UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA
DE MÉXICO
FACULTAD DE QUÍMICA
LABORATORIO BIOQUÍMICA CLÍNICA
PRUEBAS DE
FUNCIÓN RENAL
Profesoras
Marisol Hernández Salas
Elizabeth Díaz Padilla
Octubre 2020
TEMARIO
u SISTEMA RENAL
u DETERMINACIÓN DE
u ÁCIDO ÚRICO
u UREA
u NITRÓGENO DE UREA
u DEPURACIÓN DE CREATININA
u DETERMINACIÓN DE MICROALBÚMINA
u CISTATINA C
u EXAGEN GENERAL DE ORINA
SISTEMA RENAL
SISTEMA RENAL
• El sistema renal está compuesto por dos
riñones, dos uréteres, la vejiga urinaria y la
uretra.
El riñón
• Mide aproximadamente 12 x 5 x 7 cm.
• Se encuentran por detrás del peritoneo
parietal, por encima de la cintura, el riñón
derecho ligeramente más abajo.
• Peso aproximado: 130 - 170 g.
IRRIGACIÓN DEL RIÑÓN
Las arterias renales derecha e izquierda son ramas de la
arteria aorta abdominal.
§ Aportan unos 1200 mL por minuto
El retorno venoso de los riñones se produce a través de las
venas renales derecha e izquierda que drenan a la
vena cava inferior.
ESTRUCTURA INTERNA DEL RIÑÓN
o Corteza
o Médula
o Pelvis Renal
o Nefrona
NEFRONA
Es la unidad funcional del
riñón.
§ Pequeños túbulos distribuidos en las zonas
medular y cortical, altamente irrigados.
Existen alrededor de 1.3
millones de unidades en
cada riñón
§ Cada una de ellas realiza su función en forma
independiente.
FUNCIONES DEL RIÑÓN
Regulación
presión arterial
Mantenimiento de volumen y la composición
del líquido extracelular, incluido el equilibrio
ácido-base.
Excreción de sustancias de desecho y sustancias químicas
extrañas por medio de la formación de orina.
Síntesis de hormonas
Contribuyen al aporte de glucosa en estados de ayuno por medio
de la gluconeogénesis.
FILTRACIÓN GLOMERULAR
Es la etapa inicial en la formación de la orina.
Consiste en el paso de parte del plasma
sanguíneo que circula por los capilares
glomerulares del riñón hacia el espacio
capsular de Bowman, atravesando la
membrana de filtración.
• Orina primitiva o inicial
• Eritrocitos, leucocitos, plaquetas, proteínas
plasmáticas.
TASA DE FILTRACIÓN GLOMERULAR
v La tasa de filtración glomerular (TFG)
§ Volumen filtrado que se produce por unidad de tiempo.
§ Es de unos 120 mL/min.
§ En 24 horas: 180 L.
§ La mayor parte del filtrado se reabsorbe.
v Volumen promedio de orina al día para
un adulto es de 2 L.
§ El volumen de agua que se elimina diariamente por los riñones depende
del estado de hidratación del organismo.
MECANISMOS RENALES BÁSICOS
(FORMACIÓN DE ORINA)
FILTRACIÓN: Aproximadamente el 25% de la
sangre es filtrada a través de las nefronas.
REABSORCIÓN: Algunas sustancias útiles son
devueltas a la sangre para su reutilización.
SECRECIÓN: Cuando el líquido filtrado se mueve a través
de la nefrona, gana materiales adicionales (desechos y
sustancias en exceso).
ÍNDICE DE FILTRADO GLOMERULAR
Tasa de filtración glomerular (TFG)
§ Volumen de plasma filtrado por minuto. (120 mL/min)
Su valor es obtenido con una sustancia: inulina o creatinina.
§ Se filtran en forma de molécula libre
§ No ligada a proteínas
§ No se absorben ni se secretan a nivel tubular
§ No se producen ni destruyen en el riñón
§ No modifican el funcionamiento del mismo
DEPURACIÓN DE CREATININA
DEPURACIÓN DE CREATININA
Es una medida del filtrado glomerular.
