Cartilla de Laboratorios Bioquímicos
Cartilla de Laboratorios Bioquímicos
LABORATORIOS
INTRODUCCION
La bioquímica estudia la base molecular de la vida. En los procesos vitales
interaccionan en gran número de sustancias de alto peso molecular o
macromoléculas compuesto de menor tamaño, dando por resultado un número
muy grande de relaciones coordinadas que producen la energía que necesitan la
célula para vivir, la síntesis de todos los componentes de los organismos vivos y la
reproducción célula.
En el presente documento vamos a abordar los principales aspectos teóricos y
experimental sobre carbohidratos quienes son moléculas formadas por carbono,
hidrógeno y oxígeno (C, H, O) e incluyen algunas de las moléculas más relevantes
en la vida de los organismos, como son la glucosa, que es universalmente
utilizada por las células para la obtención de energía metabólica, los lípidos I y II
son un conjunto de moléculas orgánicas que cumplen funciones diversas en los
organismos vivientes, entre ellas la de reserva energética (como los triglicéridos),
y estructural (como los fosfolípidos de las bicapas) y reguladora (como las
hormonas esteroides), ácidos nucleicos los poseen todos los organismos es decir
son biomoléculas que dirigen y controlan la síntesis de sus proteínas,
proporcionando la información que determina su especificidad y características
biológicas, ya que contienen las instrucciones necesarias para realizar los
procesos vitales y son las responsables de todas las funciones básicas en el
organismo PH que influye en el potencial de hidrogeno y determina si es acida o
básica la sustancia. Actividad Enzimática son catalizadores por los organismos
vivos y casi todas las enzimas son proteínas y finalmente la fotometría.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Reconocer las estructuras químicas de las macromoléculas naturales
identificándolas como sustancias de importancia biológica valorando de forma
crítica y responsable su participación en los procesos vitales y el impacto en la
sociedad actual
OBJETIVOS ESPECIFICOS
1. Proporcionar al estudiante unos conocimientos básicos, teóricos, y
prácticos, sobre las principales metodología y técnicas de investigación
biomolecular.
2. Determinar la solubilidad y desnaturalización de las proteínas con varios
agentes físicos y químicos.
3. Reconocer e identificar los carbohidratos mediante los diferentes tipos de
reactivos (benedict, molisch feling Ay B, troumer, almidón seliwanoff y
prueba para sacarosa).
4. Establecer la relación, reacción y función de los lípidos (Aceites Grasas) en
el laboratorio de bioquímica en cuanto a su solubilidad e hidrolisis.
5. Determinar la presencia del almidón el tubérculo de la yuca y Observar las
propiedades físicas y químicas que presenta al momento de mezclarlo con
los diferentes reactivos suministrados por el docente.
6. identificar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y
vegetales.
7. Demostrar las leyes que fundamentan los análisis fotométricos.
SOLUBILIDAD
MARCO TEORICO
La solubilidad es una medida de la capacidad de disolverse una determinada
sustancia (soluto) en un determinado medio (solvente); implícitamente se
corresponde con la máxima cantidad de soluto disuelto en una dada cantidad de
solvente a una temperatura fija y en dicho caso se establece que la solución está
saturada. Su concentración puede expresarse en moles por litro, en gramos por
litro, o también en porcentaje de soluto (m(g)/100 mL) . El método preferido para
hacer que el soluto se disuelva en esta clase de soluciones es calentar la muestra
y enfriar hasta temperatura ambiente (normalmente 25 C). En algunas condiciones
la solubilidad se puede sobrepasar de ese máximo y pasan a denominarse como
soluciones sobresaturadas.
No todas las sustancias se disuelven en un mismo solvente. Por ejemplo, en el
agua, se disuelve el alcohol y la sal, en tanto que el aceite y la gasolina no se
disuelven. En la solubilidad, el carácter polar o apolar de la sustancia influye
mucho, ya que, debido a este carácter, la sustancia será más o menos soluble; por
ejemplo, los compuestos con más de un grupo funcional presentan gran polaridad
por lo que no son solubles en éter etílico.
MATERIALES Y REACTIVOS
1. Termómetro
2. Vasos precipitados
3. Tubos de ensayo
4. Pinzas
5. Papel filtro
6. Agitador
7. Dicromato de potasio
8. Sulfato de cobre
9. Ácido acético
10. Sulfato de níquel
11. Yodo de cristales
PROCEDIMIENTOS
1. Se llenaron con agua dos
2. Se llenó hasta la mitad dos
tubos de ensayo hasta la mitad
tubos de ensayo con agua
colocando en unos de los tubos
destilada y se calentó uno de
crista de sulfato de níquel y en el
ellos hasta que hierva, después
otro sulfato de cobre se taparon
se le adicionaron 5g de sulfato
y se agitaron y posteriormente
de cobre.
se dejó reposar
MATER
IALES
1. Tubo de ensayo
2. Beaker
3. Papel tornasol rosado
4. Papel tornasol azul
5. Probeta
6. Pipeta
7. Vaso precipitados
8. Ácido clorhídrico
9. Hidróxido de amonio
10. Hidróxido de sodio
11. potenciómetro
-.
