Aguilar Bazán Ximena

PRACTICA 6. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

RESUMEN (ABSTRACT)

La cromatografía es un método de separación de sustancias, en esta práctica se analizó la

cromatografía en capa fina ésta es muy útil en muchos sentidos, la podemos usar para ver la
pureza de un compuesto, el avance de las reacciones y de igual manera si éstas son limpias o
generan varios productos, la cromatografía en capa fina basa la separación de las sustancias de
acuerdo a la polaridad de éstas, entre más polar sea un compuesto recorrerá una menor distancia
en nuestra muestra, de igual manera entre menos polar sea se alejará más, además se analizó el
efecto de la concentración y la identificación de compuestos.

INTRODUCCIÓN

La cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más compuestos por
distribución entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las
sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La
fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido. Todas
las técnicas cromatográficas dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre
esas dos fases. Según lo anterior, son posibles varios tipos de cromatografía, dependiendo de la
naturaleza de las dos fases involucradas: pueden ser sólido-liquido (capa fina, papel o columna), o
bien liquido-liquido o gases liquido (fase vapor). Todos los sólidos finamente pulverizados tienen el
poder de adsorber en mayor o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente,
todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de
adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía.

El símbolo Rf significa “Relación de frentes”, es una relación de distancias, y se expresa como el

cociente entre la distancia recorrida por la sustancia y la distancia recorrida por el disolvente hasta
el frente del eluyente:

El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra: tipo de adsorbente,
eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturación, etc. Tiene una
reproducibilidad de  20%, por lo que es mejor correr duplicados de la misma placa.
En la cromatografía en capa fina (ccf), se utiliza una placa recubierta con el adsorbente (fase
estacionaria) en forma de una capa delgada, de espesor constante, adherida sobre un soporte
rígido, que puede ser una placa de vidrio, aluminio o poliéster. Hay adsorbentes que contienen un
indicador de fluorescencia para facilitar la identificación de muestras. Si no se usa indicador y los
componentes no son coloridos, se requerirán otras técnicas de revelado. Punto de aplicación
Muestra Frente del eluyente El eluyente (fase móvil) ascenderá por capilaridad por la placa y
arrastrará los componentes en forma diferenciada a lo largo de ésta, produciendo “manchas” de
los componentes. El grado de elución de las sustancias dependerá tanto de su propia polaridad
como de la polaridad del eluyente utilizado.

El gel de sílice, también conocido como Silicagel, es un producto absorbente que puede diferenciar
la adsorción de diferentes moléculas, actuando como un adsorbente selectivo en procesos de
cromatografía, tanto en columna como en placa fina.

RESULTADOS
ANÁLISIS DE RESULTADOS

El primer punto a analizar es el efecto que tiene la concentración en una cromatografía de capa
fina, con concentración nos referimos a cuanta cantidad de muestra problema coloquemos, como
sabemos el resultado de una cromatografía en capa fina es la observación de manchas, el efecto
que tiene la concentración realmente es el tamaño que nuestra mancha tendrá, es decir a mayor
concentración habrá una mancha de mayor proporción, en este caso tuvimos una pequeña
variación que fue que las manchas se presentaban alargadas, esto lo debemos a que el punto de
aplicación de las muestras en donde se debía poner más de una gota de muestra no fue en el
mismo lugar, aunque no fue un problema mayor ya que la variación del Rf no fue significativa.

El siguiente punto que se analizó en la práctica fue el efecto de la polaridad, la distancia que
nuestra muestra recorra estará en función de la polaridad, en el caso de la práctica analizamos tres
casos, con tres distintos eluyentes, en la primera el eluyente utilizado fue hexano, en éste caso
podemos notar que el valor de Rf es cero en ambas muestras, podemos afirmar entonces que
nuestras muestras son polares ya que se retuvieron en el punto de aplicación ya que no tuvieron
interacción con el eluyente que es un compuesto no polar, de esta manera justificamos que no
hayan recorrido distancia alguna nuestras muestras ya que solo experimentaron interacciones con
la fase estacionaria, es decir, la sílica gel la cuál es muy polar; el segundo eluyente fue el acetato
de etilo, sabemos que este es un compuesto medianamente polar, de acuerdo a lo observado en
los resultados encontramos que el Rf tiene valores distintos para cada muestra, en el caso de la
muestra dos encontramos un Rf de 0.183 lo cual indica que nuestro compuesto es muy polar ya
que éste se retiene más hacia el punto de aplicación, en el caso de la muestra tres encontramos
que el valor del Rf es de 0.683 esto nos indica una polaridad menor que el anterior ya que se
desplazó más que la muestra dos; en el caso del eluyente usado

