Instituto Tecnológico De Jiquilpan
Materia: Análisis instrumental
Maestro: Marcela Arteaga
Alumnos:
Omar Alejandro Bautista Vallejo
Yohaira Martínez
Jiquilpan, Michoacán a 22 de Abril del 2020
Resumen
Espectrofotometría
Es una técnica básica de la caracterización y análisis en bioquímica y biología
molecular cuya finalidad tiene el medir la cantidad de luz absorbida en una
substancia química cuando un haz luminoso pasa a través de la solución
muestra, basándose en la Ley de Lambert-Beer la cual afirma que la cantidad
de luz absorbida por un cuerpo depende de la concentración en la solución.
Esta medición también puede usarse para medir la cantidad de un producto
químico conocido en una sustancia.
Dicha técnica solo puede ser realizada con un instrumento llamado
espectrofotómetro el cual nos permite medir la absorción de la luz de una
muestra química, este está formado por cuatro componentes básicos como lo
son:
1. Fuente de energía: Tiene intensidad constante en el rango de longitud de
onda que cubre.
2. Monocromador: Dispersa la longitud de onda a la muestra
3. Analito(muestra).
4. Detector: Mide la radiación que atraviesa la muestra sin que sea absorbida
por esta misma
Una muestra medida a distintas longitudes de onda se corresponde con el
espectro de absorción, todas la moléculas que absorben luz se caracterizan
con dicho espectro, por lo que al realizar el espectro de absorción de una
muestra nos ayuda a caracterizar las moléculas que la componen.
Cuando se analiza una muestra se debe identificar cual es el color que mas
predomina en la misma así sabremos donde se puede encontrar en el espectro
ultravioleta visible.
Un ejemplo de esto podría ser al analizar una porción de alguna planta,
podemos ver que el color más predominante es el color verde por lo cual se
puede concluir que su longitud de onda se encuentra entre 500 y 570
nanómetros (nm).
Cuando mayor sea la distancia que atraviese el haz de luz sobre la muestra
esto significara que es mayor la absorbancia proporcional al número de
moléculas involucradas en la muestra.
La luz que se concentra en las zonas visibles y ultravioletas del espectro que
cada una de las moléculas puede absorver depende de el numero de dobles
enlaces que posee.
Las aplicaciones principales son:
Determinar la cantidad de concentración en una solución de algún
compuesto utilizando las fórmulas ya mencionadas;
Ayudar en la determinación de estructuras moleculares;
La identificación de unidades estructurales específicas, ya que estas
tienen distintos tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomerías).
Determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base.
La absorbancia de una sustancia es proporcional a su coeficiente de extinción
molar, a la concentración de dicha sustancia y a la longitud de la cubeta de
medida que por lo general es de un centímetro.
Todo esto ya viene involucrado con la ley de lambert-beer que trata sobre la
iluminancia de una superficie situada a una cierta distancia de una fuente de
luz. Determina que la iluminación producida por una fuente luminosa sobre una
superficie es directamente proporcional a la intensidad de la fuente y al coseno
del si ángulo que forma la normal a la superficie con la dirección de los rayos
de luz y es inversamente proporcional al cuadrado de la distancia a dicha
fuente.
Tambien podemos medir la concentración conociendo la absorbancia y el
coeficiente de extinción molar
Según la ley de Beer, si hiciéramos que un rayo de luz atravesara el primer
vaso, la cantidad de luz que saldría del otro lado sería mayor que si
repitiéramos esto en el segundo, ya que en este último las ondas
electromagnéticas chocan contra un mayor número de átomos o/y moléculas y
son absorbidos por estos.