Procedimiento # 2 potenciómetro
De acuerdo con lo esperado y los resultados obtenidos se describe en las sgte
tabla cada sustancia obtenida de acuerdo a su PH tomando como referencia la
escala del PH.
Sustancias PH obtenido Tipo de sustancia según el
PH
orina 5,62 acido
leche 7,01 neutra
Coca -cola 2,37 acido
Jugo de naranja 3,19 acido
Jugo de limón 2,42 acido
Jugo de cifrut 3,02 acido
Vinagre casero 4,02 acido
Como pudimos observar en la práctica gracias al papel tornasol donde es
utilizado para medir la concentración de iones hidrógenos contenido en una
sustancia o disolución, donde sumergimos el papel tornasol en las soluciones y
luego retiramos para comparar con la escala del pH
Procedimiento # 2
Como se muestra en la tabla anterior la gran mayoría de estas muestras son
acidas a diferencia de la leche que presenta un pH de 7,01 neutra, basados en la
tabla podemos determinar que este PH puede variar con unas características
acidas y neutras.
Características de los ácidos:
1. Tienen un sabor picante
2. Dan un color característico a los indicadores
Características de las bases:
1. Tienen un sabor amargo
2. Se sienten jabonosas al tener tocarla
3. Nunca se deben probar esta clase de sustancias
CUESTIONARIO
1. Investigue el compuesto que contribuye al PH de las soluciones
obtenidas ?
Limón, naranja: ácido cítrico
Gaseosa Coca-Cola: ácido fosfórico
Leche: ácido láctico
Vinagre: ácido acético
Orina: citrato de potasio, bicarbonato de sodio
2. que son los indicadores y cuáles son los indicadores más importantes
que se utilizan en el laboratorio de bioquímica?
Son sustancias que siendo acidas o bases débiles al añadirse a la muestra sobre
la que se desea realizar el aná[Link] produce un cambio químico que es
apreciable, generalmente un cambio de color esto ocurre porque esta sustancia
sin ionizar tiene un color distinto que al ionizarse.
BIBLIOGRAFIA
1. Skoog, Douglas A., West, Donald M., Holler, F. James, Crouch, Stanley R.
Química Analítica, 7a. edición, McGRAW-HILL, México, 2001.
2. Mahan, Bruce H. QUÍMICA CURSO UNIVERSITARIO, Fondo Educativo
Interamericano, S.A., Bogotá, 1968.
1.
2.
TO
Se extrajo la clara de huevo por un tiempo corto.
luego en un beaker se mezcló 5 veces su volumen (5cm).
3. con un gorro de tela fina se filtró, preparando la sustancia para los
experimentos siguientes.
2. COAGULACIÓN
4. REACCIÓN XANTOPROTEICA
5. REACCIONES DE MILLON
1. en un tubo de ensayo limpio y seco se le adiciono 3 ml de albumina.
2. más 5 gotas de reactivo de millón.
3. luego en beaker y el mechero de bunsen se hirvió 100ml de agua y se
calentó la solución.
4. después de un tiempo determinado se dejó enfriar a temperatura ambiente.
5. y así adiciono 5 gotas de nitro de sodio.
6. observando las características físicas y químicas de esta solución.
5. DESNATURALIZACIÓN
RESUL
TADOS
COMPOSICIÓN DE LA CLARA DEL HUEVO.
3.
6. DESNATURALIZACIÓN
si se somete a las proteínas a la acción de ciertos agentes que trastornan su
organización, se alteran sus propiedades físicas, químicas y biológicas naturales,
y se dice que las proteínas se desnaturalizan. Usualmente, debido a la menor
solubilidad en agua de la proteína desnaturalizada se observa la precipitación en
la forma de un sólido blanco. Si se ensaya la albúmina del huevo frente a calor,
alcohol etílico, sales neutras. Los iones de algunos metales pesados, tales como
la plata (Ag) y el mercurio (Hg), precipitan a las proteínas y, por lo tanto inactivan
las enzimas. Normalmente, las enzimas están en suspensión dentro del
citoplasma o unidas a una biomembrana.
.
[Link] DE LA CISTEÍNA
Al añadir los reactivos de la prueba de nitro prusiato ocurre una reacción que se
puede explicar en dos etapas: en la primera, durante los diez minutos iniciales, el
cianuro reduce la cistina, de esta manera se rompe el enlace di sulfuro y se
forman dos aminoácidos de cisteína que tienen grupos sulfhídrico libres. En la
segunda etapa, el nitro prusiato de sodio interacciona con la cisteína, produciendo
un compuesto soluble de color rojo-púr
INTERPRETACION: Las proteínas son alimentamos que tomamos a diario contienen unos
nutrientes que son los que proporcionan al organismo energía, le permiten formar y mantener
estructuras corporales y participan en los procesos metabólicos. Las proteínas están formadas
por unas unidades más pequeñas llamadas aminoácidos. Existen 20 tipos distintos de
BIBLIOGRAFIA
aminoácidos de los cuales ocho los tenemos que ingerir con los alimentos, pues somos
incapaces de sintetizarlos, por ello estos ocho aminoácidos se les denomina esenciales.
