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GUÍA DE PRÁCTICAS
Unidad académica: Obstetricia

Nombre de la asignatura:

BIOQUÍMICA

Autor:

Mag. JAVIER FRANCISCO MARTINEZ CARRERAS

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 INTRODUCCIÓN

La Bioquímica, que crece a un ritmo extraordinariamente vigoroso, ejerce una

influencia cada vez mayor en las Ciencias de la vida. Actualmente se considera que
la Bioquímica es el arma más poderosa con que se cuenta para interpretar el
fenómeno biológico, con una profunda incidencia en numerosas áreas incluyendo la
medicina y la nutrición humana.

La presente guía de práctica comprende la aplicación experimental de los

conceptos fundamentales, tanto básicos como de desarrollo de la capacidad crítica
del estudiante más que en el almacenamiento memorístico de datos que tampoco
puede, sin embargo, descuidarse.

Cada Práctica de laboratorio incluye: Marco Teórico, Competencias,

Materiales y Equipos, Procedimiento, Cuestionario y Fuentes de información que se
deben desarrollar cuidadosamente durante la práctica. La guía de laboratorio debe
ser revisada antes de iniciar la práctica.

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 I. PRÁCTICA No. 1 (semana 1)

Recomendaciones y explicación del desarrollo de las prácticas

1.1 Marco teórico

Para realizar con éxito las practicas programadas para el curso, se requiere
de la lectura de la guía.
1.2 Competencias
Entiende de forma correcta cada una de las practicas a desarrollar cada
semana.
1.3 Procedimiento
El estudiante deberá estar en las prácticas en el horario programado, a la
hora exacta.

Todos los alumnos participarán activamente en el desarrollo de las prácticas.

Es necesario que el alumno antes de cualquier experimento posea los

conocimientos básicos:
- Los objetivos de cada práctica.
- Leer sobre el material, reactivos y equipo de laboratorio necesario para la
realización de dicha práctica.
- El método seleccionado que permitirá obtener resultados objetables.
- Desarrollar su capacidad de observación y actitud crítica

Recomendaciones, debe asegurarse de una buena conectividad en su internet. Las

practicas serán grabadas y estarán a disposición del alumno.

El modelo para el informe de cada práctica debe seguir el siguiente esquema:

1.− Título de la práctica

2.− Nombre del(los) integrante(s), fecha de entrega
3.− Materiales y Procedimientos
4.- Cálculos y Resultados
5.− Conclusiones (de acuerdo a los objetivos y resultados de la práctica)
6.− Desarrollo del cuestionario
7.− Bibliografía

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 II. PRÁCTICA No. 2 (semana 1)
Análisis y discusión de lectura de artículo
2.1 Marco teórico
Para realizar con éxito las practica programada para esta semana, se requiere
que el alumno previamente debe leer el artículo y analizar e investigar
sobre el mismo para poder participar de forma activa en la discusión
durante la práctica.
2.2 Competencias
- Participa activamente en el análisis y discusión de la lectura
correspondiente.
2.3 Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica
b. Bibliografía de carácter científico (revistas, manuales, etc.)

3.3 Procedimiento.

Se realizará el análisis y discusión del artículo con

participaciones, aporte, preguntas y respuestas con la
intervenciones de todos los alumnos durant e la práctica.

2.5 Cuestionario
1 . r e a l iz a r u n m a p a co n c e pt ua l so b r e l a l ect u r a r e a l iz a d a e n l a
p r á ct ic a.
2 . B u sc a r u n art í c u l o r e l ac i o n a do a l t e ma t r at a d o e n pr á ct ic a
p r e s en t a d o u n r es u me n d e l mis m o.
2.6 Fuentes de información
1. Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2. Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3. Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4. Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición.
2014
5. Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6. Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7. Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.
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 Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

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 III. PRÁCTICA No. 3 (semana 2)

Sistemas Amortiguadores
3.1 Marco teórico
El concepto de pH fue dado a conocer por primera vez en 1909 por
SORENSEN, y lo definió como el logaritmo negativo de la concentración de
iones de hidrógeno es decir:
pH = - log (H) ó = [H + ] = 10 – pH ó = - log ( 1 )
H
Donde la concentración del hidrogenión es dada en unidades moles.
La determinación del pH es uno de los procedimientos analíticos más
importantes y más utilizados en bioquímica puesto que esta medida
determina características notables de la estructura y la actividad de las
macromoléculas biológicas, por consiguiente, la conducta de las células y de
los organismos.

APLICACIONES:
En organismos vivientes, por ejemplo:
Para conocer las alteraciones producidas en la composición química de la
sangre.
Para conocer las alteraciones del pH de otros líquidos biológicos: saliva,
lágrimas, sudor, líquido cefalorraquídeo, etc.
En ciertos fenómenos fisiológicos: respiración, aplicación de enzimas
(catalizadores), etc.
En química:
Para determinar el pH de una solución.
Para determinar el punto final de una titulación
Demostración: reacciones químicas con liberación o consumo de iones H +.
Otros

METODOS DE DETERMINACION DEL pH:

Existen varios procedimientos:
Mediante indicadores
Mediante cintas o papel de pH universal
Mediante el potenciómetro o pHmetro

DETERMINACION DEL pH MEDIANTE EL USO DE INDICADORES:

Indicadores.-Son soluciones o cuerpos químicos que se agregan a los
líquidos para dosar, con el fin de ver el momento preciso d el término de la
reacción; manifestándose por la aparición, desaparición o modificación del
color. Estas sustancias químicas pertenecen al grupo de los ácidos y bases
débiles. Según Glaser, se clasifican en tres grupos:
1ero: Para valorar bases débiles con ácidos fuertes. Ejem: anaranjado de
metilo, rojo de congo, etc.
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 2do: Para valorar bases y ácidos fuertes. Ejem: Tornasol, paranitrofenol,
etc.
3ero: Para valorar ácidos débiles con bases fuertes. Ejem: fenolftaleína, etc.

