Fer-color

AA
C Método colorimétrico directo para la determinación de
hierro en suero o plasma

SIGNIFICACION CLINICA REACTIVOS NO PROVISTOS

El hierro se distribuye en el organismo de diferentes ma- - Calibrador A plus de Wiener lab.
neras, incluyendo hemoglobina, hierro tisular y mioglobina. - Agua bidestilada.
El transporte de hierro de un órgano a otro se realiza
mediante una proteína transportadora llamada apotransfe- INSTRUCCIONES PARA SU USO
rrina. El complejo que forma con el hierro se conoce como Reactivo C: listo para usar.
transferrina. Standard: listo para usar.
La ferritina, localizada en casi todas las células del cuerpo, Reactivo de Trabajo: transferir al vial de Reactivo B la
constituye una reserva de hierro disponible para la forma- cantidad de Reactivo A indicada en el rótulo. Colocar fecha
ción de la hemoglobina y otras proteínas que contienen el de preparación.
grupo hemo. La absorción de hierro ocurre principalmente
en el duodeno. Tanto la ferritina como la transferrina están PRECAUCIONES
presentes en las células de la mucosa intestinal y juntas Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
regulan la absorción de hierro. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Los mayores desórdenes del metabolismo de hierro se re- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
lacionan con su deficiencia o exceso, sin embargo, se han Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
observado alteraciones en muchas otras enfermedades, in- acuerdo a la normativa local vigente.
cluyendo anemia, enfermedades cardiovasculares, hepatitis
crónica, enfermedades renales e infecciones. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
La anemia por pérdida de hierro representa uno de los tras- ALMACENAMIENTO
tornos orgánicos más frecuentes, especialmente en niños, Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
mujeres jóvenes, embarazadas y ancianos. También las (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
úlceras gástricas o duodenales y carcinomas de estómago, Reactivo de Trabajo: es estable durante 3 meses a partir
constituyen causas de anemia ferropénica. de la fecha de su preparación conservado en refrigerador
Por el contrario, el exceso de hierro se asocia con otros (2-10oC) o 10 días a temperatura ambiente (18-25oC).
desórdenes, como hemosiderosis, hemocromatosis y anemia
sideroblástica. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
FUNDAMENTOS DEL METODO Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y/o
El hierro sérico se libera de la unión con su proteína trans- Standard, indican contaminaciones ocasionales (agua, ma-
portadora específica, la transferrina, en buffer acetato terial de vidrio, etc.). Un aumento en el valor de los Blancos
pH 4,5 y en presencia de un reductor, el ácido ascórbico. indicará una contaminación con hierro.
Posteriormente reacciona con el reactivo de color, piridil bis-
fenil triazina sulfonato (ferrozina) dando un complejo color MUESTRA
magenta, que se mide a 560 nm. Suero o plasma
a) Recolección: el paciente debe estar en ayunas y las
REACTIVOS PROVISTOS extracciones deben practicarse siempre a la misma hora
A. Reactivo A: solución de acetato 150 mmol/l para pH 4,5, (preferentemente de mañana) ya que las fluctuaciones
conteniendo guanidina. fisiológicas son significativas durante el día.
B. Reactivo B: ácido ascórbico. b) Aditivos: en caso de utilizar plasma como muestra debe
C. Reactivo C: solución estabilizada de ferrozina. usarse heparina como anticoagulante.
S. Standard: solución de iones Fe (III) equivalente a 100 ug/dl. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observa
interferencia por hemoglobina hasta 90 mg/dl, bilirrubina
Concentraciones finales hasta 15 mg/dl y heparina hasta 50 UI/ml.
Acetato.................................................. 150 mmol/l, pH 4,5 Muestras lipémicas pueden conducir a resultados erróneos.
Ferrozina............................................................. 0,2 mmol/l Niveles de triglicéridos de 3,72 g/l producen interferen-
Acido ascórbico.................................................... 0,03 mol/l cias.
Guanidina............................................................... 4,0 mol/l Si bien hemólisis ligeras no interfieren con este método, el

864109024 / 00 p. 1/12
International Committee for Standardization in Hematology (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
(ICSH) recomienda el uso de suero libre de hemólisis. de hierro, con cada determinación.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método. VALORES TEORICOS
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el Hombres: 65 a 175 ug/dl (11,6-31,3 umol/l)
suero o plasma heparinizado pueden conservarse hasta una Mujeres: 50 a 170 ug/dl (9-30,4 umol/l)
semana en refrigerador (2-10oC).
VALORES DE REFERENCIA
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos, con edades
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. oscilando entre los 18 y 51 años, se halló un rango de 55 a
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. 175 ug/dl* con los siguientes promedios:
- Tubos o cubetas espectrofotométricas.
Hombres: 114,6 ug/dl (20,5 umol/l)
Mujeres: 103,3 ug/dl (18,5 umol/l)
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 560 nm en espectrofotómetro o 540-560 nm *Valores de referencia extraidos de archivos de Wiener lab.
en fotocolorímetro con filtro verde. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente valores de referencia.
- Tiempo de reacción: 5 minutos
- Volumen de muestra: 200 ul CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
- Volumen total de reacción: 1,4 ml Hierro (ug/dl) x 0,179 = Hierro (umol/l)

