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Manual Parasitologia

El laboratorio de Parasitología es un lugar importante para el diagnóstico de enfermedades parasitarias a través de muestras biológicas. Se debe seguir un estricto protocolo para el adecuado manejo de las muestras y residuos, y utilizar equipo de protección. Los métodos directos como el método en fresco permiten visualizar parásitos directamente en muestras como heces, utilizando solución salina o Lugol para conservar las muestras y observar trofozoítos o quistes b

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Manual Parasitologia

El laboratorio de Parasitología es un lugar importante para el diagnóstico de enfermedades parasitarias a través de muestras biológicas. Se debe seguir un estricto protocolo para el adecuado manejo de las muestras y residuos, y utilizar equipo de protección. Los métodos directos como el método en fresco permiten visualizar parásitos directamente en muestras como heces, utilizando solución salina o Lugol para conservar las muestras y observar trofozoítos o quistes b

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Manual Parasitología.

EQUIPO #5
César Augusto Romero Ocaña
Luis Manuel Martinez Mancilla

| Laboratorio de Parasitología. |
Ricardo Galan Zamora
05/06/20
Indice.

Practica 1. Organización y Funcionamiento de laboratorio de Parasitología.


Métodos parasitológicos. ...................................................................... 2

Practica 2. Método en fresco. ................................................................ 3

Practica 3. Identificación de Ballantidium Coli. ........................................... 5

Practica 4. Amiba en fresco................................................................... 7

Practica 5. Estudio citológico de moco fecal. ............................................. 9

Practica 6. identificación de Criptosporidium y Cyclospora. ......................... 12

Practica 7. Búsqueda de Toxoplasma gondii. .......................................... 14

Practica 9. Trypanosoma y Leishmania. ................................................. 19

Practica 10. Método de Graham. .......................................................... 23

Practica 11. Método de Faust. ............................................................. 25

Practica 12. Método de Ritchie. ........................................................... 27

Practica 13. Método de Baerman.......................................................... 30

Practica 14. Método de Stoll. ............................................................... 33

PÁGINA 1
Practica 1. Organización y Funcionamiento de laboratorio de Parasitología.
Métodos parasitológicos.
Autor: César Augusto Romero Ocaña.

Resumen.

El laboratorio de Parasitología es un lugar que cuenta con las áreas de diagnóstico


parasitológico coprológico convencional, de muestras biológicas, que llegan para descartar
enfermedades parasitarias. El adecuado manejo de las muestras biológicas es de suma
importancia, pues independientemente del tipo de muestra que se maneja se les considera
potencialmente infecciosas, por lo cual es necesario que la persona encargada del análisis
conozca el reglamento, organización y funcionamiento del laboratorio, esto junto con el cuidado
dentro de este laboratorio dependerá la precisión y exactitud de los resultados obtenidos.

Los accidente por lo general se presentan por descuido, ignorancia, por desatienden las reglas
de seguridad o por tratar de trabajar apresuradamente, por lo tanto, es importante recalcar los
protocolos que podrían denominarse de “rutina” para este laboratorio.

Para obtener resultados exactos y confiables, se debe realizar un control de calidad a los
procedimientos de laboratorio para el diagnóstico de las infecciones parasitarias.

Si las muestras de heces no son recolectadas adecuadamente tendrán poco o ningún valor
diagnóstico, pues las formas parasitarias se verán alteradas.

Se deben usar recipientes limpios y secos, evitando el contacto con orina o agua
durante la recolección. La muestra debe ser llevada con la mayor prontitud al
laboratorio para ser procesada, si no es posible estas deberán refrigerarse (4-5 °C).

El manejo de los residuos deberá basarse en la NOM-087-ECOL-SSA1, así como en las


indicaciones especificas proporcionadas por el docente.

Esta práctica se centró en el docente encargado brindándonos información importante acerca


del equipo de protección, la forma en cómo se trabajaría en el laboratorio, como se
desecharían los residuos y también la organización de los equipos de trabajo.

Logramos comprender la importancia del reglamento dentro del laboratorio de Parasitología,


pues este nos brinda las pautas que debemos cumplir para poder llevar a cabo nuestro trabajo
de manera segura.

Antecedentes.

Se han hallado antecedentes de los parásitos desde la antigüedad, tal es el caso del papiro de
Kahun donde se menciona la hipodermosis bovina y la helmintiasis del perros, y el de Eber,
en el cuale se menciona el paludismo, áscaris, tenias, oxiuros y otros diversos parásitos.
Debemos a Grecia una importante información y numerosos términos hoy habituales en
parasitologia, como es el conocimiento de las áscaris, tenias, quistes hidatídico y oxiuros.
Teofrasto (372-287 AC) aporto información sobre helmiticos, se trataba de un helecho capaz
de curar tenías.

Hasta tiempos recientes, puede decirse que se estudiaron más los parásitos que el
parasitismo, predominaban los estudios desde la perspectiva zoológica sobre las investigación
parasito/hospedador/ambiente, con el paso del tiempo el avanze del ser humano condujo:

A destacar los factores ecológicos del parasitismo, con lo que mejoro la comprensión
de la epidemiologia de las parasitosis,

Un mayor estudio de las relaciones parasito/hospedador.

PÁGINA 2
Establecimiento de la enseñanza de Parasitología en la facultades sanitarias, lo cual
a su vez propicio la participación de la industria químico-farmacéutica en la
investigación.

El establecimiento de métodos ayudo considerablemente en el proceso de investigación,


pasando de la tinción de protozoos, la perfección de los microscopios ópticos y electrónicos,
los métodos de diagnóstico inmunológicos y el diseño de modelos experimentales para evaluar
los resultados.

No hay diagrama, resultados y observaciones pues la práctica no maneja una


metodología, solo se trató de la presentación de información pertinente.

Bibliografía.
Rodríguez Bataz, E. (2009). Manual de prácticas de parasitología I y II. Universidad Autónoma
de Guerrero.
Cordero del Campillo, M. (2007). Parasitología general. McGraw-Hill España.
Yolanda Medina, F (2009) – Manual de prácticas de Parasitología

Practica 2. Método en fresco.


Autor: Luis Manuel Martinez Mancilla

Resumen.

Los métodos directos son aquellos que permiten visualizar directamente parásitos u hongos
en un material patológico, o bien asilarlos del mismo.

El método que necesita menos equipo y es más sencillo de realizar, corresponde a las
preparaciones húmedas que se hacen directamente con muestras de heces. Para las
preparaciones directas de heces frescas o no preservadas, los exámenes ordinarios se hacen
con solución salina isotónica y Lugol. Si se emplean heces preservadas, el formol sirve de
diluyente.
El método en fresco se basa en la utilización de solución salina fisiológica para conservar
condiciones semejantes a las del cuerpo humano y de esta manera observar los trofozoítos.
Mientras que en el método directo se puede utilizar una solución de Lugol, para la observación
quistes.
Las preparaciones no teñidas son de especial valor para el estudio de parásitos vivos, como
trofozoítos de protozoarios móviles, huevos de helmintos para el estudio de parásitos vivos,
como emplea principalmente para la búsqueda e identificación de quistes y larvas, con base a
sus características.

La metodología consiste en colocar una gota de sol. Salina o Lugol en un portaobjetos, se


toma una muestra con un aplicador de madera y se mezcla con la gota previamente colocada
procurando que la extensión quede delgada, se coloca el cubreobjetos y se observa a 10x y
40x. Es de importancia tener cuidado de que la mezcla no quede muy cargada y retirar
cualquier grumo o resto de alimentos pues estos podrían interferir en la visualización de la
mezcla. También es preferible que la muestra sea de una deposición “normal” y que esta no
se encuentre contaminada con agua u orina.

PÁGINA 3
No obtuvimos resultados para esta práctica debido a que no conseguimos la muestra para esta
práctica. El método directo representa un herramienta útil para observar desde quistes o
huevos hasta formas activas como trofozoítos o helmintos.

Antecedentes.

La parasitología se inicia con el hallazgo de los parásitos en el hombre, el cual se pierde en


las crónicas hechas por distintos pueblos: chinos, griegos, egipcios, persas, romanos, Indus
etc.

Como sabemos uno de los primeros microscopistas fue Antón Van Leewenhoek y a mediados
del siglo XVII fue el primero en utilizar este método al observar directamente en sus propias
heces fecales, tofozoitos de Giardia lamblial.

Aun en los inicios de este siglo XXI las enfermedades infecciosas y parasitarias continúan
siendo una de las más importantes causas de morbilidad mortalidad en gran parte del planeta.
Por esto el examen coproparasitario no ha perdido importancia con el paso de los años.

Diagrama.

Con un aplicador se toma una


En un portaobjetos se coloca
pequeña cantidad de la
una gota de sol. Salina/Lugol.
muestra y mezclar con la gota.

Se coloca un cubreobjetos
Se observa a 10x y 40x
sobre el extendido.

Observaciones.

No se obtuvieron imágenes de esta práctica.

Resultados.

No se obtuvieron resultados.

Bibliografía.

Moreno, M. F. (29 de Octubre de 2013). Método coproparasitoscopico en fresco. Obtenido de


"MÉTODO DE COPROPARASITOSCOPICO DIRECTO O EN FRESCO”:
http://coproparasitoscopico.blogspot.com/2013/08/metodo-cps-directo-o-en-fresco.html

PÁGINA 4
M.E. Sara Ortigoza Gutiérrez, M. E. (s.f.). FACULTAD DE BIOANALISIS. Obtenido de
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL LABORATORIO DE LA E. E.PARASITOLOGIA
CLINICA: https://www.uv.mx/personal/sortigoza/files/2011/05/Manual-de-Para-Clinica.2.2.pdf

Practica 3. Identificación de Ballantidium Coli.


