U.A.G.R.M.
03/10/2020
FAC.CS.FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICAS
CARRERA DE FARMACIA
MUESTRAS TOXICOLOGICAS
Dra. Ivana S. Jiménez C.
F.C.F.B. - Carrera de Farmacia
Los estudios toxicológicos
pueden clasificarse en:
• ESTUDIOS TOXICOLÓGICOS
POSTMORTEM: destinados a
determinar la ausencia o
presencia de sustancias
potencialmente tóxicas en
distintas muestras biológicas y
no biológicas a fin de
establecer su contribución a
la causa o mecanismo de
muerte.
DRA.IVANA JIMENEZ
TOXICOLOGIA EF 1
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Los estudios toxicológicos
pueden clasificarse en:
• ESTUDIOS TOXICOLÓGICOS
EN SUJETOS VIVOS:
destinados a determinar la
ausencia o presencia de
sustancias potencialmente
tóxicas en distintas muestras
biológicas y no biológicas a fin
de establecer su papel
determinante o contribución
en el hecho que se investiga.
Toma y remisión de muestras
en Toxicología
La adecuada selección, recolección,
preservación y envío de muestras biológicas
y cualquier otra muestra con el propósito de un
estudio toxicológico es de fundamental
importancia, ya que de esto dependen el éxito
del análisis y su interpretación.
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TOXICOLOGIA EF 2
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Toma de Muestra
Previo al análisis, todas las muestras biológicas
deben ser almacenadas a 4 ºC y mantenidas a esa
temperatura durante 3 á 4 semanas, en situaciones
que se requieran futuros análisis.
En los casos de implicancias médico legales,
la muestra a analizar debe ser almacenada a
–20ºC hasta que la investigación haya concluido.
TIPO DE CANTIDAD
MUESTRA DE MUESTRA
RESULTADO DEL
ANALISIS
OPORTUNIDAD
DE LA TOMA
SELECCIÓN – RECOLECCION – PRESERVACION – ENVIO DE MUESTRAS
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TOXICOLOGIA EF 3
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CLASIFICACIÓN DE LAS MUESTRAS
PARA ANALISIS TOXICOLOGICO
1. Biológicas: sangre, orina, vómitos, lavados
estomacales, grasa, heces, saliva, leche,
pelos, cerebro, riñón, huesos, hígado, lavado y
raspado de dedos, airea alveolar, pulmón, etc.
2. No biológicas: restos de productos,
medicamentos, polvos, botellas, envases,
alimentos, aguas, etc.
Sangre
Vísceras
Lavados y/o
contenido gástrico
Orina
Vegetales
Animales
Hisopados vaginales /
anales.
Biológicas
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TOXICOLOGIA EF 4
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Polvos
Solventes
Comprimidos
Medicinas
Pinturas
Tintas
Ropa
Métales
No biológicas
Muestra de Orina
• Es idónea para screening en el caso de no conocer el
origen de la intoxicación.
• En la detección de consumo de sustancias ilícitas en
trabajadores o en casos de dopaje en el deporte.
(drogas de abuso: cocaína, marihuana, opiáceos,
benzodiacepinas, anfetaminas, etc).
• Un resultado positivo solo indicará el consumo de la
sustancia detectada, independientemente del nivel
obtenido.
• Ventajas: está exenta de proteínas, con lo cual se
tienen menos interferencias, y es una muestra
abundante, fácil de recolectar y de conservar.
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TOXICOLOGIA EF 5
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Sangre
• De gran valor en casos especiales, como la
determinación de monóxido de carbono, cianuros,
metanol, etc.
• La muestra de sangre en dos tubos, uno de ellos
con anticoagulante (fluoruro de sodio al 1%, que
también es preservador antibacteriano) y el otro sin
anticoagulante.
• Utilizar siempre material nuevo o virgen.
• La conservación de la muestra se hará en nevera a
4°C.
Contenido gástrico y
productos del lavado gástrico,
• Este tipo de muestra
brindan la posibilidad de
encontrar el tóxico
parcialmente intacto sin
disolver o absorber,
facilitando su
identificación.
• Saliva, útil en casos de
drogas de abuso.
