“AÑO DE LA LUCHA CONTRA LA CORRUPCIÓN E

IMPUNIDAD”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

PRESENTADO POR:

CUEVA VÁSQUEZ; ELVIS JAVIER.

DOCENTE: LOPEZ ORBEGOSO JOHN VICTOR

TEMA: PRACTICA DE MEDIO DE CULTIVO

CURSO: MICROBIOLOGIA AGRICOLA

ESPECIALIDAD: AGRONOMÍA.

CICLO: V

GRUPO: A1

Cajamarca Sep. del 2020

 I. INTRODUCCION

Un cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones físicas,

químicas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada. En

general, podemos distinguir cultivos líquidos y sólidos en función de las características

del medio y cultivos discontinuos y continuos en función de la disponibilidad de

nutrientes en el medio de cultivo.

Los métodos de desinfección y esterilización son muy comunes en un laboratorio donde

se llevan a cabo prácticas con cultivos bacterianos, ya que estos garantizan unos buenos

resultados y disminuyen las posibilidades de contaminación por agentes externos.

Estos métodos se clasificaban dependiendo las características físicas y químicas de

un producto o instrumento a utilizar. Y no solo se pueden encantarar en un laboratorio,

sino que también a nivel industrial los métodos de esterilización tienen gran

aplicación, estos se utilizan para tratar contaminaciones en productos comestibles

altamente comerciales como productos lácteos, sumos de jugo o pasa bocas de mesa.
 II. OBJETIVOS

 Comparar los principales métodos de cultivo utilizados para los diferentes tipos

de microorganismos.

 Conocer los principales métodos de cultivo utilizados para los diferentes tipos de

microorganismos.

III. MARCO TEORICO

3.1.¿QUE ES MEDIOS DE CULTIVO?

Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros

componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los

microorganismos. La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad de

medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para

todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias con exclusividad.

[Link] HABITUALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

A continuación, se da una idea general sobre algunos de los constituyentes habituales de

los medios de cultivo.

AGAR: Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. En el

agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que se obtiene de ciertas

algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que, a excepción de algunos

microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente. Un gel de agar al 1-2% se licua

alrededor de los 100ºC y se gelifica alrededor de los 40ºC, dependiendo de su grado de

pureza.
EXTRACTOS: Su preparación consiste en que ciertos órganos o tejidos animales o

vegetales (carne, hígado, cerebro, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor y

posteriormente concentrados hasta la forma final de pasta o polvo. Estos preparados

deshidratados son a menudo empleados en la elaboración de los medios de cultivo. Los

más utilizados son el extracto de carne, de levadura y el de malta.

PEPTONAS: Son mezclas complejas de compuestos orgánicos, nitrogenados y sales

minerales, que se obtienen por digestión enzimática o química de proteínas animales o

vegetales (soja caseína carne, etc.). Las peptonas son muy ricas en pépticos y

aminoácidos, pero pueden ser deficientes en determinadas vitaminas y sales minerales.

FLUIDOS CORPORALES: Con frecuencia es necesario añadir a los medios de cultivo

de algunos patógenos sustancias como sangre completa, sangre desfibrilada, plasma o

suero sanguíneo, sobre todo para conseguir el primer aislamiento a partir del hospedador.

La sangre no puede ser esterilizada, y por tanto debe de ser obtenida en condiciones

asépticas directamente de un animal sano, y adicionada al medio de cultivo después de

que este haya sido auto clavado. Los fluidos corporales no solo aportan factores de

crecimiento, sino que también aportan sustancias que neutralizan a inhibidores del

crecimiento de algunas bacterias. Un ejemplo podría ser la catalasa presente en las células

sanguíneas destruye el peróxido de hidrógeno que algunas bacterias que no poseen este

enzima acumulan como producto del metabolismo del oxígeno.

SISTEMAS AMORTIGUADORES: Para mantener el pH dentro del rango optimo del

crecimiento bacteriano a veces, es necesario añadir algunos componentes al medio de

cultivo. Debido a que la mayoría de las bacterias son neutrófilos, se suelen emplear sales

del tipo de los fosfatos disódicos o dipotásicos u otras sustancias como las peptonas para

prevenir la desviación del pH.

INDICADORES DE PH: Con el objeto de poder detectar variaciones en el pH debido a

fermentaciones u otros procesos, se hace necesario a veces añadir indicadores acido-base

que nos lo indiquen.

AGENTES REDUCTORES: Con el objetivo de crear en los medios de cultivo

condiciones que permitan el desarrollo de los gérmenes microaerófilos ò anaerobios se

añaden estos agentes reductores siendo, los más empleados la cisteína y el tioglicolato

entre otros.

AGENTES SELECTIVOS: La adición de determinadas sustancias a un medio de

cultivo puede convertirlo en selectivo. Así, por ejemplo, la adición de cristal violeta, sales

biliares, azida sódico, telurio potásico, antibióticos, etc., a la concentración adecuada hará

que actúen como agentes selectivos frene a determinados microorganismos.

[Link] DE MEDIOS DE CULTIVO MEDIOS GENERALES

Son aquellos que permiten el crecimiento de una gran variedad de microorganismos.

MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO: Son aquellos que favorecen el crecimiento de u

determinado tipo de microorganismo sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento de los

demás. MEDIOS SELECTIVOS: Son aquellos que permiten el crecimiento de un tipo

de microorganismos determinado, inhibiendo el desarrollo de los demás.

MEDIOS DIFERENCIALES: Son aquellos en los que se pone de manifiesto

propiedades que un determinado tipo de microorganismos posee.