Autor: Luis Manuel Martinez Mancilla

Resumen.
Es un protozoo ciliado intestinal, es el único con capacidad de infectar a humanos, estos
parásitos son transmitidos por una vía fecal-oral por alimentos y agua contaminados, a menudo
se asocia con cerdos, que son el principal reservorio huésped. Esta infección parasitaria a
menudo es asintomática, en caso de presentar síntomas, podrán experimentar diarreas, dolor
abdominal y en casos con una parasitosis severa un colon perforado (3). Las zonas donde se
puede encontrar mayoritariamente son en países tropicales (2). El objetivo de esta práctica fue
identificar protozoarios ciliados intestinales a partir de heces fecales de porcino (1). Los quistes
de Balantidium coli miden entre 50 -70 μm, los trofozoítos pueden alcanzar 30-200μm por 40-
70μm. Como material biológico se utilizó muestra de material fecal de porcino. Primeramente,
se colocó una gota de solución salina en un portaobjetos, después se agregó
aproximadamente 1 mg de materia fecal y se homogenizo. Después se colocó un cubreobjetos
sobre el portaobjetos. Este mismo procedimiento se realizó con portaobjetos, pero añadiendo
ahora una gota de Lugol. También se realizó el mismo procediendo con una muestra positiva.
Finalmente, las muestras preparadas se observaron al microscopio con objetivos 10X y 40X.
Es de fácil observación por su tamaño y por su rotación. Esto nos servirá para la observación
del parasito vivo, en el cual se presentó un color café verdoso con olor fetido, con una
consistencia blanda sólida. La muestra que se llevó al laboratorio fue positiva ya que se
encontró un quiste de Ballantidium coli el cual se ve de una forma circular con un tamaño
promedio de 45-65 µm, con una pared doble, gruesa y transparente, recolectado de heces de
cerdo esa misma mañana. La infección por B. coli generalmente pueden ser libres de la
infección, pero en individuos debilitados puede haber complicaciones e incluso pueden ser
fatales.

Antecedentes.
Ballantidium coli es un protozoario ciliado el cual contiene organismos unicelulares que durante
su ciclo vital poseen prolongaciones cortas de la membrana ectoplasmaticas conocidas como
cilios, los géneros de este parasito son exclusivos del aparato digestivo de hospederos
vertebrados e invertebrados. B. coli comprende varias patogenias para animales, aunque es
la única que es patógena para el ser humano. La balantidiasis es la afección que presenta
mayores incidencias en zonas tropicales y subtropicales (2). Este agente etiológico presenta
dos fases: trofozoíto y quiste. El trofozoíto es la forma patógena, y tiene un cuerpo revestido
de cilios que le permite desplazarse. Tiene un citostoma, con el cual ingiere sus nutrientes,
esta continua en la citofaringe, constituyendo el aparato digestivo. En la parte posterior se
encuentra el citoprocto por el cual excretan residuos. En el citoplasma hay vacuolas las cuales
contraen sus paredes, posee dos núcleos. El mecanismo de infección habitual es la ingesta
de quistes en agua y/o alimentos contaminados, En estómago inicia la disolución de la pared
del quiste, y este proceso termina en intestino delgado. Los trofozoítos liberados colonizan
intestino grueso, desde ciego hasta recto. Los trofozoítos, la forma vegetativa, se dividen por
fisión binaria transversal y también recorren a la conjugación para el intercambio de material
genético. Se eliminan tanto quistes como trofozoítos en materia fecal; esto depende de la
consistencia de las heces y tránsito intestinal. Los trofozoítos tienen la capacidad de crear
úlceras en epitelio intestinal; se puede contemplar desde un síndrome diarreico, con moco y/o
sangre, hasta disentería, con sangre y pus, újo, tenesmo, similar al cuadro presentado en la

PÁGINA 5
disentería amebiana, con dolor abdominar, náusea, anorexia, fiebre, deshidratación (5). Esto
se parecía con mayor frecuencia en individuos desnutridos, en contacto con cerdos, ganado,
y en ambientes con servicios sanitarios deficientes.

Diagrama.

2.- Agregar 1 mg de 3.- Colocar el


1.- Colocar una gota
materia fecal y cubreobjetos
de solución salina
homogeneizar procurando que no
en un portaobjetos.
bien. queden burbujas.

4.- Hacer lo mismo 5.- Observar al


con una gota de microscopio con
Lugol. objetivo 10x y 40x.

Observaciones.

Quiste Ballantidium coli

Resultados.

PÁGINA 6
Se observó en el examen microscópico un quiste de Ballantidium coli proveniente de una
muestra de heces fecales de porcino en la preparación con Lugol. Fue posible identificarlo
debido a su morfología redonda, la pared quística se identificaba fácilmente; la vacuola y el
núcleo se tiñeron de amarillo por el Lugol.

Bibliografía.
1- Hechenbleikner EM, McQuade JA. (2015) Parasitic colitis. Clin Colon Rectal Surg.
79-86.
2- Schuster FL, Ramirez-Avila L. (2008) Current world status of Balantidium coli. Clin
Microbiol Rev. 626-638.
3- Koopowitz A Smith P, Van Rensburg N, Rudman (2010) A. Balantidium coli-
induced pulmonary haemorrhage with iron deficiency. SAMJ, S Afr med j. 534-536.
4- Kumar M, Rajkumari N, Mandal J, Parija SC. (2016) A case report of an
uncommon parasitic infection of human balantidiasis. Trop Parasitol. p 82-94.
5- Plutzer J, Karanis P. (2016) Review. Neglected waterborne parasitic protozoa and
their detection in water. Water Research.

Practica 4. Amiba en fresco.


Autor: César Augusto Romero Ocaña.

Resumen.
El examen directo en fresco se realiza de dos formas. En una se utiliza solución salina isotónica
para realizar un extendido de la muestra, suele utilizarse para investigar los trofozoítos de
protozoos o ciertas larvas, con experiencia es una técnica útil para identificar otras formas
parasitarias. La otra forma utiliza Lugol para realizar el extendido de la muestra y es una
excelente técnica para para detectar diferentes formas parasitarias de parásitos intestinales.

Para realizar adecuadamente esta metodología es necesario que el extendido no sea


demasiado grueso ni demasiado delgado y esto puede diferenciarse si se puede leer una letra
pequeña a través del extendido. Si el extendido está muy grueso o delgado la observación de
los elementos en la muestra puede llegar a dificultarse. También es necesario verificar que
tanto la solución salina como el Lugol no estén contaminadas o demasiado viejas, un Lugol
viejo no teñirá los quistes apropiadamente.

La técnica consiste en colocar en un portaobjeto una gota de Lugol y en otro una gota de
solución salina, con un aplicador de madera se toma una porción de muestra y se mezcla con
la solución salina/Lugol, se retira cualquier residuo que pudiera interferir con el examen, se
coloca un cubreobjetos sobre el extendido y se observa a 10x y 40x.

No observamos ninguna forma infectante pues no logramos conseguir una muestra de heces
diarreica por lo cual fuimos retirados del laboratorio por el docente.

El paciente del cual se recolecto la muestra había presentado un cuadro diarreico dos días
antes de la toma de muestra, cuando se recolecto la muestra esta no presentaba aspecto
diarreico, si bien no observamos parásitos en nuestra muestra, pudimos observar la presencia
de trofozoítos en la muestra recolectada por los miembros de otro equipo.

El análisis directo en fresco es una herramienta útil para el diagnóstico parasitológico pues
permite observar rápidamente formas parasitarias que suelen degradarse si no se procesan
rápidamente.

Antecedentes.

PÁGINA 7
La amebiasis intestinal es una infección causada por la Entamoeba histolytica/ E. dispar,
exclusiva del humano. En la década pasada la Organización Mundial de la Salud (OMS)
considera que es la segunda parasitosis más importante por su frecuencia en el mundo. El
principal foco de transmisión de la infección es el enfermo crónico o portador sano, que excreta
con las heces formadas los quistes, mientras que el enfermo con diarrea aguda elimina con
las heces diarreicas los trofozoítos. Su distribución es Mundial (principalmente en áreas
tropicales y subtropicales con condiciones higiénico-sanitarias deficientes, siendo endémica
en: México, la India, Indonesia, las regiones subsaharianas y tropicales de África y partes de
América Central y de América del Sur). Los quistes se adquieren por el consumo de agua o
alimentos contaminados. En el intestino, la rotura de su pared produce la liberación de
trofozoítos que invaden el colon causando lisis celular a través de contacto directo y formación
de úlceras. Los trofozoítos pueden ascender por el sistema portal y penetrar en el hígado,
perforando el intestino, causando peritonitis o migrando hacia el pulmón, donde provocan
infección pleural.

La técnica para la identificación de la amiba en fresco (AF), como una forma rápida para
reconocer la presencia de trofozoítos en pacientes con enfermedad diarreica aguda, se ha
recomendado desde hace varias décadas para afirmar el diagnóstico clínico de amebiasis
intestinal

Diagrama.

Tomar una porcion de


Colocar una gota de Colocar un
la muestra y mezclar
Sol. salina/lugol en un cubreobjetos sobre la
en la gota colocada
portaobjetos mezcla.
anteriormente.

Observar a 10,
Reportar hallazgos.
posteriormente a 40x

Observaciones.
No obtuvimos observaciones en esta práctica debido a que no conseguimos una muestra
adecuada para su observación.
Resultado.
Sin resultados.

PÁGINA 8
Bibliografía.
Rodríguez Bataz, E. (2009). Manual de prácticas de parasitología I y II. Universidad Autónoma
de Guerrero.
Yolanda Medina, F (2009) – Manual de prácticas de Parasitología

Databio. (20 de Mayo de 2015). Instituto nacional de seguridad e higiene en el trabajo.


