EXTRACCION CASERA DE ACIDOS NUCLEICOS EN TEJIDO VEGETAL
Yeison Arroyo, Marquiño Corpas, Tania Márquez & Jorge Peralta.
INTRODUCCION
El ácido desoxirribonucleico o ADN está constituido por dos cadenas de nucleótidos unidas
entre sí formando una doble hélice. Los nucleótidos están integrados por un azúcar
(desoxirribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada (adenina, guanina, timina o citosina).
La unión de los nucleótidos ocurre entre el grupo fosfato y el azúcar, mediante enlaces
fosfodiéster, dando lugar al esqueleto de la molécula. Las bases de cadenas opuestas se unen
mediante puentes de hidrógeno y mantienen estable la estructura helicoidal. (C. Alonso,1997).
Los datos moleculares han permitido estudiar con mayor precisión los patrones de diversidad
genética y su distribución; el comportamiento; la selección natural; las interacciones biológicas;
la composición, funcionamiento y dinámica de comunidades microbianas; las relaciones
filogenéticas, entre otros (Sunnucks, 2000). La aplicación de técnicas moleculares inicia con la
extracción de ADN y la obtención exitosa de datos confiables y reproducibles depende, en gran
medida, de la extracción de ADN íntegro y puro. (Hudson, 2008)
La extracción consiste en el aislamiento y purificación de moléculas de ADN, a través de las
siguientes etapas: homogeneización del tejido, lisis celular, separación de proteínas y lípidos,
precipitación y redisolución del ADN y/o ácidos nucleicos presentes en las alícuotas.
En esta investigación se conoce el método de extracción casera de ácidos nucleicos de células
vegetales, específicamente en las células de la cebolla, y se desarrollan habilidades en la
extracción de los ácidos nucleicos por el método del uso del detergente y alcohol, con el fin de
identificar las propiedades de los ácidos nucleicos evidenciadas en el experimento.
MATERIALES Y METODOS
1.Materiales Empleados en la investigación.
1. Bicarbonato de sodio (NaHCO3)
2. Detergente
3. Agua
4. Cebolla, ajo, tomate o banano
5. Sal (NaCl)
6. Gaza
7. Recipientes de vidrio
8. Vasos dosificadores
9. Licuadora
2. Metodología
Inicialmente se preparo la solución tampón con 120 mL de agua (1/2 del vaso) mas una
cucharada de sal (1.5 g) junto con otra cucharada de bicarbonato (5 g) y 5 mL de detergente.
Mas tarde se corto el vegetal en cuadritos y se trituro la muestra con un poco de agua en la
licuadora hasta quedar homogeneizada. Después se mezclo 10 mL de la solución buffer con 5
mL del triturado, se agito por 2 minutos e inmediatamente se filtro con la gaza, descartando lo
que queda en la gaza. Posteriormente a la solución obtenida del filtrado se le adiciono 10 mL de
alcohol al 70%. Por ultimo se observo los ácidos nucleicos de color un poco blanco en el
sobrenadante.
CONCLUSION.
Se lograron evidenciar muchas moléculas de ácidos nucleicos, pero esto no sugiere que
solo sean de ADN puro, puesto que el método implementado no permite un aislamiento
selectivo de ADN nuclear. Por ende, esa suspensión blanquecina corresponde a miles de
hebras de ADN nuclear, ADNmitocondrial, ADNcloroplasmatico, ya que las células
vegetales poseen 3 tipos de información de acido desoxirribonucleico, y eso sin
mencionar los otros tipos de ácidos nucleicos presentes como los ribonucleicos.
se recomienda realizar otros protocolos que permitieran identificar selectivamente las
moléculas de ADN nuclear del proceso que se llevó a cabo.
la extracción de ácidos nucleicos consta de una serie de etapas las cuales consisten en
una lisis celular para poder extraer los ácidos nucleicos, donde se llega a romper la
membrana celular y por ultimo la nuclear. Se eliminan las proteínas presentes en los
ácidos nucleicos, se tiende a aislar el material genético y se obtiene este mismo por
precipitación. Donde el éxito de dicha extracción se vera en la manera diciplinada en
que se lleven a cabos dichos pasos.
BIBLIOGRAFIA
C. Alonso, 1997. Estructua y funciin del ADN en conformacion Z. Investigacion y ciencia.
Bioquimica. Recuperado de: https://www.investigacionyciencia.es/revistas/investigacion-y-
ciencia/la-experimentacin-animal-a-debate-225/estructura-y-funcin-del-adn-en-conformacin-z-
7313
Sunnucks, P. 2000. Efficient genetic markers for population biology. Trends in Ecology and
Evolution 15:199-201
Hudson, M. E. 2008. Sequencing breakthroughs for genomic ecology and evolutionary biology.
Molecular Ecology Resources 8
