PRÁCTICAS DE LABORATORIO
CURSO : QUÍMICA ORGÁNICA
Capítulo 5 :
CROMATOGRAFÍA
• LABORATORIO
SEM_6
LOGROS DE APRENDIZAJE
Conocimiento de un método de identificación y purificación de
mezclas de compuestos.
Verificación de un método de separación basado en la distribución o en la
diferencia velocidad con que se desplazan los compuestos entre 2 fases en
íntimo contacto.
Identificación de compuestos en una mezcla.
REFLEXIÓN DESDE LA EXPERIENCIA
• ¿Qué sucede cuando agregamos agua al vaso que contiene el papel con los 5 puntos?
• ¿Será un método de separación ?
¿Cuáles son las parte del sistema
cromatográfico?
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CROMATOGRAFÍA
Separación de una mezcla por Tipos de cromatografía
distribución diferencial atendiendo el fenómeno
físico que prevalece
puede ser
En 2 fases
1.De Adsorción (S-L) 2.Reparto o 3.-Intercambio iónico
partición (L-L) (Resina-L)
Fase móvil
Fase estacionaria, ,disolvente
fija ,adsorbente. ,eluyente
SISTEMA CROMATOGRÁFICO: Partes
FASE FIJA O FASE MÓVILO
1 ESTACIONARIA DISOLVENTE
Fluye la fase móvil Fluye (Recorre) en la
fase estacionaria.
4 Retiene a la muestra Contiene a los
componentes de la
muestra (separa a la
muestra)
-Líquido -Líquido
-Sólido -
2
Tipos de Cromatografía Según el
material a utilizar
C. SOBRE PAPEL C. EN CAPA FINA C. EN COLUMNA
Cromatografía de adsorción. Fase fija es un sólido (
Silicagel,alúmina, fosfato de
calcio)
Adsorbato
Adsorbente
Fenómeno físico
superficial
Separación depende de la adsorción y
desorción
Desorción :separación de las moléculas
adsorbidas por la fase móvil
El desplazamiento de las moléculas depende
de su polaridad.
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
CROMATOGRAFÍA DE REPARTO O
Fase fija es un líquido .
Fase móvil es un líquido o un
PARTICIÓN gas.
El desplazamiento depende de la solubilidad
de los compuesto en las fase.
Los componentes si son solubles a la fase
fija no se desplazará.
Los compuesto si son solubles a la fase
móvil se desplazará a la misma velocidad
que la fase.
cromatografía de intercambio iónico
En este tipo de Cromatografía la
Fase Estacionaria tiene grupos
cargados que interaccionan
electroestáticamente
con iones de signo contrario
de la fase móvil.
C de Intercambio catiónico : retiene
los positivos ;porque es la FE
negativa
Se basa en la interacción y el intercambio.
Las resinas posee cargas
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G7QHNpAeQE
Etapas del trabajo cromatográfico
1 3
2
FACTOR REPARTICIÓN O Usada en Cromatografía sobre papel
RELACIÓNDE FRENTE “Rf” o capa fina
Frente del
solvente
Punto de
siembra
Permite identificar un compuesto en
base a su desplazamiento
A mayor distancia del compuesto mayor
rf y mayor afinidad a la fase móvil.
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
PARTE EXPERIMENTAL 1 CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL
1.-Preparación para el sembrado
Señale el punto
del lugar de la
siembra de uno
Señale la línea de los colorantes
para la siembra
de la mezcla
Señale la línea de partida
Distancia = 1,5 cm
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
PARTE EXPERIMENTAL 1: CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL
2.- SIEMBRE 3 VECES CON EL CAPILAR
3.- Hacer secar
Sembrar el
anaranjado de
metilo (patrón)
Siembre el azul
de metileno con
anarajando de
metilo (Muestra)
Señale la línea de partida
D=
1,5
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
PARTE EXPERIMENTAL 1: I.-CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL
4.- Introducir el papel al tubo
Introducir a un tubo de ensayo
vacío
Agregar la fase móvil( propanol,
butanona ,agua) menos de la línea de
siembra .
Esperar que la fase móvil suba 8 a
10cm ,sacar y marcar. Luego secar
el papel filtro.
Solvente de propanol- butanona-agua
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
PARTE EXPERIMENTAL 1: CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL
RESULTADO
PATRÓN
MUESTRA
10cm
Calcular el Rf de la
6,3cm 3,5cm muestra y compara con el
6,3cm
patrón y afirma que
componentes tiene.
No olvidar que aquí se
aplica cromatografía de
adsorción.
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
CROMTOGRAFÍA DE PAPEL
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PARTE EXPERIMENTAL 2 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
Señalar dos Sembrar Introducir la placa en una
puntos con el Seca cámara cromatografica Retirar ,marque el
Secar los portaobjeto
equidistante ( capilar 3 r con la fase frente del solvente
silicagel ya preparadas
1cm de línea de gotas de móvil(propanona, ,secar ,calcular Rf
partida) muestra butanona y agua).
PARTE EXPERIMENTAL 2 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
RESULTADO : También se trabajó con la mezcla de azul de metileno y anaranjado de metilo
PATRÓN
MUESTRA
7.5cm
Calcular el Rf de la muestra y
compara con el patrón y afirma
2.8cm que componentes tiene.
2.8cm No olvidar que aquí también se
aplica cromatografía de
adsorción.
VIDEO CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA
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O5pg&t=255s
PARTE EXPERIMENTAL 3 CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA
PREPARACIÓN DE LA 3. Agregar la Abrir la llave hasta SIEMBRA 2. Abrir la llave ELUCIÓN
COLUMNA suspensión de que el solvente sea 1.Agregar 2m de la hasta que se 1.Adiconar mas
1.-Introducir algodón silicagel y 1mm por encima de mezcla y adsorbido en la etanol hasta que se
2.-Agregar 10ml de etanol etanol).20ml la superficie. fase fija. eluya la mezcla.
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MÉTODO PARA LAS OBSERVACIONES DE
LAS SUSTANCIAS
Si son
Directo
coloreadas
Observación
de las No modifica la
sustancias sustancia.
Método físico
Revelador ( se Fluorescencia,
usa cuando no Radiactividad
Indirecto son
coloreadas las
sustancias)
Método Reacciona con
Químico la sustancia
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
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gE8
CROMATOGRAMA
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
INTEGRAMOS LO APRENDIDO
FASE MÓVIL
FASE ESTACIONARIA
PARTES
MUESTRA
SOPORTE
SIEMBRA
CROMATOGRAFÍA ETAPAS DESARROLLO
Reparto o
SECADO
partición.
SEGÚN EL FÉNOMENO FÍSICO
Adsorción
QUE PREVALECE
Intercambio
Papel
TIPOS Iónica.
Según el
Material
Capa fina
físico
utilizado
Columna
¡LOGRO ALCANZADO !
MUCHAS
ACTIVIDAD ASINCRÓNICA
• Próxima semana: Presentación de informe de
Laboratorio 5(Capítulo 5):Cromatografía.
• La siguiente semana es el examen parcial de
laboratorio.
MUCHAS GRACIAS
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