CARBOHIDRATOS
MARCO TEORICO
LOS CARBOHIDRATOS
A) Monosacáridos o azúcares
simples: no pueden ser hidrolizados
a moléculas más pequeñas. En su nomenclatura, el sufijo “osa” es para designar
un azúcar reductor que contiene un grupo aldehído o un grupo alfa-hidroxicetona.
Ejemplo: Ribosa, arabinosa, xilosa, lixosa, ribulosa, fructosa, glucosa, que se
encuentran en las frutas, miel y verduras.
MATERIALES Y REACTIVOS
1. Tubos de ensayo
2. Beaker de 600ml
3. Beaker 150ml
4. Mechero de bunsen
5. Pipetas
6. Espátulas
7. Agitador de vidrio
8. Maya de asbesto
9. Balanza
10. Gradilla de madera
11. Probeta de 100ml
12. Baño de maría
13. Papel filtro
REACTIVOS
1. Glucosa o sacarosa
2. Lactosa
3. Fructosa
4. Sacarosa
5. Maltosa
6. Galactosa
7. Almidón
8. Algodón
9. Sulfato cúprico
10. Ácido sulfúrico
11. Nitrato de plata
12. 1-naftol
13. Etanol
14. Feling a y b
15. Acetato de sodio
16. Sulfato de amonio
17. Éter
18. Reactivo de benedict
PROCEDIMIENTO
EXPERIMENTO N°1
REACCION DE MOLICH
Luego en orden se adiciona 10-12 gotas de reactivo de molich a cada uno de los
tubos y agite. Acto seguido vierta con cuidado; Hasta 3ml de H 2SO4 haciéndolo
resbalar con cuidado por las paredes del tubo sin agitar.
Que coloración toma cada uno de los tubos, A qué se debe el anillo violeta Escriba
la ecuación correspondiente.
EXPERIMENTO N°2
REACCION DE BENEDICT
REACTIVO DE TOLLENS
EXPERIMENTO N°4
PRUEBA DE FEHLING
EXPERIMENTO N°5
PRUEBA DE ALMIDON
REACCION DE MOLICH
MUESTRAS REACCION
MUESTRAS REACCION
MUESTRAS REACCION
MUESTRAS REACCION
MUESTRA REACCION
EXPERIMENTO N°10
PRUEBA DE SACAROSA
Al hidrolizar la sacarosa
obtuvimos la descomposición
de la misma, en sus dos
monosacáridos componentes
glucosa y fructosa.
Aplicando esta prueba pudimos conocer los componentes y características de la
misma, afirmando que es efectiva en presencia de HCL y en caliente, la sacarosa
se hidroliza, es decir, incorpora una molecula de agua y se descompone en los
monosacáridos que la forman, que si son reductores.
CUESTIONARIO
METABOLISMO DE LA GLUCOSA
[Link] un cuadro sobre las propiedades de algunos homos polisacáridos
teniendo en cuenta se estructura, estado natural y función.
2. Enfermedades en el hígado
La hiperglucemia es una afección bastante común entre los diabéticos. Las causas
que provocan la hiperglucemia pueden ser varios:
BIBLIOGRAFIA
1. [Link]
_carbohidratos
2. [Link]
q=clasificacion+de+los+carbohidratos&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=
0ahUKEwjWybzp177TAhWFwiYKHU2fAaAQ_AUIBigB&biw=1366&bih=662
3. [Link]
q=clasificacion+de+los+carbohidratos&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=
0ahUKEwjWybzp177TAhWFwiYKHU2fAaAQ_AUIBigB&biw=1366&bih=662
#tbm=isch&q=clasificacion+de+los+carbohidratos+simples+y+complejos&i
mgrc=9W_zvy2hY9lJqM:
4. guiadelaboratorio
5. [Link]
_carbohidratos
PRUEBA PARA LÍPIDOS I Y II
MARCO TEORICO
LOS LIPIDOS
CARACTERÍSTICAS GENERALES
Los lípidos son moléculas muy diversas; unos están formados por cadenas
alifáticas saturadas o insaturadas, en general lineales, pero algunos tienen anillos
(aromáticos). Algunos son flexibles, mientras que otros son rígidos o semiflexibles
hasta alcanzar casi una total flexibilidad mecánica molecular; algunos comparten
carbonos libres y otros forman puentes de hidrógeno. La mayoría de los lípidos
tiene algún tipo de carácter no polar, es decir, poseen una gran parte apolar o
hidrofóbico ("que le teme al agua" o "rechaza el agua"), lo que significa que no
interactúa bien con solventes polares como el agua, pero sí con la gasolina, el éter
o el cloroformo.