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO - Valores de Blanco aceptables: la determinación de oligo-
En tres tubos marcados B (Blanco de Reactivos), S elementos requiere la prevención de posibles contamina-
(Standard) y D (Desconocido) colocar: ciones del agua y los reactivos. El Blanco de Reactivos,
ejecutado de acuerdo al Manual de Instrucciones, no debe
B S D
ser superior a 0,150 D.O. debiendo ser además, despre-
Agua bidestilada 200 ul - - ciable la contribución del agua en dicho Blanco. Para ello
Standard - 200 ul - se recomienda el uso de agua de calidad comprobada
(conductividad menor a 0,02 uOhms).
Muestra - - 200 ul - Limpieza del material: todo el material de laboratorio em-
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml pleado debe estar libre de hierro, para lo cual debe ser
sumergido durante 6 horas en HCl p.a. 10-15%, eliminando
Mezclar. Leer la absorbancia del tubo D (Blanco de Suero la acidez con numerosos lavados con agua libre de hierro.
BS) en espectrofotómetro a 560/580 nm o en fotocolo- Secar el material preferentemente a no más de 80oC en
rímetro con filtro verde (540/560 nm) llevando a cero el cestillas de acero inoxidable o revestidos con plástico.
aparato con agua. Luego agregar: Todo el material debe ser empleado exclusivamente para
Reactivo C 200 ul 200 ul 200 ul la determinación de hierro.
Mezclar inmediatamente. Volver a leer cada tubo a los 5
PERFORMANCE
minutos, llevando el aparato a cero con agua.
a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguientes
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL datos:
Los tubos deben ser leídos entre 5 y 60 minutos luego de Nivel D.S. C.V.
completados los pasos del procedimiento. 146,5 ug/dl ± 1,93 ug/dl 1,32 %
324,6 ug/dl ± 1,76 ug/dl 0,54 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS
Corregir las lecturas de S y D, restándoles los Blancos Procesando la misma muestra en días diferentes, se obtu-
correspondientes: vieron los siguientes resultados:
S - B = S corregida Nivel D.S. C.V.
D - (B + BS) = D corregida 142,8 ug/dl ± 2,50 ug/dl 1,75 %
Fe (ug/dl) = D corregida x f 314,0 ug/dl ± 3,93 ug/dl 1,25 %
100 ug/dl
donde: f = b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de Fe
S corregida (II) a alícuotas de un mismo suero, se recuperó entre 90 y
103%.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 1000 ug/dl.
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad d) Límite de detección: 6,05 ug/dl.

864109024 / 00 p. 2/12
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS SÍMBOLOS
Para las instrucciones de programación debe consultarse el Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra- reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
ción debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab., de
acuerdo a los requerimientos del analizador. Este producto cumple con los requerimientos previstos

PRESENTACION
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"
- 5 x 20 ml (Cód. 1492003).
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
BIBLIOGRAFIA
- Dixon, K. - Ann. Clin. Biochem. 10/5:127 (1973).
V Uso diagnóstico "in vitro"

- I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971). Contenido suficiente para <n> ensayos
- Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M. - Clin.
X
Toxicol. 4/4:621 (1971). H Fecha de caducidad
- Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Alba-
rracín, A. - III Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos l Límite de temperatura (conservar a)
Aires (1975).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",  No congelar
AACC Press, 4th ed., 2001.
F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

Cont. Contenido

g Número de lote

Elaborado por:
M
Nocivo

Corrosivo / Cáustico

Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

864109024 / 00 p. 3/12
 Fer-color
AA
C Método colorimétrico direto para a determinação de
ferro em soro ou plasma

