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Pruebas Bioquímicas: Fundamentos y Métodos

Este documento describe las pruebas bioquímicas TSI, LIA e Indol, el medio IMViC y sus reacciones, y métodos modernos como PCR para análisis de alimentos. El TSI, LIA e Indol analizan la fermentación de azúcares y producción de ácidos/enzimas. El IMViC incluye pruebas de Indol, rojo de metilo, Voges-Proskauer y citrato. Métodos modernos como PCR son sensibles y selectivas para detección e identificación de microorganismos en alimentos.

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Pruebas Bioquímicas: Fundamentos y Métodos

Este documento describe las pruebas bioquímicas TSI, LIA e Indol, el medio IMViC y sus reacciones, y métodos modernos como PCR para análisis de alimentos. El TSI, LIA e Indol analizan la fermentación de azúcares y producción de ácidos/enzimas. El IMViC incluye pruebas de Indol, rojo de metilo, Voges-Proskauer y citrato. Métodos modernos como PCR son sensibles y selectivas para detección e identificación de microorganismos en alimentos.

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PRUEBAS BIOQUIMICAS

1. Cuál es el fundamento bioquímico de la prueba del TSI, LIA e Indol?


a) TSI
El agar triple azúcar hierro contiene tres carbohidratos (glucosa, lactosa y
sacarosa ). Cuando dichos carbohidratos se fermentan, la producción
resultante de ácido es detectada por el indicador rojo fenol. Se producen
cambios de color: amarillo para la producción de ácido y rojo para la
alcalinización. Dado que la lactosa y la sacarosa se encuentran presentes en
concentraciones mucho más elevadas que la glucosa, la formación de ácido
en la base del tubo se debe a dichos azúcares, mientras que la formación de
ácido a partir de la glucosa es suprimida por la rápida oxidación de una
pequeña cantidad de ácido en el área inclinada del tubo, lo que genera una
reacción de pH neutro o alcalino cuando se fermenta sólo glucosa
b) LIA
El Medio de Lisina y hierro (L.I.A.) es un medio de cultivo ampliamente
utilizado para la diferenciación de bacilos Gram negativos entéricos,
especialmente miembros del género Salmonella con capacidad de
fermentación de lactosa, sobre la base de la producción de H2S y la actividad
de la enzima Lisina decarboxilasa. También es posible observar cambios
debidos a la actividad de la enzima lisina deaminasa, característica del
género Proteus y Providencia. Las peptonas y el extracto de levadura aportan
aminoácidos y nutrientes esenciales, la dextrosa constituye una fuente de
energía.
c) INDOL
El indol es uno de los productos de degradación del aminoácido triptófano.
La presencia de la enzima triptofanasa en la bacteria provoca la hidrólisis del
aminoácido y su desaminación, produciendo indol, ácido pirúvico y
amoníaco.
2. Cuál es la composición de los medios usados en el INVIC y cómo reaccionan frente
al microorganismo?
El IMViC es una prueba utilizada en biología para la identificación bacterias. Se
compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
El resultado de este test se expresa mediante símbolos de positivo o negativo (+
o -) según el resultado de cada prueba, siguiendo siempre el orden establecido
por las iniciales del método. Así por ejemplo, el IMViC de la bacteria
Salmonella y Citrobacter es -+-+. Para [Link] es ++-- y para Klebsiella y
Enterobacter es --
3. Describa métodos modernos de pruebas bioquímicas para análisis de alimentos
La literatura reciente reporta un número significativo de técnicas moleculares,
alternativas, sensibles y selectivas para la detección, enumeración e
identificación de microorganismos patógenos en alimentos, siendo la reacción en
cadena de la polimerasa (PCR) la plataforma más popular, mientras que la
secuenciación de alto rendimiento se perfila como una técnica de gran
aplicabilidad a futuro.

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