INTRODUCCION

En los organismos vivos se están produciendo continuamente ácidos orgánicos que son productos
finales de reacciones metabólicas, catabolismo de proteínas y otras moléculas biológicamente
activas. Mantener el pH en los fluidos intra y extracelulares es fundamental puesto que ello influye
en la actividad biológica de las proteínas, enzimas, hormonas, la distribución de iones a través de
membranas, etc… La manera en que podemos regular el pH dentro de los límites compatibles con
la vida son: 1) los tampones fisiológicos o buffers y 2) la eliminación de ácidos y bases por
compensación respiratoria, cutánea y renal. Los tampones fisiológicos son la primera línea de
defensa frente a los cambios de pH de los líquidos corporales, entre los que destacan: el tampón
fosfato y el tampón bicarbonato, estudiados en clase.

OBJETIVOS

 Conocer las funciones de los buffers biológicos.

 Importancia de los tampones fisiológicos en el organismo humano.
 Determinar las características especiales de cada sustancia por medio de la determinación
del pH y la de observar la capacidad de resistencia a los cambios de pH que tienen algunas
sustancias presentes en los organismos vivos.
MARCO TEÓRICO

 pH: Coeficiente que indica el grado de acidez o basicidad de una solución acuosa.
 Medición del pH: El valor del pH se puede medir de forma precisa mediante el pHmetro, un
instrumento que mide la diferencia de potencial entre dos electrodos: un electrodo de
referencia (generalmente de plata/cloruro de plata) y un electrodo de vidrio que es sensible
al ión hidrógeno.
También se puede medir de forma aproximada el pH de una disolución empleando
indicadores, ácidos o bases débiles que presentan diferente color según el pH.
Generalmente se emplea papel indicador, que se trata de papel impregnado de una mezcla
de indicadores.
 Solución Buffer: Muchas de las reacciones químicas que se producen en solución acuosa
necesitan que el pH del sistema se mantenga constante, para evitar que ocurran otras
reacciones no deseadas.
TAMPÓN BICARBONATO
El tampón bicarbonato está compuesto por ácido carbónico (H2CO3) y bicarbonato(HCO3-) y
el valor de su pKa es de 6,1. Es el tampón más importante de la sangre(pH=7,4), representa el
75 % de la capacidad buffer total de la sangre. También está presente en el líquido intersticial.
Es un tampón muy eficaz porque la relación HCO3-/ H2CO3 es muy alta, lo que supone una
alta capacidad para amortiguar los ácidos. Supone una ventaja el hecho que se trata de un
sistema abierto ya que el CO2 puede ser eliminado en la respiración muy rápidamente, los H+
se pueden eliminar por vía renal y el HCO3- puede reemplazarse en la orina. En realidad, este
tampón está compuesto por dos equilibrios, pues el ácido carbónico forma CO2, generando una
molécula de H2O. Cuando el pH disminuye, el bicarbonato toma los protones libres. Así, el
equilibrio se desplaza hacia el H2CO3, que, a su vez, mediante la reacción catalizada por la
anhidrasa carbónica (glóbulos rojos), cede una molécula de H2O y se convierte en CO2, el cual
se elimina a través de los pulmones. Por el contrario, si el pH de la sangre aumenta, se forma
HCO3- a partir de H2CO3, lo que conduce a mayor captación de CO2. Las concentraciones de
HCO3- y de H+ también se pueden controlar por mecanismos fisiológicos a nivel renal.