Determinación del pH mediante el uso del papel indicador:

El papel Indicador:
Es un papel especial que contiene absorbidos indicadores en serie o a lo
largo, que al ponerse en contacto con la solución a evaluar da un color que
corresponde al pH aproximado de la solución problema. En el comercio
existen diferentes tipos de papeles indicadores, por ejemplo: el papel
indicador universal (pH de 1 a 10); PH – YDRIEN papel (pH del 10 a 14)
Podemos observar la siguiente tabla de indicadores:

TABLA DE INDICADORES :
INDICADOR Pk LIMITES COLOR
Azul de timol 1.50 0.5 – 2.8 rojo – amarillo
Azul de bromofenol 3.98 3.0 – 5.0 amarillo – azul
Verde de bromofenol 4.68 3.7 – 5.7 amarillo – azul
Anaranjado de metilo 4.00 3.5 – 4.5 anaranjado–amarillo
Rojo de clorofenol 5.98 5.0 – 7.0 amarillo – rojo
Púrpura de bromocresol 6.30 5.3 – 7.3 amarillo - púrpura
Azul de bromotimol 7.00 6.0 – 8.0 amarillo – azul
Rojo de fenol 7.90 6.9 – 8.9 amarillo – rojo
Fenolftaleína 9.20 8.2 – 10.2 incoloro – rojo
Rojo de metilo 5.10 4.4 - 6.0 rojo – amarillo

EL POTENCIÓMETRO o pHMETRO:
Fundamento.-
Se fundamenta en la generación de una diferencia de potencial que se
establece cuando se emplean dos soluciones ionizadas de diferente
concentración en las cuales se hace pasar una corriente eléctrica, es decir la
diferencia de potencial es proporcional a la diferencia de concentración(es)
entre las soluciones.
Partes que lo constituyen.-
1.-Electrodo de vidrio: Es un pequeño bulbo de vidrio soldado a un vástago de
vidrio de borosilicato (pirex) dentro de él existe una solución de KCl 0.1N en
la que está sumergido un electrodo de referencia interna que puede ser de
plata cloruro de plata o de Calomell, quedando aislada dicha celda mediante
un cierre hermético constituido por un dieléctrico de cera o plástico y un
casco de metal o plástico.
2.-Un electrodo de referencia externa de Calomell
3.-Un tablero de control con diales que regulan el funcionamiento del equipo.

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 Soluciones Buffer, tampón o amortiguadores:
Son aquellas soluciones que se caracterizan por ser mezclas de ACIDOS y
BASES DEBILES y sus sales, las cuales impiden las variaciones bruscas de
pH; permitiendo que el cambio de este no sea el más mínimo.
3.2 Competencias
• Aplica los conceptos fundamentales sobre el pH y la acción de los
sistemas buffer.
3.3 Materiales y equipos
Materiales y equipos a usar en la práctica:
Gradillas Bureta 25mL Estándar de pH 10 Pipeta 1mL
Beacker 100mL Soporte universal Ac. Acético 0,1N Pipeta 2mL
Matraz 250mL Pinza para bureta Acetato sodio 0,1N Pipeta 5mL
Anaranjado de metilo Tubos 13x100mL Agua destilada Pipeta 10mL
HCl 0,1N

3.4 Procedimiento
Cambios de pH en un sistema Buffer:
3.4.1 El agua como buffer
Colocar en un beaker, 10 mL de agua destilada y tres gotas de anaranjado de
metilo.
Enrasar una bureta de 25mL con HCl 0,1N.
Comience a titular dejando caer gota a gota el HCl 0,1N, agitando
constantemente hasta que cambie el color.
Anotar la cantidad (mL) de HCl 0,1N que se gastó en la titulación.
3.4.2 Un ácido débil y su respectiva sal en diferentes proporciones:
Colocar en un beaker 8 mL de agua destilada, 1,5 mL de ácido acético 0.1N,
0,5mL de acetato de sodio 0.1N y tres gotas de anaranjado de metilo.
Enrazar una bureta de 25mL con HCl 0.1N.
Comience a titular dejando caer gota a gota el HCl 0.1N, agitando
constantemente hasta que cambie el color.
Anotar la cantidad (mL) de HCl 0.1N que se gastó en la titulación.
3.4.3 Un ácido débil y su respectiva sal en iguales proporciones:
Colocar en un beaker 8 mL de agua destilada, 1,0mL de ácido acético 0.1N,
1,0mL de acetato de sodio 0.1N y tres gotas de anaranjado de metilo.
Enrazar una bureta de 25mL con HCl 0.1N.
Comience a titular dejando caer gota a gota el HCl 0.1N, agitando
constantemente hasta que cambie el color.
Anotar la cantidad (mL) de HCl 0.1N que se gastó en la titulación.
3.5 Resultados

3.6 Cuestionario
1.-Mencione el pH normal de: Sangre, orina, líquido seminal, líquido
cefalorraquídeo, líquido amniótico, saliva y su correlación con alguna
patología.
2.- Indique los principales sistemas buffer orgánicos.
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 3.7 Fuentes de información
1. Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2. Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3. Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4. Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición.
2014
5. Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6. Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7. Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.

Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

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IV. PRÁCTICA No. 4 (semana 2)