Determinación de creatinina sérica
Determinación de creatinina urinaria
Recolección de orina de 24 horas
Dep. de creatinina = UV /P
U = mg/dL de creatinina urinaria
V = volumen de orina en mL / min
P = mg / dL de creatinina sérica
EJERCICIO
¿Cuál será la depuración de creatinina de un paciente que tiene
creatinina sérica de 2.0 mg/dL, creatinina urinaria 85.6 mg/dL y un
volumen de orina de 2000 mL?
(85.6 mg/dL) x (1.75 mL/min)
Dep. Creatinina= __________________________ = 74.9 mL/min
2.0 mg/dL
UMBRAL PLASMÁTICO RENAL
Concentración plasmática máxima de algunas sustancias
para ser reabsorbidas en los túbulos renales.
Cuando este umbral es superado la sustancia es reabsorbida en forma parcial y el
excedente es desechado en la orina.
Umbral plasmático glucosa 180 mg/dL.
CONCENTRACIONES URINARIAS Y
PLASMÁTICAS
SUSTANCIA CONCENTRACIÓN CONCENTRACIÓN
ORINA PLASMA
Glucosa (mg/dL) 0 100
Na (mEq/L) 90 140
Urea (mg/dL) 900 15
Creatinina (mg/dL) 150 1
ENFERMEDAD RENAL
Parámetros
Medición de la presión arterial
Medición de proteína o albúmina en orina
Cálculo de la tasa de filtración glomerular
UREA
UREA
v La urea es el producto terminal del metabolismo proteico.
v Las proteínas se descomponen en aminoácidos.
v Estos se catabolizan y se forma amoníaco libre.
v Se combina para formar urea.
v La urea pasa al torrente sanguíneo y de allí a los riñones y se excreta en la orina.
v La producción de la urea tiene lugar casi exclusivamente en el hígado.
¿ EN QUÉ PADECIMIENTOS ESTÁ
ALTERADA?
v Insuficiencia renal crónica (IRC)
v Fallo renal
v Glomerulonefritis
v Pielonefritis
v Tumores del trato genitourinario
v Enfermedad hepática severa
DETERMINACIÓN DE LA UREA
La urea es uno de los análisis de laboratorio más habituales para evaluar la función renal.
La urea es determinada en suero, plasma y orina.
Existen varios métodos para la determinación de urea en líquidos fisiológicos (Berthelot,
enzimático, diacetil monoxima, cinética UV)
Intervalo de referencia: 15 – 45 mg/dL
UREA 37
FUNDAMENTO
La urea presente en la muestra reacciona con o-ftalaldehído en medio
ácido originando un complejo coloreado que puede cuantificarse :
Urea + o-ftalaldehído H+ Isoindolina
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de
urea en la muestra.
https://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS35_UREA_37_03-2015.pdf
UREA 37
A) CINÉTICA
UREA 37
Control Normal Control Patológico Muestra
CREATININA
CREATININA
• Es el anhídrido que se deriva de la creatina y fosfato de creatina.
• La creatinina es el producto final del metabolismo que ocurre
principalmente en el músculo esquelético
CREATININA
v Cerca del 2% de la creatina se transforma en creatinina cada 24 horas.
v La creatina se sintetiza de glicina y arginina en (riñón hígado y páncreas) de
ahí se transporta al músculo y cerebro y es convertida en fosfocreatina.
v El contenido de creatina del organismo es proporcional a la masa muscular.
v La transformación de la creatina en creatinina se verifica en solución acida
o alcalina
CREATININA ELEVADA EN:
• Acromegalia
• Deshidratación
• Distrofia muscular
• Glomerulonefritis
• Obstrucciones renales
• Nefropatía diabética
FUNDAMENTO
En la reacción de Jaffe, la creatinina reacciona con el ácido pícrico bajo
condiciones alcalinas para formarse un complejo alcalino amarillo rojizo.