SIGNIFICADO CLÍNICO REAGENTE NÃO FORNECIDO

O ferro encontra-se distribuído no organismo em diferentes - Calibrador A plus da Wiener lab.
formas que incluem: hemoglobina, ferro tissular e mioglobina. - Água destilada.
O transporte de ferro de um órgão a outro realiza-se mediante
uma proteína transportadora: a apotransferrina. INSTRUÇÕES DE USO
O complexo formado com o ferro é conhecido como trans- Reagente C: pronto para uso.
ferrina. Padrão: pronto para uso.
A ferritina, localizada em quase todas as células do corpo, Reagente de Trabalho: transferir ao frasco de Reagente B
constitui uma reserva de ferro disponível para a formação da a quantidade de Reagente A indicada no rótulo. Colocar a
hemoglobina e outras proteínas que contêm o grupo hemo. data de preparo.
A absorção de ferro é realizada principalmente no duode-
no. Tanto a ferritina como a transferrina encontram-se nas PRECAUÇÕES
células da mucosa intestinal e ambas regulam a absorção Os reagentes são para uso diagnóstico "in vitro".
de ferro. Utilizar os reagentes observando as precauções habituais
Os mais grandes desordens do metabolismo de ferro de trabalho no laboratório de análises clínicas.
relacionam-se com a deficiência ou excesso. No entanto, Todos os reagentes e as amostras devem ser descartadas
observam-se alterações em muitas outras doenças como conforme à regulação local vigente.
anemia, doenças cardiovasculares, hepatite crônica, doen-
ças renais e infecções. ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE
A anemia por perda de ferro representa um dos transtornos ARMAZENAMENTO
orgânicos mais freqüentes, principalmente em crianças, mu- Reagentes Fornecidos: são estáveis sob temperatura
lheres jovens, grávidas e idosos. Também constituem causas ambiente (< 25oC) até a data do vencimento indicada na
de anemia ferropênica as úlceras gástricas ou duodenais e embalagem.
carcinoma de estômago. Reagente de Trabalho: é estável por 3 meses a contar da
Por outra parte, o excesso de ferro associa-se com outros data de sua preparação conservado sob refrigeração (2-
desordens como hemosiderose, hemocromatose e anemia 10oC) ou por 10 dias sob temperatura ambiente (18-25oC).
sideroblástica.
INDÍCIOS DE INSTABILIDADE OU DETERIORAÇÃO
FUNDAMENTO DO MÉTODO DOS REAGENTES
O ferro sérico libera-se de sua ligação com sua proteína Variações nas leituras de Brancos de Reagentes e/ou
transportadora específica, a transferrina, tampão acetato Padrão, são indícios de contaminações ocasionais (água,
de pH 4,5 e em presença de um redutor, o ácido ascórbico. material de vidro, etc.). Aumento no valor dos Brancos indi-
Depois reage com o reagente de cor, piridil bis-fenil triazina cará uma contaminação com ferro.
sulfonato (ferrozina) obtendo-se um produto de cor magenta,
que se mede a 560 nm. AMOSTRA
Soro ou plasma
REAGENTES FORNECIDOS a) Coleta: o paciente deve estar em jejum, sendo que as
A. Reagente A: solução de acetato 150 mmol/l para pH 4,5 extrações devem ser realizadas sempre na mesma hora
contendo guanidina. (preferencialmente de manhã) já que as oscilações fisioló-
B. Reagente B: ácido abscórbico. gicas são muito importantes durante o dia.
C. Reagente C: solução estabilizada de ferrozina. b) Aditivos: se a amostra é plasma deverá utilizar-se hepa-
S. Padrão: solução de iônes Fe (III) equivalem a 100 ug/dl. rina como anticoagulante.
c) Substâncias interferentes conhecidas: não se observa
Concentrações finais interferência pela hemoglobina até 90 mg/dl, bilirrubina até
Acetato.................................................. 150 mmol/l, pH 4,5 15 mg/dl, nem heparina até 50 UI/ml.
Ferrozina............................................................. 0,2 mmol/l Amostras lipêmicas podem levar a resultados errôneos.
Ácido abscórbico.................................................. 0,03 mol/l Níveis de triglicerídeos de 3,72 g/l produzem interferências.
Guanidina............................................................... 4,0 mol/l Embora hemólises ligeiras não interferem com este método,

864109024 / 00 p. 4/12
o International Committee for Standardization in Hematology lidade (Standatrol S-E 2 niveles) com concentrações
(ICSH) recomenda a utilização de soro livre de hemólise. conhecidas de ferro, com cada determinação.
Referência bibliográfica de Young para efeitos de drogas
neste método. VALORES TEÓRICOS
d) Estabilidade e instruções de armazenamento: o soro Homens: 65 a 175 ug/dl (11,6-31,3 umol/l)
e o plasma heparinizado podem ser conservados até uma Mulheres: 50 a 170 ug/dl (9-30,4 umol/l)
semana sob refrigeração (2-10oC).
VALORES DE REFERÊNCIA
MATERIAL NECESSÁRIO (não fornecido) Em um grupo de 20 mulheres e 20 homens sadios, com
- Espectrofotômetro ou fotocolorímetro. idades entre os 18 e 51 anos, foram encontradas faixas de
- Micropipetas e pipetas para medir os volumes indicados. 55 a 175 ug/dl* com as seguintes médias:
- Tubos ou cubetas espectrofotométricas. Homens: 114,6 ug/dl (20,5 umol/l)
Mulheres: 103,3 ug/dl (18,5 umol/l)
CONDIÇÕES DE REAÇÃO
- Comprimento de onda: 560 nm em espectrofotômetro ou *Valores de referência extraídos de arquivos da Wiener lab.
540-560 nm em fotocolorímetro com filtro verde. É recomendável que cada laboratório estabeleça seus pró-
- Temperatura de reação: temperatura ambiente prios valores de referência.
- Tempo de reação: 5 minutos
- Volume de amostra: 200 ul CONVERSÃO DE UNIDADES AO SISTEMA SI
- Volume total de reação: 1,4 ml Ferro (ug/dl) x 0,179 = Ferro (umol/l)

LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
PROCEDIMENTO - Valores de Branco aceitável: a determinação de oligoe-
Em três tubos marcados B (Branco de Reagente), P lementos comprometem as possíveis contaminações de
(Padrão) e D (Desconhecido), colocar: água e os reagentes. O Branco de Reagente, realizado
segundo o Manual de Instruções, não deve superar 0,150 D.O.
B P D devendo ser ainda desprezível a contribuição de água no
Água bidestilada 200 ul - - Branco. Para poder ser controlado, recomenda-se o uso
de água de qualidade comprovada (condutibilidade menor
Padrão - 200 ul -
a 0,02 uOhms).
Amostra - - 200 ul - Limpeza do material: todo o material do laboratório utilizado
Reagente de Trabalho 1 ml 1 ml 1 ml deve estar livre de ferro, submergindo-o durante 6 horas em
HCl p.a. 10-15%, eliminando a acidez com vários lavados
Misturar. Ler a absorbância do tubo D (Branco de Soro com água livre de ferro. Enxugar o material perfeitamente
BS) em espectrofotômetro a 560/580 nm ou em fotoco- à temperatura não superior a 80oC em cesto de aço inoxi-
lorímetro com filtro verde (540/560 nm) levando a zero dável ou recoberto com plástico. Todo o material deve ser
o aparelho com água. Depois adicionar: utilizado só para a determinação de ferro.
Reagente C 200 ul 200 ul 200 ul
DESEMPENHO
Misturar imediatamente. Voltar a ler cada tubo em 5
a) Reprodutibilidade: processando duplicatas das mesmas
minutos, levando o aparelho a zero com água.
amostras no mesmo dia, foram obtidos os seguintes dados:
Nível D.P. C.V.
ESTABILIDADE DA MISTURA DE REAÇÃO FINAL 146,5 ug/dl ± 1,93 ug/dl 1,32 %
Os tubos devem ser lidos entre 5 e 60 minutos após com- 324,6 ug/dl ± 1,76 ug/dl 0,54 %
pletados os passos do procedimento.
Processando a mesma amostra em diferentes dias, obteve-
se o seguinte:
CÁLCULOS DOS RESULTADOS
Corrigir as leituras de P e D, subtraindo os Brancos cor- Nível D.S. C.V.
respondentes: 142,8 ug/dl ± 2,50 ug/dl 1,75 %
314,0 ug/dl ± 3,93 ug/dl 1,25 %
P - B = P corrigido
D - (B + BS) = D corrigida b) Recuperação: adicionar quantidades conhecidas de Fe
Fe (ug/dl) = D corrigida x f (II) a alíquotas de um mesmo soro, recuperou-se entre 90
100 ug/dl e 103%.
onde: f = c) Linearidade: a reação é linear até 1000 ug/dl.
P corrigido d) Limite de detecção: 6,05 ug/dl.

MÉTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE PARÂMETROS PARA ANALISADORES AUTOMÁTICOS

Processar dois níveis de um material de controle de qua- Para a programação consultar o manual de uso do analisador

864109024 / 00 p. 5/12
a ser utilizado. Para a calibração deve-se utilizar Calibra- SÍMBOLOS
dor A plus da Wiener lab., segundo os requerimentos do Os seguintes símbolos são utilizados nos kits de reagentes
analisador. para diagnóstico da Wiener lab.

APRESENTAÇÃO Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europeia

- 5 x 20 ml (Cód. 1492003).
C 98/79 CE para dispositivos médicos de diagnóstico "in
vitro"
REFERÊNCIAS
- Dixon, K. - Ann. Clin. Biochem. 10/5:127 (1973).
P Representante autorizado na Comunidade Europeia
- I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971).
- Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M. - Clin.
V Uso médico-diagnóstico "in vitro"

Toxicol. 4/4:621 (1971). Conteúdo suficiente para <n> testes

X
- Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y
Albarracín, A. - III Congreso Argentino de Bioquímica - H Data de validade
Buenos Aires (1975).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", l Limite de temperatura (conservar a)
AACC Press, 4th ed., 2001.
 Não congelar

F Risco biológico

Volume após a reconstituição

Cont. Conteúdo

g Número de lote

Elaborado por:
M
Nocivo

Corrosivo / Caústico

Irritante

i Consultar as instruções de uso

Calibr. Calibrador

b Controle

b Controle Positivo

c Controle Negativo

h Número de catálogo

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 Fer-color
C AA
Direct colorimetric method for the determination of
iron in serum or plasma