Obtenido de Entamoeba Hystolitica :
https://www.insst.es/documents/94886/354041/Entamoeba+histolytica+2016.pdf/2eb
89214-8e9b-4ccd-b392-a8eb95eb0940

IO, F. (s.f.). fundacionio.com. Obtenido de Entamoeba Hystolitica :


https://fundacionio.com/salud-io/enfermedades/parasitos/entamoeba-histolytica/

Norberto Gómez-Rivera, *. A. (mayo de 2005). Medigraphic . Obtenido de dentificación de la


Entamoeba histolytica/E. dispar por la técnica de amiba en fresco :
https://www.medigraphic.com/pdfs/pediat/sp-2005/sp053b.pdf

Practica 5. Estudio citológico de moco fecal.


Autor: Luis Manuel Martinez Mancilla

Resumen.
La pérdida de sangre en heces se puede deber a numerosos procesos patológicos como
alteraciones gastrointestinales, cáncer colorrectal, ulceras, pólipos, anemia y ciertos procesos
parasitarios que pueden invadir la mucosa intestinal y causar patogenia. Cuando las heces
fecales contienen una mayor cantidad de sangre de lo que se pierde normalmente (2 a 2.5ml),
se debe realizar en primer lugar, la citología del moco fecal, la cual nos permite diferenciar la
etiología de una infección viral o bacteriana (2). El reporte de más de 10 leucocitos por campo
orienta a una etiología infecciosa; si estos son predominantemente mononucleares debe
pensarse en etiología viral, pero si el predominio es de polimorfonucleares, su etiología será
probablemente bacteriana. Los organismos invasivos tales como Shigella, Campylobacter,
algunas cepas de Salmonella, E. coli enteropatógena o enteroinvasiva, Yersinia y la
Entamoeba histolytica impiden al intestino llevar a cabo su normal absorción de agua y
electrolitos (4). Estos organismos tienen predilección por el colon y el proceso cursa con
disentería (materia fecal con moco y sangre). El objetivo de esta práctica fue determinar en
procesos parasitarios la presencia de células polimorfonucleares, en pacientes con cuadros
diarreicos o desinteriformes. Para lo cual se utilizó una muestra de materia fecal humana moco
y se procedió a hacer 2 frotis delgados, se secaron con la flama del mechero y se tiñeron con
tinción de Wright. Se observaron al microscopio con objetivo de 40x y de inmersión, al no
identificar ningún leucocito por lo que podemos concluir que el paciente no presento ningún
tipo de infección viral o bacteriana. Aunque la muestra poseía moco, con una consistencia
semisólida con un color verde-marrón, presentaba un olor característico, se llevó a cabo el
análisis de las heces fecales, sin embargo, el objetivo no pudo cumplirse ya que en ellas no se
encontró la presencia de células polimorfonucleares.

Antecedentes.

Muchas veces existe pérdida de sangre en el tracto intestinal muy poco evidente ya que al
estarse eliminando en mínimas cantidades no es posible evidenciar estar pérdida. Cuando
eliminación de sangre se realiza en partes superiores del sistema digestivo, la hemoglobina
presente en los glóbulos pasa por diferentes procesos químicos hasta ser excretada junto con
las heces. El ácido clorhídrico gástrico metaboliza la hemoglobina produciendo hematina la

PÁGINA 9
que a su vez sufre degradaciones sucesivas al pasar por el intestino debido a la acción de
enzimas, bacterias etc. Cuando las heces fecales contienen una mayor cantidad de sangre de
lo que se pierde normalmente (2 a 2.5ml), se debe realizar la identificación de sangre oculta
de heces. La pérdida de sangre se puede deber a números procesos patológicos como
alteraciones gastrointestinales, cáncer colorrectal, ulceras, pólipos, anemia y ciertos procesos
parasitarios que pueden invadir la mucosa intestinal y causar patogenia (1). El análisis de
sangre oculta en heces se basa en una prueba cualitativa, con un dispositivo que contiene una
tira de papel impregnada con extracto de resina de guayaco, donde la muestra de heces
fecales va a ser colocada, los grupos hem de la hemoglobina tienen actividad peroxidasa y
catalizan la oxidación de ácido alfaguayacónico por el peróxido de hidrogeno presente en la
solución de peróxido usada para la prueba. Cuando se ha producido la reacción se ve de color
“azul-verdoso”, si no hay este cambio de color la prueba es negativa para sangre oculta. Se
debe esperar aproximadamente de 30 a 0 segundos para ver la reacción.
Los organismos invasivos tales como Shigella, Campylobacter, algunas cepas de Salmonella,
E. coli enteropatógena o enteroinvasiva, Yersinia y la Entamoeba histolytica impiden al
intestino llevar a cabo su normal absorción de agua y electrolitos. Estos organismos tienen
predilección por el colon y el proceso cursa con disentería (materia fecal con moco y sangre).
En la mayoría de los casos en al examen de microscopio se observan leucocitos, bien sea
polimorfonucleares o mononucleares (3). Estos últimos aparecen especialmente en casos de
fiebre tifoidea o amibiasis. Los polimorfonucleares aparecen también en colitis ulcerativa
producida por Clostridium difficile posterior al tratamiento con algunos antimicrobianos como
clindamicina, Lincomicina o Ampicilina.
Cuando la diarrea es acuosa. Tipo secretora y por tanto no inflamatoria, la agente infecciosa
se localiza en el intestino delgado y aunque en algunos casos pueden aparecer hematíes, los
leucocitos fecales están ausentes La realización de la investigación de leucocitos
polimorfonucleares en heces fecales se basa en detectar la presencia de procesos
inflamatorios de la mucosa intestinal, como ocurre en ciertas patologías como colitis ulcerativa
o en infecciones bacterianas o por parásitos intestinal como es el caso de E. coli
enteroinvasivao Entamoeba histolytica. Es importante tomar en cuenta que, en la enfermedad
diarreica aguda, causada por virus o toxinas bacterianas no suele encontrarse leucocitos en
heces, por ejemplo, en la diarrea aguda producida por Vibrio cholerae (1).
Entamoeba histolytica es el patógeno intestinal más frecuente en nuestro medio –después de
Giardia lamblia–, una de las principales causas de diarrea en menores de cinco años y la cuarta
causa de muer-te en el mundo debida a infección por protozoarios. Posee mecanismos
patogénicos complejos que le permiten invadir la mucosa intestinal y causar colitis amebiana.
El examen microscópico es el método más usados para su identificación, pero la existencia de
dos especies morfológicamente iguales, una patógena (E. histolytica) y una no patógena
(Entamoebadispar), ha llevado al desarrollo de otros métodos de diagnóstico. El acceso al
agua potable y los servicios sanitarios adecuados, un tratamiento médico oportuno y el
desarrollo de una vacuna, son los ejes para disminuir la incidencia y mortalidad de esta entidad.

Diagrama.

PÁGINA 10
Se dejo secar el
Realizamos dos fortis cerca de la
frotis delgados. flama de un
mechero.

Observamos al
Se tiñe con microscopio con
colorante de Wright obetivos de 40x y de
inmersion.

Observaciones.

Frotis positivo de citología fecal

Resultado.

Se llevó a cabo el análisis de las heces fecales, sin embargo, el objetivo no pudo cumplirse en
su totalidad pues en ellas no se encontró la presencia de células polimorfonucleares. La
imagen mostrada es de una prueba positiva, en la cual se tuvo que haber mostrado en nuestro
examen.

Bibliografía.

1. Paruncajas Maza J. (2015). Identificación etiológica de la enfermedad diarreica aguda (EDA)


en niños de dos meses a cinco años en el servicio de emergencia de la Novaclínica santa
Cacilia en el periodo de mayo a diciembre de 2013. Pontificia Universidad católica del Ecuador.
2. Gómez J., Cortés J., Cuervo S., López. (2007)
3. s.a (s.f) Amebiasis intestinal. Recuperado de
http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v11n1/v11n1a06.pdf el 30 de marzo de 2019.
4. Villegas Estrada Sonia (1991). Leucocitos fecales. Recuperado
http://abj.org.co/images/revistas/23/23_23_Pag_16_17_Leucocitos_Fecale.pdf el 30 de marzo
de 2019.

PÁGINA 11
Practica 6. identificación de Criptosporidium y Cyclospora.
Autor: César Augusto Romero Ocaña.

Resumen.
La criptosporidiosis, enfermedad considerada principalmente una parasitosis gastrointestinal
cuya principal vía de contagio es la fecal-oral siendo el agua un importante agente para su
diseminación. En esta infección el estado inmunológico del individuo afectado es fundamental,
siendo las especies pertenecientes a este género responsables de cuadros gastrointestinales
y la severidad va a depender de varios factores: del hospedador, como son competencia
inmunitaria, edad y estado nutricional, del número de parásitos causantes de la infección y del
medio ambiente, ya que los ooquistes mantienen su infectividad durante un tiempo
relativamente largo.
El diagnóstico parasitológico clásico se basa en la detección de ooquistes redondos (8-10 μm)
en deposiciones. Hay varias técnicas microscópicas disponibles, pero todas requieren
experiencia y son dependientes del operador. Lo más común es el uso de la tinción Ziehl-
Neelsen modificada, ej. Kinyoun, recomendada para la detección de Cryptosporidium.
La preparación de la tinción es sencilla: se extiende la muestra fecal en una laminilla y se deja
secar al aire, para después fijarla con calor o metanol. La muestra fijada se cubre con fucsina
durante tres a cinco minutos; luego de este tiempo, se enjuaga con agua. El siguiente paso es
decolorar con ácido-alcohol durante un minuto y enjuagar de nuevo con agua. Finalmente, se
cubre con azul de metileno durante un minuto y se enjuaga. La laminilla se deja secar y se
observa en un microscopio óptico de campo claro a 10X para enfoque y 100X para análisis.
Se realizaron dos tinciones con colorantes distintos para la tinción en uno se uso verde de
malaquita, del cual obtuvimos resultados y en el otro se uso fucsina.
Si bien ambos parásitos producen cuadros parecidos se trata de diferentes agentes causales
y su diferenciación gracias a la tinción de Kinyoun es determinante en el tratamiento que se
dará al paciente sobre todo si se encuentra inmunosuprimido.