El color rojo es directamente proporcional a la concentración de creatinina.
Intervalo de referencia
Hombres: 0.7 – 1.4 mg/dL
Mujeres: 0.6 – 1.1 mg/dL
https://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/1001111.pdf
CREATININA
CREATININA
Control Normal Control Patológico Muestra
ÁCIDO ÚRICO
ÁCIDO ÚRICO
El ácido úrico es el producto de desecho final del catabolismo de los ácido nucleicos
y purinas en humanos.
FUENTES Y VÍAS DE ELIMINACIÓN
HIPERURICEMIA
• Es definida como una concentración sérica de urato mayor de
7 mg/dL.
• Resultado de diferentes alteraciones y condiciones asociadas
a una producción incrementada de uratos y/o descenso de su
excreción renal.
Se observa en:
v Leucemias y linfomas (lisis tumoral).
v Consumo excesivo de alimentos ricos en purinas (carnes, vísceras).
v Ingesta de ciertos fármacos citotóxicos
v Obesidad e hipertrigliceridemia.
v Ingesta de fructuosa
GOTA
Trastorno metabólico frecuente que se caracteriza por concentraciones elevadas de ácido
úrico.
Puede dar lugar a la formación de cristales en las articulaciones y tejidos blandos, originando
una inflamación de las mismas.
FUNDAMENTO
El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno
(2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y
2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un compuesto rosáceo
La intensidad de quinonimina roja formada es proporcional a la
concentración de ácido úrico presente en la muestra ensayada.
Se lee a una longitud de onda de 520 nm.
Intervalo de referencia: Hombres 3.6 – 7.7 mg/dL
Mujeres 2.5 – 6.8 mg/dL
https://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/1001012.pdf
ÁCIDO ÚRICO
ÁCIDO ÚRICO
CREATININA
Control Normal Control Patológico Muestra
MICROALBÚMINA
MICROALBÚMINA
v Se denomina microalbuminuria al aumento de excreción urinaria de
albúmina por encima de niveles normales.
v Excreción de 30 a 300 mg de albúmina en 24 horas.
v Esta determinación es importante en el seguimiento de pacientes
diabéticps, ya que permite detectar precozmente a aquellos individuos en
riesgo de desarrollar enfermedad renal progresiva permitiendo la aplicación
de medidas terapéuticas adecuadas.
MUESTRA: Orina
FUNDAMENTO: La albúmina reacciona con el anticuerpo específico formando
inmunocompñejos insolubles. La turbidez causada por estos inmunocomplejos
es proporcional a la concentración de albúmina en la muestra y puede ser
medida espetrofotométricamente.
CISTATINA C
CISTATINA C
u La concentración sérica de cistatina C se correlaciona muy bien con la
depuración de creatinina
u Método que está sujeto a las imprecisiones de la recogida de orina de 24
horas y diversas interferencias analíticas, lo que ha precipitado la realización
de diversos estudios en los últimos años valorando este nuevo marcador renal.
u La cistatina C es una proteína de 13kDa de peso molecular no glicosilada
producida por todas las células nucleadas.
u El bajo peso molecular y un alto punto isoeléctrico permiten a la cistatina C
ser filtrada libremente y reabsorbida en el túbulo renal, además su producción
es estable por lo que es un buen indicador de evaluación de la tasa de filtración
glomerular.
CISTATINA C
u La cistatina C desempeña una función protectora mediante la inhibición de las
catepsinas (B, H, L y S) que intervienen en el metabolismo intracelular de
proteínas, catabolismo del colágeno y degradación de la matriz celular.
u Además, se le ha atribuido un papel defensivo en infecciones bacterianas y
vírales.
u Fisiológicamente la cistatina C tiene una vida media más corta que la creatinina y
una menor distribución a nivel corporal (la cistatina C se ubica solo en el volumen
extracelular mientras que la creatinina se distribuye por el agua corporal total).
u Debido a su pequeño tamaño y a que su punto isoeléctrico de 9,3 le confiere una
carga positiva a pH fisiológico, la cistatina C se filtra libremente por el glomérulo y
se reabsorbe en el túbulo proximal donde se cataboliza completamente por las
células tubulares, por lo que no retorna hacia el torrente sanguíneo.