CLASIFICACIÓN BIOQUÍMICA
Los lípidos son un grupo muy heterogéneo que usualmente se subdivide en dos,
atendiendo a que posean en su composición ácidos grasos (lípidos saponificables)
o no los posean (lípidos insaponificables):
MATERIALES Y
REACTIVOS
1. Tubos de ensayo
2. Beaker
3. Hidróxido de sodio
4. Agua destilada
5. Sudan III
6. Acetona
7. Bisulfato de potasio
8. Acido etanoico
9. Éter
10. Aceite mineral
11. Acido clorhídrico
MATERIALES SUMINISTRADOS POR EL ESTUDIANTE
Experimento N ° 3
SAPONIFICACIÓN
EXPERIMENTO N°5
TINCION
TADOS
Manc
PRUEBA DE TINCION
Con los resultados obtenidos es notable justificar que, de acuerdo a los resultados
obtenidos, en el caso de suda III, todo en el aceite resulto teñido mientras que, en
el tubo con tinta, este se fue al fondo, pero el aceite quedo igual. Como se analiza
en la muestra es importante resaltar que al agregarle el sudan III al tubo 2 este
demoro en irse al fondo completamente se fue mezclando poco a poco y, sin
embargo, este no se mezcló totalmente. En la parte de arriba se formó el colorante
aplicado en el caso del tubo 1 y el aceite quedo igual, el sudan es utilizado
principalmente para detectar la presencia de lípidos en una muestra, los cuales se
colorean por el reactivo, ya que este compuesto de sudan III por su baja polaridad
es más soluble en los lípidos que es [Link] lípidos se colorean
selectivamente de rojo-naranjado con el colorante sudan
PRUEBA DE GLICEROL
El proceso de fabricación del jabón se lleva a cabo gracias a una reacción química
llamada saponificación. La saponificación es la hidrolisis con catálisis básica de
grasas y aceites para producir jabón. Los aceites vegetales y grasas animales son
triglicéridos (esteres de glicerina con ácidos grasos) y al ser tratados son una base
fuerte como NAOH o KOH se saponifica, es decir se produce jabón (sal de ácido
graso) y la glicerina (glicerol).
PRUEBA DE INSATURACION
Los resultados obtenidos por lo ácidos grasos presentes en grasas animales son
comúnmente saturados, mientras que los que están presentes en los vegetales
contiene uno o más dobles enlaces. Los halógenos pueden unirse fácilmente a los
dobles enlaces. La decoloración encontrada en una solución de bromo o yodo por
un lípido indica la presencia de dobles enlaces. el bromo rompe los enlaces y
produce el blanqueamiento, como lo muestra la imagen.
Los fosfolípidos son las moléculas más abundantes en las membranas biológicas.
Aunque se pueden clasificar en dos grupos distintos, llevan todo un único grupo
fosfato unido a un amino alcohol que les caracteriza. Los fosfolípidos e encuentran
en ambas caras de la membrana citoplasmática, es de las bicapas lipídicas son
fluidas, los fosfolípidos individuales difunden rápidamente por la superficie
bidimensional de la membrana. Esta estructura, que se propone para las
membranas biológicas, se conoce como el modelo de mosaico fluido, donde
mosaico se refiere al hecho que también la integran proteínas, colesterol, ergo
esterol, y otros tipos de moléculas insertadas entre los fofolí[Link] en la bicapa
lipídica.
1. [Link]
de-los-lipidos
2. enciclopedia:mentorinteractivo
Marco teórico
EL ALMIDON
GRANO DE
ALMIDÓN
La mayor parte de los granos de almidón de las células del endospermo prismático
y central del trigo tiene dos tamaños: grande, 15-30 mm de diámetro, y pequeño,
1-10 mm, mientras que los de las células del endospermo sub-aleurona, son
principalmente de tamaño intermedio 6-15 mm de diámetro. En las células del
MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES
1. Tubos de ensayos
2. Beaker de 600ml
3. Beaker de 150ml
4. Agitador de vidrio
5. Gradilla de madera
6. Probeta de 100ml
7. Baño maria
8. Maya de asbesto
9. Vaso de precipitado
REACTIVOS
2. HCL concentrado
3. Reactivo de lugol
4. Reactivo de benedic
5. Agua destilada
1. Almidon de yuca
PROCE
DIMIEN
Se obtiene almidón mediante un trozo de yuca rayado
TO
REACCION DE YODO
En 3 tubos de ensayos numerados se vertieron las siguientes soluciones:
TUBO 1.
TUBO2.
En el segundo tubo que contiene almidón al agregar dos gotas de yodo (lugol) nos
dio una coloración azul negruzco.
