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Informe de Laboratorio No. 3 Identificación de Lipidos

El documento describe la identificación de lípidos realizada por tres estudiantes de la Universidad Distrital Francisco José de Caldas. El objetivo principal fue identificar los lípidos y cómo difieren de otras moléculas orgánicas mediante pruebas de Salkowsky, Liebermann-Burchard y Schiff. Esto permitió aislar fosfolípidos y colesterol, y determinar la solubilidad de sustancias. Se concluyó que la solubilidad depende de la polaridad y se identificó colesterol en una muestra de cerebro.

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Informe de Laboratorio No. 3 Identificación de Lipidos

El documento describe la identificación de lípidos realizada por tres estudiantes de la Universidad Distrital Francisco José de Caldas. El objetivo principal fue identificar los lípidos y cómo difieren de otras moléculas orgánicas mediante pruebas de Salkowsky, Liebermann-Burchard y Schiff. Esto permitió aislar fosfolípidos y colesterol, y determinar la solubilidad de sustancias. Se concluyó que la solubilidad depende de la polaridad y se identificó colesterol en una muestra de cerebro.

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UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSÉ DE CALDAS

FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS

1 2
Autores: Luz Angelly Fandiño Cruz, Laura Katherine Bernal Riaño, Eduardo Esteban
3
Ventura Cáceres

RESUMEN

Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e hidrógeno y
generalmente también oxígeno, son sustancias insolubles en agua, pero solubles en otros
disolventes orgánicos grasos no polares, esto hacen que cumplan diferentes funciones vitales
en animales y plantas. El principal objetivo del laboratorio fue identificar los lípidos y la
manera en que difieren de otras moléculas orgánicas, esto se hará mediante tres pruebas:
Salkowsky, Liebermann-Burchard y Schiff, en donde se realizó un aislamiento de
fosfolípidos, colesterol y se pudo determinar la solubilidad de algunas sustancias. Se
estudiará la importancia y funcionalidad de estas biomoléculas en los organismos vivos.

Se concluyó que la solubilidad depende en gran medida de que la sustancia encuentre una
polaridad o no polaridad similar a la sustancia o compuesto con el que interactúa en el caso
específico de los lípidos encontramos que se disolverá en sustancias igualmente no polares,
en la segunda parte del laboratorio identificamos la presencia del lípido colesterol en la
muestra asignada de cerebro

Palabras clave: Lípidos, solubilidad, grasas, biomoléculas orgánicas.

INTRODUCCIÓN

Los lípidos son moléculas orgánicas pertenecientes a un grupo de compuestos heterogéneos,


que incluye grasas, aceites, esteroides, ceras y compuestos relacionados más por sus
propiedades físicas que por sus propiedades químicas [1]. El término lípido (del griego Lipos,
"grasa") se refiere a cualquier sustancia apolar natural que sea en parte o del todo insoluble en
agua (hidrofóbica) pero soluble en disolventes apolares como cloroformo, disulfuro de
carbono, éter o etanol caliente [2]. Son importantes constituyentes de la dieta no sólo debido
a su alto valor energético, sino también debido a las vitaminas liposolubles y los ácidos

1
Código estudiantil: 20181180104. Grupo 543. Estudiante de Ingeniería Ambiental. Universidad Distrital Francisco José de
Caldas. Laboratorio de Bioquímica, Bogotá D.C., Colombia. Email:lafandiñoc@[Link]
2
Código estudiantil: 20182780010. Grupo 543. Estudiante de Ingeniería Ambiental. Universidad Distrital Francisco José de
Caldas. Laboratorio de Bioquímica, Bogotá D.C., Colombia. Email: lkbernalr@[Link]
3
Código estudiantil: 20182180016. Grupo 543. Estudiante de Ingeniería Ambiental. Universidad Distrital Francisco José de
Caldas. Laboratorio de Bioquímica, Bogotá D.C., Colombia. Email: eeventurac@[Link]
grasos esenciales contenidos en la grasa de alimentos naturales. La grasa se almacena en el
tejido adiposo, donde también sirve como un aislador térmico de los tejidos subcutáneos y
alrededor de ciertos órganos [1]

Son un grupo químicamente diverso y, por tanto, desempeñan funciones biológicas muy
variadas. Algunos son moléculas que almacenan gran cantidad de energía química, como los
triacilglicéridos. Los fosfolípidos y los esfingolípidos constituyen los principales
componentes estructurales de las membranas biológicas. Otros lípidos desempeñan funciones
de protección como los que se encuentran en las superficies limitantes con el medio (ceras).
También existen lípidos que desempeñan funciones muy importantes, tales como vitaminas,
pigmentos (carotenoides), hormonas y mensajeros intracelulares, a pesar de estar presentes en
cantidades relativamente pequeñas en los organismos [3]

CLASIFICACIÓN

A. lípidos saponificables: Cuando son sometidos a hidrólisis alcalina (saponificación) se


convierten en jabones, con lo cual, al convertirse en sales, tiene como característica
que son hidrosolubles. Además, contienen en su estructura ácidos grasos.
Encontramos lípidos simples (acilglicérido y ceras), y lípidos complejos
(Fosfoglicéridos, esfingolípidos y lipoproteínas).