Antecedentes.
Cryptosporidium parvum es un protozoo intracelular descrito en 1907. Taxonómicamente, se
encuadra dentro del Phylum Apicomplexa. Cryptosporidium parvum es la especie que se
asocia a enfermedad humana, aunque también puede encontrarse en otros hospedadores, ya
que no existe una completa especificidad de huésped. Los parásitos son esféricos o elípticos.
En las células epiteliales del intestino presentan un tamaño entre 2 y 6 µm y se encuentran
localizados en vacuolas parasitóforas. Los ooquistes presentan cuatro esporozoitos, sin
esporocistos, son ovoides y pueden medir entre 4,5 y 7,9 µm. El cuadro clínico más frecuente
es la diarrea, aunque también se ha asociado a infecciones pulmonares. Pueden existir
infecciones asintomáticas, incluso en las personas inmunodeprimidas. La diarrea suele ser
abundante y acuosa; raramente aparece sangre o leucocitos.
Cyclospora cayetanensis es un protozoo intestinal humano, que causa ciclosporiasis (o
también ciclosporosis) y pertenece al filo Apicomplexa, subclase Coccidiasina. La infección es
endémica en el mundo, principalmente en países tropicales y subtropicales de Latinoamérica
y Asia. El coccidio se transmite a través de la ingestión de agua y alimentos contaminados.
Una vez que alcanza el intestino delgado, el parásito se multiplica en las células
epiteliales provocando atrofia y alteración de las vellosidades. Se produce la
liberación de ooquistes inmaduros por las heces, los que se mantienen en el
ambiente 7 a 15 días antes de esporular. Luego de un período de incubación de
una a dos semanas, Cyclospora causa diarrea, muchas veces acompañada por
anorexia, dolor abdominal, náuseas y vómitos, fatiga, y fiebre baja. La infección

PÁGINA 12
generalmente causa molestias gastrointestinales prolongadas, pero
autolimitadas. En pacientes inmunocomprometidos se puede manifestar en forma
crónica y grave (similar a Cryptosporidium).

Diagrama.

Cubrir el
Realizar un
Fijar la muestra con portaobjetos con Enjuagar y decolorar
extendido de las
metanol 30s. fucsina/verde de con alcochol 3-5s.
heces y dejar secar.
malaquita 5min.

Enjuagar y cubrir con


Observar a 10x y Enjuagar y dejar
azul de metileno
100x secar
1min.

Observaciones.

Este frotis se Verde sobre azul como contraste por que en lugar de fucsina se utilizó verde de
malaquita para contrastar.

Resultado.
Creemos que se trata de Cryptosporidium y puede observarse en abundancia.

Bibliografía.
Brenda Janet Torres Murillo, 1. E. (junio de 2019). medigraphic . Obtenido de Tinción de
Kinyoun para el diagnóstico de Cryptosporidium spp:
https://www.medigraphic.com/pdfs/actmed/am-2019/am192s.pdf

Kamínsky, R. G. (2003). bvs honduras . Obtenido de Manual de parasitologia :


http://www.bvs.hn/Honduras/pdf/Manual%20Parasitologia%202007.pdf

PÁGINA 13
María Antonia de la Parte-Péreza*, E. B. (enero de 2005). Scielo. Obtenido de Cryptosporidium
spp. y Criptosporidiosis: http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-
25562005000100003

Royo, J. C. (s.f.). seimc. Obtenido de Cryptosporidium y criptosporidiosis:


https://www.seimc.org/contenidos/ccs/revisionestematicas/parasitologia/crypto.pdf

Thomas Weitzel, V. V. (febrero de 2017). scielo. Obtenido de Cyclospora cayetanensis:


https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-
10182017000100006

Practica 7. Búsqueda de Toxoplasma gondii.


Autor: Luis Manuel Martinez Mancilla

Resumen.
La búsqueda de Toxoplasma gondii para diagnosticar la toxoplasmosis es difícil debido a que
es el parásito más diseminado del mundo, este es un parásito intracelular obligado. T. gondii
tiene un ciclo de reproducción y trasmisión que comprende una fase sexual en el epitelio
entérico del huésped principal y una fase de reproducción asexual en los huéspedes
intermediarios. Existen tres formas infectantes para el ser humano: 1) taquizoíto, trofozoíto o
endozoíto. 2)Quiste. 3)Ooquiste. El taquizoíto es el estadio observado en la fase aguda de la
infección, el quiste aparece ocho días después de la infección primaria y puede persistir por
toda la vida, y el ooquiste contiene esporozoitos que son descritos solo en felinos (Flores,
2014). Estos no son infectivos al expulsarse ya que deben esporular. El objetivo de la práctica
fue realizar el examen en fresco de heces de gato para la búsqueda de Toxoplasma gondii.
Para esto se procedió a colocar una porción de la muestra de heces fecales en un portaobjetos
y una gota de Lugol y a realizarse lo mismo, pero con una gota de solución salina, se les colocó
un cubreobjetos y se observó al microscopio bajo a 10x y 40x. La muestra analizada fue de un
gato doméstico que vive en buenas condiciones y que ocasionalmente convive con otros
felinos. En el examen microscópico se observaron quistes no esporulados de Toxoplasma
gondii, indicándonos que dicho felino presenta una parasitosis por Toxoplasma gondii. La
muestra fue obtenida de un felino doméstico, el cual se encontraba en buenas condiciones, la
dueña menciono que ocasionalmente sale. La muestra era de color café, poseía un olor fétido
y era de consistencia semisólida. En el examen microscópico se observaron quistes no
esporulados de Toxoplasma gondii, encontrándose alrededor de 9 quistes en la preparación
de Lugol. No se observaron otras formas parasitarias.

Antecedentes.
T. gondii tiene un ciclo de reproducción y trasmisión que comprende una fase

PÁGINA 14
sexual en el epitelio entérico del huésped principal (los felinos) y una fase de reproducción
asexual en los huéspedes intermediarios (mamíferos y aves). Existen tres formas infectantes
para el ser humano: 1) taquizoíto, trofozoíto o endozoíto. 2)Quiste. 3)Ooquiste. El taquizoíto
es el estadio observado en la fase aguda de la infección. Es intracelular obligado y capaz de
invadir cualquier célula, con excepción de los eritrocitos. Tiene forma de media luna y mide
entre 4 y 8 μm de largo por 2 a 4 μm de ancho. Se reproduce por fisión binaria y endodiogenia,
forma de división celular en el cual el parásito se divide dentro de la célula madre. Bajo ciertas
condiciones los taquizoíto se trasforman en brandizoítos, los cuales se multiplican con suma
lentitud y se encuentran dentro de quistes que pueden alcanzar un diámetro de 50 a 200 μm.
Los quistes aparecen ocho días después de la infección primaria y pueden persistir durante
toda la vida del huésped, lo que da lugar a la fase crónica de la infección. El ooquiste que
contiene los esporozoítos se ha descrito sólo es los felinos, pues es resultado del ciclo sexual
enteropitelial del parásito. Los ooquistes se excretan en gran número en las heces del animal,
entre 3 y 10 días después de una infección por quiste y entre 20 y 34 días después de la
infección por ooquistes. Los ooquistes no son infectivos cuando su expulsión es reciente, ya
que deben esporular. La esporulación ocurre en el suelo, toma dos o tres días y requiere de
algunas condiciones de humedad y aireación. Dentro de cada ooquiste se forman dos
esporoquistes, cada uno de los cuales contiene cuatro esporozoítos, entonces el ooquiste se
vuelve muy infectivo para las personas y animales por un tiempo prolongado (Flores, 2014).
Los quistes y ooquistes son las dos formas del Toxoplasma que interviene en la trasmisión de
la toxoplasmosis al humano y animales. La trasmisión puede ser adquirida o congénita
(Beaver, Jung, & Cupp, 2003):

1. La toxoplasmosis adquirida puede tener lugar por vía oral, por ingestión de ooquistes que
contiene los alimentos (contaminación fecal) o quistes presentes en la carne cruda.

2. La toxoplasmosis congénita tiene lugar en el caso de mujeres que contraen la infección


durante el embarazo. Los taquizoítos, que se multiplican durante los primeros días de la
infección, pueden atravesar la placenta en forma extracelular o intracelular, e infectar al feto
con consecuencias muy graves.

En los individuos cuyo sistema inmunitario es competente la infección es casi siempre


asintomática en cambio en los individuos inmunosuprimidos, se observa toxoplasmosis
sintomática. Los síntomas son muy variables e incluyen fiebre, malestar general,
linfadenopatia, miocarditis y encefalitis.

La infección por T. gondii puede persistir toda la vida del huésped sin ninguna complicación.
Además, la inmunidad antitoxoplasma protege al individuo contra cualquier reinfección, por
toda la vida. Sim embargo, en los individuos cuya respuesta inmune se encuentra suprimida,
la toxoplasmosis puede ser grave, con consecuencias fatales; la más frecuente de las cuales
es la infección del sistema nervioso.

Las consecuencias de la toxoplamosis congénita son variables según la etapa del embarazo
en la cual se contrae la infección: mientras más temprana es la etapa en la que se contrae,
más graves son las consecuencias. Así durante los primeros meses del embarazo, la
trasmisión del parásito al feto puede provocar un aborto o conducir al nacimiento de niños
anormales que presentan una triada clásica: coriorretinitis, calcificaciones intracraneanas e
hidrocefalia. Si la infección tiene lugar en los últimos meses del embarazo, los niños por lo
general son asintomáticos al nacer, pero pueden presentar secuelas más tarde, como
coriorretinitis, retraso psicomotor y mental.