En la tercera parte es metanol, encontramos una cuestión un poco similar a la anterior, pero en
este caso notamos que la muestra número dos tuvo un valor de Rf de 0.51 este valor nos indicaría
que estamos usando el eluyente ideal de esta muestra y que tiene una polaridad significativa ya
que se encuentra justo en el medio de nuestra placa, en relación al valor obtenido con la muestra
número tres observamos un valor de 0.73 lo cual indica que este compuesto si bien es polar es
mucho menos que la muestra dos. Podemos afirmar que la distancia recorrida dependerá de la
polaridad de nuestro eluyente y de las interacciones que tenga con nuestra muestra problema, en
este caso observamos una polaridad mayor en la muestra número dos que en la número tres, por
lo que podríamos decir que la muestra dos es polar y la tres es medianamente polar. El tercer caso
en analizar fue identificar cuando un compuesto o una muestra es pura, utilizamos el mismo
principio de polaridad en este caso, cuando una muestra es pura solo encontraremos una solo
mancha en nuestra placa ya que todo el compuesto tiene la misma polaridad ya que es un único
compuesto, en el caso de que el compuesto o muestra no sea pura encontraremos dos o más
manchas en el cromatograma esto nos afirma que tenemos más de una sustancia presente en
nuestra muestra, en el caso de que las polaridades de las sustancias presentes sean distintas, esto
es lo que podremos apreciar en la placa realizada.
CONCLUSIONES

La cromatografía en capa fina resulta un método muy útil, si bien no tanto para separar sustancias
si es muy útil utilizar este principio de separación para observar diferentes situaciones de una
muestra problema como es la pureza o la identificación de compuestos presentes en ésta muestra
de igual manera aplicamos esto para saber cuándo una reacción ya ha terminado o no, para lograr
observar un buen cromatograma debemos de tomar en cuenta siempre la polaridad tanto del
compuesto a analizar así como del eluyente, así podremos ver las diferencias de Rf y asegurar los
puntos anteriores por la distancia recorrida de cada sustancia y cuando son distintas o cuando son
las mismas.

CUESTIONARIO

1. ¿Cómo se elige el eluyente para cromatografía en capa fina?

Se busca un eluyente en base a la sustancia a identificar o purificar, tomando en cuenta la
polaridad de ella, si se tiene una sustancia polar se elegirá un eluyente polar para que este
la pueda correr con facilidad
2. ¿Por qué se dice que la cromatografía en capa fina es un criterio parcial y no total de
identificación?
Debido a que se llega a tener casos en los que dos muestras corren a la misma velocidad y
distancia, estas siendo diferentes, por ende no se podrían identificar correctamente por
ello es un criterio no total de identificación
3. ¿Cuál será el resultado de los siguientes errores en cromatografía en capa fina?

 Aplicación de solución muy concentrada: Puede afectar en el caso de que lo Rf de las

sustancias sean muy próximos y por tanto no pueda llevarse a cabo una separación
eficiente
 Utilizar eluyente de alta polaridad: Puede desplazar demasiado a la muestra lo cuál
causaría errores en el momento en que se efectuara el cociente para el cálculo de Rf,
 Emplear gran cantidad de eluyente en la cámara de cromatografía: La sustancias se
disolvería en el mismo eluyente antes de ser arrastrada en la fase estacionaria por el
mismo eluyente, y por tanto la cromatografía no se llevaría a cabo de forma eficiente

4. El valor del Rf ¿depende del eluyente utilizado?

Si porque el valor de Rf es calculado con la distancia que el eluyente corre la sustancia

5. Qué significa que una sustancia tenga:

 Rf < 0.5: el eluyente es de muy baja polaridad para la separación

 Rf = 0.5: el eluyente es el adecuado para la separación
 Rf > 0.5: el eluyente es de muy alta polaridad para la separación

BIBLIOGRAFÍA

Vogel A. I., Practical Organic Chemistry, 5 ed., Longman Scientific & Technical, London, 1989.