Universidad de Panamá
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas
Departamento de Genética y Biología Molecular
Laboratorio 3
Guía de laboratorio y Taller grupal
Asignación grupal
Preparado por: Aidamalia Vargas L.
Biomoléculas
Introducción
El agua, iones inorgánicos y una gran cantidad de moléculas orgánicas pequeñas tales
como, azucares, vitaminas y ácidos grasos corresponden entre el 75 al 80 por ciento
del peso de la materia viva. De todas estas moléculas pequeñas, el agua es la más
abundante (Lodish et al. 2000).
Por otro lado, los compuestos orgánicos más comunes que se encuentras en los
organismos vivos son las denominadas macromoléculas, en las cuales se incluyen las
proteínas, los lípodos, los carbohidratos y ácidos nucleicos.
Las células adquieren y utilizan estas dos diferentes clases de moléculas para
desempeñar funciones de gran importancia. Mientras que las moléculas orgánicas
pequeñas y las moléculas inorgánicas son transportadas del entorno hacia las células,
las macromoléculas deben ser fabricadas dentro de ella (Lodish et al 2000).
(Guía de laboratorio: Introducción a la Biología Celular. Departamento de Genética y
Bio. Molecular, Facultad de Ciencias Naturales y Tecnología, Universidad de Panamá).
Carbohidratos
Los carbohidratos (azúcares o glúcidos) son componentes principales de las células y
además son fuente de energía. Contienen átomos de carbono, hidrógeno y oxígeno en
proporciones de [Link].
Los azucares contienen muchos grupos hidroxilos por tal razón, enlaces glucosídicos
pueden unir un monosacárido con otro monosacárido (Berg et al. 2002). Estas
moléculas pueden clasificarse en tres (3) grupos:
Monosacáridos, una sola molécula. Ejemplo glucosa, fructosa y galactosa.
Oligosacáridos, construidos por el enlace de dos o más monosacáridos por medio de
enlace O-glucosídicos (Berg et al. 2002). Ejemplo, los disacáridos como la sacarosa,
maltosa y lactosa.
Polisacáridos, macromoléculas que pueden formar estructuras. La celulosa y quitina; o
almacenar de energía como por ejemplo el almidón y el glucógeno.
Para la detección de estos tres grupos existen algunas pruebas cualitativas que
pueden darnos evidencia de su presencia. Así tenemos la prueba de Benedict, prueba
de Yodo o Lugol, prueba de Molisch, prueba de Barford, prueba de Seliwanoff, prueba
de Fehling y prueba de Bial (Lozano, 2002).
Lípidos
Los lípidos o grasas son grupos heterogéneos de compuestos de naturaleza
anfipática; es decir, que contienen regiones hidrofóbicas e hidrofílicas. La mayor parte
de los lípidos abundantes en la naturaleza (triacilgliceroles), están formados por ácidos
grasos de cadenas hidrocarbonadas pares, saturados o insaturados.
Los lípidos pueden clasificarse en dos grandes grupos:
Lípidos simples (Acilglicéridos, ácidos grasos, triacilglicéridos y ceras) y;
Lípidos compuestos (fosfoglicéridos, plasmalógenos, esfingolípidos, glucolípidos,
lipoproteínas, entre otros).
También existen varias pruebas para la detección de los lípidos. Entre ellas se puede
mencionar la prueba de acroleína, prueba de iodo, prueba de Lieberman-Burchard,
prueba de saponificación y prueba del Sudan IV.
Proteínas
Las proteínas, derivan su nombre del griego “proteos” que significa lo primero, lo
principal. Tanta es su importancia que constituyen el 50% del peso seco de un ser vivo
(15% del peso total), por lo que representan la categoría de biomoléculas más
abundantes después del agua. Se deduce entonces que realizan una versatilidad de
funciones, sobre todo por la particular relación que tienen con los ácidos nucleicos.
Las proteínas son polímeros complejos, cada una forma la combinación de 20
aminoácidos en diversas cantidades y secuencias (aminoácidos proteicos). Los
aminoácidos presentan característica anfotérica es decir, que pueden comportarse
como ácidos o bases. Cada aminoácido tiene un pH en el que no experimenta carga
neta, este punto se denomina punto isoeléctrico.
Las proteínas son biomoléculas de elevado peso molecular y presentan estructuras
muy complejas.
Las proteínas se clasifican en dos grupos principales de acuerdo con su composición
química:
Las proteínas simples u holoproteínas y las proteínas conjugadas o heteroproteínas.
Las proteínas simples están compuestas solamente por aminoácidos y las proteínas
conjugadas están compuestas de aminoácidos y otras sustancias de naturaleza no
proteica que reciben el nombre de grupo prostético.