Determinación de glicemia
4.1 Marco teórico
La Insulina:
Es una hormona formada por 51 aminoácidos dispuestos en dos cadenas. La
insulina se forma a partir de la proinsulina, que está constituida por una sola
cadena polipetídica que se sintetiza en las células  de los islotes
pancreáticos de Langerhans. La insulina es el factor más importante de los
que intervienen en la regulación de los niveles de glucosa sanguínea, q ue
deben mantenerse dentro de unos límites rigurosos. Cuando la glucosa está
elevada en la sangre el nivel de insulina se incrementa del mismo modo.
El Glucagón:
Es una hormona formada por una cadena polipeptídica compuesta por 29
aminoácidos; es sintetizada por las células  de los islotes pancreáticos de
Langerhans y se incrementa en la sangre al disminuir la glucosa, estimulando
la glucogenólisis hepática.
Alteraciones del Metabolismo de los Carbohidratos:
Para los efectos del establecimiento del diagnóstico en el trastorno o
alteraciones del metabolismo de carbohidratos se han considerado dos
situaciones clínicas bien definidas:
1.-Hiperglucemia:
Es el estado biológico donde los niveles de glucosa sanguínea están por
encima de los valores considerados normales: La hiperglucemia fisiológica en
situaciones de excitación síquica, esfuerzos musculares, por exposición a
baños calientes y a veces en el periodo menstrual, y la hiperglucemia
patológica más común es la Diabetes mellitus que es un síndrome
caracterizado por un aumento de los niveles de la glucosa en estado
postprandial y ayuno, que conlleva a características de laboratorio como:
Aumento de la glucosa en ayunas por encima de 7.8 mmol/L (140 mg/dl).
Aumento exagerado de la glucosa a cualquier hora del día, por encima de
200mg/dL.
Aparición de glucosa en orina (glucosuria) cuando esta pasa de 180 mg/dL en
sangre (umbral renal de filtración para la glucosa).
El aumento de glucosa en orina produce un aumento en la osmolaridad y en
la secreción de agua en orina, con aumento de la excreción de orina
(poliurea).
El aumento de glucosa sérica produce igualmente un aumento de la
osmolaridad sanguínea, y un aumento de agua intravascular por dos
mecanismos: por una parte, se produce una sed intensa que oblig a a beber
una cantidad (polidipsia) y, por otra parte, existe un trasvase del agua interior
de la célula al exterior, que lleva a una hemodilución de los elementos formes.
Aunque existe una gran cantidad de glucosa en la sangre esta no es capaz de
ingresar a la célula y producir energía debido a la falta de insulina,
produciéndose sensación de hambre y el enfermo come mucho (polifagia),
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 pero a pesar de ello disminuye su peso corporal, ya que se utilizan las
reservas, activándose la gluconeogénesis, con una gran formación de
cuerpos cetónicos, que dan lugar a un estado de acidosis metabólica y de
halitosis (aliento a manzanas).
La Diabetes se acompaña de pérdida de proteína muscular y cetosis al
aumentar el catabolismo de proteínas, el músculo libera mayor cantidad de
alanina proporcionando substrato para la gluconeogénesis, promoviendo la
hiperglucemia debido a la mayor disponibilidad de substrato, la
gluconeogénesis puede contribuir con más del 30% de la producción de la
glucosa hepática; la mayor utilización de aminoácidos produce la pérdida de
proteína.
Con el tiempo y con hiperglicemias constantes, se producen trastornos
vasculares que afectan a vasos pequeños, como los de la retina, el riñón y los
capilares de la circulación general, con lo que el enfermo puede acabar con
problemas de ceguera, insuficiencia renal y gangrena en zonas periféricas.
El diagnóstico precoz y un buen control de la enfermedad, encaminado a
mantener los niveles de glucosa dentro de unos niveles adecuados, son
condiciones necesarias para que el enfermo con diabetes mellitus pueda
tener una buena calidad de vida y no sea esta enfermedad la que le produzca
la muerte.
2.- Hipoglucemia:
Hablamos de hipoglucemia cuando los niveles de glucosa en sangre se
sitúan en 2.2 y 2.5 mmol/L (40-45 mg/dL). La hipoglucemia se puede
presentar por un ayuno prolongado, ejercicio intenso o a un exceso de
insulina, como ocurre en la hiperplasia de las células de los islotes
pancreáticos (insulinomas), o pueden ser del tipo reactivas producidas por la
administración exagerada de insulina exógena o por tratamiento con
hipoglucemiantes orales en el caso de enfermos diabéticos.
4.2 Competencias
• Determina la glucosa en sangre por el método enzimático de glucosa
oxidasa.
4.3 Materiales y equipos
Tubos 17x150mm Bagueta Alcohol Centríf uga
Rvo. Glicemia enzimática Aguja venoject 21Gx Pipeta pasteur Micropipeta 10-100uL
Estd Glucosa 100mg/dL Mortero Baño maría Micropipeta 100-1000uL
Pinza para tubos Agua destilada Tips azul Agua destilada
Tubo 13x100mm Piceta Algodón
Gradilla Jeringa 5 mL Ligadura
Espectrof otómetro Pipeta 5mL Tips amarillos

1.4 Procedimiento
Método enzimático de la Glucosa Oxidasa
Fundamento:
Se basa en la oxidación de la glucosa por la enzima glucosa oxidasa,
reacción en la que se consume oxígeno (O2) y se genera agua oxigenada
(H2O2).
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 Con esta reacción como principio, la glucosa se puede cuantificar por varios
métodos:
Reacción de la Glucosa Oxidasa:

Glucosa + O2 GOD Acido Glucónico + H2O2

(suero)

H2O2 + Cromógeno POD Compuesto coloreado +

H2O (505 nm)
GOD: Glucosa Oxidasa
POD: Peroxidasa

Determinación de glicemia
Tomar una muestra de sangre (aprox. 3 mL), centrifugar a 3,000 rpm por
10 minutos. Separar el suero.
Determinación de glucosa sanguínea:
Colocar en tres tubos de ensayo de acuerdo al siguiente esquema:
REACTIVO / TUBO BLANCO ESTÁNDAR MUESTRA
Estándar Glucosa(100mg/dL) -- 20 ul --
Muestra (suero) -- -- 20 ul
Reactivo de trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
Mezclar e incubar en baño María a 37º C por 10 minutos.
Leer a 505 nm, llevando a cero el aparato con el blanco de reactivo.

CALCULO DE LOS RESULTADOS:

Glucosa (g/L) = D (Abs M) x f f = 1,00

g/L
Abs.
Std

VALORES DE REFERENCIA: Suero o plasma: 0.70 – 1.10 g/L

Sangre total: 0.60 – 1.00 g/L
LCR: 0.40 – 0.74 g/L

4.5 Resultados

4.6 Cuestionario
1.- Según la última clasificación de la OMS, cuantos tipos de diabetes
existen.
2.- Como se produce la insulina recombinante.

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 4.7 Fuentes de información
1. Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2. Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3. Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4. Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Ed. Omega. 6 ta Edición.2014
5. Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6. Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7. Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.

Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

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 VI. PRÁCTICA No. 5 y No. 6 (semana 3 )

Seminario N° 1: “Aspectos bioquímicos de la Diabetes Mellitus y la

Diabetes Gestacional”.
Temas que se deben considerar en el seminario:
1.- Generalidades. Conceptos. Etiopatogenia
2.- Tipos de Diabetes. Factores predisponentes
3.- Insulina. Síntesis. Función. Deficiencia
4.- Complicaciones en el embarazo
Seminario Nº2: “Rol del Calcio, Hierro y Hemoglobina durante el
embarazo y la lactancia”.
Temas que se deben considerar en el seminario:
1.- Calcio. Fuentes. Requerimientos. Importancia en el embarazo y lactancia.
2.- Hierro. Fuentes. Requerimientos. Importancia en el embarazo y lactancia.
3.- Hemoglobina. Características. Función en el organismo y durante el
embarazo y la lactancia.
Seminario N° 3: “Rol bioquímico y fisiológico del surfactante pulmonar
en la maduración fetal”.
Temas que se deben considerar en el seminario:
1.- Generalidades. Significado fisiológico. Composición química.
2.- Índices de madurez pulmonar
3.- Estructura y desarrollo del alveolo pulmonar
4.- Biosíntesis. Etapa embrionaria. Etapa pseudoglandular. Fase canalicular.
Fase de saco terminal
5.- Aceleración de la madurez pulmonar fetal
Importancia de la utilización de corticoides en la vida fetal
6.- Enfermedades por insuficiencia del surfactante pulmonar:
Atelectasias. Membrana hialina. Embolia pulmonar. Síndrome distress
respiratorio
Seminario N° 4: Hormonas en el embarazo y
lactancia. Temas que se deben considerar en el
seminario:
1.- Funciones
2.- Clasificación
3.- Metabolismo
4.- Regulación hormonal