SUMMARY INSTRUCTIONS FOR USE

Iron is distributed in the body in different ways, including Reagent C: ready to use.
hemoglobin, tissue iron and myoglobin. Iron transport from Standard: ready to use
one organ to another is performed by a carrier protein called Working Reagent: transfer to the Reagent B vial the amount
apotransferrin. This complex is known as transferrin. of Reagent A stated on the label. Date.
Ferritin, present in most cells, constitutes an iron reservoir
available for hemoglobin formation and further proteins con- WARNINGS
taining the hemo group. Iron absorption is mainly produced Reagents are for "in vitro" diagnostic use.
in the duodenum. Both ferritin and transferrin are present Use the reagents according to the working procedures for
in the intestinal mucous membrane cells and together they clinical laboratories.
regulate iron absorption. All reagents and samples should be discarded according to
The main metabolism disorders are related to their deficiency the local regulations in force.
or excess; however, alterations have been observed in many
other diseases, including anemia, cardiovascular diseases, STABILITY AND STORAGE INSTRUCTIONS
chronic hepatitis, renal diseases and infections. Provided Reagents: are stable at room temperature (<
One of the most frequently organic disorders found in clini- 25oC) until the expiration date shown on the box.
cal practice is the anemia caused by iron loss. It is usually Working Reagent: stable for 3 months from preparation
observed in children, young and pregnant women, and the date stored in refrigerator (2-10oC) or for 10 days at room
elderly. Gastric or duodenal ulcers and stomach carcinoma temperature (18-25oC).
may also lead to ferropenic anemia.
On the contrary, the iron excess is associated to other INSTABILITY OR DETERIORATION OF REAGENTS
disorders such as hemosiderosis, hemochromatosis and Variations in Blank and/or Standard readings show occa-
sideroblastic anemia. sional contamination (water, glassware, etc.).
An increase in Blank values will indicate contamination
PRINCIPLE with iron.
Serum iron is released from its specific carrier protein
(transferrin) in pH 4.5 acetate buffer and in the presence SAMPLE
of a reducing agent (ascorbic acid). Then it reacts with Serum or plasma
the color reagent, pyridyl bis-phenyl triazine sulfonate a) Collection: the patient must be fasting and extractions
(ferrozine) producing a magenta color complex measured should be performed always at the same time (preferably in
at 560 nm. the morning) since physiological fluctuations are significant
during the day.
PROVIDED REAGENTS b) Additives: use heparin as anticoagulant whenever plasma
A. Reagent A: 150 mmol/l acetate solution for pH 4.5 con- is used as sample.
taining guanidine. c) Known interfering substances: hemoglobin interference
B. Reagent B: ascorbic acid. is not observed up to 90 mg/dl, bilirubin up to 15 mg/dl and
C. Reagent C: ferrozine stabilized solution. heparin up to 50 IU/ml. Interference is observed with 3,72 g/l
S. Standard: ferric ions solution (III) equivalent to 100 ug/dl. triglycerides.
Lipemic samples may yield erroneous results.
Final concentrations Although light hemolysis does not interfere with this method,
Acetate.................................................. 150 mmol/l, pH 4.5 the International Committee for Standardization in Hema-
Ferrozine............................................................. 0.2 mmol/l tology (ICSH) recommends the use of serum free from
Ascorbic acid........................................................ 0.03 mol/l hemolysis.
Guanidine............................................................... 4.0 mol/l See Young, D.S. in References for effect of drugs on the
present method.
NON-PROVIDED REAGENTS d) Stability and storage instructions: serum or heparin-
- Wiener lab.'s Calibrador A plus. ized plasma may be stored up to one week in refrigerator
- Distilled water. (2-10oC).

864109024 / 00 p. 7/12
REQUIRED MATERIAL (non-provided) between 18 and 51 years of age, a range of 55-175 ug/dl*
- Spectrophotometer or photocolorimeter. was observed, obtaining the following mean values:
- Micropipettes and pipettes for measuring the stated volumes Men: 114.6 ug/dl (20.5 umol/l)
- Spectrophotometric tubes or cuvettes. Women: 103.3 ug/dl (18.5 umol/l)

ASSAY CONDITIONS * Reference values obtained from Wiener lab. records.