Diagrama.

PÁGINA 15
Diluimos 1 mg de
Hicimos lo mismo en
materia fecal con 1
otro portaobjetos
gota se solución
con 1 gota de lugol.
salina

Colocamos un Observamos con


cubreobjetos. objetivos 10X y 40 X

Observaciones.

Diferenciación de quistes

Quistes Toxoplasma gondii

Resultados.

La muestra era de color café, poseía un olor fétido y era de consistencia semisólida. Se realizó
el examen en fresco de heces de gato para la búsqueda de Toxoplasma gondii, donde en la
preparación con Lugol se observaron quistes no esporulados de T. gondii.

PÁGINA 16
Bibliografía.
Beaver, P., Jung, R., & Cupp, E. (2003). Parasitologia clinica. Mexico D.F.: Masson Doyma.

Flores, D. M. (2014). Parasitologia Medica. Ciudad de Mexico: Mc Graw Hill.

Gutierrez Quiroz, M., Lara Aguilera, R., Velasco Castrejón, O., & Tay Zavala, J. (2011).
Parasitología Médica. Mexico D.F.: Mendez Editores.

Practica 8. identificación de Plasmodium.


Autor: César Augusto Romero Ocaña.

Resumen.
El paludismo es una enfermedad causado por un parásito Plasmodium, el cual es trasmitido
por la picadura de un mosquito infectado. Sólo el género anófeles del mosquito transmite el
paludismo. Los síntomas de esta enfermedad pueden incluir fiebre, vómito y/o dolor de cabeza.
La forma clásica de manifestación en el organismo es "fiebre, sudoración y escalofríos" que
aparecen 10 a 15 días después de la picadura del mosquito.
Los parásitos Plasmodium vivax y P. falciparum son los más comunes en el paludismo,
mientras que la P. malariae y P. ovale son parásitos menos conocidos. De todos estos, la
infección adquirida por P. falciparum es la más fatal si no es tratada a tiempo y podría tener
serias complicaciones renales y cerebrales, e inclusive la muerte.
El diagnóstico microscópico de malaria con una muestra de sangre, gota gruesa o extendido
fino, está basado en la identificación de los parásitos coloreados libres (gota gruesa) o
intracelulares en el eritrocito (extendido fino). Las coloraciones de Giemsa y de Wright tienen
colorantes ácidos (eosina) y básicos (azul de metileno) que colorean los componentes
celulares acidofílicos y basofílicos, respectivamente. En el caso de Plasmodium, el citoplasma
se colorea azul, la cromatina (núcleo) se colorea rojo y el pigmento malárico, pardo-amarillo.
La calidad de la coloración dependerá de la calidad de los reactivos usados.
En nuestra muestra no se observó presencia de plasmodium.
Tuvimos complicaciones para poder realizar un frotis sanguíneo que pudiera considerar apto
para su observación. El docente proporciono unas muestras positivas que nos permitieron
observar cómo se ven estos parásitos en el frotis sanguíneo.
A pesar de que existen otros métodos para la detección del paludismo el examen de un frotis
sanguíneo sigue siendo una herramienta útil, barata y rápida. Debido a eso es que es
necesario aprender cómo realizar y el resultado esperado de una prueba positiva.

Antecedentes.
La malaria es una enfermedad causada por parásitos del género Plasmodium, siendo cuatro
las especies que pueden parasitar al hombre: Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax,
Plasmodium ovale y Plasmodium malariae. Desde que se describiera por primera vez en 1880,
el diagnóstico de esta enfermedad se ha realizado mediante la observación de las distintas
formas del parásito en el examen microscópico de extensiones de sangre periférica teñidas
con diversos colorantes. Hoy día, 120 años después, esta técnica sigue siendo el método de
referencia.
La gota gruesa es 20-30 veces más sensible que el extendido fino, ya que se observa mayor
cantidad de sangre en un área más pequeña. El hecho de que la muestra en la gota gruesa
no se fija, permite deshemoglobinizar el frote grueso, dejando los parásitos libres y en mayor
número por área, que en la misma muestra procesada como extendido fino. La fijación del

PÁGINA 17
extendido fino con metanol, permite observar el parásito dentro del eritrocito y provee un dato
adicional para la identificación de la especie de Plasmodium: las características del glóbulo
rojo parasitado. Así tenemos, que la gota gruesa es más sensible y el extendido fino es más
específico.

Diagrama.

Realizar el Cubrir el extendido


Fijar el extendido
extendido de una con Giemsa al 10%
con calor.
gota de la muestra. durante 30min.

Enjuagar el
Observar a 10x y
portaobjetos y
100x.
dejar secar.

Observaciones.

Si bien este no es el mejor campo puede observarse presencia de punteado en algunos


Hematocitos.

PÁGINA 18
Resultado.
En nuestra muestra el resultado es negativo. En la muestra proporcionada por el docente se
podían observar algunos glóbulos rojos con presencia de punteado en el campo que se hallaba
enfocado.

Bibliografía.
Alger, J. (1999). cidbimena . Obtenido de Diagnóstico Microscópico de la Malaria Gota Gruesa
y Extendido Fino: http://cidbimena.desastres.hn/RMH/pdf/1999/pdf/Vol67-3-1999-
7.pdf

López-Vélez, M. C. (s.f.). Seimc. Obtenido de ASPECTOS PRÁCTICOS DEL DIAGNOSTICO


DE LABORATORIO Y PROFILAXIS DE LA MALARIA :
https://seimc.org/contenidos/ccs/revisionestematicas/parasitologia/malaria.pdf

salud, O. p. (s.f.). programa de paludismo . Obtenido de Paludismo: informacion general. :


https://www.paho.org/hq/index.php?option=com_content&view=article&id=2573:2010
-general-information-malaria&Itemid=2060&lang=es

Practica 9. Trypanosoma y Leishmania.


Autor: Luis Manuel Martinez Mancilla

Resumen.

La tryponosomosis es causada por el Tripanosoma cruzi que generalmente es transmitido al


humano por las heces de un artrópodo. El parásito afecta las células del sistema retículo
endotelial en especial las del miocardio, esófago y colon. La enfermedad conocida como
tripanosomiasis o enfermedad de Chagas, es un grave problema de salud ya que sólo en el
continente americano existen 16 a 18 millones de personas infectadas. Actualmente, la
importancia de dicha enfermedad se mide por el efecto económico que produce en los países
afectados, los daños potenciales de vida productiva perdidos por las personas enfermas y los
costos de los servicios de salud utilizados en su tratamiento y control, pues se trata de un
padecimiento invalidante que impide al sujeto llevar una vida normal por las alteraciones
orgánicas que ocasiona. La Organización Mundial de la Salud (OMS). Actualmente existen
distintos métodos para su diagnóstico y su posterior tratamiento. La identificación de este
parásito es a través de una muestra sanguínea, pues es a través de la cual el parásito cumple
su ciclo biológico y se replica para su infección. La tinción de Wright y la tinción de Giemsa son
las técnicas que en el siguiente trabajo se presentan para la identificación microscópica de su
morfología. El colorante de Wright contrasta la forma morfológica y tiñe de un color rosa
característico al parásito. Por su ciclo biológico la forma morfológica que podemos observar
en una muestra sanguínea puede ser un trypamastigote sanguíneo o metacíclico. El trabajo
expresa los resultados encontrados en la muestra y su consiguiente observación. El docente
nos proporcionó laminas donde mostraba pruebas positivas, por lo que pudimos ver la
morfología de estos parásitos. Se llevó acabo la observación de hemoflagelados en sangre en
una muestra positiva para T. cruzi proporcionada.

PÁGINA 19
Introducción.

El médico e investigador brasileño Carlos Chagas aisló por primera vez el agente causal en
un paciente humano y en 1909 describió el cuadro clínico del trastorno, denominado en su
honor como enfermedad de Chagas. Trypanosoma cruzi (“cruzi”, en honor a su maestro
Osvaldo Cruz) es un parásito flagelado perteneciente a la familia de los tripanosomatídeos,
incluida en el orden de los cinetoplástidos de la clase Zoomastigina. Esta familia comprende
parásitos de vida libre, monogénicos de invertebrados, digénicos de invertebrados y plantas, y
digénicos de invertebrados y vertebrados, como los géneros Leishmania y Trypanosoma.
(Florián, 2010)

Posee un ciclo de vida complejo que incluye tres fases morfológicas comprendidas en dos
huéspedes: el vector invertebrado y el huésped mamífero. Entre los estadios existen otros
intermedios que aumentan la complejidad del ciclo. Los estadios básicos se definen por su
forma, la posición del cinetoplasto respecto del núcleo y la región por donde emerge el flagelo,
a saber: epimastigote (forma replicativa), amastigote (forma replicativa intracelular) y
tripomastigote; este último puede ser metacíclico (forma no replicativa pero infectiva) o
sanguíneo. Se ha comprobado la existencia de varios reservorios animales de T. cruzi desde
el sur de Estados Unidos hasta Argentina, incluida la mayor parte de los países de
Centroamérica y Sudamérica. Los triatominos son los únicos vectores naturales de T. cruzi,
los cuales pertenecen al orden Hemipterae, familia Reduviidae y subfamilia Triatominae. Entre
los vectores más importantes que se han adaptado para convivir y reproducirse en las
viviendas se encuentran Triatoma dimidiata, T. phyllosoma, T. papillidipenis, Rhodnius prolixus
y T. barberi; este último es considerado el mejor transmisor de T. cruzi en México después de
R. prolixus (Flores, 2014). Debido a que T. cruzi se encuentra en la circulación sanguínea
durante la fase aguda, las técnicas de laboratorio se basan en la utilización de una muestra de
sangre para detectar al parásit. Las pruebas clásicas para la detección de tripomastigotes, son
el examen directo ylos extendidos (delgados o gruesos) teñidos con Giemsa y derivados de
Romanowsky; donde se puede observar al parásito (su morfología) mediante el frotis de
sangre, el cual es útil y rápido en las formas congénitas; gota gruesa cuando la parasitemia es
baja; sin embargo, es recomendable hacer técnicas de concentración de sangre mediante los
métodos de Stront o Woo (hematocrito). También es factible realizar inoculación de sangre del
paciente en animales de experimentación, en medios de cultivo como NNN (medio Novy-
Macneal-Nicolle) y LIT, y el xenodiagnóstico; este último consiste en utilizar triatominos no
infectados con el protozoario, que al colocarse sobre el antebrazo del paciente durante 20 a
30 minutos se alimentan con su sangre; los insectos se mantienen en el laboratorio y los días
7, 14 y 30 después de la alimentación se efectúan observaciones de las heces del triatomino
bajo el microscopio en busca del parásito. (T, 2004)

Diagrama.