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 VII. PRACTICA No. 7 (semana 4) PRACTICA CALIFICADA

Solubilidad y características de los lípidos

7.1 M a r c o teórico
Los lípidos son macromoléculas orgánicas que se encuentran en el
organismo formando parte estructural de la membrana celular, el
tejido adiposo y otras formas moleculares funcionales; así mismo,
constituyen una rica fuente de reserva energética de nuestro organismo.
Los lípidos se caracterizan por ser insolubles en agua, pero solubles
en solvente orgánicos no polares como éter, acetona, cloroformo,
benceno, etc. Químicamente están constituidos por unidades denominadas
ácidos grasos, unidos covalentemente a moléculas de alcohol.
Los podemos clasificar en Lípidos simples (esteres de ac. graso y
alcohol generalmente glicerol), lípidos complejos (alcohol, ac. graso y otras
moléculas como fosfato, aminas, carbohidratos y similares) y lípidos
derivados como los esteroides, el colesterol, la Vit D y los ácidos biliares.
Los l í p i d o s s o n compuestos orgánicos insolubles en el agua, pero
solubles en solventes orgánicos como éter, cloroformo, benceno, disulfuro
de carbono entre otros; participan en la absorción de vitaminas liposolubles,
síntesis de hormonas etc.
Desde el punto de vista energético constituye reserva calórica como
tejido adiposo, proporcionando 9 kilocalorías por gramo.
7.2 C o m p e t e n c i a s
Determina la solubilidad y características de los lípidos.
7.3 M a t e r i a l e s y equipos
Piceta Cloroformo Bagueta Mechero de alcohol
Aceite de oliva Pipeta 2mL Gradilla Pinza para tubos
Agua destilada Pipeta 5mL Benceno Pipeta pasteur
Tubo 17x150mm Éter Etílico Cloroformo Alcohol etílico

7.4 Procedimiento
Solubilidad de los lípidos:
Reactivo/Tubos 1 2 3 4 5
Aceite de oliva (gotas) 5 5 5 5 5
Agua (mL) 2 --- --- --- ---
Cloroformo (mL) --- 2 --- ---
Éter Etílico (mL) --- --- 2 ---
Benceno (mL) --- --- --- 2
Alcohol etílico (mL) --- --- --- --- 2
Al tubo N°5 (con alcohol) agregar 3mL de agua y calentar lentamente
en el mechero.

7.5 Resultados: Anotar los resultados de solubilidad e interpretar.

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 7.6 Cuestionario
1.- Fundamento de las características de solubilidad de los lípidos.
2.- Importancia de los lípidos en la estructuración de la membrana celular.
7.7 Fuentes de información
1.Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2.Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3.Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4.Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición. 2014
5.Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6.Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7.Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.

Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

F-CV3-3B-2
 IX. PRÁCTICA No. 9 (semana 5)

Hidrólisis enzimática de los lípidos

9.1 Marco teórico

En general la hidrólisis de los lípidos libera ácidos grasos de alto peso

molecular y un alcohol que depende del tipo de lípido, siendo el glicerol el
más frecuente.
La digestión de los lípidos se inicia en el estómago, mediante una li pasa
ácido- estable que se cree que en su mayoría se origina en la parte posterior
de la lengua. Sin embargo, la velocidad de hidrólisis es lenta porque los
triacilgliceroles forman una fase lipídica separada con una interfase agua -
lípido limitada.
La verdadera hidrólisis se realiza en la primera porción del yeyuno la primera
acción de la lipasa pancreática, esta enzima es específica para esteres en la
posición 1 y 3 del glicerol y prefiere ácidos grasos de cadena larga de más de
10 átomos de carbono. La hidrólisis de triacilgliceroles por la enzima
pancreática también tiene lugar en la interfase agua-lípido de las partículas
de la emulsión. La lipasa llega al intestino con el jugo pancreático requiere un
pH optimo 8, sin embargo, el quimo ácido que viene del estómago no se
neutraliza completamente por la alcalinidad del jugo pancreático y la bilis.
El pH intestinal es 6.5 y aun así la lipasa puede ejercer su acción. Por ejemplo
a falta de la enzima cuando hay obstrucción del conducto pancreático por
cualquier proceso patológico las grasas de la alimentación quedan sin digerir
en las heces (esteatorrea).
La lipasa libera los ácidos grasos de las posiciones 1 y 3 del glicerol, pasando
sucesivamente por triglicéridos, diglicéridos y monoglicéridos, este último con
el ácido graso (en posición 2), sobre el no actúa la lipasa interviniendo
entonces una enzima, la ISOMERASA que transforma el monoglicérido de
posición 2 a 1 ó 3, haciéndolo de esta manera susceptible a la acción lenta,
los productos finales de la digestión de los triglicéridos son monoglicéridos,
pequeña cantidad de diglicéridos, triglicéridos, glicerol y ácidos grasos libres.
Las sales biliares, en especial el glicocolato y taurocolato de sodio, contenidos
en la bilis llegan al hígado por el colédoco, participan en la digestión y
absorción de los lípidos. Su papel en la digestión consiste en disminuir la
tensión superficial de las gotas de lípidos (de 500,000A de diámetro)
originando una emulsión, en gotas de lípidos muy pequeñas, permitiendo una
mayor superficie de acción a la lipasa y aumentando paulatinamente La
actividad enzimática.
Terminando el proceso digestivo por acción de las sales biliares, los productos
finales forman complejos de 50 A de diámetro, llamadas MICELAS, que son
absorbidas. Las sales biliares se absorben en el íleon y regresan al hígado
por la vena porta.