TUBO3.
TUBO 1
TUBO2
REACCION DE YODO
TUBO 1: En el primer tubo que contenía agua destilada y lugol, nos dio una
coloración amarillenta transparente, debido a que el agua no es un polisacárido
que pueda producir la reacción con el yodo, por lo que se torna el color del
reactivo de yodo que hemos añadido.
La prueba del yodo es una reacción química usada para determinar la presencia o
alteración de almidón u otros polisacáridos. Una solución de yodo – di yodo
disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio- reacciona con almidón
produciendo un color purpura profundo.
HIDROLISIS DEL ALMIDON
Muchas amilasas son activadas por Ca+, lo cual es una de las razones por las que
el calcio es un elemento esencial.
Lugol y benedict
CUESTIONARIO
1-¿Cuál es el porcentaje en peso del almidón en el hígado humano?
Principal polisacárido de reserva de las células animales y equivalentes del
almidón de las células vegetales abunda especialmente en el hígado donde puede
llegar a construir hasta el 10% de su peso húmedo y se halla en una proporción de
su peso del 1-2% en el musculo
esquelético en la células hepáticas aparece en forma de gránulos constituidos por
agrupaciones de simples moléculas muy ramificadas.
2- diga el estado natural y función biológica de los polisacáridos.
Los polisacáridos están formados por la unión de centenares de monosacáridos,
unidos por enlaces “O-glucosídicos”. Existen algunos formados por unidades de
pentosa, llamados pentosanas, pero los que tienen importancia biológica son los
polímeros de unidades de hexosas, llamados también hexosanas, y muy
especialmente los polisacáridos formados de glucosa. 37
BIBLIOGRAFIA
1. [Link]
04ViBbxvhKhfRMY5g/edit
2. [Link]
q=granos+de+almidon+de+yuca+en+un+tubo+de+ensayo&espv=2&source
=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwiK0pP-
kL7TAhWDRSYKHegmCXQQ_AUIBigB&biw=1680&bih=920#tbm=isch&q=
cuales+es+el+papel+que+desempe
%C3%B1a+el+almidon+en+los+animales
3. [Link]
MARCO TEORICO
ACIDOS NUCLEICOS
Son compuestos orgánicos de elevado peso molecular, formados por carbono, hidrógeno,
oxígeno, nitrógeno y fósforo. Cumplen la importante función de sintetizar las proteínas
específicas de las células y de almacenar, duplicar y transmitir los caracteres hereditarios.
Los ácidos nucleicos, representados por el ADN (ácido desoxirribonucleico) y por el ARN
(ácido ribonucleico), son macromoléculas formadas por la unión de moléculas más
pequeñas llamadas nucleótidos.
NUCLEÓTIDOS
Son moléculas compuestas por grupos fosfato, un monosacárido de cinco carbonos
(pentosa) y una base nitrogenada. Además de constituir los ácidos nucleicos forman parte
de coenzimas y de moléculas que contienen energía. Los nucleótidos tienen importantes
funciones, entre ellas el transporte de átomos en la cadena respiratoria mitocondrial,
intervenir en el proceso de fotosíntesis, transporte de energía principalmente en forma de
adenosin trifosfato (ATP) y transmisión de los caracteres hereditarios.
2. alcohol
S
3. tubos de ensayo
4. mortero
5. NaCl
6. Arena
7. Sal
8. Detergente
9. Hígado de pollo
PROCED
IMIENT
O
ANALISIS
Resultados
Explicación Científica
Tubo 1 se le agrego acido acético lo pusimos al calor y se dejo enfriar se coagulo en gran
proporción
Tubo 2 se le agrego agua caliente cvasi no se
Cuestionario
1¿Cuál es el papel de los ácidos nucleicos?
La función principal de los ácidos nucleicos es almacenar y transmitir la
información genética. El ADN, a nivel molecular, tiene una doble función: sacar
copias de sí mismo, duplicarse, auto perpetuarse, asegurando la transmisión de
los genes en un proceso denominado REPLICACIÓN. Transmitir la información al
ARN, que saca copias del ADN, pudiendo así transcribir dicha información, en
forma de proteínas, determinando las características de la célula, la herencia; a
este proceso se le denomina TRANSCRIPCIÓN; Replicación del ADN.
Es un proceso semiconservativo ya que la doble hélice de ADN, cuando se
duplica, conserva una de sus hebras, y sintetiza la otra de nuevo, por
complementariedad de bases, añadiendo nucleótidos y utilizando la cadena madre
como patrón.
2¿Cómo se realiza la separación de los nucleótidos de ADN por
cromatografía de intercambio iónico?