Tinción de Wright

PÁGINA 20
Se colocó la misma
Al frotis se le colocó cantidad de
Se dejó actuar de 1 a
el colorante hasta colorante que de
5 minutos.
cubrirlo todo. buffer de fosfatos de
pH 7.

Se dejó actuar de
Se dejo secar y se observo a Se lavó suavemente 1a5 min. Se observó
objetivo de inmersion. con agua de la llave. una película
metálica.

Tinción Giemsa

Con la solución
Se dejó actuar el
madre de Giemsa se
colorante durante 3 a
cubri ó la preparación
5 min.

Se lavó y se observó
en objetivo de
inmersión

Método de Strout

PÁGINA 21
Se dej
Se obtuvieron, Esta se
ó coagular a
mediante punción vació en un
temperatura
venosa, cinco tubo de ensaye 13 x
ambiente, se quito el
mililitros de sangre. 100.
coagulo.

El suero se entrifugó tres Se eliminó el Se vuelve a centrifugar a 1500


minutos a 500 rpm. sobrenadante rpm por 1 min.

Decantar y examinar el boton


para buscar trypanosomas.

Observaciones.

IFrotis sanguíneo

Trypanosoma

Resultados.

Se llevó acabo la observación de hemoflagelados (tripomastigotes sanguíneos) en sangre en


una muestra positiva para T. cruzi proporcionada, en la muestra obtenida en el laboratorio no
pudo ser observado porque el paciente era sano.

PÁGINA 22
Bibliografía.

Flores, D. M. (2014). Parasitologia Medica. Ciudad de Mexico: Mc Graw Hill.

Florián, Y. L. (2010). Enfermedad de Chagas-Mazza. Medicina tropical.

T, C. B. (2004). Trypanosoma cruzi: Historia natural y diagnóstico de la enfermedad de Chagas.


Revista Mexicana de Patología Clínica y Medicina de Laboratorio, 205-219.

Practica 10. Método de Graham.


Autor: César Augusto Romero Ocaña.

Resumen.

La prueba de Graham es una prueba utilizada para detectar enterobiasis, se trata de un


examen no rutinario, ya que dentro de la parasitología es una prueba especial que consiste en
colocar una tira adhesiva de papel de celofán, de unos 20 mm de ancho, en el extremo de
un depresor de madera o de un porta, de tal forma que la zona engomada quede hacia el
exterior y que a cada lado del extremo queden unos 5 cm de tira adhesiva. Para realizar la
prueba se debe colocar la tira sobre la región anal y perianal del paciente y luego extenderla
sobre un portaobjetos, de manera que la zona engomada quede adherida al mismo.
Seguidamente, observar al microscopio con pocos aumentos (10X). La toma debe hacerse por
la mañana, antes de que el paciente se asee o defeque.

La forma infectiva es el huevo embrionado, que se adquiere habitualmente por contaminación


fecal – oral, a través de fómites (juguetes, ropa de cama, otros objetos) y manos, o por
inhalación. La autoinfección ocurre debido al rascado de la zona perianal, y la transferencia de
huevos infectantes a la boca. Los parásitos adultos se encuentran en íleon terminal, ciego,
apéndice e inicio del colon ascendente transcurridas dos semanas a la infección, sin invadir
tejidos en condiciones normales.

Se observo una muestra procedente de un paciente humano durante un largo rato, pero no se
halló presencia del parasito en ella, posteriormente se tomó muestra de una rata perteneciente
al bioterio de la facultad en la cual pudo observarse un huevo del parasito.

Esta técnica si bien tiene entre sus ventajas lo barata y fácil de llevar a cabo, también tiene el
riesgo de que la muestra sea contaminada con facilidad, pero aun con este inconveniente
continúa siendo una técnica de gran valor para el diagnóstico de este tipo de parásitos.

Antecedentes.
Enterobius vermicularis es un nematodo cuyo único hospedero natural es el humano. Su
distribución es cosmopolita, tanto en zonas templadas como en los trópicos, y se presenta en
todos los niveles socioeconómicos, aunque prevalece en condiciones de hacinamiento y falta
de higiene. Se observa el mayor número de casos en niños de <1 – 9 años, y a nivel
institucional: internados, orfanatos, cuarteles, guarderías, hospitales psiquiátricos. Debe
considerarse como una patología que abarca a todo el núcleo familiar.
Vix en 1860 recomendó por primera vez el uso de una torunda o un raspador anal para obtener
material para el examen microscópico en busca de huevos de Enterobius. Graham (1941) y
Jacobs (1942) introdujeron independientemente una técnica de cinta adhesiva de celulosa
Scotch para obtener huevos de Enterobius de la región perianal.

PÁGINA 23
Esta técnica se basa en que la hembra adulta de Enterobius vermicularis habitualmente no
deposita sus huevos en el interior del intestino, sino que por lo general emigra durante la noche,
hacia los márgenes del ano, depositando los huevos en los pliegues perianales.

Diagrama.

Presionar la superficie
Colocar la cinta en un
sobre la region
extremo del
perianal en ambos
portaobjetos.
lados de la cinta.

Separar
cuidadosamente la
Observar a 10x
cinta y adherirlo al
portaobjetos

Observaciones.

Posible huevo de Entorobius presente en muestra tomada de una rata con el método de
Graham.

PÁGINA 24
Resultados.
Se hallo la presencia de posibles huevos de Enterobius en escasa cantidad.

Bibliografía.

Berrueta, T. U. (s.f.). Departamento de Microbiología y Parasitología. Obtenido de


Parasitología: http://microypara.facmed.unam.mx/?page_id=2184

Claudia. (21 de junio de 2008). Parasitología general. Obtenido de Método de Graham:


https://para1.wordpress.com/2008/06/21/metodo-de-graham/

XXl, M. (s.f.). Mundolab. Obtenido de INDICACIONES TOMA DE MUESTRA TEST DE


GRAHAM, TECNICA DE GRAHAM: https://www.mundolab.com/indicaciones-test-de-graham/

Practica 11. Método de Faust.


Autor: Luis Manuel Martinez Mancilla

Resumen.

El método de Faust es una técnica de flotación, esta se emplea para aislar quistes, ooquistes,
y huevos de las heces, con esto se busca que floten mientras los restos de materia fecal se
van al fondo, los quistes y huevos suelen tener una densidad entre 1.05 y 1.15. (Reyes, 2001)
Esta técnica se basa en la propiedad que tienen las soluciones de densidad mayor, para hacer
flotar objetos menos densos. El método de Faust con Zn 2SO4 es uno de los más utilizados,
aunque poco eficaz para huevos pesados, se puede emplear en muestras recientes,
refrigeradas o fijadas con formol al 5 o 10%. (Olivia, 2001) El cual se basa en la flotación de
los parásitos después de centrifugar la muestra; es de vital importancia tomar en cuenta que
la solución utilizada tiene una densidad de 1.180 Baurner permitiendo la flotación de huevos,
larvas o quistes de los diferentes parásitos. Esta muestra presenta varias ventajas ya que
recupera las estructuras parasitarias como huevos, larvas o quistes, siendo una desventaja
para la identificación de Ascaris Y Taenias. Para la realización de esta práctica se realizó una
centrifugación de la muestra y posteriormente se llena el tubo con nuestra solución de zinc
para poder tomar la muestra con un cubreobjetos del menisco formado (no dejar en a solución
de Zn2SO4 por un tiempo prolongado ya que deformara los quistes), obteniendo así el material
que se encuentra flotando. Obtuvimos resultados negativos ya que no se observó ningún tipo
de forma parasitaria. Se realizó una técnica cualitativa de centrifugación por flotación de Faust
para la búsqueda de quistes, huevos y larvas de menor peso que el sulfato de Zinc en el cual
obtuvimos resultados negativos ya que no se observó ningún tipo de forma parasitaria.

Antecedentes.

El método coproparasitoscópico de Faust fue descrito en 1938 basándose en los siguientes


antecedentes:

 La flotación con salmuera originalmente dada por Bass en 1906 usada para la
recuperación de huevos de helmintos.
 En 1910, el mismo Bass introdujo la centrifugación en su técnica de flotación con
salmuera.
 En 1924, Lane ideó un refinamiento para la técnica combinada de centrifugación-
flotación con salmuera que consistió en realizar el lavado del sedimento antes de
centrifugar con la salmuera.

PÁGINA 25
Faust y Cols posteriormente realizaron pruebas con diferentes soluciones encontrándose que
la solución de sulfato de zinc con densidad de 1.180 Baumé era un medio adecuado para la
flotación de quistes de protozoarios y nuevos helmintos.

