para reducir la hemólisis, y se dbe
proteger de la luz, ya que esta puede alterar ciertas determinaciones (caso de la bilirrubina).

Algunas pruebas necesitan que la sangre se refrigere inmediatamente después de realizar la

punción vensoa y transportarse en hielo como amoniaco, fosfatasa acida, gases sanguíneos y
activad de renina.

Si las muestras se transportan a otro laboratorio, ha de hacerse en recipientes adecuados que

mantengan las coniciones de estanqueidad y temperatura usadas en el almacenamiento.

4. MUESTRAS DE ORINA

La orina es una muestra de gran utilidad en el laboratorio clínico. En una muestra de orina se
pueden realizar análisis bioquímicos, detectando metabolitos de manera cualitativa o
cuantitativa, y análisis microbiológicos. La utilidad clínica de la orina es:

- Diagnosticar infecciones del tracto urinario, mediante urocultivo.

- Ayuda al diagnóstico de aleraciones de alteraciones d la función renal.
- Ayuda al diagnostico de enfermadedes de otros sistemas, por ejemplo metabólicas,
endocrinas, hepáticas, etc.
- Control de la evolución de enfermedades renales y de otros sistemas.
- Diagnostico precoz de embarazo
- Determinaciones toxicológicas, como drogas.

4.1 OBTENCION Y TIPOS DE MUESTRA DE ORINA

La recogida de la orina puede ser realizada por el propio paciente cuando esta consciente o
por el personal sanitario en el caso de pacientes incapacitados, incoscientes, niños pequeños o
cuando se obtiene por procedimientos invasivos. En cualquier caso la recolección debe ser
adecuada utilizando un recipiente nuevo, limpio, seco y esteril. Se utilizan frascos o botellas
con tapon a rosca. E envio al laboratorio debe ser inmediato una vez finalizada la recogida. Si el
procesamiento no es inmediato se puede refrigerar durante varios días. El tipo de muestra de
orina depende por tanto del tipo de paciente y también del tipo de estudios a realizar.

4.1.1 Recogida de orina por procedimientos no invasivos

Es el procedimiento de recogida habitual de muestras de orina. Es realizado por el propio

paciente salvo en nenonatos.

- Orina de una micción al azar: se obtiene en servicios de urgencias hospitalarias con el

fin de realizar un estudio analito básico (tira reactiva y estudio del sedimento urinario).
El paciente debe limpiar la zona genital, para evitar contaminación bacteriana de la
piel porciones ultimas de la uretra y para eliminar restos de jabon que pueden dar
lugar a interferencias con los compuestos químicos. Se desechará la primera porción
de la orina, que arrastra las bacterias y se recoge en el recipiente la porción media de
la micción, descartando el final. En los casos de insuficiencia renal con oliguria/anuria
se recogerá toda la orina.
- Orina matutina: es la más útil y la más concentrada. El procedimiento de recogida es
igual que el anterior. Esta recogida proporciona resultados más fiables y es la muestra
de elección para realizar urocultivo y realizar un sistematico de orina
 - Orina de 24 horas: es una muestra de gran utilidad en el laboratorio de bioquímica.
Ocn ella se pueden cuantificar números metabolitos. La recolección se realiza en
contenedores de 2 o 3 litros. Se empieza arecoger por la mañana, desechando la
primera orina y se termina al dia siguiente a la misma hora, recogiendo en el
contenedor la primera orina de esta egunda mañana. Durante este periodo debe
conservarse refrigerada. Esta orina es valida para la cuantificación de metabolitos
urinarios como glucosa, proteínas, creatinina, urea, iones, metabolitos de
catecolaminas, citrato, etc. también se puede realizar un proteionagrama.
- Otras orinas cronometradas: para la cuantificación de albumina en orina es suficiente
con la recogida de orina e 8 horas. El paciente debe estar en reposo desde el dia previo
a la recogida. Para la cuantificación D-xilosa se dbe recoger orina de 5 horas y el
paciente debe estar en ayunas desde la noche del test y durante este.
- Para la recogida de orinas de pacientes pediátricos de corta edad se utilizan olsas de
recogida especiales con adhesivos ipoalergenicos aplicables a la piel periuretral.

4.1.2 Recogida de orina por procedimientos invasivos

A veces es necesario obtener muestras de orina libres de contaminantes uretrales.

- Aspiración suprapúbica: útil en caso de infección del tracto urinario por m.o anaerobios o en
infección urinaria en pacientes sondados. Se inserta una aguja a traes de la pared abdominal
cuando la vejiga está llena.

- Sondaje uretral o cateterismo vesical: introducción de una sonda por la uretra que llega hasta
la vejiga. Se usa en pacientes que no pueden orinar de forma voluntaria. La principal
complicación es la contaminación, provocando una infección urinaria nosocopial.
Normalmente esta muestra no se utiliza para urocultivo, solo para BQ.