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 HIDRÓLISIS:

O H2C – O – C – R1 R1 – CO2H
LIPASA + CH2 -- OH
R2 – C – O – CH O + 2 H2O R2 -- CO2 --CH
+
H2C – O – C – R3 CH2 -- OH
R3 – CO2H

Triacilglicerol 2 ácidos grasos y 1 monoacilglicerol

R = cadena hidrocarbonada

En la hidrólisis pueden distinguirse al menos cinco fases diferentes:

-Hidrólisis de triacilgliceroles a ácidos grasos libres y monogliceroles
-Solubilización de los ácidos grasos libres y monogliceroles por detergentes
(ácidos biliares) y transporte desde la luz intestinal hacia a la superficie
celular.
-Captación de ácidos grasos libres y mono gliceroles al interior de la célula y
resíntesis a triacilgliceroles.
-Empaquetamiento de los triacilgliceroles recién sintetizados en glóbulos
lipídicos especiales denominados quilomicrones.
-Exocitósis de los quilomicrones desde las células y liberación a la linfa.

9.2 Competencias
• Demuestra el poder emulsificador de las sales biliares.
• Mide la actividad de la lipasa pancreática por viraje del indicador.
• Determina el efecto de las sales biliares sobre la digestión de los lípidos
9.3 Materiales y equipos

Pipeta 2m L Baño m aría Aceite de oliva

Gradilla KOH 0.1 N Fenolftaleína
Pipeta 1m L Tubo 17x150m m Buffer fos fato pH 8
Sales Biliares en SF Agua des tilada Pinza para tubos

9.4 P rocedimiento
9.4.1.- Hidrólisis del aceite por acción de la lipasa
Fundamento:
Se ha demostrado que los aceites no hidrolizables difícilmente se absorben
en cantidades apreciables. Sin embargo, cuando el aceite está en forma de
emulsión muy fina, puede ser absorbido a nivel intestinal en pequeña
proporción.
Para que esto ocurra es necesario la presencia de las sales biliares (bilis) que
van a producir la emulsión de las grasas y de esa manera facilitar su
absorción y la acción enzimática de la lipasa pancreática sobre las grasas
F-CV3-3B-2
 hasta el desdoblamiento en ácidos grasos y glicerol. En todo este proceso
interviene el pH óptimo de 8.00.
En el laboratorio su demostración se puede llevar a cabo empleando una
enzima pancreática (sintética, solución de pancreatina) en lugar de la lipasa
pancreática, la cual para poder ser aislada necesita un proceso laborioso,
también debido a su inestabilidad.

Disponer una serie de 3 tubos de ensayo y proceder de la siguiente manera

1 2 3
Reactivo / Tubos Nº
Aceite de oliva neutraliza do mL 1 1 --
Buffer pH 8. 0 mL - 2 2
Sales biliares en buffer pH8 mL 2 -- 2
Agua destilada mL 2 2 1
Antes de agregar la solución de pancreatinina, debemos estar seguros de que
no haya acidez libre en el medio que estamos preparando, para lo cual
debemos emulsionar bien cada tubo y si el color rosado del indicador
(fenolftaleína) no se mantiene, nos indica acidez en el medio de proceso; se
añade unas gotas de KOH 0.1N, cuidando del exceso.
Solución de pancreatina mL 5 5 5

Agitar y deje incubando durante 20 minutos a 37º C.

Durante este tiempo la enzima libera los ácidos grasos del aceite que
acidifican el medio, esto hace virar al indicador hacia la zona ácida.
En el tubo que no contiene sales liberadas, la reacción habrá sido más lenta
que la del primer tubo, y en el que no contiene aceite de pepita no habrá
ninguna acidez.

9.5 Resultados
Cuestionario
1.- Composición y función e Importancia clínica de las sales biliares.
2.- Cuantos tipos de Lipasa existen.
9.6 Fuentes de información
1. Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2. Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3. Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4. Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición.
2014
5. Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6. Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7. Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

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 Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)
1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.

Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

F-CV3-3B-2
 X. PRACTICA 10 (semana 5)

Determinación de proteínas totales y fraccionadas

10.1 Marco teórico
Las proteínas presentan diferentes funciones muy importantes en los
procesos biológicos, actúan como elementos estructurales, biocatalizadores,
coagulación sanguínea, anticuerpos, hormonas, receptores hormonales y
también como nutrientes de primer orden en la dieta y alimentación del
humano.
PROTEINAS SERICAS: El plasma sanguíneo es una solución coloidal con
gran contenido de proteínas, aprox 7-7,5 g/dL. Al conjunto de proteínas del
plasma se les denomina proteínas totales plasmáticas.
Albúmina.- Las albúminas constituyen más de la mitad del total de proteínas
del organismo, debido a ello se les pueden considerar como una importante
reserva proteica del organismo. Se caracterizan por su gran estabilidad,
solubilidad en agua y soluciones salinas, bajo peso molecular siendo el mayor
contribuyente en el mantenimiento de la presión osmótica coloidal
intravascular.
Es sintetizada por el hígado, se encarga de fijar y transportar numerosas
sustancias que son insolubles en medios acuosos tales como los ácidos
grasos, hormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, etc.
Globulinas.- Son proteínas plasmáticas complejas, muy heterogéneas, de alto
peso molecular, son insolubles en agua pero solubles en soluciones salinas,
constituyen las proteínas conjugadas (glicoproteínas y lipoproteínas).
Fibrinógeno.- Se sintetiza en el hígado y constituye la fase preliminar de la
fibrina que interviene en el proceso de coagulación sanguínea, su
concentración media es de 0.3g/dL.
Variaciones en los Niveles de las Proteínas Séricas
-Hiperproteinemia.- Se presenta en la deficiencia relativa de agua. Se trata de
cambios en la concentración y no indica que haya alteración de la cantidad
absoluta de proteínas, se aprecia en casos de deshidratación, en ciertas
enfermedades crónicas: procesos inflamatorios crónicos, cirrosis he pática,
etc.
-Hipoproteinemia.- Se presenta en un exceso relativo de agua. Se trata de
cambios en la concentración y no indica alteración de la cantidad absoluta de
proteínas.
Pérdida excesiva de proteínas, principalmente albúmina, a través del riñón en
el síndrome nefrótico, por la piel en quemaduras graves, y por el intestino en
enteropatías.
Disminución de la síntesis proteica por deficiencia proteica grave en la dieta,
hepatopatía grave o malabsorción. A niveles <4 g/dL, es frecuente la aparición
de edemas.
-Hiperalbuminemia.- Es el aumento anormal de albúmina y se presenta
generalmente, en casos de deshidratación.
-Hipoalbuminemia.- Es la disminución anormal de albúmina lo cual genera
trastornos en la distribución de los líquidos orgánicos con formació n de
edema, acompañados de hipocalcemia (debido a su unión con el calcio
F-CV3-3B-2
 plasmático), presentándose en cuadros de infección crónica, insuficiencia
hepática, hemorragias y síndrome nefrótico.
-Hiperglobulinemias.- Aumento anormal de globulinas, se presenta en daño
hístico activo, como en procesos inflamatorios, procesos malignos, después
de traumatismos, etc.
-Hipoglobulinemias.- Es la disminución de globulinas presentándose en
diversos cuadros dependiendo del tipo de globulina involucrada.
Las -globulinas, están disminuidas particularmente en casos de enfisema
pulmonar y aumentadas en las reacciones inflamatorias.
Las -globulinas, están disminuidas en casos de pérdida renal como en el
síndrome nefrótico, disminución de su síntesis, deficiencias inmunitarias, edad
avanzada, etc, encontrándose aumentadas generalmente en procesos
inflamatorios crónicos y en algunas enfermedades autoinmunitarias.
TERMINOLOGIA CLINICA:
Proteinograma: Gráfico que representa cada una de las concentraciones
proteicas en los distintos líquidos del organismo.
Proteinemia: Concentración de las proteínas en la sangre.
Proteinosis: Acumulación de proteínas en los tejidos.
Proteinuria: Presencia de proteína en orina.
Proteinuria falsa: Proteína extraña a la de la orina por contaminación,
ejemplos: leucorrea vaginal, menstruación, semen, secreciones perianales o
rectales, etc. Para evitar se recomienda recoger orina por cateterismo.

