“AÑO DE LA UNIVERSALIZACION DE LA SALUD”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA

PERUANA
FACULTAD DE FARMACIA BIOQUIMICA

TÍTULO: REGULACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA:

ALOSTERICA: CINETICA. TIPOS, CARACTERISTICAS. EFECTO
HOMOTROPICO, EFECTO HETEROTROPICO. MODIFICACION COVALENTE.

ASIGNATURA: Bioquímica I

DOCENTE: Q.F. Wilfredo Oswaldo Gutiérrez Alvarado

HORARIO: G1 - Martes: 2 a 5 p.m.

ALUMNAS(OS):
 Campos Vásquez Tanith
 Egoavil Ramírez Marco
 Flores del Águila Rossana Geraldine
 Lozano Diaz Lucia Esther
 Pinedo Sánchez Bryan
 Torres Pérez Eudoro
 Valera Amasifuén Mery Lorena

SEMESTRE: V CICLO: III

IQUITOS – PERÚ
2020
 REGULACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA:
ALOSTERICA: CINETICA. TIPOS, CARACTERISTICAS. EFECTO
HOMOTROPICO, EFECTO HETEROTROPICO. MODIFICACION
COVALENTE.
1. INTRODUCCION
En la naturaleza existen enzimas y transportadores que participan en
múltiples procesos y llevan a cabo diferentes reacciones químicas en una
célula. Sin embargo, muchas de estas enzimas no presentan una cinética
clásica tipo Michaelis-Menten, donde la gráfica de velocidad inicial vs la
concentración de sustrato en lugar de tener un comportamiento
hiperbólico presenta un comportamiento sigmoidal. A este tipo de
enzimas se les denomina enzimas alostéricas, las cuales poseen múltiples
sitios de unión a diferentes ligandos denominados sitios de alostéricos
(diferentes al sitio activo) estos ligandos pueden modificar sus
propiedades cinéticas. En este tipo de enzimas se puede presentar un
fenómeno denominado cooperatividad positiva, cuando la unión de un
ligando facilita la unión de la siguiente molécula e incrementa la afinidad
por los sitios vacantes. Si el ligando en cuestión es el sustrato se denomina
efecto homotrópico, pero si es una molécula diferente (un activador o un
inhibidor) se denomina efecto heterotrópico.
Las enzimas alostéricas son enzimas que cambian su conformación al
unirse un efector, lo que conduce a un cambio aparente en la afinidad de
unión de otro Ligando (bioquímica) en un sitio distinto de la molécula. Esta
"acción a distancia" de la unión de un ligando que afecta a la unión de otro
en un sitio claramente diferente es la esencia del concepto de alostería o
alosterismo. La alostería juega un papel crucial en muchos procesos
biológicos fundamentales, entre los que se incluyen la señalización celular
y la regulación del metabolismo.
Las moléculas efectoras, que pueden ser el propio sustrato (efector
homotrópico) o alguna otra molécula pequeña (efector heterotrópico),
pueden hacer que la enzima sea más o menos activa alterando el
equilibrio entre los estados de mayor y menor afinidad. Los sitios donde se
unen los efectores heterotrópicos, llamados sitios alostéricos, son
generalmente independientes del sitio activo, aunque están acoplados
termodinámicamente.

2. OBJETIVOS

 La alostería juega un papel crucial en muchos procesos biológicos

fundamentales, entre los que se incluyen la señalización celular y la
regulación del metabolismo.

 Permite que las enzimas más alostéricas varíen mucho su actividad

catalítica en respuesta a pequeños cambios en la concentración del
efector.
3. MARCO TEORICO
El comportamiento alostérico se define como la situación en que una proteína ve
alterada su actividad como consecuencia de la unión de una molécula en un sitio
diferente al centro activo.
La proteína alostérica puede ser una enzima o bien tener otra función. La molécula que
se une alterando su actividad se denomina efector alostérico. El efecto alostérico está
normalmente asociado a un cambio conformacional en la proteína, como
consecuencia de la unión del efector.
Podemos estudiar la alostería a través de varios ejemplos:
 Actividad enzimática de la trombina. Se trata de una proteína monomérica
(aunque formada por dos cadenas), en la que no existe cooperatividad.
Ejemplos de modulación por efectores alostéricos negativos.
 Actividad enzimática de la glucoquinasa. Esta es también una proteína
monomérica, con cinética sigmoidal. Ejemplos de modulación por efectores
alostéricos positivos.
 Oxigenación de la hemoglobina modulada por la unión del BPG. Se trata de una
proteína tetramérica que presenta cooperatividad. Ejemplo de modulación por
un efector alostérico negativo.