A su vez estas proteínas conjugadas pueden ser clasificadas en:
- glucoproteínas (glúcido),
- lipoproteínas (lípido),
- metaloproteínas (ion metálico),
- fosfoproteínas (grupo fosfatos) entre otros, dependiendo de la naturaleza de su
grupo prostético.
La desnaturalización de las proteínas se debe a la pérdida de las estructuras de orden
superior ya sea secundaria, terciaria o cuaternaria, quedando la cadena polipeptídica
reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura tridimensional fija. La
modificación causada por cualquier factor químico o físico influirá en la interacción de
la proteína con el disolvente haciendo que este disminuya su estabilidad en disolución
y provocará la precipitación de la proteína. Estos factores que provocan la
desnaturalización de una proteína se llaman agentes desnaturalizantes, de estos se
distinguen los agentes físicos como el calor y los agentes químicos como los
detergentes, disolventes orgánicos, el pH, la fuerza iónica.
De los ácidos nucleícos hablaremos en otra oportunidad.
En general, los alimentos que ingerimos diariamente, ya sean de origen vegetal o
animal son una combinación de estos compuestos orgánicos. El propósito principal de
esta experiencia de laboratorio es que usted se familiarice con las diferentes pruebas
sencillas que permiten la identificación de la presencia de diferentes compuestos
orgánicos. Por ser pruebas de tipo cualitativo, un simple cambio de color es un
indicador de la presencia o no de estos compuestos.
Esta guía de laboratorio se dividirá en tres partes. En la primera parte encontrará
enlaces a diferentes páginas con vídeos que servirán para entender las pruebas de
identificación de macromoléculas como también para que se haga una idea de cómo
se debieron realizar en un laboratorio a manera presencial.
La segunda parte de esta guía consta de un laboratorio virtual. Ustedes trendrán que
entregar un informe de laboratorio grupal basados en las preguntas efectuadas a lo
largo de la experiencia.
Finalmente, en otro documento se le proporcionará los enlaces para desarrollar
simulaciones que le permitirá realizar un taller grupal con fecha de entrega
posterior al presente informe.
Competencias
• Aprenden a reconocer las distintas biomoléculas.
• Reconocen las distintas moléculas orgánicas mediante pruebas específicas.
Materiales
Una computadora con conexión a internet.
Metodología
Este informe debe ser realizado de manera grupal. La fecha de entrego antes de la
fecha propuesta por su profesora de laboratorio.
I Parte
Moléculas orgánicas
A manera de apoyo les envío los siguientes enlaces, deben verlos antes de hacer el
laboratorio virtual de la II Parte. Esta sección no es sumativa, es formativa.
Información general sobre las biomoléculas:
[Link]
Identificación de carbohidratos, proteína y lípidos:
[Link]
[Link]
[Link]
II Parte
Moléculas orgánicas
En esta sección conocerá algunas de las pruebas utilizadas para la identificación de
los compuestos orgánicos más abundantes: carbohidratos, proteínas y lípidos.
Para realizar esta práctica debe ingresar al siguiente enlace:
[Link]
[Link] (Figura 1).
Figura 1. Vista del portal compuestos orgánicos. Es la imagen que debe
observar al ingresar al enlace brindado.
Siga las indicaciones señalas en la página web:
- Para acceder a las diferentes pruebas, deberá “cliquear” los íconos rotulados
como carbohidratos, proteínas y grasas.
- Inicie con las pruebas de carbohidratos
1- Carbohidratos
Al ingresar a la página de carbohidratos podrá ver la imagen de una molécula,
conteste:
Cuál es el nombre de dicha molécula?
Investigue y diga los nombres de las dos formas utilizadas para representar el
monosacárido que observa. Conoce alguna otra forma de representar la estructura de
los carbohidratos?
En el informe deberá colocar dicha imagen con la traducción de lo que está escrito en
rojo.
Continúe la experiencia haciendo “click” en el siguiente enlace:
- Adjunte en el informe la imagen que observa. Qué se muestra en esta imagen?
- En la siguiente página deberá “cliquear” en la imagen del baño maría.
- Cuál es el color que observe en el tubo?
- Cuál es el color que se observa luego de agregar la glucosa?
- Continúe con la siguiente página. En el informe deberá adjuntas la imagen
mostrada y anotar debajo de ella sus observaciones.
- Prosiga con la siguiente práctica.
- Qué observa? Cuál es el nombre de la siguiente prueba? Adjunte la imagen al
informe.
- Proceda hacer “click” para continuar. Adjunte la imagen con los materiales
mostrados y menciónelos en el informe.
