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Pruebas Bioquímicas Bacterianas

El documento presenta los resultados de un cuestionario sobre técnicas de microbiología. Explica cómo reconocer cultivos puros, jóvenes, dañados y envejecidos y cómo algunos microorganismos desarrollan películas en caldo. También describe cómo visualizar polisacáridos extracelulares producidos por Streptococcus mutans, la prueba de catalasa para distinguir entre Streptococcus y Staphylococcus, e interpretar resultados de pruebas de fermentación de carbohidratos.
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Pruebas Bioquímicas Bacterianas

El documento presenta los resultados de un cuestionario sobre técnicas de microbiología. Explica cómo reconocer cultivos puros, jóvenes, dañados y envejecidos y cómo algunos microorganismos desarrollan películas en caldo. También describe cómo visualizar polisacáridos extracelulares producidos por Streptococcus mutans, la prueba de catalasa para distinguir entre Streptococcus y Staphylococcus, e interpretar resultados de pruebas de fermentación de carbohidratos.
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PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

Anote las características coloniales de cada cepa en la tabla, basándose en el Texto, las
figuras:

I. CUESTIONARIO
1. Qué método utilizaría para reconocer un cultivo puro, joven, injuriado y envejecido.

Cultivos puros: son aquellos que contienen un solo tipo de microorganismo, el modo
de obtener estos cultivos consiste en obtener colonias aisladas provenientes de una
celula.
Características:
 Las colonias deben ser iguales en forma, tamaño y color.
 En el microscopio deben tener un aspecto común.
 Tienen propiedades tinteriales iguales.
 Bioquímicamente y fisiológicamente son iguales.
Método de siembra:
 Por inoculación
 Por aislamiento.
Método de obtención:
 Siembra por aislamiento o por estría.

Cultivos injuriados: son aquellos donde los m.o considerados gran-contienen


crecientes gran-. Las bacterias indicadoras de contaminación fecal pueden injuriarse
debido a la acción del cloro, pH, temperaturas extremas, presencia de metales y otras
sustancias toxicas, falta de nutrientes, etc.
Si estas bacterias no se encuentran en condiciones adecuadas para su recuperación
metabólica, serán incapaces de desarrollar dando lugar a falsos negativos.

Cultivos envejecidos: se debe distinguir de un medio enjuriado, se utiliza un cultivo


diferencial o indicadores que pueden distinguir. Por tinción gran se tienen parcialmente
rosa. Por absorción macroscópica podemos distinguir un medio joven de un medio
envejecido.

2. Por qué algunos microorganismos de importancia industrial desarrollan en caldo una


característica de forma de película.

El crecimiento tipo película es la acumulación de los microorganismos que se están


cultivando en la superficie del medio de cultivo, en este caso del caldo de cultivo. Los
m.o se acumulan allí por tener respiración aerobia. Al ser el oxigeno poco soluble no
penetra en la totalidad del tubo y se concentra en la superficie del medio donde se
agrupan los m.o formando la película.

La concentración del oxígeno ambiental que disiparía la acumulación de m.o en la


superficie del medio o factores como el aumento de temperatura pueden causar la
muerte de los microorganismos.
3. ¿Cómo se visualiza el polisacárido extracelular y a qué bacteria puede corresponder?

Los polisacáridos extracelulares sintetizados por bacterias incluyen glucanos (formaores


por la polimerización de glucosa), fructanos (fructosa), heteropilosacaridos, etc.
Particularmente la Streptococcus mutans.
La síntesis de glucanos extracelulares bacterianos se produce por la acción de enzimas
extracelulares sintetizadas por bacterias GLUCOSINTRANSFERASAS (GTF-S), estas
enzimas hidrolizan a la sacarosa en unidades de glucosa y fructosa.
Los glucanos extracelulares cumplen 2 funciones:
 Mediar la adherencia bacteriana.
 Servir como fuente nutricional.

4. ¿Qué es la prueba de catalasa, cómo se realiza y


qué utilidad tiene?

Se utiliza para comprobar la presencia del enzima


catalasa que se encuentra en la mayoría de las
bacterias aerobias y anaerobias facultativas que Ilustración 1: Streptococcus mutans
contienen citocromo. La prueba de la catalasa
hace que sea fácil distinguir entre Streptococcus (-) y Staphylococcus (+).

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA:
 Coloque una gota de peróxido de hidrógeno al 3% en un portaobjetos de
microscopio
 Hacerse con una colonia de bacterias a prueba de la placa de agar utilizando un
bucle bacteriana o punta de pipeta
 Agitar la colonia bacteriana en el peróxido de hidrógeno y el reloj para que se
formen burbujas
Si la colonia bacteriana es Staphylococcus, se verán inmediatamente abundantes
burbujas, si no aparecen burbujas, la colonia es una especie Streptococcus.
El principio de esta prueba es que la enzima catalasa reacciona con peróxido de
hidrógeno para formar agua y oxígeno - las burbujas observadas son oxígeno.
5. ¿Cómo se interpretan los resultados de una prueba de fermentación de hidratos de
carbono?

Las bacterias que fermentan un hidrato de carbono son por lo general anaerobios
facultativos. Por medio del proceso de fermentación un hidrato de carbono es
degradado y descompuesto en dos moléculas de carbono (triosas) que son nuevamente
degradadas. Los productos finales varían con cada especie bacteriana y depende del
sistema enzimático existente en la especie y las condiciones del medioambiente.
Utilizando un indicador de pH con un determinado hidrato de carbono puede
determinarse si una bacteria ha degradado el mismo en varios productos terminales,
observando un cambio de color visible en el medio.

Indicador de pH ( aldehidos )+ CHO→ H 20O 2+cambio de ¿ ¿

medio no inoculado negativo positivo


Ilustración 2: pruebas bioquímicas de fermentación de carbohidratos de Streptococcus

Interpretacion:

Positiva = Color amarillo (ácido)

Negativa = Color rosa - rojizo (alcalina)Color naranja

Referencias
academia. (2003). Obtenido de
https://www.academia.edu/4858992/Atlas_de_pruebas_bioquimicas_para_identifica
r_bacterias

Sanchez, W. (07 de 12 de 2008). SCRIBD. Obtenido de


https://es.scribd.com/doc/8705261/Prueba-de-La-Catalasa

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