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Pelo
Determinación de metales
pesados (As), de drogas
(heroína, morfina, lidocaína)
y de hidrocarburos
aromáticos policíclicos, y
recientemente para
escopolamina.
Ventajas: permite la detección de las sustancias en una
amplia franja de tiempo y es muy fácil de obtener.
Se toma aprox. 1 cm de mechón lo más próximo al
cuero cabelludo, en el caso de vello pubiano o axilar se
obtiene al ras de la piel, dicha muestra deberá ser
colocada en sobre de papel a temperatura ambiente.
Humor vítreo
• Forma novedosa para la búsqueda de ciertos
tóxicos como el etanol, barbitúricos,
benzodiazepinas, antidepresivos, opiáceos,
cannabinoles, anfetaminas, LSD, anestésicos.
• Ventajas: no se
contamina fácilmente
con otros fluidos y su
descomposición es más
retardada en el cadáver.
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TOXICOLOGIA EF 7
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CADÁVER INDIVIDUO VIVO CANTIDAD MÍNIMA CONDICIONES DE
ENVÍO
Vísceras
---------
(Cerebro, Hígado, 50 gr por órgano Refrigerada
Riñón) Sin conservantes
Refrigerada
Sangre cardiaca -------- 25 ml
Con FNa 1-2%
Sin cámara de aire
Refrigerada
Sangre periférica Sangre periférica 10 ml (vena femoral) Con FNa 1-2%
Sin cámara de aire
Refrigerada
Humor vítreo -------- Todo lo disponible Sin conservantes
Sin cámara de aire
Bilis, líquido Refrigerada
-------- Todo lo disponible
pericárdico Sin conservantes
CADÁVER INDIVIDUO VIVO CANTIDAD MÍNIMA CONDICIONES DE ENVÍO
Refrigerada
Sin conservantes
Orina Orina 50 ml
Caso necesario Azida de
sodio 1%
Refrigerada
Contenido estomacal Contenido estomacal Todo lo disponible
Sin conservantes
En envoltorio de papel o
1-2 gr (mechón de 1 cm
cartón, identificando
Pelo Pelo de ancho) o 100
extremos distal y
mg/fracción de 1-1.5 cm
proximal
de longitud.
Vello pubiano Vello pubiano En envoltorio o sobre de
100 mg
y axilar y axilar papel
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TOXICOLOGIA EF 8
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Muestra de Autopsias
CONCENTRACION CANTIDAD DE
APROXIMADA DEL MUESTRA
TOXICO
1mg/Lt 50 ml de Orina o Sangre
50 g de tejido
10mg/Lt 5ml de Orina o Sangre
5g de tejido
Mas de 10mg/Lt 1ml de Orina o Sangre
1g de tejido
Transporte de muestras
biológicas
Asegurar condiciones de:
• Temperatura
• Agitación
• Exposición a la luz
• Posición del envase
• Tiempo de transporte
Medios de transporte:
• Primario
• Secundario
• Terciario
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TOXICOLOGIA EF 9
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Sistema básico de triple
embalaje
La Cadena de Custodia
Es el procedimiento documental que pretende asegurar
a través de un seguimiento trazable, fundado en la
responsabilidad asumida por los intervinientes, que la
muestra que se procesa en el laboratorio toxicológico
no sea alterada, sustituida o cambiada, entre el
momento en que ésta se recoge hasta el momento que
finaliza el análisis.
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TOXICOLOGIA EF 10
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Etapas de la cadena de custodia
1. Extracción o recolección de
la prueba.
2. Preservación y embalaje de
la prueba.
3. Transporte o traslado de la
prueba.
4. Traspaso de la misma, ya
sea a los laboratorios para su
análisis, o a las diferentes
fiscalías para su custodia.
5.Custodia y preservación final
hasta que se realice el debate.
Etiquetado
Todo indicio debe ser identificado con
una etiqueta en la que aparecerán
éstos datos:
• Número de averiguación previa.
• Número de oficio.
• Número de indicio que le corresponde.
• Hora a la que fue recolectado.
• Tipo de indicio de que se trate.
• Condiciones en que se encuentra.