Figura 1. Clasificación de lípidos saponificables


Fuente: Campos, et al, 2011.

B. Lípidos insaponificables: Son aquellos que no contienen ácidos grasos, y por lo


tanto, no tienen la capacidad de convertirse en jabones, como por ejemplo: terpenos,
carotenoides y esteroides.
Figura 2. Clasificación de lípidos insaponificables
Fuente: Campos, et al, 2011. [4].

Ácidos grasos

Las grasas y aceites, utilizados casi universalmente como formas de almacenamiento de


energía en los organismos vivos, son compuestos derivados de los ácidos grasos [5]. Son
ácidos carboxílicos de cadena larga con un único grupo carboxilo y una "cola"
hidrocarbonada no polar. Se encuentran en el cuerpo principalmente como ésteres en grasas y
aceites naturales, pero existen en la forma no esterificada como ácidos grasos libres, una
forma de transporte en el plasma [3]. Difieren uno del otros en la longitud de la cadena y en
la presencia, número y posición de dobles enlaces. La mayor parte de los ácidos grasos
presentes en los sistemas biológicos contienen un número par de átomo de carbono,
generalmente entre 14 y 24, siendo los de 16 y 18 átomos de carbono los más abundantes [1].

La cadena puede ser saturada (que no contiene dobles enlaces) o insaturada (que contiene uno
o más dobles enlaces). La cola hidrocarbonada puede estar saturada si sólo contiene enlaces
simples, o insaturado si posee uno o más enlaces dobles [3].

Figura 3. Ácido graso saturado, insaturado y poliinsaturado.


LÍPIDOS SIMPLES

Los lípidos simples de dividen en dos grupos: los acilgliceroles neutros y las ceras
Son ésteres de ácidos grasos con diversos alcoholes.

A. Acilglicéridos: ésteres de ácidos grasos con glicerol. Los aceites son grasas en el
estado líquido [1]. Según el número de ácidos en enlace éster, existen
monoacilgliceroles, diacilgliceroles y triacilgliceroles. Los triacilgliceroles (o
triglicéridos) son los más abundantes en la naturaleza, En todo caso, un acilglicerol
simple no contiene grupos funcionales iónicos y, por tanto, se dice que es un lípido
neutro [2].

Figura 4. Estructura de algunos acilgliceroles neutros.

Los grupos R, que suelen ser diferentes, representan las cadenas laterales acílicas de los
ácidos grasos alifáticos. Según su estado físico a temperatura ambiente, lo triacilgliceroles se
denominan grasas neutras (sólidas) o aceites neutros (líquidos). Los triacilglicéridos son
simples si los tres ácidos grasos son iguales, y se denominan según el ácido graso. Estos
funcionan como almacén de energía en las células, constituyendo reservas de energía mucho
más eficaces que los hidratos de carbono. Las grasas y aceites que se encuentran en plantas y
animales son en gran medida mezclas de triacilglicéridos [1].

El almacenamiento de grasas en los animales tiene tres funciones distintas:

1. Producción de energía. La mayor parte de la grasa de la mayoría de los animales se


oxida para generar ATP, que impulsa los procesos metabólicos.
2. Producción de calor. Algunas células especializadas oxidan los triacilglicéridos para
producir calor, en lugar de utilizarlos para formar ATP.
3. Aislamiento. En los animales que viven en un entorno frío, las capas de células
adiposas situadas debajo de la piel actúan como un aislante térmico.

B. Ceras: ésteres de ácidos grasos con alcoholes monohídricos de masa molecular


relativa (peso molecular) más alta [1] Las ceras son ésteres de ácidos grasos de cadena
larga (14 a 36 átomos de carbono), saturados o insaturados, con alcoholes de cadena
larga (16 a 30 átomos de carbono). Sus puntos de fusión (60 a 100°C) son
generalmente más elevados que los de los triacilglicéridos [3]. Cumplen diversas
funciones en la naturaleza que tienen que ver con su hidrofobicidad y su consistencia,
desempeñan funciones de aislamiento y protección [2].

Figura 5. Estructura general de las ceras.

