Fijación

Alan Parada Aguayo 2-A BTCH

Los fijadores se pueden clasificar en dos grandes grupos según su acción sobre el tejido: los
coagulantes y los que establecen enlaces cruzados. Los primeros, al extraer agua de los tejidos
producen coagulación y desnaturalización de las proteínas, sobre todo las de la matriz
extracelular, mientras que los segundos establecen enlaces químicos entre moléculas del tejido.
Los fijadores que tienen como base al alcohol son desnaturalizantes, tales como el Bouin o el
Carnot, mientras que el formaldehído o el glutaraldehído establecen enlaces. También se preparan
soluciones mixtas de ambos tipos de fijadores. Otra clasificación de los fijadores es la de que sean
aditivos o no aditivos. Los primeros tienen moléculas o iones que se combinan con las moléculas
del tejido y formarán parte de él en los pasos sucesivos del procesamiento. Estos son sobre todo
los que establecen enlaces y algunos coaguladores. Los no aditivos son aquellos que tras llevar a
cabo su función son eliminados en pasos posteriores, como es el caso del alcohol o el ácido
acético. Otra clasificación de los fijadores es la de que sean aditivos o no aditivos. Los primeros
tienen moléculas o iones que se combinan con las moléculas del tejido y formarán parte de él en
los pasos sucesivos del procesamiento. Estos son sobre todo los que establecen enlaces y algunos
coaguladores. Los no aditivos son aquellos que tras llevar a cabo su función son eliminados en
pasos posteriores, como es el caso del alcohol o el ácido acético.

Los fijadores por deshidratación son sustancias altamente higroscópicas es decir absorben agua
actúan eliminando tanto el agua libre como el agua ligada a las proteínas de forma que estas
últimas precipitan y disminuyen su solubilidad. Este cambio proteico es conocido con el nombre de
desnaturalización y provoca importantes alteraciones en la organización y estructura celular y
tisular, por tanto, estos agentes fijadores inducen grandes cambios en la morfología orgánica
sobre todo si se emplean como agentes fijadores aislados. Alguno de ellos como por ejemplo la
acetona, altera poco la estructura antigénica tisular y ello se debe a que estos fenomenitos
inducidos son reversibles en parte tras la rehidratación. El fundamente molecular de la acción
deshidratante de los alcoholes y la acetona, está en la competición que establecen con las
proteínas por las moléculas de agua cuando se encuentra en soluciones concentrada, los
principales agentes fijadores por deshidratación son alcoholes metílico y etílico, acetona y
cloroformo.

Los fijadores que actúan por cambios en el estado coloidal de las proteínas se utiliza comúnmente
el ácido acético, aunque no es muy recomendable utilizarlos. Ácido acético. Su proceso de fijación
consiste en cambiar el estado coloidal de las proteínas. Se utiliza a una concentración que varía
entre el 1 y el 5 %. Es el fijador ideal para ácidos nucleicos y nucleoproteínas. Como
inconvenientes cabe destacar la destrucción de las mitocondrias y mala fijación de membranas y
citoplasma. Se suele usar en combinación con otros fijadores. Ejemplos: Bouin, FAA
La fijación por formación de sales se produce gracias a que las sales del tipo picrato coagulan las
proteínas de los tejidos. Se suele usar del 2 al 15 % de una solución saturada de ácido pícrico.
Preserva bien la estructura celular, no produce retracciones cuando el tiempo de fijación es
óptimo, preserva bien glucógeno y lípidos. Es un buen fijador para tinciones generales puesto que
tiene efecto mordiente y favorece la unión de los colorantes. Hay que eliminarlo completamente
antes de proceder a la inclusión en ceras como la parafina puesto que dificulta la penetración de la
parafina.

Los fijadores por reticulación constan de una reacción química de los polímeros, implica la
formación de una red tridimensional formada por cadenas poliméricas homogéneas; con esto
adquieren mayor rigidez y en caso de los elastómeros su resistencia aumenta.

Los fijadores deben evitar la autolisis, proteger frente a ataques bacterianos, insolubilizar
elementos solubles que se quieren estudiar, y evitar distorsiones y retracciones tisulares que
afecten al volumen o a la morfología. Además, deben preparar el tejido para poder llevar a cabo
tinciones específicas posteriores, si es necesario, y mantener las características del tejido en
procesos histológicos como inclusiones.

Aquellos fijadores que contienen formol son diferentes sustancias y técnicas, pero estas son las
dos principales.

Liquido de Bouin: Solución muy usada como alternativo a la formalina cuando queremos fijar
ciertos Tejidos como piel órganos endocrinos, testículos y tejido embrionario en general. Sin
embargo, no está fijado para la fijación de biopsias renales sobre los cuales provoca una severa
distorsión.

Se prepara de la siguiente manera:

SOLUCIÓN ACUOSA DE ÁC. PÍCRICO

ü (ÁC. PÍCRICO AL 1-2% EN AGUA DESTILADA) ……..750.0 ml.

ü FORMALINA CONCENTRADA………………………250.0 ml.

ü ÁC. ACÉTICO GLACIAL……………………………….50.0 ml.

ü PH. FINAL…………………………………………………2.2

ü TIEMPO DE FIJACIÓN……………………………..2 a 24 horas

Fijador de Bouin-Hollander: es una variante del líquido de Bouin especialmente indicado para la
fijación de los cilindros de biopsia de médula ósea cuando no es posible controlar el tiempo de
fijación de la muestra en éste líquido, la conservación, puede incluso conservar las 48 horas sin
que se produzca excesivo endurecimiento.

Se prepara de la siguiente manera:

§ ACETATO NEUTRO DE COBRE………….……………2.5 gr.

§ ÁC. PÍCRICO……………………………………………..4.0 gr.

§ FORMALINA CONCENTRADA……………………....10.0 ml.

§ ÁC. ACÉTICO GLACIAL……………………….……….1.5 ml.

§ AGUA DESTILADA…………………………………..100.0 ml.

Fijar un tejido es preservar sus características morfológicas y moleculares lo más parecidas

posibles a las que poseía en su estado vivo. O dicho de otra manera, la fijación disminuyen los
cambios en los tejidos desde que se obtienen hasta que se observan, tanto en organización
estructural como en composición química.

La consistencia en la fijación es importante porque de ello depende una buena interpretación de la

estructura del tejido. Imagínese que puede ser la diferencia entre un buen y un mal diagnóstico de
una patología, basado en diferencias en la organización del tejido o en las características de los
núcleos de las células. No existe un fijador universal, ni un método de fijación único. Incluso
podemos usar varios fijadores secuencialmente según nuestras necesidades. La elección depende
de las características fijadoras que necesitemos.