Es el método más utilizado para la separación de ácidos nucleicos. El mecanismo
básico es el intercambio reversible de los iones en solución con los grupos
funcionales unidos covalentemente a una fase estacionaria insoluble llamada
resina. Por ejemplo, un ácido nucleico con carga negativa a pH 7,0 se unirá a un
intercambiador iónico con grupos cargados positivamente, pero el uirá de la
columna al cambiar el pH del tampón (tampón de elución) ya que los iones del
tampón de elución interaccionan con los grupos cargados del ácido nucleico o del
intercambiador iónico, respectivamente; primero el uirá de la columna las
moléculas cargadas positivamente que no se unen a la fase estacionaria y
posteriormente, al añadir el tampón de elución, el uirán las moléculas con poca
carga negativa neta y luego las de mayor carga negativa neta.
3¿explique el mecanismo de síntesis de proteínas?
La realización de la biosíntesis de las proteínas, se divide en las siguientes fases:
Fase de activación de los aminoácidos.
Fase de traducción que comprende:
Inicio de la síntesis proteica.
Anexos
Bibliografía
[Link]
[Link]
).pdf
Marco teórico
LAS ENZIMAS
Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones
químicas, siempre que sean termodinámicamente posibles: una enzima hace que
una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una
velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a mayor
velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas
actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en
moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las
células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las
reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas.
Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de
activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que la presencia de la enzima acelera
sustancialmente la tasa de reacción. Las enzimas no alteran el balance energético
de las reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la
reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso en escalas de millones de
veces..
Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas en las
reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio químico. Sin embargo, las
enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. La gran
diversidad de enzimas existentes catalizan alrededor de 4000 reacciones
bioquímicas distintas.5 No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas, pues
algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la
subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividad peptidil transferasa).
También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas enzimas
artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clá[Link]
actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores
enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas,
mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad.
Asimismo, gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad.
Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras..
TIPOS DE ENZIMAS
ÓXIDO-REDUCTASAS: estas enzimas están vinculadas con las reducciones y
oxidaciones biológicas que intervienen en los procesos de fermentación y de
respiración. Estas son esenciales en ciertas cadenas metabólicas como por
ejemplo la escisión enzimática de la glucosa y en la producción de ATP.
Transferasas: estas enzimas son las encargadas de catalizar la transferencia de
una porción de molécula a otra. Además, estas enzimas son las que actúan sobre
distintos sustratos, transfiriendo glucosilo, sulfató, amina, aldehído, entre otros
grupos.
HIDROLASAS: estas enzimas actúan sobre las moléculas de protoplasma, tales
como las de grasas, de glicógeno y de proteínas. El acto de catalizar es realizado
en la escisión de los enlaces de los átomos de nitrógeno y carbono o bien, de
carbono y oxígeno..
ISOMERASAS: estas son las que actúan sobre ciertas sustancias a las que
transforman en otras isómeras, lo que significa que tienen la misma fórmula
empírica pero un desarrollo diferente.
LIASAS: estas enzimas son las que actúan sobre los enlaces entre los átomos de
carbono, carbono y oxígeno, carbono y azufre o carbono y nitrógeno,
escindiéndolos.
Materiales
1. Tubo de ensayos
2. Beaker
3. Mechero de bunsen
4. Pipetas
5. Maya de asbesto
6. Gradilla de madera
7. Probeta
8. Baño de maría
9. Trocitos de Hígado
10. Trocitos de Tomate
REACTIVOS
1. Reactivo fehling
2. Solución de Lugol
3. agua oxigenada
4. Almidón
PROCEDIMIENTOS
1. Reconocimiento de la catalasa
Tome un tubo de
ensayo, Añada unos
trocitos de hígado.
Agregue 5ml de
agua Oxigenada.
2. Desnaturalización de la catalasa
En esta práctica se vio una propiedad fundamental
de las proteínas que es la desnaturalización.
Ya que la catalasa químicamente es una proteína, podemos
desnaturalizarla al someterlas a altas temperaturas. Al
perder la estructura terciaria, perderá también la función y
como consecuencia su función catalítica, por lo que no podrá descomponer el
agua oxigenada.
Colocar en un Añadir agua para hervir la
Añadir agua
tubo de ensayo muestra .Durante unos
varios trocitos de oxigenada y
minutos des pues de ese
hígado tiempo retirar el agua observar
1. Observar el
[Link] del almidón
1. RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA:
Trocitos de Trocitos de
tomate hígado Trocitos de
tomate
Trocitos de+hígado
agua
oxigenada (poco
+ agua oxigenada
burbujeo)
(intenso burbujeo)
2. Desnaturalización de la catalasa:
Trocitos de hígado cocido
+ agua oxigenada
34
Almidón y saliva
Reacción de Reacción de
Fehling Lugol
Baño maría
ANALISIS DE RESULTADOS
Reconocimiento de la catalasa
En un tubo de ensayo hemos puesto trocitos de hígado y hemos añadido agua
oxigenada. Hemos observado un intenso burbujeo debido a la presencia de
catalasa en la carne ya que esta descompone el agua oxigenada en agua y
oxígeno.