4.2 CONSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS DE ORINA

La composición de la orina cambia significativamente durante su almacenamiento debido

principalmente a la acción bacteriana. Algunos cambios que ocurren en la orina son:

- Precipitación de acido urico

- Oxidación de sustancias como bilirrubina cuando la orina se exone a la luz y al aire.
- Cambios osmóticos: destrucción de hematíes
- Destruccion de cilindros

Debido a estas causas en ocasiones esta indicada la adición de aditivos a la muestra de orina, y
va a depender del tipo de análisis. Estos son:

- Acido clorhídrico: se añade a las orinas de 24 horas cuando se quieren determinar

catecolaminas y sus metabolitos, 5 HIAA, magnesio, plomo o cobre. El HCl también
evita la precipitación de iones y metales con lo cual se añade para cuantificación de
cobre, plomo o magnesio en orina. Para el análisis d metanefrinas y normetanefrinas
es necesario que el paciente se abstenga, durante varios días antes de la recogida de la
orina, de ingerir café, té y fármacos que estimulen la secreción de catecolaminas.
- El carbonato sódico: para alcalinizar orinas de 24 horas en las que se quiere
determinar urobilinogeno y uroporfirinas.
- Timol: estabiliza los componentes en orinas de periodos de más de 24 horas.
- Formaldehido: (en tabletas) retrasa la destrucción de elementos formes y cilindros y
no interfiere en el examen quimico ni microscópico.
 - Acido bórico: es bacterioestatico y se utiliza en el estudio microbiológico
- Otra forma de conservación de la orina para las sustancias fotosensibles es la
recolección en recipientes oscuros o cubrir la muestra con papel de aluminio.
Importante para el análisis de porfirinas en orina.

5 MUESTRAS DE HECES

La recogida de heces debe hacerse en un recipiente bien limpio lo suficientemente grande,

eitando siempre la contaminación con orina. Luego se traslada una parte con un depresor de
lengua al recipiente de transporte que ha de ser esteril. Debe recomendarse a los pacientes
que no toqun la parte interior del recipiente y que no lo llenen demasiado. El gas que con
frecuencia se acumula dbe liberarse gradualmente aflojando con cuidado la tapa para evitar
una liberación desagradable. En niños de hasta 2 años de edad se utiliza un sistema
comercializado que consiste en una bolsita que se adhiere a la zona anal del niño.

El análisis se realizará dentro de las 12 horas siguientes a la deposición manteniéndose hasta

entonces en nevera a 4ºC.

Para determinar la excreción fecal de una sustancia cualquiera en 24 horas se deben recoger
las heces al menos durante 3 días seguidos, debido a la gran variación de habitos intestinales.
Se calcula la producción de 24 horas diviendo la cantidad total por el número de días de
recogida.

5.1 HECES PARA ESTUDIOS BIOQUIMICOS

- Analiis de sangre oculta en heces: deben recogerse 3 alicuotas de las heces durante 3 días
consecutivos y conservar en refrigeración. Si se realiza el test quimico de guayaco es necesario
que el paciente siga una dieta libre de carne y vegetales verdes durante al menos 3 días para
evitar posibles interferencias con la Hb no humana y citocromos.

- Analisis del pH de las heces, cuerpos reductores, determinación de quimiotripsina y digestión

de principios inmediatos: debe recogerse las heces de un día en un recipiente limpio y esteril.

- Cuantificación de grasas en heces (test de Van de Kramer): recoger las heces de 3 días y dieta
extricta exeenta de grasas durante 6 días, exceptuando dos yemas de huevo cocinas y 6
cucharadas pequeñas de mantequilla al día. La conservación se realiza congelándolas hasta
que se lleven al laboratorio.

5.2 HECES PARA ANALISIS BACTERIOLÓGICO

El coporocultivo es el método utilizado para la investigación de bacterias en caso de sospecha

de gastroenteritis bacteriana. Es suficiente una única muestra de heces.

Son preferibles las heces de primera hora de la mañana y mejor antes de la administración de
antibióticos o angentes antidiarreicos.

Es importante la higiene de la zona rectal con jabon y agua antes de la recogida.

Se recogerán las heces de las partes mucosas, purulentas o sanguinolentas. Se mantendrán en

refrigeración hasta su procesamiento y en congelación cuando es para investigación de virus.

5.3 HECES PARA ANALISIS PARASITOLOGICO

Va dirigido a la búsqueda microscópica de huevos o formas de resistencia (ooquistes) de
protozoos y helmintos. También se pueden buscar formas vegetativas como trofozoitos de
algunos parasitos como guardias y amebas, formas larvarias de helmintos, etc.

Se recogen 3 porciones de heces de 3 días consecutivos en 3 recipientes diferentes. Si las

heces son diarreicas hab´ra que utilizar conservantes como el formol, si son formes
refrigeración hasta envio a laboratorio.