• Nombre del perito que intervino.
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Características de las muestras
Cantidad suficiente.
Representativa.
Sin conservadores ni fijadores.
Colocadas en frascos de boca ancha.
Debidamente identificadas y rotuladas.
Remisión: conservar la cadena de frío.
Evitar contaminaciones externas.
Lugar de conservación, medio y transporte.
Evitar el uso de conservadores
Cadena de custodia
Características de las muestras
Descripción del material.
Responsable de la toma de muestra.
Lugar de destino(interno o externo
Fecha.
Condiciones del transporte.
Breve resumen de historia clínica.
Plan de contingencia.)
Cantidad de material en el interior
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Características de las muestras
• Número de referencia de la muestra.
• Tipo de muestra (sangre, saliva, pelos...).
• Si la muestra elegida es sangre líquida, describir el
tipo de anticoagulante utilizado en el envío.
• Nombre de la persona a la que se realiza la toma o
código elegido para identificarla.
• Relación con el caso (víctima, sospechoso....
Para evitar un muestreo
incorrecto
1. Tener en cuenta el objetivo del muestreo.
2. Considerar el tamaño de la muestra, el tipo de
envase y de tapa , la naturaleza de los envases, el
tipo de conservante , los tiempos de
representatividad de la muestra , el tipo de
análisis a practicar.
3. Evitar la contaminación de la muestra.
4. Proteger la muestra de cualquier cambio químico,
físico o biológico antes del análisis.
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Para evitar un muestreo
incorrecto
4. Tener en cuenta el transporte de la muestra.
5. Considerar las técnicas de pretratamiento de las
muestras.
6. Realizar las determinaciones in situ de aquellos
parámetros que así lo requieren.
7. Conformar una cadena de custodia apropiada e
incuestionable.
8. La toma de muestra debe realizarla por todo lo
expuesto un especialista en el tema , y no dejarla
librada a manos inadecuadas
Lineamientos básicos en el manejo y envío
de las muestras
1. Muestras identificadas con los
datos relevantes del caso.
2. Frascos, viales, tubos, etc. tapados
herméticamente, con sus tapas y
tapones asegurados con cinta
adhesiva.
3. Si son varios tubos se aseguran
con ligas y se colocan en bolsas
cerradas.
4. Si son órganos se colocan en
papel aluminio dentro de una
doble bolsa de plástico.
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Continuación…
5. Las laminillas se deben enviar secas, envueltas
individualmente en papel de China y cada una
estar identificada.
6. Para el envío, las muestras se colocan en cajas
térmicas resistentes, empaquetándolas con
relleno de papel, plástico o madera (viruta).
7. Si se envían por avión,
asegurarse que el paquete viaje
en el área presurizada para
evitar la pérdida (evaporación)
de los especímenes.
Continuación…
8. Deben ir una carta que especifique qué tipo de prueba
se solicita y otros parámetros. Y se colocan dentro del
paquete en una bolsa de plástico sellada.
– Los datos deben coincidir.
– Escribir con letra de molde, de preferencia a
máquina y enviar en original.
– La cantidad de muestra enviada debe estar de
acuerdo a los estudios solicitados.
– Indicar en el paquete en un lugar visible si éste
contiene muestras de cólera, rabia, poliomielitis,
aguas residuales, citología, paludismo, VIH, etc..
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Continuación…
9. Las muestras se deben
remitir lo más pronto
posible después de
obtenidas para asegurar
su adecuada preservación.
10. Es conveniente que se
informe del envío al
departamento de
recepción de muestras del
laboratorio toxicológico.
TIPO DE
MUESTRA
TOMA DE CANTIDAD DE
MUESTRA MUESTRA
OPORTUNIDAD VENENOS
DE MUESTRA VOLATILES
EXTRACCION
ANALISIS SEGÚN VENENOS
EXTRACCION ORGANICOS
TOXICOLOGICO NATURALEZA DEL
TOXICO
VENENOS
METALICOS
ANALISIS
CUALITATIVO
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Selección de los envases y de los sistemas de recolección ,
como de los reactivos para preservar las muestras, para evitar
pérdidas de analitos (por volatilización, absorción,
precipitación , degradación biológica , etc).
