MAICOL ANTONY CASTREJON GARCIA – MICROHIDROBIOLOGIA –
INGENIERIA HIDRAULICA
ejemplos de Colorantes según las clasificaciones dadas:
COLORANTES ACIDOS Fucsina acida
Azul de Anilina
Eosina
Naranja G
COLORANTES BASICOS Verde de Metilo
Azul de metilo
Pironina G
Azul de toluidina
COLORANTES NEUTROS Pimenton
azafran
COLORANTES DE ORIGEN ANIMAL carmin de cochinilla
quermes
la sepia
pigmento nacarado de perlas
COLORANTES DE ORIGEN VEGETAL Hematoxilina
Orcilla
Toransol
Madera roja
Madera amarilla
Madera de sandalo
Describir las observaciones microscópicas observadas en clase:
Observación Descripción
Tinción de Ziehl Neelsen Tinción para el basilo de Cosh, se basa en la
pared de bacilo de cosh, que se hace a todos
los pacientes que tienen tuberculosis
Tinción Simple Se usa un solo colorante, que en su mayoría
son colorantes básicos
Tincion compuesta y diferencial Utiliza mas de un colorante, por lo menos 2
colorantes, la más útil es la coloración
GRAM, y es fácil diferenciar las GRAM + y las
GRAM -
Observaciones microscópicas de cultivos con tinción de Gram
Observación Descripción
Tinción de Ziehl Neelsen Tinción para el basilo de Cosh, se basa en la
pared de bacilo de cosh, que se hace a todos
los pacientes que tienen tuberculosis
Tinción Simple Se usa un solo colorante, que en su mayoría
son colorantes básicos
Tinción compuesta y diferencial (utilizan más de un colorante y permiten la
agrupación de las bacterias de acuerdo a su
diferente afinidad tintorial
DISCUSIÓN: Se hará en base a las siguientes preguntas: (Desarrollarlo en hoja adjunta)
1) ¿Cuáles son las fuentes de error más frecuentes en la preparación y fijación de frotis?
- No esterilizar correctamente el asa de inoculación
- No haber dejado enfriar el asa completamente, por lo que al tomar la muestra se
destruirían los microorganismos
- Tomar con el asa una muestra y después volver a tomar otra muestra de
diferentes microorganismos sin haber esterilizado
- Acercarlo demasiado al mechero o acercarlo por mucho tiempo
- Olvidar fijar con etanol los microorganismos
2) Investigue cuáles son las estructuras celulares o moleculares responsables de la tinción
simple realizada. De ejemplos de otros colorantes que podrían utilizarse
La tinción simple es un procedimiento en el cual agregamos solo un colorante a la
muestra y tiñe toda la célula, proporcionándonos información como la forma, el
tamaño, las estructuras presentes en el citoplasma y la agrupación de los
microorganismos. En estas tinciones se usa un único colorante de carácter básico
como puede ser azul de metilo o violeta de genciana
3) Explique en forma completa la teoría que explica la tinción Gram. Investigue otros dos
ejemplos de Tinción diferencial
Tincion Gram:
Se utiliza para diferenciar tipos de bacterias las muestras bacterianas se extienden
sobre una porta, se tiñen con un colorante violeta, se tratan con alcohol acetona (un
decolorante) y finalmente se contratiñen con un colorante rojo. Las bacterias
grampositivas retienen el primer colorante, y aparecen azul oscuro al microscopio, por
ejemplo, las bacterias que tienen una gruesa capa de peptidoglucano en su pared. En
las bacterias gramnegativas, el alcohol acetona lava el colorante violeta y les permite
tomar la contaminación, de forma que aparezcan rojas al microscopio. La pared celular
de estas bacterias tiene una capa externa de lipoproteína sobre una delgada capa de
peptidoglucano. La tinción se denomina así en honor del bacteriólogo danes H.C.J
GRAM (1953-1983), que fue quien primero describió la técnica después modificada en
1884
4) Explique porque en la Coloración Ziehl Neelsen, las bacterias deben ser sometidas a
Calor por tres Veces
Existen bacterias y géneros relacionados que resisten al tratamiento decolorante y
retienen al colorante.
5) Si se aplica la tinción de Gram de Bacillus sp. con endosporas ¿Cómo se observaría la
célula vegetativa y la endospora? ¿Por qué?
Solo se observaría bacilos debido a que en la técnica de tinción de Gram funciona para
estas células con membrana menos permeable y en las endosporas no ocurriría tinción
por tener membrana más gruesa (membrana-pared celular-membrana)
CONCLUSIONES: De acuerdo a sus resultados, expresa tus conclusiones
- Se aprendió a diferenciar las técnicas de tinciones que se utilizara para el tipo de
muestra y poder identificar la coloración.
- Se aprendió el procedimiento para poder realizar una correcta tinción
- Las técnicas de tinción son de gran importancia y muy útiles.
- Se aprendió sobre los errores más frecuentes al realizar la fijación de la muestra
- Identificar los tipos de tinción que se va a realizar en el laboratorio
- Los instrumentos y reactivos que se va a realizar para las prácticas de tinción en el
laboratorio
BIBLIOGRAFIA
Artículo de revisión, Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología, Vol 3, Num. 1
enero-Marzo 2014 pp 10-18
Ramos, M.. (2014). Metodos y tecnias detincion. Septiembre 10, 2015.
PRESCOTT MICROBIOLOGIA QUINTA EDICION PAG. 70
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