CISTATINA C
La medición de la cistatina C es útil en la detección precoz de la enfermedad renal,
especialmente cuando otras pruebas o parámetros todavía no se alteran y antes
incluso de que aparezcan signos y síntomas.
Su concentración no sufre influencia por la edad, el sexo o la ingesta de proteínas y
presenta una mayor sensibilidad a pequeños cambios en el filtrado glomerular.
Son todas estas características lo que ha identificado a su concentración plasmática
como uno de los mejores marcadores del filtrado glomerular.
Por todas sus propiedades, la cistatina C es un parámetro de laboratorio de utilidad
en el diagnóstico y pronóstico de la enfermedad renal de causa primaria o
relacionada con enfermedades que de manera secundaria provocan lesión del
riñón, como sucede en los pacientes con drepanocitosis, la hemoglobinopatía
estructural más frecuente en el mundo.
Estos pacientes tienen riesgo de insuficiencia renal crónica (IRC). Su afectación renal
clínicamente significativa ocurre más frecuentemente en los individuos
homocigotos que en los heterocigotos o con hemoglobinopatías mixtas, con la
excepción del carcinoma medular renal, que es más frecuente en los portadores
del rasgo falciforme.
TODO COMENZÓ HACE MÁS DE 2000 AÑOS
Se distinguían más de 20 matices de
u color en la orina (desde la claridad
cristalina, pasando por el tono pelo
de camello, blanco, rojo mora y de
verde pálido a negro), de los que se
extraían las conclusiones
correspondientes acerca de la
enfermedad del paciente.
La evolución llegó tan lejos que se
u creía que todo lo que iba mal en el
cuerpo humano se reflejaba como en
un espejo en la muestra de orina.
Un disco de vidrio de orina con 20 matices
de color (1491 DC)
EXAMEN GENERAL DE ORINA
v Se utiliza como evaluación general de la salud
v A poyo en el diagnóstico y monitoreo de
enfermedades metabólicas o sistémicas que
afectan la función renal
v Desórdenes endocrinos
v Función hepática biliar
v Enfermedades o desórdenes del tracto urinario
RECIPIENTES PARA RECOLECCIÓN DE ORINA
o Uso de recipientes para recolección primaria que sean de aprox. 50 mL, con una base
amplia para evitar derrames y una apertura de al menos 4 cm, resistentes a fugas para
proteger al personal de la salud.
o Recolección de orina de 24 horas se recomienda el uso de recipientes color ámbar, para
proteger a los analitos sensibles a la luz (urobilinógeno, porfirinas).
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
§ Presentarse al laboratorio con la
primera orina de la mañana
§ Eliminando el primer chorro y
recolectar la del chorro intermedio en
un contenedor de plástico con tapa de
rosca.
§ El cuidado en la recolección y su
entrega rápida en el laboratorio,
son cruciales para obtener una
información óptima.
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
¿POR QUÉ LA PRIMERA ORINA DE LA
MAÑANA?
z La orina de primera hora de la mañana ha
demostrado ser la más valiosa para la mayoría de las
pruebas.
z En general, garantiza una permanencia bastante prolongada de la
orina en la vejiga y su composición no está influida por las
variaciones diarias debidas a los alimentos, ingestión de líquidos y
actividad física.
z No debe realizarse un diagnóstico urinario en mujeres durante los
2 – 3 días siguientes a la menstruación.
RECOMENDACIONES
• Realizar análisis de orina dentro de la primera hora de la recolección si se mantuvo a
temperatura ambiente.