- Prosiga con la prueba “cliqueando” en la imagen posterior derecha.
- Adjunte en el informe la imagen presentada, indique que observa en cada
figura y conteste la pregunta. Cuál es el tubo positivo? Por qué se produce este
cambio de color?
- Felicidades! A terminado con las pruebas de carbohidratos.
2. Proteínas
Ingrese a las pruebas de identificación de proteínas “cliqueando” el ícono de proteínas
(caja morada).
- Adjunte en el informe la imagen que observa, realice la traducción de lo que
está escrito en letras rojas. Conteste, qué significan los círculos o bolitas
verdes con las letras R del esquema de la estructura de la proteína?
- Continúe la experiencia haciendo “click” en el siguiente enlace:
- Adjunte en el informe la imagen que observa e indique el nombre de los
materiales que están presentes en las figuras.
- Añada los 2 ml de la solución como se le indica.
- Adjunte la imagen en el informe e indique cuál es el color que se observa en el
tubo.
- Haga click en la solución de proteínas.
- Qué ocurre luego de agregar la solución de proteínas?
- Continúe y adjunte la imagen que observa en el informe. Qué indica este
cambio de coloración? Cuál de los dos tubos corresponde a la prueba positiva?
3. Identificación de Lípidos
Ingrese a las pruebas de identificación de lípidos “cliqueando” el ícono de grasas (caja
rosada).
- Adjunte en el informe la imagen que observa, realice la traducción de lo que
está escrito en letras rojas. Según lo leído en la introducción de esta guía, qué tipo de
lípidos se presenta en esta imagen? Observe la imagen nuevamente, qué color
corresponde a la región hidrofóbica y qué color corresponde a la cadena hidrofílica? -
- Continúe la experiencia haciendo “click” en el siguiente enlace:
- Adjunte en el informe la imagen que observa e indique el nombre de los
materiales que están presentes en las figuras.
- Añada los 2 ml de la solución como se le indica.
- Proceda con la siguiente página para observar el resultado.
- Adjunte la imagen en el informe e indique cuál es el color que se observa en el
tubo.
- Haga click en la botella de aceite.
- Cuál es el color que observa en el tubo luego de mezclar todas las soluciones?
Adjunte la imagen en el informe y anote sus observaciones.
4. Identificación de compuestos orgánicos en alimentos.
Ingrese a las pruebas de identificación de alimentos “cliqueando” el ícono “foods” (caja
anaranjada).
Encontrará una página con diferentes fotos de alimentos. Ingrese en cada una de esas
fotos para realizar las pruebas de identificación de carbohidratos, proteínas y lípidos.
Figura 2. Página con los alimentos que se les realizará las pruebas de identificación.
Complete el siguiente cuadro.
Coloque un signo positivo (+) cuando el resultado de la prueba sea positivo y un signo
negativo (-) cuando el resultado sea negativo.
Prueba
Benedict Yodo Biuret Sudan IV
Papa
Jugo
Alimento
Almendra
Huevo
Salmón
Leche
Preguntas de evaluación
1. ¿Cuándo se dice que un azúcar es un agente reductor?
2. Explique ¿cómo las reacciones de Benedict y Fehling identifican la presencia
de azúcares reductores?
3. Investigue otras dos pruebas que puedan ser usadas para detectar
carbohidratos, lípidos y proteínas (dos para cada uno).
4. ¿Qué son metales pesados? y ¿cuál es su efecto en los seres vivos?
Referencias
Berg JM, Tymoczko JL, Stryer L. Biochemistry. 5th edition. New York: W H Freeman;
2002. Section 11.2, Complex Carbohydrates Are Formed by Linkage of
Monosaccharides. Available from: [Link]
Lodish H, Berk A, Zipursky SL, et al. Molecular Cell Biology. 4th edition. New York: W.
H. Freeman; 2000. Section 1.2, The Molecules of Life. Available from:
[Link]
Rodrigo, Jordi, Barbany, Montserrat, Gutiérrez-de-Terán, Hugo, Centeno, Nuria B., de-
Càceres, Miquel, Dezi, Cristina, Fontaine, Fabien, Lozano, Juan J., Pastor, Manuel,
Villà, Jordi, & Sanz, Ferran. (2002). Comparison of biomolecules on the basis of
Molecular Interaction Potentials. Journal of the Brazilian Chemical Society, 13(6), 795-
799. [Link]
Guía de laboratorio: Introducción a la Biología Celular. Departamento de Genética y
Bio. Molecular, Facultad de Ciencias Naturales y Tecnología, Universidad de Panamá
[Link]
[Link]
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