- Wavelength: 560 nm in spectrophotometer or 540-560 nm Each laboratory should establish its own references values.
in photocolorimeter with green filter.
- Reaction temperature: room temperature SI SYSTEM UNITS CONVERSION
- Reaction time: 5 minutes Iron (ug/dl) x 0.179 = Iron (umol/l)
- Sample volume: 200 ul
- Final reaction volume: 1.4 ml PROCEDURE LIMITATIONS
- Acceptable Blank values: oligo-elements determination
requires prevention from possible water and reagent con-
PROCEDURE tamination. The Reagent Blank, tested according to the
In three photocolorimeter tubes labeled B (Reagent Instruction Insert, should not be higher than 0.150 O.D. Also
Blank), S (Standard) and U (Unknown) place: the water contribution to the blank should be insignificant.
Hence, the use of proven quality water is recommended
B S U (conductivity below 0.02 uOhms).
Bidistilled water 200 ul - - - Cleaning of the material: the labware used should be iron-
free, so it should be submerged for 6 hours into 10-15%
Standard - 200 ul - analytical grade hydrochloric acid, eliminating the acidity
Serum - - 200 ul with numerous washes steps using iron-free water. Dry the
material at a temperature not above 80oC in stainless steel
Working Reagent 1 ml 1 ml 1 ml
or vinyl coated baskets. This material should be exclusively
Mix. Read absorbance of U Tube (Serum Blank: SB) in used for iron determination.
spectrophotometer at 560/580 nm or in photocolorimeter
with green filter (540/560 nm) setting the instrument to PERFORMANCE
zero with water. Then add: a) Reproducibility: when replicates of the same samples
Reagent C 200 ul 200 ul 200 ul were assayed on the same day, the following results were
obtained:
Mix at once. Reread each tube after 5 minutes, setting
the instrument to zero with water. Level S.D. C.V.
146.5 ug/dl ± 1.93 ug/dl 1.32 %
324.6 ug/dl ± 1.76 ug/dl 0.54 %
STABILITY OF FINAL REACTION Performing the same assay on different days, the following
Tubes must be read within 5 and 60 minutes after completing results were obtained:
the procedure steps.
Level S.D. C.V.
CALCULATIONS 142.8 ug/dl ± 2.50 ug/dl 1.75 %
Correct S and U readings, subtracting the corresponding Blanks: 314.0 ug/dl ± 3.93 ug/dl 1.25 %
S - B = corrected S b) Recovery: a recovery between 90 and 103% was ob-
U - (B + SB) = corrected U tained by adding known amounts of Fe (II) to aliquots of the
Fe (ug/dl) = corrected U x f same serum.
100 ug/dl c) Linearity: reaction is linear up to 1000 ug/dl.
where: f = d) Detection limit: 6.05 ug/dl.
corrected S
PARAMETERS FOR AUTOANALYZERS
QUALITY CONTROL METHOD For programming instructions check the user manual of the au-
Test two levels of a quality control material (Standatrol toanalyzer in use. For calibration, Wiener lab. Calibrador A plus
S-E 2 niveles) with known iron concentration for each should be used, according to the autoanalyzer requirements.
determination.
WIENER LAB. PROVIDES
THEORETICAL VALUES - 5 x 20 ml (100 ml Reagent A) (Cat. Nº 1492003).
Men: 65 to 175 ug/dl (11.6 - 31.3 umol/l)
Women: 50 to 170 ug/dl (9 - 30.4 umol/l) REFERENCES
- Dixon, K. - Ann. Clin. Biochem. 10/5:127 (1973).
REFERENCE VALUES - I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971).
Among a group of 20 healthy women and 20 healthy men, - Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M. - Clin.

864109024 / 00 p. 8/12
 Toxicol. 4/4:621 (1971). SYMBOLS
- Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Alba- The following symbols are used in the packaging for Wiener
rracín, A. - III Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos lab. diagnostic reagents kits.
Aires (1975).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", This product fulfills the requirements of the European
AACC Press, 4th ed., 2001.
C Directive 98/79 EC for "in vitro" diagnostic medical devices

P Authorized representative in the European Community

V "In vitro" diagnostic medical device

X Contains sufficient for <n> tests

H Use by

l Temperature limitation (store at)

 Do not freeze

F Biological risks

Volume after reconstitution

Cont. Contents

g Batch code

M Manufactured by:

Harmful

Corrosive / Caustic

Irritant

i Consult instructions for use

Calibr. Calibrator

b Control

b Positive Control

c Negative Control

h Catalog number

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 Fer-color
AA
C Bezpośrednia metoda kolorymetryczna do oznaczania
żelaza w surowicy krwi lub osoczu bez odbiałczania
Nr kat.: 1492003