10.2 Competencias
• Determina la concentración de proteínas totales y fraccionadas (albúmina
y globulina) en suero.

10.3 Materiales y equipos

Tubo 13x100mm Piceta Centríf uga Micropipeta 10-100uL

Espectrof otómetro Tips azul Baño maría Kit ProteinaTotales
Alcohol Jeringa 5mL Algodón Kit albúmina
Tips amarillos Ligadura Bagueta Estándar Prot Totales y A lbumina
Aguja venoject 21Gx 1” Gradilla Mortero Micropipeta 100-1000uL

10.4 Procedimiento
10.4.1 Método para la determinación de proteínas totales:
Fundamento:
Las proteínas en medio alcalino y en presencia de sulfato de cobre forman un
complejo de color violeta, debido a que el ión cobre forma un complejo tetra
coordinado con el nitrógeno del enlace peptídico

F-CV3-3B-2
 C C

H--N N--H

R—H--C C—H--R
Cu ++
C C

H--N N--H
10.4.2 Método para la determinación de Albúmina
Fundamento:
La albúmina reacciona específicamente sin separación previa con la forma
aniónica de la Bromo Cresosulfon Ftaleína (BCF), en presencia de un exceso
de colorante, en medio tamponado a un pH 3.8. El aumento de absorbancia
a 625 nm respecto del blanco de reactivos, es proporcional a la cantidad de
albúmina presente en la muestra.
10.4.3 DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES
Tomar una muestra de sangre (aprox. 3 mL), centrifugar a 3,000 rpm por 10
minutos. Separar el suero.
Colocar en tres tubos de acuerdo al esquema siguiente:
Rvo. / TUBOS BLANCO ESTÁNDAR MUESTRA
Agua destilada 50 uL - -
Estándar Prot. Tot. - 50 uL -
Muestra (suero) - - 50 uL
Rctv.EDTA/ Cu 3.5 mL 3.5mL 3.5 mL
Mezclar e Incubar durante 15 minutos a 37 0C. Leer en espectrofotómetro a
540 nm llevando a cero con el tubo blanco.
Estabilidad de la mezcla de reacción Final: El color de la reacción es estable
durante 12 horas por lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese
lapso.

10.4.4 DETERMINACION DE ALBUMINAS

Colocar en tres tubos lo siguiente:
Rvo. / TUBOS BLANCO ESTANDARD MUESTRA
Estándar Albúminas - 10 uL -
Muestra (suero) - - 10 uL
Reactivo BCF 3.5 mL 3.5 mL 3.5 mL
Mezclar y mantener los tubos entre 15 y 28º C durante 10 minutos. Leer en
espectrofotómetro a 625 nm llevando a cero con el blanco de reactivo.
Estabilidad de la mezcla de reacción final: El color de la reacción es estable
20 minutos, por lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso.

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 10.4.5 CALCULO DE LOS RESULTADOS:
Proteínas Totales (g/dL)= Abs. Muestra x f f=[Std.P.T.g/dL]
Abs Std

Albúmina (g/dL) = Abs. Muestra x f f=[Std. Alb. g/dL]

Abs. Std.

Globulinas (g/dL)= [Proteínas Totales] - [Albúmina]

Relación A/G= [Albúmina g/dL]

[Prot. Tot. g/dL] - [Alb. g/dL]

10.4.6 VALORES DE REFERENCIA: Proteínas totales: 6,1 a 7,9 g/dL

Albúmina: 3,5 a 4,8 g/dL
Globulinas: 2,0 a 3.6 g/dL
Relación A / G: 1–2

10.5 Resultados

10.6 Cuestionario
1.- Tratamientos contra las quemaduras empleando colágeno.
2.- Explique usted los cuadros de hipoproteinemia por pérdida renal.
10.7 Fuentes de información
1. Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2. Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3. Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4. Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición. 2014
5. Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6. Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7. Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.
Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

F-CV3-3B-2
 XI. PRÁCTICA No. 11 y No. 12 (semana 6)
Representación gráfica del mecanismo de
acción de las hormonas a nivel de membrana y a nivel de núcleo
11.1 Marco teórico.
Las hormonas son sustancias químicas que se caracterizan por ejercer su actividad
en un lugar diferente a donde se producen, se encuentran por lo general asociadas a
una glándula endocrina, esta libera a la hormona al torrente sanguíneo hasta que
recibe la señal fisiológica adecuada. La hormona viaja por el torrente circulatorio e
interactúa con la las célula diana mediante la unión inicial a un receptor
macromolecular, situado en la membrana plasmática o en el interior de la célula.
Para ejercer su acción, todas las hormonas deben unirse a su receptor específico,
estas uniones inician mecanismos intracelulares que conllevan las respuestas
celulares. De acuerdo a su mecanismo de acción las hormonas se dividen en dos
grupos,
Los receptores de membrana en general presentan dominios específicos que: a.).
Se unen al ligando; b). Interactúan con sistemas efectores ya sea en forma indirecta
a través de la proteína G o directa por los canales del calcio; c). Tienen actividad
enzimática inherente; d). Determinan la localización en la membrana e
internalización.
Con respecto a las hormonas esteroides, estas se producen en células específicas
de los testículos, la corteza adrenal, ovarios y placenta. Los testículos son los
encargados de secretar, principalmente, testosterona (andrógenos), la corteza
adrenal produce la aldosterona, cortisol y la DHEA (dehidroepiandrosterona), los
ovarios producen los estrógenos que engloban el estradiol, 4-androsteno-3, 17-diona
y la progesterona, y por último esta la placenta que también secreta estradiol y
progesterona, pero además produce otra sustancia, el estriol.

