PROCEDIMIENTO OPERATIVO PAGINACION
ESTANDAR (POE) 1 HASTA 5
CODIGO
DETERMINACION FACTOR REUMATOIDE (RF) POE-IC-01
Fecha de Emisión:
ACTUALIZACION FECHA RESPONSABLE OBSERVACION
DD/MM/AA
ELABORO REVISO APROBO
Cargo: Cargo: Cargo:
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PROCEDIMIENTO OPERATIVO PAGINACION
ESTANDAR (POE) 2 HASTA 5
CODIGO
DETERMINACION FACTOR REUMATOIDE (RF) POE-IC-01
Fecha de Emisión:
1. OBJETIVO
Este Procedimiento Operativo Estándar tiene por objeto describir el
procedimiento para la determinación del Factor reumatoide (RF) en las prácticas
de Inmunología Clínica.
2. RESPONSABLE
El responsable de velar por la veracidad de dicho proceso es el Docente de
Prácticas a cargo de direccionar las prácticas.
3. ALCANCE
Este Procedimiento Operativo Estándar aplica para determinar el Factor
Reumatoide asignatura práctica de Inmunología.
4. FRECUENCIA
La frecuencia con que se realiza este procedimiento esta dada por la
programación de las prácticas programadas por el docente.
5. DEFINICIÓNES
REACTIVO LATEX: Suspensión de Partículas de látex sensibilizadas con
antígenos o anticuerpos.
6. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
Kit para Factor Reumatoide o RF:
a. Reactivo Látex RF: suspensión de partículas de látex de poliestireno
sensibilizadas con IgG humana.
b. Control Positivo: Suero humano diluido que contiene mas de 20 UI/ml
de factor reumatoide.
c. Control Negativo: Suero humano diluido que contiene menos de 1 UI/ml
de RF.
d. Portaobjetos.
Solución Salina Fisiológica
Pipetas serológicas o Automáticas
Cronómetro.
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PROCEDIMIENTO OPERATIVO PAGINACION
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DETERMINACION FACTOR REUMATOIDE (RF) POE-IC-01
Fecha de Emisión:
7. MUESTRA
Suero fresco recogido por centrifugación de sangre coagulada (Ver POE-TM-
01).
8. FUNDAMENTO
La Mayoría de los sueros de pacientes afectados de artritis reumatoide tienen la
propiedad de reaccionar con las IgG no solo humanas sino también de otras
especies, esto es debido a la presencia en ellos de una inmunoglobulina
mayoritariamente tipo IgM que se conoce como el Factor Reumatoide. Esta es
una reacción Ag-Ac actuando el RF como un anticuerpo.
La técnica se fundamenta en una reacción Ag-Ac donde el reactivo látex RF que
contiene IgG humana se pone a reaccionar con sueros de pacientes dando
aglutinación al encontrarse en este 10 o mas UI/ ml. Esta aglutinación es índice
de positividad.
9. RECOMENDACIONES PREVIAS
Si la prueba no puede realizarse el mismo día el suero puede ser conservado
durante 48 horas entre 2 y 8° C.
No deben usarse sueros bemolizados o contaminados
No usar Plasma
Antes de realizar una serie de determinaciones es aconsejable controlar el
reactivo dando el control positivo una clara aglutinación y el control negativo
no.
10. PROCEDIMIENTO CUALITATIVO
10.1 Dejar que el reactivo y los controles alcancen la temperatura ambiente (20 -
30° C) y agitar no violentamente.
10.2 Colocar 50 ųL de Suero en el Portaobjetos
10.3 Añadir una gota del reactivo junto a la del suero.
10.4 Mezclar las gotas con un palillo cubriendo la superficie de la sección del
portaobjetos.
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ESTANDAR (POE) 4 HASTA 5
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DETERMINACION FACTOR REUMATOIDE (RF) POE-IC-01
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10.5 Agitar ya sea manual o mecánicamente en agitador mecanico (60-80 rpm)
durante 3 minutos
10.6 Observar la presencia o ausencia de Aglutinación
11. PROCEDIMIENTO SEMICUANTITATIVO
11.1 Prepara las diluciones del suero de la siguiente forma:
1 2 3 4 5 6
SSF (ųL) --- 50 50 50 50 50
MUESTRA (ųL) 50 50 -- -- -- --
MEZCLAR Y 50 50 50 50 50
TRASFERIR (ųL)
DILUCION 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
UI/ml 10 20 40 80 160 320
11.2 Añadir una gota del reactivo a cada uno de las seccione 1 a6 del
portaobjetos que contienen las distintas diluciones del suero
11.3 Mezclar ambas gotas con un palillo y agitar como en la Pba cualitativa.
11.4 Observar la presencia o ausencia de aglutinación.
12. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
La lectura de los resultados debe leerse a los tres minutos de iniciada la
reacción si se excede el tiempo puede inducir a la interpretación erronea de los
resultados.
13. INTERPRETACION Y REPORTE DE RESULTADOS.
13.1 PROCEDIMIENTO CUALITATIVO
La presencia de aglutinación indica un contenido de factor reumatoide igual o
mayor de 10 UI/ml. La ausencia de aglutinación indica un contenido de factor
reumatoide inferior a 10 UI/ml
Las reacciones positivas se reportan así: tres cruces de positividad (+++) con
agregados grandes en fondo transparente, dos cruces agregados moderados
con fondo ligeramente opaco, una cruz agregado fino sobre fondo opaco.
13.2 PROCEDIMIENTO SEMI CUANTITATIVO
El titulo aproximado corresponde al de la dilución mas alta del suero que aún
presente aglutinación claramente visible.
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14. REFERENCIAS.
14.1 Rojas William. INMUNOLOGIA. Corporación de Investigaciones Biológicas
CIB
14.2 Inserto de Rheumajet RF. Laboratorio Achebe.
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