Transporte y conservación (sensibilidad a la luz, reactividad
,etc ) .
Pretratamiento de muestras – preconcentración . Eliminación
de interferencias . Transformación de analitos en una especie
con mayor sensibilidad analítica .
CONSERVACIÓN DE LA
MUESTRA
• Un tema de vital importancia en la conservación de
muestras, es el de los materiales con los que están
fabricados los elementos que vayan a entrar en
contacto con la muestra.
• Dichos materiales, deben cumplir una serie de
requisitos para que su interacción con la muestra
sea lo más baja posible y garanticen el aislamiento
de la misma del entorno y eviten su contaminación.
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CONSERVACIÓN DE LA
MUESTRA
• El objetivo de una muestra es permitirnos conocer
las condiciones de un sistema en el momento del
muestreo, por lo cual, no sólo es imprescindible
que la muestra sea representativa, sino que sus
propiedades deben permanecer inalteradas
durante todo el proceso de manipulación y análisis.
• De esta manera, el valor determinado debe ser lo
más próximo posible al valor que tendría el
parámetro en estudio en la muestra sin manipular.
CARACTERISTICAS DE LOS
ENVASES
no ser solubles en el agua ni en otros componentes que
pueda contener la muestra,
no presentar adsorción de las sustancias a analizar,
sobre todo de aquellos constituyentes que se deban
analizar a nivel de trazas (metales pesados, elementos
radiactivos, etc.) (ejemplo : muestras para analizar
mercurio deben ser de vidrio y no de plástico),
no reaccionar con los componentes de la muestra,
ser fácilmente limpiables,
en caso de contacto con muestras para análisis de
parámetros biológicos deben ser esterilizables y que en
su composición no existan sustancias tóxicas para las
bacterias que afecten su viabilidad.
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TOXICOLOGIA EF 18
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CARACTERISTICAS DE LOS
ENVASES
Otras características exigibles a los recipientes y
equipos destinados a la obtención de muestras, en el
caso de ciertos parámetros específicos, son:
ser impermeables a gases, cuando vayan a
realizarse determinaciones de sustancias gaseosas
o volátiles como VOC’s, amoníaco, y otras,
ser opacos en el caso de parámetros fuertemente
influenciables por la luz, como color y DBO5,
El éxito de un análisis toxicológico y su
interpretación depende en grado sumo de la
adecuada selección, recolección,
preservación y envío de muestra
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TOXICOLOGIA EF 19
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CUESTIONARIO
1. Como se realiza la toma de muestra
para un análisis toxicológico?
2. Que envases se utilizan para muestras
de compuestos orgánicos, plaguicidas,
aceites?
3. Que envases se utilizan para muestras
de metales traza?
4. Que cambios pueden ocurrir en las
muestras?
5. Cuales son las técnicas de preservación
de las muestras y como funcionan?
6. Para realizar la toma de muestra para
un análisis toxicológico que se debe
tomar en cuenta?
CUESTIONARIO
7. De que depende un análisis
toxicológico y su interpretación?
8. En su informe coloque imágenes
de como debe enviarse las
muestras toxicológicas de
acuerdo a la clasificación?
9. Muestre modelos de etiquetas
para las muestras biológicas y no
biológicas?
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CUESTIONARIO
10. Realice un cuadro resumen del tiempo
para la toma de muestras de : Morfina,
alcohol, cocaína, marihuana,
benzodiacepinas, disolventes orgánicos
plaguicidas, metales, etanol, CO2 y gases
MUESTRA sang orina Conteni cerebro hígado riñón bilis Uñas y
re do pelo
gástrico
CANTIDA 100 Máxima Por 100g 100g 100g vesícula x
D DE ml disponi estoma
MUESTRA ble go
Morfina
etanol
INFORME DE LABORATORIO
• 1. Objetivos.
• 2. Fundamento Teórico.
• 3. Materiales ,Reactivos, Equipos y
muestras
• 4. Procedimiento - Desarrollo de la
práctica. (fotografías)
• 5. Observación
• 6. Conclusiones
• 7. Cuestionario
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TOXICOLOGIA EF 21