 Tampón bicarbonato (Inorgánicos)

CO 2 + H 2 O H 2 CO 3 HCO 3 - + H +
TAMPÓN FOSFATO
El tampón fosfato está compuesto por el hidrógeno fosfato (HPO 4 −2 ) y el dihidrógeno fosfato
(H 2 PO 4- ). Actúa en el plasma y el líquido intersticial. Este tampón tiene un pKa de 6,8, el
cual está mucho más cerca del pH plasmático. Esto significaría que este tampón tendría que ser
más útil que el anterior, pero no es así ya que se encuentra en concentraciones menores en sangre
y la eliminación del fosfato es mucho más lenta, por vía renal .El pH fisiológico de 7,4, la
relación HPO 4 −2 / H 2 PO 4- es igual a 4. Así, se trata de un sistema eficaz para amortiguar
ácidos. A nivel sanguíneo, el tampón bicarbonato resulta más útil que el tampón fosfato ya que
este último se encuentra en concentraciones bajas. Ahora bien, a nivel intracelular, el tampón
fosfato tiene concentraciones elevadas y es más eficiente

 Tampón fosfático (Inorgánicos)

H 2 PO 4 - HPO 42- + H +
TAMPÓN HEMOGLOBINA

La función principal de la hemoglobina es el transporte de oxígeno por la sangre. Referente

a su estructura, se trata de un heterotetrámero y consta de dos pares de cadenas poli
peptídicas diferentes. Cada una de las cadenas lleva un hemo como grupo prostético, donde
se unen las moléculas de O 2 , por lo que una hemoglobina puede unir como máximo cuatro
moléculas de O 2 .La captación de O 2 se ve afectada, entre otros factores, por los H + y el
CO 2 . Algunos factores favorecen el estado T, en el cual la proteína no tiene O 2 unidos, y
otros favorecen el estado R, en el cual la hemoglobina tiene unidas moléculas de O 2 . Se
denomina efecto Bohr. Es muy positivo para remarcar la diferencia entre las distintas
afinidades para el O 2 ; la cual es esencial para que cumpla su función de transporte

 Tampón Hemoglobina (Orgánicos)

HHbO 2 HbO 2- / HbH Hb - + H+

AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
Los aminoácidos tienen carácter anfótero, es decir, pueden ceder protones y también
captarlos. Esto es así gracias a dos de los radicales comunes en todos los
aminoácidos: el grupo NH2 y el grupo COOH. Estos radicales, al estar en contacto
con el agua, se presentan ionizados o protonados; actuando los dos como donantes o
aceptores de protones.

 En pH ácidos:
El NH2 capta un protón: NH3+………… (El pka para este radical es 9)
 En pH ácidos: El NH2 capta un protón: NH3+………… (El pka para este radical es 9
PROCEDIMIENTO:
Calibrar el potenciómetro con patrones de pH 7,0 y 4,5.
Lavar con agua destilada el electrodo (tener cuidado ya que el bulbo es muy sensible).
1.- Colocar la muestra en el vaso de precipitación, introducir el electrodo teniendo en cuenta que la
muestra cubra el bulbo de vidrio. (Ensayar con cada una de las muestras disponibles )
Tomar nota de la temperatura y de la lectura de pH Lavar inmediatamente el electrodo con agua
destilada.
2.- Utilizar las soluciones coloreadas para la medición del pH de las muestras que estén
disponibles en el l momento del experimento

A. PREPARAR UNA SOLUCIÓN AMORTIGUADORA DE BUFFER FOSFATO

Lea con atención el enunciado y su solución:

Preparar 100 ml de una solución buffer fosfato 0.1 M de pH 7, 0, usando las sales de fosfato
monobásico y bibásico.

Cálculos:

Datos.-

A.- NaH2PO4.2HOH - M = 156,01 g/mol

B.- Na2HPO4.7HOH - M = 268,07 g/mol

Molaridad del Buffer = 0,1 M aportado por NaH2PO4.2HOH (sal monobásica)

y Na2HPO4.7HOH (sal dibásica).

Dónde: A + B = 0,1

A = 0,1 - B

B = 0,1 - A

Por lo que, ¿Cuál será el valor de A ó B? - Se recurre a la relación B/A.

pH = pKa + log B/A

7,00 = 7,21 + log B/A

7,0 - 7,21 = log B/A

-0,21 = log B/A

Aplicando antilog, se tiene:

 0,62 = B/A

Por lo tanto: B = 0,62

Reemplazando en : B = 0,1 - A

0,62 A = 0,1 - A

0,62 A + A = 0,1

1,62 A = 0,1

A = 0,062 M

B = 0,1 - 0,062

B = 0,038 M

¿Cuánto de Acido debemos de pesar y Cuánto de base, si queremos preparar 100 ml de cada una
de estas soluciones?