Gracias a su naturaleza lipídica las hormonas esteroides atraviesan fácilmente las

membranas de las células diana o células blanco, y se unen a las moléculas
receptoras de tipo proteico, que se encuentran en el citoplasma. De esta manera
llegan al núcleo, donde actúan sobre genes del ADN, se produce la transcripción.
Las moléculas de ARNm originadas se encargan de dirigir en el citoplasma la
síntesis de unidades proteicas, que son las que producirán los efectos fisiológicos
hormonales.

11.2. Competencia.
Representa con gráficos el mecanismo de acción de las
hormonas a nivel de Membrana y a nivel de núcleo.
11.3. Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica
b. Bibliografía de carácter científico (revistas, manuales, etc.)
c. Videos VHS, etc.
d. Libros y revistas
e. Power point.

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 11.4.Procedimiento.

Se realizará de acuerdo a la técnica para elaborar representaciones gráficas

del mecanismo de acción de las hormonas a nivel de membrana biológica y a
nivel de núcleo.

11.5. Cuestionario.
1. Elabore un mapa conceptual del mecanismo de acción del glucagón.
2. Grafique el mecanismo de acción de la hormona de crecimiento.
3. Esquematice el mecanismo de acción de la testosterona.

11.6 Fuentes de información

1. Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2. Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3. Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4. Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición.
2014
5. Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6. Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7. Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.

Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

XII. PRÁCTICA No. 12 (semana 7)

Actividad enzimática y factores que la afectan: pH

12.1 Marco teórico

Las Enzimas son proteínas que intervienen en las reacciones químico-
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 biológicas acelerando la velocidad de dichas reacciones
hasta su punto de equilibrio.
Los substratos son las moléculas sobre las que actúan las enzimas.
En una reacción bioquímica catalizada por una enzima, a medida que
progresa la reacción, aumenta la concentración de los productos a expensas
de la desaparición de los correspondientes substratos en tanto permanece fija
la concentración de la enzima.

La Actividad Enzimática se puede expresar como:

E + S E + P
a.- La DESAPARICION del SUBSTRATO.
b.- La APARICION del PRODUCTO
Donde: C C´
c.- Por la MODIFICACION de COFACTORES
E = Enzima
S = Substrato
Factores que Modifican la Actividad Enzimática
P = Producto
Son diversos:
C = Cofactor antes de la reacción
1.- pH del medio
C´ = Cofactor después de la reacción
2.- Temperatura
3.- Concentración de Enzima
4.- Concentración de Substrato
5.- Acción de Inhibidores y Activadores

12.2 Competencias
• Comprueba la acción del pH como factor que regula la actividad
enzimática
• Demuestra como la actividad enzimática puede ser expresada.

12.3 Materiales y equipos

Tubos 17x150mm Pipeta 1mL Papel Universal de pH 1-14

Pinza de tubos Pipeta 5mL Albúmina de huevo en SSF
Baño maría Pipeta 10mL Pepsina en SSF
HCl 1N Bagueta Agua destilada
Espectrofotómetro Gradillas NaCO3 10%

Para nuestros experimentos estudiaremos el efecto de la PEPS INA sobre la

ALBUMINA.
La PEPSINA es una enzima que hidroliza cadenas grandes de proteínas
convirtiéndolas en cadenas pequeñas.

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 La ACTIVIDAD ENZIMATICA se demostrará por desaparición del substrato, o
sea la disminución de la turbidez de una solución de A lbúmina de huevo sobre
la cual actuará la enzima. La turbidez se leerá en el
ESPECTROFOTOMETRO.

12.4 Procedimiento Efectos del pH sobre la Actividad

Experiencia Nº1 EFECTO DEL pH Enzimática.
Principios Teóricos.- Si actúa una enzima sobre un A E 1 pH óptimo
substrato en cantidades equimoleculares (iguales) c n
variando el pH del medio de reacción, se observará t z
i i
que existe una región o punto de actividad óptima, v m
correspondiendo al pH, al cual se denomina pH i á
OPTIMO, que varía con la pureza de la enzima, el d t
tipo de sustancia sobre el cual actúa, las sales del a i
d c
medio, etc. Ello debido a la interacción E–S (Enzima a
–Substrato) que se realiza, en gran parte, a través de
los grupos ionizados existentes en sus moléculas. La
concentración de iones (H+) u Oxhidrilos (OH-)
presentes en el medio, alteran los grupos ionizados
e impiden la asociación de las moléculas.
0 pH
12.4.1 Procedimiento Experimental: BAJO ALTO
Preparar 6 tubos de acuerdo al esquema siguiente:

Tubo Nº 1 2 3 4 5 6
H2O dest. (mL) --- 1,5 2 1,5 --- ---
HCl 1N (mL) 2,0 0,5 --- --- ---
Na 2CO3 10%(mL) --- --- --- 0,5 2,0 ---
Albúmina (mL) 5 5 5 5 5 ---
Pepsina (mL) --- --- --- --- --- 20
pH del tubo 1 2 6 10 11 ---

Medir el pH cada tubo

Incubar por 5 min los 6 tubos en Baño maría a 37ºC.
Añadir 3 mL de la pepsina pre-incubada (tubo 6), a los tubos 1, 2, 3, 4 y 5, y
mezclar bien.
Volver a incubar los tubos 1 al 5 por 5 min en baño maría a 37ºC.
Leer la absorbancia de los tubos del 1-5 al espectrofotómetro a una longitud
de onda de 440nm, usando un blanco de agua destilada.
La lectura debe realizarse tan pronto sale de la incubaci ón, de no ser así,
mantener los tubos en agua helada hasta el momento de la lectura.
12.4.2 CALCULOS: Para obtener la actividad enzimática se debe restar la
mayor absorbancia obtenida menos la absorbancia de cada tubo. Graficar los
resultados, en un papel milimetrado, colocando el pH en las abscisas y la
actividad enzimática en las ordenadas.
12.5 Resultados: Encontrar el pH óptimo de acción de la PEPSINA sobre la
ALBUMINA
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 12.6 Cuestionario
1.- Explique el mecanismo de acción de la las enzimas.
2.- A que llamamos especificidad por el sustrato?