En otro tubo de ensayo hemos puesto trocitos de Tomate y hemos añadido agua
oxigenada. Hemos observado un pequeño burbujeo debido a la presencia de
catalasa en el tomate ya que esta descompone el agua oxigenada en agua y
oxígeno.
La diferencia entre la cantidad de burbujeo producido por el hígado y el producido
por el tomate se debe a la cantidad de catalasa en los tejidos utilizados ya que hay
una mayor actividad en el tejidos animales debido a que hay más sustancias
toxicas que detoxificar, con lo cual tendrán que actuar más moléculas de catalasa.
Desnaturalización de la catalasa
Una de las enzimas que intervienen en la protección y en el mantenimiento del
balance oxidante/antioxidante es la catalasa.
Como Stryler, L. (1995) nos menciona
La catalasa es una enzima que podemos encontrar en el hígado de muchos
organismos vivos, y cataliza la reacción de descomposición del peróxido de
hidrogeno en agua y oxígeno.
2H2O2 → 2H2O + O2
Todas las enzimas son proteínas. Por lo tanto, todas las enzimas sufren
desnaturalización frente al calor. Esto quiere decir que cuando la temperatura es
muy elevada, la enzima pierde su estructura terciaria, por lo tanto su sitio activo
también se desnaturaliza, y ya no puede cumplir su función y no se observara
ninguna reacción.
En el transcurso de la práctica, pudimos observar que al hervir el trocito de hígado,
se ha producido la desnaturalización de la catalasa por el calor; al ser esta enzima
de naturaleza proteica la desnaturalización conlleva la pérdida de su estructura
terciaria y por lo tanto de su función, lo que explica que al añadir el H2O2, esta vez
no se produce burbujeo.
Hidrolisis del almidón
Almidón + lugol: la reacción del Lugol es un método que se usa para identificar
polisacáridos.
El almidón en contacto con el reactivo de Lugol toma un color violeta. Esa
coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las
espiras de la molécula de almidón. Por lo tanto, no es una verdadera reacción
química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las
propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración violeta. Este
complejo es sensible a la temperatura, ya que si se calienta el tubo, el color
desaparece. Esto se debe a que las espiras del almidón se "desarman", por así
decirlo, y el yodo se libera. Una vez frío, las espiras se reorganizan y se vuelve a
ver el color.
Almidón + fehling: El reactivo de fehling se utiliza para manifestar la presencia de
glucosa. Lo que hace es que a través de ciertos compuestos aparece un
precipitado coloreado. Este precipitado aparece porque la glucosa tiene poder
reductor.
Saliva + almidón + fehling: La disolución de almidón sola no cambia de color, lo
cual significa que no tiene poder reductor. La ptialina que está en la saliva rompe
las cadenas de almidón y las desdobla hasta obtener maltosa, dextrinas límite y
glucosa. Por eso da color a la prueba de fehling
Saliva + almidón + lugol: el lugol es un reactivo que determina la presencia de
almidón en una disolución. Cuando se le echa el lugol, la disolución cambia de
color. Si no cambia de color es que no hay almidón. Ahora, la saliva contiene una
enzima, llamada amilasa, que descompone el almidón y lo convierte en glucosa.
Entonces, al agregarle el lugol, la disolución no cambio de color, porque ya no hay
almidón dentro, sino glucosa.
La amilasa, necesita unas condiciones específicas. Entonces, si calientas la saliva,
la amilasa ya no "funciona", no es capaz de descomponer el almidón en glucosa.
DISCUSIÓN
Al realizar esta práctica pudimos darnos cuenta que realmente la acción de las
enzimas es muy rápida su acción, pues al entrar en contacto con el sustrato, actúa
en cuestión de segundos. Al ver esto de manera macroscópica, nos maravillamos
de la importancia que tienen en nuestro cuerpo, pues al introducir en él, diversos
tipos de sustancias que generalmente son ingeridas, ayudan a realizar muchos
procesos de una forma muy veloz, pues si no fuera así, no estaríamos con vida.
Además de que nos ayudan a descomponer sustancias que son dañinas para
nuestro organismo.
Las actividades que regulan, integran un complejo tema a través del cual los
organismos controlan todas sus actividades.
Creemos que es importante que haya una regulación en la formación de
productos, pues observamos en la actividad, cuando le agregamos una cantidad
considerable de agua oxigenada, hubo una producción excesiva de O₂, y si esto lo
llevamos al interior de d nuestro cuerpo, puede ser muy peligroso en el consumo o
falta en el consumo de ciertas sustancias.
BIBLIOGRAFÍA
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vivos/[Link]
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Fotometría
FOTOMETRIA
Fotometría es la ciencia que se encarga de la medición de la intensidad de la luz,
como el brillo percibido por el ojo humano. Es decir, estudia la capacidad que tiene
la radiación electromagnética de estimular el sistema visual. No debe confundirse
con la Radiometría, que se encarga de la medida de la luz en términos de potencia
absoluta. Cuando la intensidad es medida en varios ángulos de una luminaria, el
proceso es denominado gonio fotometría.