Sí:

156,01 g ------- 1000 ml ------- 1,000 M

X g ------- 1000 ml ------- 0,062 M

X = 9,67 g/1000 ml

9,67 g ------- 1000 ml ------- 0,062 M

X g ------- 100 ml ------- 0,062 M

X = 0,967 g NaH2PO4.2HOH

268,07 g ------- 1000 ml ------- 1,000 M

X g ------- 1000 ml ------- 0,038 M

X = 10.19 g/1000 ml
 10,19 g -------- 1000 ml ------- 0,038 M

X g -------- 100 ml ------- 0,038 M

Pesar ambas sustancias por separado y disolver con agua bidestilada, llevando a enrase en fiolas
de 100 ml.

Proceder igual para la preparación del buffer fosfato 0,2 M.

B. COMPROBAR EL EFECTO REGULADOR DE LOS CAMBIOS DE pH, POR LAS SOLUCIONES BUFFER
ELABORADAS A LA EXPERIENCIA A :

Erlenmeyer/Reactivo 1 2 3 4 5 6

HOH Destilada (ml) 5.0 ---- ---- 5.0 ---- -----

Buffer Fosfato 0.1 M (ml) ---- 5.0 ---- ---- 5.0

Buffer Fosfato 0.2 M (ml) ---- ---- 5.0 ---- ---- 5.0

Anaranjado de Metilo 1% 3 gts 3 gts 3gts ---- ---- ----

Fenolftaleína 1% ---- ---- ---- 3 gts 3 gts 3 gts

Titular con: HCl M/10 Erln.1 Erln.2 Erln 3 ---- ---- -----

Titular con Na OH M/10 ---- ----- ----- Erln 4 Erln.5 Erln 6

RESULTADOS:

Muestra Temperatura pH pOH H+ OH-

Solucion de
Fosfato monosódico
17.5° 4,6 9.4 0.21 0.10

Solución de Fosfato
de disodió
17.2° 8.5 5.5 0.11 0.18
Combinación de
soluciones
17.4° 7.3 7.5 0.15 0.13
 CUESTIONARIO:
1. Detalles la acción integrada de los tapones biológicos en manutención del pH
sanguíneo

Es La capacidad de taponamiento es una propiedad importante para los sistemas biológicos, donde
un rápido cambio de pH puede tener consecuencias desastrosas. Un tampón biológico eficaz debe
ayudar a mantener la sangre en el intervalo "seguro" de pH = 7,35 a 7,45 evitando los cambios de
pH en cualquier sentido fuera de este intervalo. Los cambios hacia pH ácido (es decir, por debajo de
7,35) son particularmente indeseables dadas las variaciones en la producción de ácidos, como
láctico, pirúvico, acético, etc., en el metabolismo. La producción de dichos ácidos en el ejercicio
extremo puede bajar el pH de la sangre periférica incluso por debajo de 7,0.

El sistema del tampón bicarbonato es clave en la regulación del pH en la sangre humana y puede
responder a los cambios de pH de varias formas:
El ion bicarbonato es realmente la base conjugada del ácido carbónico:
H+ + HCO3- [H2CO3]; pKa = 6,14
[Reacción ácido-base no enzimática, prácticamente instantánea]
El ácido carbónico, sin embargo, es rápidamente convertido en CO2 y agua por la anhidrasa
carbónica, lo que hace de él una especie transitoria:
[H2CO3] >--< CO2 + H2O; pKa = 6,14
[Reacción enzimática con muy alta velocidad]
En relación a los dos productos de la reacción de la anhidrasa carbónica, el agua es fácilmente
absorbida por el sistema, mientras que el CO2 se puede eliminar mediante la respiración. Además, la
tasa de eliminación del CO2 en la respiración está controlada a través de mecanismos neurológicos.
La [HCO3-] y la [H+] pueden ser controladas (lenta e incompletamente) por mecanismos
fisiológicos a nivel renal.
Todos estos aspectos se pueden resumir como sigue:
CO2 + H2O <--> [H2CO3] <--> H+ + HCO3-