12.7 Fuentes de información

1. Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2. Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3. Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4. Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición.
2014
5. Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6. Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7. Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.

Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

F-CV3-3B-2
 XIII. PRÁCTICA No. 13 (semana 7)

Actividad enzimática y factores que la afectan: Temperatura

13.1 Marco teórico
Las Enzimas son proteínas que intervienen en las reacciones químico -
biológicas acelerando la velocidad de dichas reacciones hasta su punto de
equilibrio.
Los substratos son las moléculas sobre las que actúan las enzimas.
En una reacción bioquímica catalizada por una enzima, a medida que
progresa la reacción, aumenta la concentración de los productos a expensas
de la desaparición de los correspondientes substratos en tanto permanece fija
la concentración de la enzima.

La Actividad Enzimática se puede expresar como:

E + S E + P
a.- La DESAPARICION del SUBSTRATO.
b.- La APARICION del PRODUCTO
c.- Por la MODIFICACION de COFACTORES
Donde: C C´
E = Enzima
Factores que Modifican la Actividad Enzimática
S = Substrato
Son diversos:
P = Producto
1.- pH del medio
C = Cofactor antes de la reacción
2.- Temperatura
C´ = Cofactor después de la reacción
3.- Concentración de Enzima
4.- Concentración de Substrato
5.- Acción de Inhibidores y Activadores
13.2 Competencias
• Comprueba la acción de la temperatura como factor que regula la
actividad enzimática
• Demuestra como la actividad enzimática puede ser expresada.
13.3 Materiales y equipos
Tubos 17x150mm Pipeta 1mL Fósforos
HCl 1N Pipeta 5mL Albúmina de huevo en SSF
Baño maría Pipeta 10mL Pepsina en SSF
Hielo Bagueta Agua destilada
Espectrofotómetro Gradillas Mechero de alcohol

Para nuestros experimentos estudiaremos el efecto de la PEPSINA sobre la

ALBUMINA.
La PEPSINA es una enzima que hidroliza cadenas grandes de proteínas
convirtiéndolas en cadenas pequeñas.

La ACTIVIDAD ENZIMATICA se demostrará por desaparición del substrato, o

sea la disminución de la turbidez de una solución de Albúmina de huevo sobre
F-CV3-3B-2
 la cual actuará la enzima. La turbidez se leerá en el
ESPECTROFOTOMETRO.
Efectos de la Temperatura sobre la Acti vi dad
Enzi máti ca.
13.4 Procedimiento
Experiencia Nº1 EFECTO DE LA TEMPERATURA A E Temperatura óptima
Principios Teóricos.- La temperatura acelera la velocidad c n 1
de las reacciones al aumentar las colisiones efectivas entre t z
los elementos reaccionantes. i i
En una reacción enzimática también debe colisionar E -S v m
(Enzima-Sustrato) para que la reacción progrese, por i á
tanto, las reacciones enzimáticas serán más rápidas a d t
mayores temperaturas, sin embargo y dada la naturaleza a i
proteica de las enzimas, la temperatura no puede d c
aumentarse indefinidamente, pues comenzarán a a
romperse los puentes de hidrógeno, alterándose las
estructuras secundarias, situación que se conoce como
DESNATURALIZACION (Ver esquema).
0
ºT (ºC )
13.4.1 Procedimiento Experimental:
Preparar 6 tubos de acuerdo al esquema siguiente:

Reactivo / Tubo N° 1 2 3 4 5
CONTROL
H2O dest. (mL) 3,0 3,5 3,5 3,5 3,5 ---
HCl 1N (mL) --- 0,5 0,5 0,5 0,5 ---
Albúmina (mL) 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 ---
Pepsina (mL) --- --- --- --- --- 11

Incubar por 5 min a 37°C en baño maría

Agregar 2 mL de la pepsina pre incubado (Tubo 5) a cada uno de los tubos
del 1 al 4 e inmediatamente incubar por 5min según el esquema siguiente:

Tubo 1 2 3 4
Temperatura °C 0 (hielo) 22(Ambiente) 37 100 (ebullición)

Al finalizar el tiempo, colocar inmediatamente los tubos en agua helada para

detener la reacción, hasta el momento de su lectura.
Leer al espectrofotómetro los tubos 1-4 y el control, usando un blanco con
agua destilada.

13.4.2 CALCULOS: La actividad enzimática se encontrará restando la lectura

de cada tubo (1-4) de la lectura del tubo CONTROL (SIN INCUBAR). Graficar
los resultados en un papel milimetrado, colocando la temperatura en las
abscisas y la actividad enzimática en las ordenadas.

13.5 Resultados: Encontrar la T° óptima de acción de la PEPSINA sobre la

ALBUMINA

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 13.6 Cuestionario
1.- De 5 ejemplos de reacciones catalizadas por enzimas en las células.
2.- De ejemplos del uso del dosaje de enzimas para el diagnóstico clínico.
13.7 Fuentes de información
1.Feduchi Canosa E. Bioquímica conceptos esenciales. 2da edición. 2015
2.Koolman, R. Bioquímica humana. 4ta edición. 2012
3.Laguna, J. Bioquímica de Laguna. 7ta edición. México. 2013
4.Lehninger, L. Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Sexta Edición. 2014
5.Mathews, V. Bioquímica. Cuarta Edición. Editorial Addison Wesley. 2013
6.Rodwell W. Victor. Harper Bioquímica Ilustrada. 30ava edición. 2016
7.Stryer, L. Bioquímica. 7ta Edición. Edit. Reverte. España. 2013.

Fuentes hemerográficas (artículos científicos, revistas, etc.)

1.- Biochemistry, Molecular Biology, and Physiology of the Glucocorticoid
Receptor May 1987, Gustafssonrt al 8(2)185
2.- Acta de bioquímica clínica latinoamericana.
3.- Medigrafic. Literatura biomédica. Índice de revistas médicas latinoamericanas.

Fuentes electrónicas
1. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enfermedades%20aminoacid
os.html
2. http://personales.ciudad.com.ar/pasionculturismo/PROTEINASYCARBOHID
RATOS.html
3. http://www.iqb.es/cbasicas/bioquim/toc02_8.htm
4. http://www.biono va .org.es /biocast/doc ume ntos/tema14.pd f
5. http://themedicalbiochemestrypage

XV. PRACTICA No. 15 (semana 8) PRACTICA CALIFICADA

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