[Link] DE MEDIOS DE CULTIVO

En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran comercializados;

normalmente bajo la forma de liofilizados a los que es preciso rehidratar. En estos casos

la preparación del medio de cultivo se reduce sencillamente a pesar la cantidad deseada

del mismo y disolverla en agua destilada siguiendo las instrucciones del fabricante. Las

sustancias termolábiles, se esterilizan por filtración y se añaden al resto de los

componentes después de que estos hayan sido previamente esterilizados en la autoclave

y enfriados a temperatura ambiente ó a 40-50ºC si se trata de medios con agar. Antes de

su esterilización los medios líquidos se reparten en los recipientes adecuados (tubos,

matraces, etc.)

IV. RESULTADOS

1. Esquematizar el procedimiento para esterilización de los Materiales y medio

de cultivo.

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento

de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la especie que se quiera

cultivar, porque las necesidades nutricionales varían considerablemente. Hay

microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales

y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias como

vitaminas, suero o sangre para crecer.

Fg.1: En esta imagen podemos observar algunos

materiales para el procedimiento de la practica del medio
de cultivo
 V. DISCUSION

1). ¿Qué tipo de medio de cultivo se utilizará para el aislamiento de

microorganismos? Anote la composición y diga qué función.

SEGÚN SU FORMULACIÓN: Esta definición es muy similar a según su origen.

Pueden ser:

Químicamente definidos

Se conoce la cantidad exacta de cada uno de los compuestos que hay en el medio.

Complejos

Se realizan a partir de extractos naturales como por ejemplo extracto de sangre o de

levadura. No se conoce la composición exacta, aunque están presentes todos o casi todos

los elementos necesarios para que crezca el cultivo.

AGAR SANGRE

Es un medio enriquecido y diferencial. Es la combinación de un agar nutritivo con sangre

de mamíferos (normalmente oveja, aunque también hay de conejo o humanos) a una

concentración de 5-10%. Se usa para aislar principalmente microorganismos del

género Estreptococos (S. piógenos y S. áureas como más comunes).

Es diferencial para detectar actividad hemolítica (lisis y digestión de eritrocitos) según si

las bacterias pueden hacer β-hemolisis (lisis completa y se ve un halo incoloro alrededor

de la colonia) o α-hemolisis (hemolisis parcial y aparece un halo verdoso alrededor de la

colonia).
2). ¿Por qué un medio de cultivo debe pasar la prueba de esterilidad antes de ser
utilizado?
La esterilización se define como "el proceso de eliminar todos los microorganismos

(incluidas las formas resistentes a los medicamentos) de los objetos, medios o

superficies", y su aplicación puede garantizar que los materiales y medios utilizados estén

libres de microorganismos.

3). ¿Que utiliza Robert Koch como medio de cultivo sólido?

Los medios de cultivo se utilizan para crear ambientes adecuados para la

siembra de microorganismos específicos, estos medios pueden ser sólidos, semisólidos

o líquidos. Para estos medios se debe tener en cuenta la humedad, el pH, la luz

ambiental, la temperatura y la esterilidad del medio.

Estos cultivos a su vez pueden ser selectivos, generales, diferenciales o

enriquecidos. Lo medios de cultivos más comunes son el agar-agar el cual es un

polisacárido no ramificado de origen marino, algas. El agar- PDA (El cual es

una infusión de papa y dextrosa) o el Agar de sal y manitol.

4). ¿Cómo se realiza el control del proceso de esterilización?

Los controles de esterilización son importantes para comprobar el funcionamiento

correcto de cualquier método de esterilización. Esto es debido a la importancia del uso de

material esterilizado y a la problemática que supondría para la salud si dicho material

estuviese contaminado a causa de un proceso de esterilización incorrecto.

Para certificar la calidad del proceso, y el resultado de la esterilización, se

emplean controles de esterilización de diversos tipos:

 Físicos

 Químicos

 Biológicos

Además, para la correcta preservación del material esterilizado antes de su uso, es

importante atender a otras cuestiones más allá de los controles de esterilización. Estas

cuestiones son el empaquetado, la manipulación y la conservación del material estéril.

5). Compare los métodos de esterilización por calor seco (Horno) y por calor
húmedo (autoclave) teniendo en cuenta: tiempo y temperatura y tipo de material a
tratar.

ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO

 Menos eficiente que la esterilización por calor húmedo.

 Se emplean temperaturas más altas que en el otro método y durante mayor tiempo.

Se puede realizar por varios métodos:

 Aire caliente

 Llama directa

 Incineración

ESTERILIZACIÓN POR CALOR HÚMEDO

  La esterilización por vapor a presión se lleva a cabo en una autoclave.

 Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una presión de 15 libras lo que

permite que la cámara alcance una temperatura de 121ºC.

 El tiempo de esterilización usualmente es de 15 minutos.

 Sólo cuando el vapor se coloca bajo presión, es cuando su temperatura aumenta

por encima de los 100ºC y esto permite alcanzar las temperaturas de esterilización

(121ºC).

6). Si usted quiere esterilizar un guardapolvo, una pipeta, un medio de cultivo.

Señale en qué equipo lo realizará cada uno de ellos.

 Guardapolvo a Autoclave

 Pipeta a Autoclave

 Medio de cultivo a Autoclave

VI. CONCLUSIONES

 Una vez que ya tenemos los medios de cultivo preparados, hay que inocularlos, y

paraíllo se necesita

 Condiciones óptimas de incubación como temperatura, pH, presión, condiciones

atmosféricas (concentración de O2).

 Estos medios de cultivo son sólidos (cultivos en reposo), o líquidos (para cultivos

en agitación)

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 [Link]

 [Link]
os_de_cultivos_para_siembras_microbianas_apuntes

 [Link]
ORGANISMOS