3.1 ENZIMA ALOSTERICA

Una enzima alostérica es una enzima cuya actividad está regulada
mediante un centro alostérico, que es un sitio, distinto del centro activo
de la enzima, al que se une un regulador (llamado regulador alostérico) de
manera reversible y no covalente.
 Poseen estructura cuaternaria (múltiples subunidades y sitios
activos
 Poseen una cinética sigmoide: indica cooperatividad entre las
subunidades, es decir la unión de un S a uno de los sitios afecta el
enlace en los otros sitios.
 Son reguladas por la unión de moduladores/efectores positivos o
negativos
 El tipo de regulación puede ser Homotrópica o Heterotrópica
 Posee dos sitios receptores
Sitio Activo: Sitio de unión del Ligando-L / Sustrato
Sitio Alosterico: Sitio de unión del modulador/efector

4. CINÉTICA DE LAS ENZIMAS ALOSTÉRICAS.

Su comportamiento cinético esta alterado por las variaciones de la
concentración del modulador alostérico. Las enzimas homotrópicas
muestran una curva sigmoidal en las gráficas de velocidad de Michaelis -
Menten. La curva sigmoidal implica que la unión de la primera molécula
de sustrato con la enzima intensifica la unión de las moléculas de S
subsiguientes a los otros centros activos.
4.1 PROPIEDADES CINÉTICA
Se han propuesto principalmente dos modelos para describir el
mecanismo básico de la enzima alostérica:
a) El estado de baja actividad, baja afinidad “tenso” o T
b) El estado de alta actividad, alta afinidad “relajado” o R.
Los activadores alostéricos son moléculas que al unirse estabilizan el
estado R, y por lo tanto permiten que la enzima tenga mayor afinidad por
el sustrato primario. Por su parte los inhibidores alostéricos son moléculas
que estabilizan el estado T y consecuentemente la enzima alostérica
tendrán poca afinidad por el sustrato primario.
Por lo tanto, existen moléculas que se pueden unir al sitio de regulación
alostérica y que funcionen como activadores o inhibidores, su unión de
estas moléculas es de manera reversible.
4.2 MECANISMOS DE ACTIVIDAD REGULADORA DE LAS ENZIMAS
ALOSTÉRICAS
Estudia los mecanismos moleculares mediante los cuales la unión del
modulador al centro regulador puede, alterar la actividad del centro
catalítico. Esta explicación se ha obtenido de los estudios con la
hemoglobina, a través de dos modelos: Secuencial y el de Simetría.
a) Modelo de simetría.
Modelo propuesto por Monod (1965). Se propuso que la proteína tiene
solo dos estados globales de "todo o nada”. Establece que la unión de la
primera molécula de sustrato incrementa la tendencia de las restantes
subunidades a experimentar transición a la forma de elevada afinidad, a
través de un efecto de todo o nada. Hallándose todas las subunidades en
estado de baja o elevada afinidad.
b) Modelo secuencial.
Modelo propuesto por Koshland (1966). Aplicable a las enzimas alostéricas
que poseen múltiples subunidades y que se suponen que existen en dos
conformaciones diferentes, donde cada una puede experimentar cambios
secuenciales individuales en su conformación entre los extremos de todo
o nada. Pueden existir diversos estados de conformación intermedios,
cada uno con su propia actividad catalítica intrínseca. Este modelo
propone una sintonización más fina de la actividad de la enzima alostérica.
4.3 CLASES DE ENZIMAS ALOSTÉRICAS POR CINÉTICA
 K efector altera la Km, pero no la Vmax: Doble recíprocos similar a
inhibidor doble recíprocos similar a inhibidor competitivo.
 V efector altera la Vmax, pero no la Km: Incrementan o disminuyen
la velocidad de descomposición del complejo ES en productos, la
constante de velocidad catalítica K queda afectada, no se modifica
la constante de fijación de sustrato.
La cinética que muestra una enzima alostérica es diferente al clásico
gráfico hiperbólico, pues en lugar de tener a lugar este, se muestra un
gráfico sigmoideo debido al efecto de cooperatividad entre las diferentes
subunidades que conforman y dan lugar al efecto alostérico. En el gráfico
sigmoideo se muestra como la presencia de un inhibidor o activador
alostérico afecta el valor de Km, pero no así el valor de Vmax. También en
este gráfico se puede observar los dos estados T, hacia el origen, y R en la
parte superior.
5. TIPOS DE ENZIMAS ALOSTERICA
Existen dos tipos de enzimas alostéricos:
 Monoméricos: Que están compuestos por una sola unidad y son
muy escasos. Los monómeros pueden ser de origen natural o
sintético.
 Heterotropicos: Estos son producidos por interacción de un efector
alostérica y un sustrato y se habla de la regulación alostérica,
homotrópicos los cuales son producidos por moléculas idénticas del
sustrato, se habla de una cooperatividad y oligoméricos que están
compuestos por varias unidades llamadas protómeros y conforman
la mayor parte de enzimas.