 Producido en el metabolismo
 Siempre disponible
 En equilibrio con las especies de cada lado

 Producido en el metabolismo
 Tampón sanguíneo preexistente
 Eliminado directamente en los pulmones
 Controlada en el riñón vía mecanismos fisiológicos no relacionados con el pH
 Convertido en los productos de la izquierda por la anhidrasa carbónica (glóbulos rojos)
 Control en el riñón o reacción con el bicarbonato para dar los productos de la izquierda
2. Cuál es su función en un sistema de amortiguador
La función de un sistema amortiguadora es la de resistir los cambios de pH cuando se le agregan
ligeras cantidades de ácido o base. Su función es muy importante en los sistemas químicos y
biológicos y los procesos que requieran un cierto valor de pH que no sea modificable con
facilidad. Ya sea para el funcionamiento adecuado de las enzimas en el sistema digestivo o los
glóbulos blancos en el torrente sanguíneo
3. Alteraciones que suceden por los cambios del ph a nivel celular

ACIDOSIS Y ALCALOSIS METABÓLICAS

La Acidosis se define como aquel proceso fisiopatológico que tiende a añadir ácido  o 
eliminar álcali de los líquidos corporales, mientras que la Alcalosis es cualquier disturbio
que tiende a excretar ácido o aportar bases.

ACIDOSIS METABÓLICA (ACM)

En ella se produce un descenso de la concentración de HCO3- de forma primaria. En la

ACM no compensada, gasométricamente se observa descenso sérico del pH y del HCO3-
con un valor de PCO2 dentro de límites normales, no obstante dado que la respuesta
compensadora del  pulmón sucede en escasos minutos el patrón gasométrico más
frecuentemente encontrado es reducción del pH,  HCO3- y PCO2 sanguínea.

 Acidosis láctica: Es la causa más común de acidosis de los pacientes en UCI. La

mayoría de los autores la definen como acidosis metabólica con un nivel de ácido
láctico por encima de 5 mmol/l. Dividiéndolas en dos tipos:  hipóxica (tipo A) y no
hipóxica (tipo B)  (Cuadro 4). El lactato es un producto normal de la glicólisis
anaerobia. La acidosis D-láctico, generalmente implica una producción exógena e
introducción en el paciente, puesto que los humanos no podemos producir la
isoforma D-láctico. Se han descrito en síndromes de intestino corto por
sobrecrecimiento bacteriano, y también en los líquidos de hemodiálisis y diálisis
peritoneal, así como en el Ringer lactato que contiene esta forma racémica. El  D-
lactato es neurotóxico y cardiotóxico.

 Cetoacidosis: Ocurre por sobreproducción hepática  de ácido-acético y beta-

hidroxibutírico debido a la disminución en la utilización de glucosa por una
deficiencia absoluta o relativa de insulina . También puede darse en los alcohólicos
desnutridos que no han bebido en los últimos días con vómitos, en donde la
alcoholemia es nula o muy baja, así como glucemia normal o baja, en dónde el
acúmulo de cuerpos cetónicos se debe a la liberación de ácidos grasos libres desde
el tejido adiposo por una lipolisis activa como consecuencia de la disminución de
los niveles de insulina con aumento del cortisol y de la hormona del crecimiento .
Puede existir acidosis láctica concomitante. 
 ALCALOSIS METABÓLICA (ALM)

Llamamos ALM al trastorno del equilibrio ácido-base en el que encontrarnos un pH arterial

> 7,45 y un HCO3-   plasmático>25 mmol/l como alteración primaria y un aumento de la
PCO2, por hipo ventilación secundaria compensatoria (la PCO2, aumenta 0.7 mmHg por
cada mmol/l que aumenta el HCO3).

La concentración de cloro disminuye para compensar la elevación de bicarbonato.

