UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y ALIMENTARIAS
LABORATORIO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL
SÁBADO 7-10
PRÁCTICA Nº 2: Concentración y curva de calibración. Ley de Beer.
Presentado por:
Johnny Isaza – [Link]
Melissa Ochoa – [Link]
Profesora: Yuliana Monsalve Carmona
1. OBJETIVOS
Construir una curva de calibración o gráfica de la ley de Beer, a partir de las
mediciones de absorbancia en función de la concentración a diferentes longitudes de
onda, para cada una de las muestras de Nitrato de Cromo (III).
Determinar la concentración de cromo en una muestra desconocida, seleccionando de
la curva de calibración la mejor longitud de onda donde se cumple la ley de Beer y
aplicando matemáticamente dicha ley.
2. DATOS
Tabla 1. Absorbancia y transmitancia obtenidas para Nitrato de Cromo (III) en función
de la concentración y la longitud de onda.
C λ 1 = 380 nm λ 2 = 410 nm λ 3 = 440 nm λ 4 = 480 nm λ 5 = 580 nm
%T 71,9 62,3 69,6 83,7 67,8
0,01 M
A 0,144 0,206 0,157 0,077 0,169
%T 64,5 47,5 59,3 81,8 52,8
0,02 M
A 0,190 0,323 0,227 0,087 0,278
%T 49,5 31,6 45,2 73,6 37,8
0,03 M
A 0,305 0,500 0,345 0,133 0,422
%T 37,1 20,7 34,7 67,8 27,0
0,04 M
A 0,432 0,684 0,459 0,169 0,568
%T 31,7 15,4 28,6 62,7 20,6
0,05 M
A 0,498 0,812 0,544 0,203 0,685
%T 54,4 36,5 51,0 79,2 42,8
Muestra #7
A 0,264 0,436 0,292 0,101 0,369
Tabla 2. Log C y (100 - %T) para las diferentes longitudes de onda.
λ 1 = 380 nm λ 2 = 410 nm λ 3 = 440 nm λ 4 = 480 nm λ 5 = 580 nm
Log C
(100 - %T) (100 - %T) (100 - %T) (100 - %T) (100 - %T)
-2,00 28,1 37,7 30,4 16,3 32,2
-1,70 35,4 52,5 40,7 18,2 47,2
-1,52 50,5 68,4 54,8 26,4 62,2
-1,40 62,9 79,3 65,3 32,2 73,0
-1,30 68,3 84,6 71,4 37,3 79,4
3. GRÁFICAS
Gráfica 1. Absorbancia vs Concentración del Nitrato de Cromo (gráfica de Beer).
- λ1:
- λ2:
- λ3:
- λ4:
- λ5:
Gráfica 2. (100-%T) vs Logaritmo de concentración del Nitrato de Cromo.
(100-%T) vs Log Concentración
90
80
70
60
(100-%T)
50
40
30
20
10
0
-2.1 -2 -1.9 -1.8 -1.7 -1.6 -1.5 -1.4 -1.3 -1.2
Log Concentración
4. CÁLCULOS Y RESULTADOS
Teniendo en cuenta la curva de calibración de Beer-Lambert, que se observa en el
gráfico 1, tomando aquel valor de longitud de onda λ donde se obtuvo mayor pendiente,
que para este caso fue de 410 nm, fue posible encontrar la siguiente ecuación que
describe el comportamiento de la absorbancia con respecto a la concentración de Nitrato
de Cromo:
y=15,73 x−0,0331
Comparando esta ecuación con la de la ley de Beer, el valor de “y” corresponde al valor
de absorbancia y el de “x” corresponde a la concentración de la solución. Obteniendo
entonces:
Absorbancia=( 15,73 ) Concentración+ 0,0331
Absorbancia−0,0331
Concentración=
15,73
De la práctica experimental se obtuvo para la muestra problema #7 a un λ de 410 nm, un
valor de absorbancia de 0,436, como se observa en la tabla 1; reemplazando este valor
para hallar la concentración se obtiene:
0,436−0,0331
Concentración=
15,73
Concentraci ó n=0,0256 M
5. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Como puede observarse en el gráfico 1 la recta que se obtuvo para una longitud de onda
de 410 nm es la que presenta mayor pendiente; este resultado era de esperarse, dado que
a esta longitud de onda se presentó la máxima absorbancia en el espectro de absorción
obtenido para el Nitrato de Cromo en la práctica anterior. Al hacer la curva de
calibración se debe emplear esta longitud de onda de máxima absorbancia, pues es ahí
donde se obtiene mayor sensibilidad y precisión debido a que el espectro se forma a
partir de ondas de banda ancha. De esta gráfica y a través de la ecuación obtenida por
regresión lineal se obtuvieron los parámetros que permitieron encontrar el valor de
concentración de la muestra problema, que para la muestra #7 fue de 0,0256 M,
comprobando así la ley de Beer-Lambert.
El valor de concentración hallado se encuentra dentro del rango de concentraciones que
comprenden la curva de calibración; en caso contrario debería aplicarse el método de
adición estándar si es menor que el rango, o una dilución si es mayor. El gráfico de
Ringbom (gráfico ¿?) permite determinar cuáles son estos rangos de concentración
óptimos. Para este caso se obtuvieron curvas sigmoidales con una posición central
lineal, que corresponden al intervalo lineal; en las concentraciones que se encuentran
fuera de este intervalo no es posible hacer una detección con precisión y exactitud,
presentándose un error fotométrico y allí no es aplicable la ley de Beer.
6. CONCLUSIONES
Para cuantificar una sustancia a partir de su espectro de absorción es necesario
que su concentración se encuentre en el intervalo de linealidad de la curva de
calibración para que sus valores sean cuantificados de manera confiable.
Las curvas de calibración constituyen una herramienta útil para la identificación
de sustancias a partir de su espectro de absorción, así como las curvas de
Ringbom permiten evaluar la sensibilidad del método utilizado.
La ley de Beer relaciona la absorción de luz con las propiedades del material
atravesado, correspondiendo la absorbancia y la concentración; por esto es
determinante la elección de longitud de onda óptima, ya que de esta depende que
la relación entre estos dos parámetros sea más evidente.
7. BIBLIOGRAFÍA
1. Guzmán C. Amally. Manual de Laboratorio de Análisis Instrumental. Medellín,
Colombia. Universidad de Antioquia.
2. Anónimo. Colorimetría, Ley de Lambert-Beer. [Consultado 11 de febrero de
2020]. Disponible en: [Link]
3. Dosal M., Villanueva M. Curvas de calibración en los métodos analíticos. 2008.
[Consultado 12 de febrero de 2020]. Disponible en:
[Link]
[Link]
4. Herbert A. Transmitancia en soluciones. Universidad de Nayarit. [Consultado 12
de febrero de 2020]. Disponible en:
[Link]
nayarit/analisis-instrumental/practical/transmitancia-en-soluciones-de-
mn/2966734/view