6. REACCIÓN DETERMINANTE.
Se asigna a la primera etapa en una secuencia de reacciones
multienzimáticas, que es irreversible en condiciones intracelulares.
Constituye una estrategia de la célula para regular una ruta metabólica,
desde la etapa inicial y así lograr la máxima economía de metabólitos.
6.1 CONTROL DE LAS ENZIMAS ALOSTÉRICAS.
Las enzimas alostéricas muestran dos tipos de control diferentes:
Heterotrópico y homotrópico, según la naturaleza del modulador.
a) Efecto homotrópicas.
El sustrato actúa, también como modulador. Estas enzimas contienen dos
o más centros de unión para el sustrato. La modulación dependerá de
cuántos sean los centros del sustrato que están ocupados.
b) Efecto heterotrópicas.
Son estimuladas o inhibidas por un modulador diferente a la del sustrato
7. CARACTERÍSTICAS

1. Un modulador negativo, producirá un incremento en la Km

aparente y el modulador positivo un descenso de ésta.
2. Un modulador negativo baja la Ve de reacción a una concentración
de sustrato saturante y constante. Mientras que el modulador
positivo producirá un incremento en la Ve.
3. Las enzimas alostéricas que responden a moduladores (+) y (-) con
cambio de la Km aparente, se asignan como enzimas K y las que
afectan la Vmax, como enzimas M.
4. Una enzima alostérica puede perder su regulación por los
moduladores, sin afectar su actividad catalítica. Proceso llamado
desensibilización de la enzima. En estas condiciones la enzima se
comporta según la cinética descrita por Michaelis-Menten.

Las enzimas alostéricas es que no siguen la cinética de Michaelis -

Menten. O sea que, si se hacen experimentos como los que se
describieron en la sección en la que se estudian los inhibidores,
pero usando ahora moduladores positivos o negativos y una enzima
alostérica, al graficar los puntos obtenidos ([S], v0)
En la figura se muestra la Cinética
de las enzimas alostéricas sin
modulador o con la presencia de
moduladores positivos o
negativos.
Para analizar los cambios tan
dramáticos que ocurren sobre la
velocidad de reacción de una
enzima alostérica, se ha tomado
en el eje de las abscisas, una
determinada concentración de
sustrato [Sx] y en las ordenadas se observan las velocidades de reacción
de la enzima a la misma concentración de sustrato, pero, sin modulador,
con modulador negativo o positivo. Cuando hay un modulador negativo la
velocidad de reacción v01 se hace muy pequeña, comparada con la que se
observa cuando existe en el medio un modulador positivo v03.

8. MODIFICACION COVALENTE
Una variedad de grupos químicos de las enzimas puede ser modificados en
forma covalente y reversible
Esta modificación puede conducir a cambios en la actividad enzimática.
 Modificaciones más comunes:
 Fosforilación - defosforilación
 Adenilación - deadenilación
 Metilación – demetilación
 Uridilación – deuridilacón
 Ribosilación – deribosilación
 Acetilación - deacetilación

9. CONCLUSIÓN
Una enzima alostérica es una enzima cuya actividad está regulada
mediante un centro alostérico, que es un sitio, distinto del centro activo
de la enzima, al que se une un regulador (llamado regulador alostérico) de
manera reversible y no covalente. La unión de este regulador modifica la
estructura tridimensional de la enzima y llega a afectar la configuración
del sitio activo, por lo que aumenta o disminuye su actividad, según el
caso.
El alosterismo es una de las principales formas de regulación en la célula
debido a que puede producir cambios rápidos y fácilmente reversibles en
la actividad de las enzimas (y, por lo tanto, en el metabolismo) sin
depender de que el regulador tenga una estructura similar al sustrato de
la enzima (lo que puede ayudar a conectar vías metabólicas). Muchos
fármacos actúan uniéndose al sitio alostérico de las enzimas, como los
inhibidores de transcriptasa inversa no nucleósidos.
[Link]

 [Link]
enzimas-alostericas/enzimas-reguladoras-o-enzimas-
[Link]

 [Link]
19952014000200006

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