LÍPIDOS COMPLEJOS

A. Fosfolípidos: lípidos que contienen, además de ácidos grasos y un alcohol, un residuo


ácido fosfórico. A menudo poseen bases que contienen nitrógeno y otros
sustituyentes, por ejemplo, en los glicerofosfolípidos el alcohol es glicerol, y en los
esfingofosfolípidos el alcohol es la esfingosina.
B. Glucolípidos (glucoesfingolípidos): lípidos que contienen un ácido graso,
esfingosina y carbohidrato.
C. Otros lípidos complejos: lípidos como sulfolípidos y amino lípidos. Las
lipoproteínas también pueden colocarse en esta categoría.

LÍPIDOS PRECURSORES Y DERIVADOS: Constituyen un grupo muy heterogéneo y


solo se asemejan por el hecho de que su síntesis puede rastrearse hasta los átomos de carbono
derivados de ácidos grasos [2]. comprenden ácidos grasos, glicerol, esteroides, otros
alcoholes, aldehídos grasos, cuerpos cetónicos, hidrocarburos, vitaminas liposolubles y
hormonas [1].

El objetivo de la práctica de laboratorio es lograr la identificación de lípidos mediante


pruebas cualitativas, de las cuales se obtendrán características para clasificar las diferentes
sustancias de estudio. Se busca la identificación de fosfolípidos, colesterol y determinar la
solubilidad de algunos compuestos.
METODOLOGÍA

Figura 1. Diagrama para la identificación y extracción de lípidos.


Fuente: Autores

RESULTADOS

A partir de las diferentes pruebas realizadas se obtuvieron los siguientes resultados:

1. Prueba de determinación de solubilidad: Con esta prueba se puede establecer


cuando una muestra es soluble o insoluble en agua y en diferentes compuestos
orgánicos. (Ver tabla 1.)
Tabla 1. Determinación de la solubilidad
Prueba
Solventes
Aceite de Oliva Aceite de hígado de Bacalao

Agua destilada Insoluble Insoluble

Alcohol Insoluble Insoluble

Cloroformo Soluble Soluble

Éter Soluble Soluble

2. Prueba de aislamiento de colesterol: Esta prueba establece la presencia de colesterol


en la muestra que fue filtrada durante el proceso mediante la prueba realizada. (Ver
tabla 2.)

Tabla 2. Resultados aislamiento de Colesterol


Muestra Prueba

Schiff Salkowsky Lieberman-Burchard

Extracto de colesterol Positivo Positivo Positivo

ANÁLISIS DE RESULTADOS

1. Prueba de solubilidad
A partir de la prueba de solubilidad se determinó cuáles sustancias funcionan como solventes
en diferentes muestras.

Aceite de oliva: El aceite de oliva presentó insolubilidad en agua destilada y alcohol,


mientras que en cloroformo y éter fue soluble. El aceite de oliva está compuesto
principalmente por triglicéridos, y en menor proporción por ácidos grasos libres y un 0.5-1%
de constituyentes no glicerol. [6] Las propiedades apolares que presenta el aceite de oliva
pueden ser solubilizadas en presencia de éter y cloroformo, debido a que estas sustancias son
solventes no polares, capaces de disolver sustancias no hidrosolubles, como el aceite de oliva.
Asimismo, es ese mismo carácter apolar del aceite de oliva el que impide que se mezcle con
agua destilada, porque es una sustancia polar al igual que el alcohol.

Aceite de hígado de bacalao: El aceite de hígado de bacalao presentó solubilidad en


cloroformo y éter, pero no en agua destilada y alcohol. Este aceite, de origen animal, está
compuesto en un 70% de ácido oleico, 25% de ácido palmítico y pequeñas cantidades de
ácido esteárico y ácidos grasos inferiores (acético, butírico, valeriánico, cáprico), además de
vitaminas A y D. En este caso, la solubilidad de lípidos como el aceite de hígado de bacalao
depende de la generación de emulsiones, las cuales se dan gracias a la mezcla de dos líquidos
inmiscibles de manera casi homogénea; por un lado, un líquido, en fase dispersa, es
diseminado en otro, en fase continua o fase dispersante, esto permite, que los lípidos
presentes en el aceite de hígado de bacalao, sean solubles en sustancias como el alcohol. [7]

2. Aislamiento de colesterol

Prueba de Schiff: Esta prueba arrojó un resultado positivo debido a que la muestra empleada
para aislar el colesterol fue un cerebro macerado lo que entra en concordancia de la teoría,
“El reactivo de schiff, permite reconocer lípidos que contengan materiales con radicales -OH-
contiguos, como es el caso de los fosfatidilinositoles, fosfatidilglicéridos y cerebrósidos.” [8],
con la identificación de lípidos por parte del reactivo de schiff en este caso de los
cerebrósidos, sabemos que se reconocen los glicolípidos que componen la vaina de mielina
de las neuronas que estuvieron presentes en el cerebro macerado.