El anion gap aumenta en proporción a la severidad de la alcalosis (HCO3-  > 40 mEq/l) , en

el 50 % debido al lactato y en el resto a la concentración de  proteínas séricas que además
se vuelven más aniónicas a causa de la alcalemia .

Casi siempre se observa también una hipokaliemia la que no se debe a pérdidas digestivas
de potasio  sino al aumento de su eliminación urinaria.

ACIDOSIS RESPIRATORIA (ACR)

La acidosis respiratoria es un trastorno clínico, de evolución aguda o crónica, caracterizado

por pH arterial bajo provocado por una elevación de la concentración de iones H +, debido
a la elevación primaria de la PCO2  y aumento variable en la concentración plasmática de
HC03-,  como resultado de múltiples factores etiológicos responsables de la falla
respiratoria

ALCALOSIS RESPIRATORIA (ALR)

La alcalosis respiratoria es un trastorno clínico provocado por disminución de la

concentración de iones H+  y caracterizado por pH arterial elevado, PC02 baja y reducción
variable en el HCO3 plasmático como consecuencia de múltiples factores etiológicos.

TRASTORNOS ACIDOBÁSICOS MIXTOS

Se deben a  la coexistencia simultánea de dos o más  alteraciones ácido básicas simples y se

les considera erróneamente muchas veces como respuestas compensatorias.

4. ¿Que es un pk ?
El pKa es una magnitud que cuantifica la tendencia que tienen las moléculas a disociarse en
solución acuosa. Se define tal que
Donde K es la constante de disociación ácida. Una forma conveniente de expresar la relativa
fortaleza de un ácido es mediante el valor de su pKa, que permite ver de una manera sencilla en
cambios pequeños de pKa los cambios asociados a variaciones grandes de Ka. Valores pequeños
de pKa equivalen a valores grandes de Ka (constante de disociación) y, a medida que el pKa
decrece, la fuerza del ácido aumenta.
5. Ejemplos de pK

Ejemplo : Calcular los valores de pKa para las siguientes sustancias:

Ácido yódico (HIO3) con Ka = 1,7 · 10-1 → pKa = - log10 Ka = - log10 (1,7·10-1) = 0,77
Ácido fórmico (HCOOH) con Ka = 1,8 · 10-4 → pKa = - log10 Ka = - log10 (1,8·10-4) = 3,74
Ácido acético (CH3COOH) con Ka = 1,8 · 10-5 → pKa = - log10 Ka = - log10 (1,8·10-5) = 4,74
Ácido cianhídrico (HCN) con Ka = 4,9 · 10-10 → pKa = - log10 Ka = - log10 (4,9·10-10) = 9,31
Fenol (C6H5OH) con Ka = 1,0 · 10-10 → pKa = - log10 Ka = - log10 (1,0·10-10) = 10,0
Peróxido de Hidrógeno (H2O2) con Ka = 2,2 · 10-12 → pKa = - log10 Ka = - log10 (2,2·10-12) = 11,66

CONCLUSIONES
 De la primera práctica se concluye que la forma más exacta de medir el pH de las
soluciones fue el pHmetro también se probó con otro tipo de indicadores como las
bandas medidoras, anaranjado de metilo, fenolftaleína que es transparente en
presencia de una base toma un color violeta o el rojo de metilo que ante un ácido
toma un color rojo y ante un alcalino es amarillo algo parecido ocurrió con el
anaranjado de metilo.
 Se sabe que un ácido amortiguador reacciona cuando un ácido débil o base débil se
combinan con su correspondiente sal hidrológicamente en una solución de agua, se
forma un sistema amortiguador denominado buffer.
 Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual dependerá de
laconstante de equilibrio del ácido o base empleado. El Cálculo de pH de
Disoluciones lo podemos calcular, mediante esta fórmula pH= pka + log 10 ([Sal] /
[Ácido])
ANEXO:
BIBLIOGRAFIA

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%20un%20ácido%20débil).
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S_EN_EL_ORGANISMO_HUMANO_Y_SU_IMPORTANCIA_EN_SU_FUNCI
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