• Refrigerada a 2-8°C durante no más de 8 horas (excepto bilirrubina y urobilinógeno).
Uso de conservadores químicos
§ Ácido tartárico, clorhexidina y ácido bórico conservan la muestra a
temperatura ambiente (la utilización depende del tipo de parámetro a
analizar).
§ Fluoruro de Sodio: se usa para conservar la glucosa en muestras de
orina de 24 horas.
§ Tabletas de formaldehído: no interfieren en el examen químico y
microscópico.
ALTERACIONES POR TIEMPOS PROLONGADOS
EN EL PROCESAMIENTO EL EGO
v Destrucción (lisis) de los leucocitos y eritrocitos
v Proliferación de bacterias
v Pruebas de Nitritos falso positivo
v Degradación bacteriana de la glucosa
v Aumento del pH por la formación de amoniaco como resultado de
la degradación bacteriana de la urea
v Oxidación de la bilirrubina y el urobilinógeno, sobre todo bajo
exposición a la luz solar
Examen físico
Examen General Examen Químico
de Orina
Examen
Microscópico
(Sedimento Urinario)
EXAMEN FÍSICO
v Volumen
v Color (amarillo pálido, ámbar, oscuro)
v Aspecto (claro, turbidez)
v Olor
EXAMEN QUÍMICO
v Leucocitos
v Nitritos
v Urobilinógeno
v Proteínas
v pH
v Sangre
v Gravedad Específica
v Cetonas
v Bilirrubinas
v Glucosa
El papel reactivo y el papel absorbente
situado debajo están recubiertos por una
fina malla porosa de nylon y sujetos a una
sólida lámina de soporte blanca.
La malla de nylon:
• Protege la almohadilla reactiva de la
contaminación
• Fija firmemente la almohadilla reactiva
a la lámina de soporte
Garantiza un desarrollo uniforme del
• color mediante la penetración uniforme
de la orina en la zona de test
Tintas de impresión especiales, satinadas
y que no se decoloran, permiten la
evaluación fácil y fiable de los resultados.
EXAMEN FÍSICO Y QUÍMICO
NORMAL ANORMAL
VOLUMEN 750 a 2000 ml en 24 hrs < 750 ml
ASPECTO Amarillo Claro Turbio
OLOR Característico Fétido, Frutas, Dulce, NH4
GRAVEDAD ESPECIFICA 1.003 – 1.035 (1.020) >1.035
pH 4.7 – 7.8 Mas ácido o alcalino
GLUCOSA Negativa + (Prob. Diabetes)
PROTEINAS Negativas + (Correlación cilindros)
ESTEARASA LEUCOCIT. Negativas + (Correlación leucocitos)
NITRITOS Negativos + (Correlación Bacterias)
HEMOGLOBINA Negativa + (Correlación Eritr)
BILIRRUBINAS Negativas + (Hepatopatías)
CETONAS Negativas + (Prob. Diabetes)
UROBILINOGENO Negativo +
UROANALIZADORES
La evaluación de tiras reactivas para orina con sistemas de análisis de orina se efectúa mediante
fotometría de reflexión utilizando diodos emisores de luz selectivos cuya longitud de onda y
momento de medición están ajustados exactamente a la reacción química y al desarrollo
cromático de la zona reactiva correspondiente.
De este modo se alcanza una exactitud optimizada en el ámbito del límite de detección, en
comparación con la lectura visual.
GLUCOSA
Prueba de cribado para identificación de DM
Cuando la glucemia supera la capacidad umbral renal para
reabsorber la glucosa (180 mg/dL), se presenta
glucosuria.
BILIRRUBINA
La bilirrubina es un constituyente de la bilis.
La bilirrubina conjugada es hidrosoluble, se
presenta en orina.
Sugiere enfermedad que afecta el metabolismo de
la bilirrubina después de la conjugación o
defectos en la excreción (colelitiasis).