WSTĘP NIEDOSTARCZANE ODCZYNNIKI

Żelazo rozmieszczone jest w organizmie w zróżnicowany - Calibrador A plus Wiener lab.
sposób m. in. w hemoglobinie, jako żelazo tkankowe i w - Woda destylowana.
mioglobinie. Przenoszone jest przez białkowy nośnik zwany
apotransferyną. Kompleks białka z żelazem jest znany jako INSTRUKCJA UŻYCIA
transferyna. Odczynnik C: gotowy do użycia.
Ferrytyna jest obecna w większości komórek i stanowi Próba wzorcowa: gotowa do użycia.
rezerwuar żelaza dostępny dla tworzenia hemoglobiny i Odczynnik Roboczy: przelać do fiolki z odczynnikiem B
innych białek zawierających grupę hemową. Wchłanianie oznaczoną na opakowaniu ilość odczynnika A i oznaczyć datą.
żelaza zachodzi głównie w dwunastnicy. Zarówno ferrytyna
jak i transferyna są obecne w komórkach błony śluzowej OSTRZEŻENIA
jelit i razem biorą udział w regulacji wchłaniania. Główne Odczynniki do diagnostyki "in vitro".
zaburzenia metaboliczne są związane z niedoborem lub Stosować odczynniki zgodnie z procedurami dla laboratoriów
nadmiarem; jakkolwiek zmiany w poziomie żelaza obserwuje klinicznych.
się w wielu innych zaburzeniach takich jak astma, choroby Wszystkie odczynniki i materiał badany odrzucać zgodnie z
sercowo-naczyniowe, przewlekle zapalenie wątroby, choroby lokalnymi przepisami.
nerek i infekcje.
Jednym z najczęstszych zaburzeń organicznych w praktyce TRWAŁOŚĆ I WARUNKI PRZECHOWYWANIA
klinicznej jest niedokrwistość z niedoboru żelaza. Zwykle Dostarczane odczynniki: stabilne w temp. (< 25oC) do
występuje u dzieci, młodzieży i kobiet w ciąży, jak również końca daty ważności umieszczonej na opakowaniu.
u osób starszych. Wrzody żołądka lub dwunastnicy a także Odczynnik Roboczy: trwały przez 3 miesięcy od daty pr-
rak żołądka może również prowadzić do niedokrwistości z zygotowania, przechowywać w lodówce (2-10oC) lub przez
niedoboru żelaza. Z drugiej strona nadmiar żelaza występuje 10 dni w temp. pokojowej (18-25oC).
w takich zaburzeniach jak: hemosyderoza, hemochromatoza
i anemia sideroblastyczna. BRAK TRWAŁOŚCI I POGORSZENIE JAKOŚCI
ODCZYNNIKÓW
ZASADA DZIAŁANIA Różnice w odczycie próbek ślepych lub wzorcowych
Żelazo surowicy krwi tj. w postaci związanej z nośnikiem świadczą o przypadkowym zanieczyszczeniu (woda, szkło
(transferyną), jest uwalniane pod wpływem buforu octanowe- itp.) Wzrost w pomiarach próby ślepej wskazuje na zanie-
go w pH 4,5 i w obecności czynnika redukującego (kwasu czyszczenie żelazem.
askorbinowego). Następnie reaguje z kolorowym odczynni-
kiem ferrozyną (pyridyl bis-phenyl triazine sulfonate) tworząc MATERIAŁ BADANY
kompleks w kolorze karmazynowym. Pomiaru dokonujemy Surowica krwi lub osocze
przy długości fali 560 nm. a) Pobranie: pacjent musi być na czczo i pobranie musi
być stale o tej samej porze najlepiej rano ze względu na
DOSTARCZANE ODCZYNNIKI znaczące, fizjologiczne zmiany poziomu w ciągu dnia.
A. Odczynnik A: 150 mmol/l roztwór octanowy o pH 4,5 b) Substancje dodatkowe: gdy używane jest osocze należy
zawierający guanidynę. zawsze zastosować heparynę jako antykoagulant.
B. Odczynnik B: kwas askorbinowy. c) Znane interakcje: hemoglobina nie wpływa do 90 mg/dl,
C. Odczynnik C: stabilizowany roztwór ferrozyny. bilirubina do 15 mg/dl i heparyna 50 IU/ml. Zaobserwowano
S. Próba wzorcowa*: roztwór jonów żelaza (III) równy interakcję z trójglicerydami do 3,72 g/l. Materiał zawierający
100 ug/dl. wysokie poziomy lipidów może dawać błędne wyniki. Mimo
iż niewielki stopień hemolizy nie wpływa na metodę, Interna-
Końcowe stężenia tional Committee for Standardization in Hematology (ICSH)
Octan..................................................... 150 mmol/l, pH 4,5 zaleca stosowanie surowicy wolnej od hemolizy.
Ferrozyna............................................................ 0,2 mmol/l Sprawdź źródło: Young, D.S. w sprawie wpływu leków w
Kwas askorbinowy................................................ 0,03 mol/l tej metodzie.
Guanidyna.............................................................. 4,0 mol/l d) Trwałość i warunki przechowywania: surowica lub he

*Niedostarczane we wszystkich rozmiarach zestawów 864109024 / 00 p. 10/12

parynizowane osocze może być przechowywane do tygodnia analizę na dwóch poziomach (Standatrol S-E 2 niveles) ze
w lodówce (2-10oC). znanym stężeniem żelaza.