Las parasitosis intestinales son un conjunto de padecimientos causados principalmente por


protozoarios y helmintos. El examen coproparasitoscópico (CPS) es un conjunto de técnicas
diagnósticas que constituyen la indicación para la identificación de la mayoría de las entero
parasitosis causadas por protozoarios o helmintos (Flores, 2004).
El diagnóstico de las infecciones parasitarias intestinales se basa ampliamente en el análisis
microscópico de las muestras fecales, que incluyen montajes húmedos directos, concentrados
y frotis con tinción permanente. La cantidad de formas parasitarias en muestras de materias
fecal, a menudo, es muy escasa y muy difíciles de detectar en preparados directos en fresco
o en frotis teñidos. Por ello existen procesos de concentración (Flores, 2004).
Conocido también como el método de flotación con sulfato de zinc, el método de Faust es un
examen coproparasitoscópico cualitativo de concentración por centrifugación y flotación, es el
método más usado y efectivo, en este se precipitan los parásitos por centrifugación después
de haber filtrado la muestra.
Este método utiliza una solución con una densidad mayor que la del agua con la que se prepara
la muestra de las heces de tal manera que se separen los elementos parasitarios del resto de
la materia fecal. Los elementos parasitarios son recuperados de la capa superficial y los
residuos se mantienen en el fondo del tubo. Con estas técnicas los preparados son más limpios
que los obtenidos por sedimentación. Este método utiliza una solución de Zn2SO4 con una
densidad del 1.180 Baumer que permite salir a flote los huevos, larvas o quistes de los
parásitos (Torres, 1991).

Diagrama.

Mezclar de manera
Filtrarlo con una gasa en
homogenea 1g de Centrifugar a 2500 rpm
un recipiente y pasarlo a
materia fecal en 10 ml por 1 min
un tubo de ensaye
de agua destilada

Decantar el
Decantar el liquido el
Repetir proceso hasta sobrenadante y
sobrenadante y
obtener un completar con sol
completar con agua y
sobrenadante limpio Zn2SO4 y centrifugar a
volver a centrifugar
1500 rpm por 3 min

Tomar con una asa una


muestra del Añadir gota de lugol y
sobrenadante y colocar observar a microscopio
en porta objetos

PÁGINA 26
Observaciones.

método de Faust

Bibliografía.

Reyes, A., Camargo, B. (2001). Glosario de términos en parasitología y ciencias afines (1ª Ed).
Plaza y Valdes.
Jiménez, I., Romero, M. (2015). Parasitología en el laboratorio: Guía básica de diagnóstico (1ª
Ed). Área de innovación y desarrollo.
Olivas, E. (2004). Manual de prácticas de microbiología I, II y Parasitología (1ª Ed). Universidad
autónoma de Ciudad Juárez.
Flores, B, Cabello, R.;(2004) Parasitología Médica. De las moléculas a la enfermedad.; Mc
Graw Hill, México.
Torres- Rodriguez,J. M.;(1991) Monografías Clínicas en Enfermedades Infecciosas: Micosis
Sistémicas; Ed. Doyma; España.

Practica 12. Método de Ritchie.


Autor: César Augusto Romero Ocaña.

Resumen.
Esta técnica forma parte de una serie de análisis coproparasitoscópicos considerados de
concentración fue descrita por Ritchie en 1948, es de utilidad para la búsqueda de huevos
quistes y larvas. Es empleada cuando no se observan parásitos en el método directo y para
aumentar la probabilidad de observar parásitos en las muestras estudiadas. Algunas
referencias no indican el uso de malla o gasa al aplicar el método (ver apartado de técnica)
por lo que se pueden obtener sedimentos sucios y no con la calidad requerida para un optima
observación
Es fundamento de la técnica se basa en el uso de la fuerza centrífuga que obligara a los
parásitos a ir al fondo del tubo, del éter que elimina los detritus orgánicos, mientras que el
formol ayuda a mantener la integridad de las formas parasitarias que se concentran.
La metodología consiste en lo siguiente: Diluir 2 gr. De heces en 5 ml de solución salina
fisiológica; filtrar la solución obtenida sobre colador y embudo; centrifugar durante 5 minutos a
2500 r.p.m; eliminar el sobrenadante; al sedimento agregar 3 ml del formaldehído al 40 % y 2
ml de éter; tapar el tubo y agitar enérgicamente; centrifugar 3 min a 2500 r.p.m. (entre el éter
y el formaldehído se formará un tapón de grasa y materiales orgánicos); del sedimento tomar
una muestra con la pipeta Pasteur y colocarla en un portaobjeto y cubreobjeto; observar al
microscopio con 10 X y posteriormente con 40 X.

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Esta práctica solo se realizó teóricamente por lo cual no hay resultados como tal.
Los métodos de concentración son realmente útiles cuando se va a analizar una muestra de
heces con sospecha de contenido de parásitos y cuyo análisis en fresco no fue determinante
pues facilitan la observación en este caso de quistes, huevos y trofozoítos pesados.
Antecedentes.
La concentración fecal ha llegado a ser un procedimiento de rutina como parte de un examen
completo para el diagnóstico de parásitos. La finalidad de la concentración de heces es separar
los parásitos de la masa de material de la muestra, (formada por bacterias, alimento no
digerido, etc.) y tratar de aumentar la cantidad de microorganismos para favorecer su
visualización debido a que los parásitos microscópicos no se multiplican en las heces como lo
hacen algunos de ellos en ciertas condiciones de cultivo in vitro. A veces la cantidad de
microorganismos en una muestra fecal es escasa. Esto puede suceder por intermitencia en la
eliminación (característica de los parásitos), porque algunos parásitos eliminan pocos huevos,
quistes u ooquistes durante su ciclo de vida, o bien porque el paciente es portador o ha recibido
tratamiento antiparasitario.
La técnica de sedimentación es un método cualitativo para la detección de huevos de
trematodos en las heces. La mayoría de los huevos de trematodos son demasiado grandes y
pesados para flotar, sin embargo, este tipo de huevos se hunden rápidamente hacia el fondo
de una suspensión heces/agua y esta es la base de la técnica de sedimentación fecal.

Diagrama.

Se filtra la mezcla usando


tres capas de gasa en un
Se diluyen 2g de heces Centrifugar 5min a
embudo y se recibe el
en 5ml de sol. fisiologica. 2500rpm.
liquido en tubo de
centrifuga.

Agregar 3ml de
Centrifugar 3min a formaldehído y 2ml de eliminar el
2500rpm. éter, tapar y agitar el sobrenadante.
tubo.

Tomar con pasteur una


gota del sedimento y
Observar a 10x y 40x
colocarlo en
portaobjetos.

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Observaciones.

Imagen recuperada de internet

Resultados.
Se reviso de forma teórica el método de concentración por sedimentación de Ritchie

Bibliografía.

Axonveterinaria. (s.f.). axonveterinaria . Obtenido de DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO A


PARTIR DE MUESTRAS FECALES:
http://axonveterinaria.net/web_axoncomunicacion/criaysalud/29/cys_29_22-
24_Diagnostico_parasitologico_partir_muestras_fecales_(II).pdf
Emma. (Julio de 2012). Libreta de notas; Medicina . Obtenido de Parasitología :
http://libretadenotas93.blogspot.com/2012/07/parasitologia.html
Hortensia Magaró, A. U. (s.f.). FACULTAD DE CIENCIAS BIOQUÍMICAS Y
FARMACÉUTICAS. Obtenido de TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO:
https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/122996/mod_resource/content/2/Diagnosti
co%20Parasitologico.pdf?forcedownload=1
M.E. Sara Ortigoza Gutiérrez, M. E. (s.f.). FACULTAD DE BIOANALISIS. Obtenido de
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL LABORATORIO DE LA E. E.PARASITOLOGIA
CLINICA: https://www.uv.mx/personal/sortigoza/files/2011/05/Manual-de-Para-Clinica.2.2.pdf

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Practica 13. Método de Baerman.
Autor: Luis Manuel Martinez Mancilla

Resumen.

Está técnica permite una buena concentración de las larvas vivas de Strongyloides, partiendo
de un volumen grande de heces. Es demasiada engorrosa para ser empleada como técnica
de rutina, pero es excelente para constatar los resultados del tratamiento. La técnica de
Baermann se usa para separar las larvas del material fecal. Se basa en la migración activa de
las larvas. Al suspender las heces en agua, las larvas se hunden hacia el fondo, donde pueden
ser recogidas para su identificación. Este método es apropiado para el diagnóstico de
estrongiloidiasis, también en coproparasitarios reiteradamente negativos. Al examinar en un
microscopio a 10 aumentos podremos distinguir nematodos de vida libre de nematodos
parásitos. Los nematodos de vida libre se tiñen de color marrón oscuro con yodo y pueden ser
distinguidos por la presencia de un doble esófago en forma de bulbo (rhabditiforme). Para
realizar dicha técnica se colocó sobre un soporte universal un embudo con un trozo de
manguera en el extremo inferior y se cerró con pinzas. Dentro del embudo se puso una gasa
doble, posteriormente sobre la gasa se agregó tierra de un parque público la cual se cubrió
con solución salina. A continuación, se dejó reposar 1:30 min, transcurrido ese tiempo se
quitaron las pinzas y se recolecto en un tubo de ensaye. Posteriormente se centrifugo y
finalmente se colocó una gota del sedimento en un portaobjetos con una gota de lugol y se
observó en el microscopio, pero no se observó ningún microorganismo. Adicionalmente se nos
proporcionó una muestra de la coproteca de Uncinaria, pero tampoco se logró observar este
parasito en el microscopio. Se realizó el método de Baermann en donde luego de tratar la tierra
con solución salina fisiológica y dejándola en reposo por 120 min. Se observó al microscopio
la siguiente forma parasitaria.

Antecedentes.