La fotometría se apoya en una herramienta conocida como Reporte Fotométrico,
esencial en el proceso de diseño, ya que contiene todos los datos requeridos para
la correcta selección y aplicación de variadas fuentes de luz en el espacio a
iluminar.
El reporte provee información que permite al profesional de iluminación predecir el
desempeño de un sistema de iluminación, además de calcular la cantidad de
luminarias requeridas y proveer la información específica de la iluminancia.
El ojo humano no tiene la misma sensibilidad para todas las longitudes de onda
que forman el espectro visible. La fotometría introduce este hecho ponderando las
diferentes magnitudes radiométricas medidas para cada longitud de onda por un
factor que representa la sensibilidad del ojo para esa longitud.
La función que introduce estos pesos se denomina función de luminosidad
espectral o eficiencia luminosa relativa de un ojo modelo, que suele denotar como
V? (este modelo u observador estándar es muy similar a los de la Colorimetría).
Esta función es diferente, dependiendo de que el ojo se encuentre adaptado a
condiciones de buena iluminación de luz diurna (visión fotópica) o de mala visión
en luz nocturna (escotópica).
Así, en condiciones fotópicas, la curva alcanza su pico para 555 nm
(nanómetros) , mientras que en condiciones escotópicas lo hace para 507 nm.
La fotometría se aplica para la correcta selección de equipos y/o dispositivos a
utilizar o proponer para su correcta aplicación en el proceso de diseño de
iluminación. Los involucrados en el proceso de diseño o aplicaciones especiales
deben acudir a las extensiones fotométricas para contar con las herramientas
necesarias que les sirvan para hacer una selección correcta de luminarias.
Conocer a fondo el reporte fotométrico brindará todos los elementos necesarios
para extraer la información necesaria de cada tipo de luminaria. Los practicantes
en los variados ramos donde se aplica un estímulo visual deben sustentar sus
intenciones y transmitir sus razonamientos y decisiones en el proceso de diseño.
Si no se utiliza la fotometría existirá un modelo de diseño sin fundamentos que no
contará con los argumentos sólidos para su aplicación.
Un entorno mal iluminado traerá como consecuencia consumos innecesarios o
mal administrados, mala distribución de la luz o bien, selección inadecuada de las
luminarias en función de los espacios o superficies a iluminar.
Al usar cualquier método colorimétrico es indispensable conocer la sensibilidad de
éste y el rango en que el color desarrollado en la solución es
directamente proporcional a la concentración del soluto. Para cumplir estos
propósitos, una vez se ha seleccionado la longitud de onda de máxima
absorción, se efectúan los ensayos con varias soluciones con
concentraciones de la sustancia. Se determina por cada una de ellas la
absorbancia a la longitud de onda de marisma absorción. Se trata la gráfica
que debe relacionar la concentración de sustancias (eje X o abscisa) con las
lecturas de densidad óptica (D.O) o de porcentaje de transmitancia (eje de la Y
u ordenada). Mediante esta gráfica se puede determinar la concentración de
cualquier solución problema de la misma sustancia. Si la gráfica da una
línea recta se cumple la Ley de [Link] el punto en que la absorción de
máxima, existe la máxima sensibilidad y la longitud de onda corresponda a
dicho punto será la conveniente
MATERIALES Y REACTIVOS
CONCLU
PRIMERO QUE TODO LA BIOQUÍMICA ESTUDIA LA COMPOSICIÓN DE LOS
SERES VIVOS, ADEMÁS DE MOLÉCULAS Y ÁTOMOS. CON LA BIOQUÍMICA
SION
SE PUEDE DESCRIBIR DISTINTAS FORMAS SITIO Y COMPOSICIONES. LA
BIOQUÍMICA ES BÁSICA PARA LA ORGANISMOS TRANSGENICOS Y
ALIMENTOS Y DEMÁS COSAS. LA BIOQUÍMICA SE BASA EN EL CONCEPTO
DE QUE TODO SER VIVO, CONTIENE CARBONO Y EN GENERAL LAS
MOLÉCULAS BIOLÓGICAS ESTÁN COMPUESTAS DE CARBONO
HIDRÓGENO, OXÍGENO Y DEMÁS COMPUESTOS
TENIENDO EN CUENTA TODAS ESTAS PRACTICAS PODEMOS DECIR QUE
ESTAMOS PREPARADOS PARA REALIZAR CUALQUIERA DE ESTAS
ACTIVIDADES EN LAS ARIAS DE LABORARTORIO .. ESTA CARTLLA SE HIZO
CON EL FIN DE PODER APRECIAR EL GRAN TRABAJO QUE REALIZO
NUESTRO PROFESOR CON AYUDA DE NOSOTROS LOS ESTUDIANTE PARA
UN MEJOR APRENDIZAJE