WYMAGANY MATERIAŁ I SPRZĘT (niedostarczany) TEORETYCZNY ZAKRES WARTOŚCI

- Spektrofotometr, fotokolorymetr, analizator automatyczny. Mężczyźni: 65 do 175 ug/dl (11,6 - 31,3 umol/l)
- Mikropipety i pipety do pomiaru objętości. Kobiety: 50 do 170 ug/dl (9 - 30,4 umol/l)
- Probówki do spektrofotometru lub kuwety.
WARTOŚCI REFERENCYJNE
WARUNKI DLA PRZEPROWADZENIA TESTU Na podstawie grupy 20 zdrowych kobiet i 20 zdrowych
- Długość fali: 560 nm w spektrofotometrze lub 540-560 nm mężczyzn, w przedziale wiekowym 18-51 lat mających
w fotokolorymetrze z zielonym filtrem. zakres wartości 55-175 ug/dl*, otrzymano następujące
- Temperatura reakcji: temperatura pokojowa średnie wartości:
- Czas reakcji: 5 minut Mężczyźni: 114,6 ug/dl (20,5 umol/l)
- Objętość materiału: 200 ul Kobiety: 103,3 ug/dl (18,5 umol/l)
- Końcowa objętość reakcji: 1,4 ml
*Zakres wartości referencyjnych uzyskano z dokumentacji
Wiener lab.
PROCEDURA Zaleca się aby każde laboratorium ustaliło własne zakresy i
W trzech probówkach do fotokolorymetru oznaczonych wartości referencyjne.
B (Odczynnik Ślepy), S (Próba Wzorcowa) i U (Próba
Nieznana) umieścić: KONWERSJA JEDNOSTEK SI
Żelazo (ug/dl) x 0,179 = Żelazo (umol/l)
B S U
Woda podwójnie 200 ul - - OGRANICZENIA PROCEDURY
destylowana - Dopuszczalne wartości Próby Ślepej: oznaczanie oligoele-
mentów wymaga zapobiegania przed zanieczyszczeniem
Próba wzorcowa - 200 ul -
wody i odczynnika. Zgodnie z umieszczoną informacją
Materiał badany - - 200 ul na ulotce wartość Próby ślepej odczynnika nie może być
Odczynnik Roboczy 1 ml 1 ml 1 ml wyższa niż 0,150 O.D. Kontrybucja wody do ślepej musi być
nieznaczna. Stąd zaleca się zastosowanie wody o sprawd-
Wymieszać. Ustawić aparat na zero na wodzie. Odczytać zonej jakości (o przewodnictwie poniżej 0.02 uOhms).
absorbancję próbki U (Surowica Ślepa: SB) w spektrofo- - Procedura czyszczenia sprzętu: używany sprzęt labora-
tometrze przy długości fali 560/580 nm lub fotokoloryme- toryjny powinien być wolny od żelaza, należy go zanurzyć
trze z zielonym filtrem przy długości fali (540/560 nm). na 6 godzin w 10-15% kwasem hydrochorowym cz.d.a, a
Następnie dodać: następnie wielokrotnie płukać wodą pozbawioną żelaza
Odczynnik C 200 ul 200 ul 200 ul w celu wypłukania kwasowości. Wysuszyć sprzęt w tem-
peraturze powyżej 80oC w nierdzewnej stali lub pokrytej
Wymieszać raz. Odczytać pomiar próbek po 5 minutach winylem cieplarce. Używać wyłącznie do oznaczeń żelaza.
i wcześniejszym ustawieniu aparatu na zero na wodzie.
CHARAKTERYSTYKA TESTU
a) Powtarzalność: przy powtórzeniach badania tego sa-
TRWAŁOŚĆ KOŃCOWEJ REAKCJI mego materiału w tym samym dniu, uzyskano następujące
Próbki muszą być odczytane w czasie 5-60 minut od wyniki:
zakończenia całej procedury wykonania badania.
Poziom S.D. C.V.
146,5 ug/dl ± 1,93 ug/dl 1,32 %
OBLICZENIA
324,6 ug/dl ± 1,76 ug/dl 0,54 %
Dokonać korekty w odczytach S i U:
Przy wykonaniu tych samych analiz w różnych dniach, uzys-
S - B = skorygowane S
kano następujące wyniki:
U - (B + SB) = skorygowane U
Poziom S.D. C.V.
Fe (ug/dl) = skorygowane U x f gdzie: 142,8 ug/dl ± 2,50 ug/dl 1,75 %
100 ug/dl 314,0 ug/dl ± 3,93 ug/dl 1,25 %
f= b) Odzyskiwanie: otrzymano odzysk pomiędzy 90 a 103%
Skorygowane S po dodaniu znanych ilości żelaza Fe (II) do równych części
tej samej surowicy.
METODA KONTROLI JAKOŚCI c) Linijność: reakcja jest linijna do wartości 1000 ug/dl.
W trakcie przeprowadzania badania, należy przeprowadzić d) Granica wykrywalności: 6,05 ug/dl.

864109024 / 00 p. 11/12
PARAMETRY DLA ANALIZATORÓW AUTOMATYCZYCH Oznaczenia
Należy zapoznać się z instrukcją obsługi urządzenia w celu Następujące symbole są zastosowane na opakowaniach
programowania analizatorów automatycznych. Do kalibracji zestawów odczynników diagnostycznych.
użyć Wiener lab’s Calibrador A plus zgodnie z wymogami dla Ten produkt spełnia wymagania Dyrektywy Europej-
poszczególnych analizatorów automatycznych.
C skiej 98/79 EC dla wyrobów medycznych używanych
do diagnozy "in vitro"
WIENER LAB. DOSTARCZA
- 5 x 20 ml (100 ml Odczynnik A) (Nr kat. 1492003).
PAutoryzowany przedstawiciel we Wspólnocie Europejskiej
V Wyrób do diagnostyki "in vitro"
ŹRÓDŁA
- Dixon, K. - Ann. Clin. Biochem. 10/5:127 (1973). X Zawartość wystarczająca dla <n> badań
- I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971). Użyć przed
- Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M. - Clin. H
Toxicol. 4/4:621 (1971). l Ograniczenie dopuszczalnych temperatur
- Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Alba-
rracín, A. - III Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos  Nie zamrażać
Aires (1975).
F Ryzyko biologiczne
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001. Objętość po rozpuszczeniu

Cont. Zawartość

g numer serii

M Wytwórca

Substancja szkodliwa

Substancja żrące

Substancja drażniąca

i Przed użyciem zapoznać się z instrukcją

Calibr. Kalibrator

b Próba kontrolna

b Próba kontrolna dodatnia

c Próba kontrolna ujemna

h Numer katalogowy

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944

Wiener lab.
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 3193/99 2000 Rosario - Argentina
864109024 / 00 p. 12/12 UR190627