CETONAS
Con la Hiperglucemia puede presentarse hipercatabolismo de ácidos grasos, produciento
cetonas ( ácido betahidroxibutírico, ácido acetoacético y acetona)
La producción se asocia: diabetes mal controlada.
Evaluación de cetoacidosis asociada a alcoholismo, ayuno, inanición, alimentación
hiperproteica.
GRAVEDAD ESPECÍFICA
Medida de la concentración de partículas.
GE alta → orina concentrada (1.025-1.030)
GE baja → orina diluida (1.00– 1.010)
Se usa para evaluar el poder de concentración y excreción renal.
Las nefropatías tienden a reducir la capacidad de concentración renal.
PH
Influye la dieta, fármacos, trastornos ácidobase y la función tubular renal.
Es útil para la identificación de los cristales en la orina y la determinación de la
predisposición a formar tipo de cálculos.
Orina ácida: cristales de xantina, cistina, ácido úrico y oxalato cálcico.
Orina alcalina: cristales de carbonato cálcico, fosfato cálcico.
PROTEINAS
Son un indicador sensible de la función glomerular y tubular renal.
La combinación de edema y proteinuria se denomina síndrome nefrótico.
UROBILINÓGENO
La bilirrubina se excreta a través de los conductos biliares hacia el intestino, parte de ella se transforma
en urobilinógeno.
La mayor parte del urobilinógeno se excreta desde el hígado de nuevo al intestino, pero parte de él se
excreta por los riñones.
NITRITOS
Prueba de cribado de las infecciones urinarias.
Reducción de nitrato a nitritos.
Gram-
Resultado positivo indicaría la necesidad de un urocultivo.
ESTERASA LEUCOCITARIA
Prueba de cribado para detección de leucocitos en orina.
PROCEDIMIENTO
TERMINOS UTILIZADOS
v ANURIA.- Ausencia del flujo de orina.
v POLIURIA.- Volumen aumentado de orina.
v GLUCOSURIA.- Presencia de glucosa en orina.
v PIURIA O LEUCOCITURIA.- Presencia de leucocitos en orina.
v HEMATURIA.- Presencia de eritrocitos.
v HIPOSTENURIA.- Peso específico menor de 1.007.
v HIPERSTENURIA.- Peso específico elevado.
v PROTEINURIA.- Presencia de proteínas.
EXAMEN MICROSCÓPICO DEL
SEDIMENTO URINARIO
Herramienta diagnóstica para la detección y evaluación de trastornos renales y del
tracto urinario, enfermedades sistémicas.
Una alícuota de orina centrifugada deja un sedimento de elementos formes que se
utiliza para el examen microscópico.
Condiciones de centrifugación
1500 rpm, 5 minutos
ELEMENTOS FORMES:
Ø Células:
epiteliales y sanguíneas
Ø Cilindros
Ø Cristales
Ø Estructuras diversas:
bacterias, hongos, moco, etc.
Ø Parásitos
Ø Artificios
Ø Material extraño
EXAMEN MICROSCÓPICO
El uso de colorantes
Sternheimer-malbin contiene cristal de violeta y safranina que tiñen la mayoría
de las estructuras de orina.
Otros colorantes estan indicados para diferenciar componentes especiales de
orina como:
Yodo Eosina
Tiñe los Tiñe globulos rojos
granulos de y distingues
almidon y celulas micoticas
fibras vegetales
CÉLULAS EPITELIALES
Pavimentosa o Tubular renal Transición
escamosas
BIBLIOGRAFIA
Henry J.B. El laboratorio en el Diagnóstico Clínico. 20ª. Edición. España. Ed. Marbán.
2005.
Baynes J.W. Medical Biochemistry. USA. Mosby 2009.
Fagundo SR y cols. Determinación de microalbuminuria como complemento del
examen general de orina. Rev Mex Patol Clin, Vol. 52, Núm. 2, pp 80-82 • Abril -
Junio, 2005
GRACIAS