Prueba de Salkowsky: En esta prueba se obtuvo resultados positivos es decir en la muestra


se observó dos capas, en su capa de cloroformo con el indicativo color rojo característico y
un color blancuzco en la capa de ácido sulfúrico, Esto ocurre al adicionarle una misma
cantidad de a ácido sulfúrico dando a lugar a la formación de dobles enlaces que se generaron
por la condensación de 2 moléculas de colesterol que posteriormente formaron biesfenoides.
[9]. Por lo tanto, podemos entender que en la muestra se aloja colesterol.

Prueba de Lieberman- Burchard: En esta prueba se obtuvo un resultado positivo, por lo


cual, se puede determinar la presencia de colesterol en la muestra de cerebro; se evidenció
como el color viro de una coloración roja a violeta, azul y finalmente verdosa. La reacción
Lieberman- Burchard, se realiza en general en un medio ácido fuerte constituido por ácido
sulfúrico, ácido acético y anhídrido acético. En esta reacción, el colesterol sufre una
oxidación gradual, formándose en cada etapa una molécula de colestapolieno que posee un
doble enlace adicional con respecto al compuesto del cual deriva.

La etapa inicial de la reacción Lieberman-Burchard consiste en la protonación (adición de un


protón (H) a un átomo, molécula o ión) del grupo OH del colesterol, con la consiguiente
pérdida de agua, obteniéndose el ion carbonio 3,5-colestadieno que constituye el primer paso
de la reacción de color. La oxidación secuencial de este ion carbonio alílico por el SO2-
produce un ácido colesta-hexano-sulfonico cromóforo. [10]

CONCLUSIONES

Los lípidos son un grupo grande de moléculas orgánicas, caracterizados por ser insolubles en
agua (hidrófobas), pero solubles en solventes orgánicos como cloroformo y éter. Los lípidos
se encuentran presentes en el cuerpo, y su importancia radica en que son depósito y
almacenamiento intracelular de energía metabólica, y sirven para el transporte de la misma.
Son parte fundamental para la producción de hormonas, estrógenos y testosterona. Además,
participan en la producción de células, y forman parte de ellas, facilitando las reacciones
químicas que se producen en los organismos vivos.
Para la prueba de solubilidad, el parámetro clave es el carácter polar o apolar de las
sustancias, puesto que en razón a este las sustancias son más o menos solubles, esto implica
que presentan solubilidad en medios con polaridad semejante. Para el caso de los lípidos,
estos al ser apolares, se disolverán en sustancias igualmente apolares. Dicha solubilidad es
importante, porque gracias a esta se facilita la extracción de lípidos para realizar el análisis de
los mismos.

Gracias a la prueba de Schiff, Salkowsky y Liebermann- Burchard fue posible identificar la


presencia de colesterol en una muestra de cerebro, ya que se obtuvieron resultados positivos
en las tres reacciones.

BIBLIOGRAFÍA

[1] Murray, R. K., Bender, D. A., & Botham, K. M. (2010). Harper: bioquímica ilustrada.
McGraw-Hill.

[2] Bohinski, R. (1991). Bioquímica. 5º ed. ED.

[3] Feduchi, E., Blasco, I., Romero, C., & Yáñez, E. (2010). Bioquímica. Conceptos
esenciales. Editorial Panamericana. Madrid. 1ª.

[4]. Campos, M., Bacca, G., & Gallo, D. (2011). Química orgánica. Universidad Jorge Tadeo
Lozano. Bogotá, Colombia.

[5] Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2015). Lehninger: principios de bioquímica.

[6] Martín-Lagos, J. (2007). Estudio de los índices de calidad en Aceites de Oliva de la


provincia de Granada. Universidad de Granada, Facultad de farmacia. Recuperado el 17 de
junio de 2020, de: [Link]

[7] Izquierdo, I. (s.f). El aceite de hígado de bacalao y sus nuevas aplicaciones en terapéutica
veterinaria. Universidad de Oviedo, Facultad de veterinaria. Recuperado el 17 de junio de
2020, de:
[Link]

[8]. Cuaran B. s.f. Reconocimiento de lípidos modificados. Obtenido de:


[Link]

[9] Viracacha L, A., Mora, N. (2018). EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS.


obtenido de:
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%C3%93N_DE_L%C3%8DPIDOS
[10]Clavo, L. & Ramírez, S. (2002). Composición química de órganos de cobayos de altura.
Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Farmacia y Bioquímica. Lima,
Perú. Recuperado el 17 de junio de 2020, de
[Link]

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