Fue en 1917, cuando Baermann diseñó el aparato que lleva su nombre, para recuperar larvas
de uncinarias del suelo. En 1922, Cort y cols. Modificaron el método colocando una malla de
alambre sobre el embudo, luego una gasa y usaron agua caliente.

Es un método conveniente para hacer una buena concentración de larvas, en parasitología se


usa para concentrar larvas de S. stercoralis, N. americanus, y Ancyclostoma duodenalis,
también se ha descrito para recuperar larvas de T. Spiralis después de la ingestión de musculo
infectado (Rodríguez, 2008).

Strongyloides stercoralis :

Presenta dos tipos de larvas, que se distinguen morfológicamente según la forma de su


esófago:

Filariforme: Tiene la capacidad de infectar al hospedador definitivo. Rabditiforme: No tiene


capacidad infectante (Fig. 1).

Presenta cuatro vías de infección:

Vía percutánea: las larvas filariformes penetran a través de la piel.

Vía oral: es la más frecuente, se produce cuando el hospedador definitivo ingiere a la larva
filariforme.

Autoinfección: se produce cuando la larva rabditiforme muda hasta la forma filariforme en el


interior del intestino del hospedador definitivo. Se produce generalmente en condiciones de
inmunodepresión y en recién nacidos.

Vía galactogénica las larvas filariformes infectan a los cachorros a través de la leche materna
(Barreneche, 2017).

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Necator americanus y Ancylostoma duodenale

Conocidos como uncinarias, son nematodos comunes en países en desarrollo de zonas


tropicales y subtropicales, con un estimado de alrededor de 700 millones de personas
infectadas.

La uncinariasis produce mayor afectación en niños y mujeres en edad reproductiva, en edad


pediátrica se asocia a retardo en el crecimiento y disminución de peso; la deficiencia en las
funciones cognitivas y alteraciones conductuales se han relacionado con anemia ferropriva,
altas cargas parasitarias y desnutrición (Urribarren, 2017).

Morfología: Necator americanus y Ancylostoma duodenale son gusanos cilíndricos,


blanquecinos y miden entre 0.8 - 1.5 cm. Las hembras son un poco más grandes que los
machos y tienen la abertura vulvar hacia la mitad posterior del cuerpo; los machos poseen en
su extremo posterior un ensanchamiento que corresponde a la bursa copulatriz (cuyas
características son de utilidad en estudios taxonómicos). Ambos géneros exhiben grandes
cápsulas bucales y glándulas anteriores que secretan varios productos, entre ellos proteasas.

N. americanus (fig. 3) presenta 2 pares de placas cortantes (anterior y dorsal). La cápsula


bucal de A. duodenale (fig. 4) está armada con 2 pares de dientes (Urribarren, 2016). Los
huevos de las 2 especies son indistinguibles entre sí; tienen forma oval, una membrana, miden
60 x 45 μm (Fig. 5). Son observan en diferentes fases de blastogénesis (Urribarren, 2016).

Las larvas filariformes, forma infectiva, exhiben una gran movilidad, miden alrededor de 500
μm de longitud (Fig. 6). No se aprecia en ellas la cápsula bucal. El esófago es recto y presenta
una pequeña protuberancia en su unión con el intestino. En ocasiones conservan la cutícula
del estadio anterior (Urribarren, 2016).

Diagrama.

Cerrar y formar una


Tomar un embudo y
Colocar una doble base bolsa con las gasas, atar
ajustar a un pedazo
de gasas y pesar de 5 a una orilla de manera en
corto de manguera y
10 g de materia fecal que pueda ser
sellar con un clip
suspendida

Colocar la bolsa en el Drenar un poco de


embudo. Llenar el fluido en tubos de Examinar sedimento en
embudo con agua tibia y ensaye y dejar caja petri
dejar reposar 24 hrs. sedimentar por 30 min

Cualquier nematodo
Usar una pipeta pasteur Añadir una gota de yodo libre se coloreara de
para transferir el liquido para fijar la larva y cafe oscuro, mietras las
a un portaobjetos colocar el cubreobjetos larvas se colorearan mas
lento en un mismo tono.

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Observaciones.

1-El cuerpo de la larva es alargado y 2-Detalle en la zona anterior, con


el extremo posterior es puntiagudo- cavidad bucal pequeña: bulbo
esofágico -

3-Necator americanus.
Cápsula bucal.- 4-Ancylostoma duodenale.
Cápsula bucal.-

5-Huevo inmaduro de 1-Larva filafiforme de


uncinaria. - uncinaria. Forma infectiva. -

Resultados.

Se utilizó adecuadamente el método de Baerman, donde se identificó una larva rhabditoide de


S. stercolaris en una muestra de tierra.

Bibliografía.

PÁGINA 32
1. Rodríguez Bataz E. (2008) Manual de prácticas de parasitología l y ll. Universidad Autónoma
de Guerrero. Pag.70
2. Barreneche Martínez E. y Vivar González R. (2017) Manual de parasitología. Pag. 54. Servet
editorial.
3. Uribarren Berrueta T. (2016). Necatoriasis. Departamento de Microbiología y Parasitología,
Facultad de Medicina, UNAM.

Practica 14. Método de Stoll.


Autor: César Augusto Romero Ocaña.

Resumen.
Esta técnica fue ideada y desarrollada por Stoll en 1923, debido a sus características de
accesibilidad en costo y material a utilizar es uno de los más empleados de manera exitosa en
encuestas epidemiológicas. Este método forma parte de los exámenes considerados
cuantitativos, por lo que es necesario tener el antecedente de que la muestra se encuentra
positiva, para su posterior cuantificación. La técnica es de utilidad para hacer una evaluación
de la intensidad de ciertas helmintiasis.
Este método se basa en los principios de dilución y saponificación. El hidróxido de sodio 0.1
N. al ponerse en contacto con las grasas de la materia fecal, las saponifica, haciendo que los
huevos de los helmintos sean menos pegajosos, además desinfecta y deodoriza la muestra.
Los cálculos son muy simples, su fundamento es básicamente aritmético, tomando en
consideración las diluciones empleadas.
Su metodología consiste en colocar en una probeta de 10 ml 5.6 ml de la sol. De hidróxido de
sodio 0.1 N; agregar materia fecal hasta la marca de 6 ml; mezclar con la varilla de vidrio;
depositar 5 perlas y tapar la probeta; agitar vigorosamente durante 1 min., hasta formar una
suspensión homogénea; dejar en reposo la probeta 15 minutos, los restos fecales y huevos
comienzan a irse al fondo; tomar la pipeta serológica e introducirla a la parte media de la
suspensión; tomar 0.075 ml y colocarlos entre porta y cubreobjeto; observar la preparación al
microscopio con objetivo seco débil y seco fuerte; se observarán todos los campos de la
preparación y se contaran los huevos encontrados.
No se obtuvieron resultados como tal en esta práctica pues solo se vio de forma teórica.
Este método es de importancia porque es de fácil realización y permite medir con mayor
precisión el grado de una infección por helmintos, lo cual es de gran importancia porque
indicará la forma en que se deberá abordar el tratamiento contra la infección.

Antecedentes.
La capacidad de los helmintos para producir enfermedad, así como la magnitud de las
manifestaciones clínicas está en relación directa con el número de parásitos presentes en el
hombre, por lo tanto, una técnica que permita saber el número de huevos por gramo (h.g.h.) o
mililitro de heces (h.ml.h.) en una muestra dada, permite calcular el número de parásitos
adultos presentes en el intestino, dando así una cifra aproximada que permite clasificar a las
infecciones en; ligeras, moderadas e intensas.(1, l9). La aplicación de los métodos para el
recuento de huevos de helmintos en materia fecal es extremadamente útil. EI resultado
terapéutico actualmente es valorado mejor mediante los métodos CPS cuantitativos
tradicionales. Las técnicas CPS de concentración (flotación y sedimentación) son poco fiables
para el recuento de huevos, ya que las cantidades obtenidas por cualesquiera de ellas son
variables y además por otra parte influyen las características diferenciales de cada muestra.

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Diagrama.

Colocar 5.6ml de Agregar materia


Mezclar con varilla
hidroxido de sodio fecal hasta la marca
de vidrio.
.1N en una probeta. de 6ml.

Tomar 0.075ml y
colocarlo entre el Dejar reposar Depositar 5 perlas y
porta y el 15min. tapar la probeta.
cubreobjetos.

Contar los huevos


Observar a 10x y 40x presentes en todos
los campos.

Observaciones.
No hay imágenes para esta práctica pues solo se realizó teóricamente. Tampoco halle
imágenes fiables sobre esta metodologia.

Resultados.
Se reviso de manera teórica el método de Stoll para recuento de huevos de helmintos.

Bibliografía.

Claudia. (21 de Junio de 2008). Parasitologia general. Obtenido de MÉTODO CUANTITATIVO


DE DILUCIÓN: https://para1.wordpress.com/2008/06/21/metodo-cuantitativo-de-dilucion/
M.C. ALMA DELIA RAMÍREZ GUARNEROS, T. M. (Abril de 2002). Facultad de ciencias
quimicas Buap. Obtenido de Laboratorio de parasitologia II:
http://www.facultadcienciasquimicas.buap.mx/ligas/acredita/QFB/data/4_2%20Curriculum/4.2
.10%20%20Actas%20de%20%C3%A1reas%20Programas%20de%20asig%20y%20Manuale
s%20Lab/Manuales%20de%20Laboratorio/An%C3%A1lisisCl%C3%ADnicosLab-
pdf/LABORATORIO%20DE%20PARASITO
M.E. Sara Ortigoza Gutiérrez, M. E. (s.f.). FACULTAD DE BIOANALISIS. Obtenido de
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL LABORATORIO DE LA E. E. PARASITOLOGIA
CLINICA: https://www.uv.mx/personal/sortigoza/files/2011/05/Manual-de-Para-Clinica.2.2.pdf

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