Para el estudio de parasitos es necesario concentrar la muestra como método preanalitico con
métodos de sedimientación o de flotación con sulfato de zinc.

Un estudio parasitológico especial que no requiere muestras fecales es el test de Graham para
investigación de Enterobius vermicularis u oxiuro. Se pone una tira de celofan transparente en
los márgenes anales y cuando pone los huevos retiramos y aplicamos en un portaobjetos.

6. LIQUIDOS BIOLÓGICOS

6.1 LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO

Es un liquido incoloro y transparente que se encuentra en el SN y que tiene la función de

proteger al cencéfalo y medula espinal de traumatismos.

Las muestras de LCR se obtienen por punción lumbar preferiblemente en ayunas.

Normalmente en la zona lumbar entre las apófisis espinosas L3 y L4. se hace con el paciente en
posición fetal. Se mide la presión del LCR con un manómetro acoplado a trocar o se vigila el
goteo normal o no del LCR.

Los riesgos de la punción son la infección o la descompresión brusca.

6.1.1 Estudios a realizar

Se toman 3 muestas de 2-4 ml de LCR en tubos esteriles para los estudios bq, celulares y
microbiológicos.

- Aspecto físico: si sale turbio suele ser por una umento de leucocitos por meningitis
bacteriana. I es de color rojo puede ser por punción traumatica y solo ha sido el primer
tubo, o por una hemorragia subaracnoidea reciente si todos los tubos presentan ese
color.
- Estudio BQ: comprende la deteriminación de glucosa y proteínas totales
- Estudio bacteriológico: si no se procesa inmediatamente ha de guardarse en estufa y si
es para diagnostico viral se puede refrigerar hasta 24 horas.
- Estudio celular: debe hacerse en la hora siguiente a la extracción. Para su tinción se
puede concentrar por centrifugación, filtración , sedimentación , etc.

6.2 LIQUIDOS DE LAS SEROSAS

- Pleura. Es una membrana serosa transparente que rodea el pulmón. Contiene el liquido
pleural.

- Pericardio: es una membrana fibroserosa que envuelve al corazón. Contiene el liquido

pericárdico
- Peritoneo: el peritoneo parietal reviste la apred de la cavidad abdominal mientras que el
peritoneo visceral cubre los órganos abdominales. El espacio que hay entre el peritoneo
visceral y parietal es la cavidad peritoneal que contiene un liquido soroso llamado liquido
peritoneal. La acumulación excesiva de este liquido se llama ascitis.

6.2.1 Obtención de muestras

La toma de muestras o paracentesis consiste en la aspiración de liquido de la cavidad

abdominal, torácica o pericárdica. Los liquidos serooso se coagulan con rapidez por lo que las
muestras se suelen recoger en tubos heparinizados.

- toracocentesis: se usa en el diagnostico etiológico del derrame pleural y para mejorar la

restricción respiratoria debida a grandes cantidad de líquido pleural que comprimen el
pulmón. Servirán para cultivos, reuentos de células, densidad y pH.

- Periocardiocentesis: el desarrollo de un taponamiento cardiaco puede requerir este

procedimiento aunque es muy peligroso.

- Paracentesis abdominal: esta tecninca puede ser también terapéutica en pacientes con ascitis
que produce dificultad respiratoria o dolor. Se pincha entre el ombligo y el pubis. Se realiza
recuento ceular, determinación del contenido de proteínas, citología o cultivo. La complicación
más frecuente es la hemorragia.

6.3 LIQUIDO SEMINAL

El semen es una suspensión de espermatozoides en una solución llamada plasmaseminal. La

muestra debe recogerse tras un perido de abstinencia de al menos 5 días, por eyaculación en
un recipiente esteril a la temperatura corporal y Conservar en estufa a 37ºC pero nunca
retrasando el análisis más de 2 horas desde su obtención.

6.4 LIQUIDO SINOVIAL

Es una secreción producida por las ceulas epiteliales de la memrana sinovial que recubre la
cara interna de la capsula articular en la diartrosis. La principal utilidad analítica de esta
muestra es el diagnositco de artritis infecciosa y estudio de cristales en el liquido. Se obtiene
por punción y aspiración del liquido (artrocentesiss). Con heparina para estudio microbiológico
y con edta para recuento ceular. Tubo seco para estudio BQ e inmunológico.

6.5 LIQUIDO AMNIÓTICO

Es el liquido que rodea al feto y la extracción de una muestra de este liquido mediante punción
transabdominal se denomina amniocentesis. Su análisis puede ayudar al diagnostico de
diferentes enfermedades genéticas del bebe.

6.6 MEDULA OSEA

Es una muestra sanguínea de gran utilidad clínica. Se puede obtener tras aspirado de medula
osea en el esternón normalmente o por biopsia.

7 MUESTRAS DE ESPUTO