BIOTECNOLOGÍA
INDICE
1 GENERALIDADES............................................................................................................................2
1.1 Introducción................................................................................................................................2
1.2 ANTECEDENTES......................................................................................................................3
1.3 JUSTIFICACIÓN........................................................................................................................5
1.4 OBJETIVOS................................................................................................................................5
1.4.1 Objetivo General................................................................................................................5
1.4.2 Objetivos Específicos........................................................................................................5
2 BIBLIOGRAFIA..................................................................................................................................6
INFORME
OBTENCIÓN DE LEVADURAS
BIOTECNOLOGÍA
1 GENERALIDADES
1.1 Introducción
Una levadura es un hongo unicelular con un único núcleo que se reproduce de forma
asexual por gemación y división transversal o por reproducción sexual mediante la
formación de esporas. Cada yema que se separa puede crecer y convertirse en una
nueva levadura, y algunas se agrupan para formar colonias. La morfología de las
levaduras puede determinarse mediante observación al microscopio óptico.
Normalmente son ovales, esféricas o cilíndricas, con un diámetro promedio de 10 μm.
Las levaduras son capaces de crecer como anaerobios facultativos si disponen de
oxígeno las levaduras realizan una respiración aeróbica para metabolizar los azúcares
hasta dióxido de carbono y agua, si carecen de oxígeno fermentan azúcares
produciendo etanol y dióxido de carbono.
Las levaduras son microorganismos de alto interés agroindustrial, biotecnológico y
científico, tienen funciones de importancia en diversos procesos de transformación en
la industria alimentaria y no alimentaria. Entre los sectores donde son empleadas se
encuentra el de panificación, cervecería, vinícola, etanolero y farmacéutico. Las
levaduras fueron en un principio aisladas y utilizadas en el ámbito comercial en el
año1970 y muchas de las cepas de las levaduras de este tiempo se encuentran en
uso en la actualidad.
El aislamiento y reproducción de la levadura constituye un proceso largo y de gran
trabajo. Primero se identifican las cepas aisladas por lo general en los viñedos, frutas
(uvas) y luego se analizan las características de fermentación.
Existen varios métodos de aislamiento de levadura, en el presente trabajo se
desarrollaran los pasos realizados durante un tiempo de aproximadamente de 4
meses para el aislamiento, purificación, identificación de las mismas que se
encuentren presentes en un mosto de uvas y con resto de cascaras de manzanas
utilizadas en el proceso.
BIOTECNOLOGÍA
1.2 ANTECEDENTES
El aislamiento de levaduras data casi desde el momento en que Charles Cagniard de la
Tour descubriera en el año 1836 la existencia de las levaduras y además formulara la
hipótesis de que su principal labor radicaba en la transformación de azúcares en alcohol
y ácido carbónico (Dubos, 1960), y que Louis Pasteur, en 1857 lograra demostrar que
las fermentaciones tienen un vínculo directo con el desarrollo de microorganismos,
convenciendo al mundo científico de que son procesos bioquímicos celulares que se
generan naturalmente o a nivel de laboratorio. Posterior a esto, investigadores
concentran sus esfuerzos en la búsqueda de levaduras (y su utilidad) presentes en
diferentes tipos sustrato; tractos digestivos de animales, granos, frutas, suelos, ríos,
lagos y hasta en el mar.
En Suecia, se han aislado y caracterizado levaduras presentes en el intestino de peces
como salmón (Salmo gairdneri) y rodaballo (Scophtalmus maximus) (Andlid., et al,
1998) obteniéndose especies levaduriformes como Debaryomyces hansenii,
Saccharomyces cerevisiae, Rhodotorula rubra, y R. glutinis, en Chipre han aislado y
caracterizado levaduras epifitas asociados a las variedades de uva (Vitis vinifera sp
vinífera) “Cabernet Sauvignon” y “Maratheftiko” (Pantelides., et al, 2015), obteniendo
aislados de A. pullulans (67,3% de la población total identificado, 37 aislamientos),
Cryptococcus magnus (16,4%, 9 aislamientos), Hanseniaspora uvarum (5,5%, 3
aislamientos) , Candida zeylanoides (3,6%, 2 aislamientos) , Candida sake (3,6%, 2
aislamientos) , Rhodotorula mucilaginosa (1,8%, 1 aislado) y Pseudozyma aphidis
(1,8%, 1 aislado), también lo han hecho en Brazil, aislando y caracterizando levaduras
de granos de café indígenas durante su etapa de fermentación húmeda (De Melo., et al,
2014), el resultado obtenido fueron las especies P. fermentans (28 aislados), P. kluyveri
(16 aislados), C. grabata (12 aislados), C. quercitrusa (8 aislados), Saccharomyces sp.
(7 aislados), P. guilliermondii (7 aislados), P. caribbica (4 aislados) y H. opuntiae (4
aislados), en México se encuentra la Colección de Levaduras Marinas del Centro de
Investigaciones Biológicas del Noroeste (CIBNOR), conformada por 64 aislamientos
pertenecientes a seis géneros (Aspergillus, Candida, Debaryomyces, Exophiala,
Rhodotorula y Yarrowia) (Ochoa & Vázquez-Juárez, 2004). También cobran importancia
los estudios donde se han aislado y caracterizado levaduras presentes en sustratos
como la leche y la salmuera del queso. En Dinamarca, por ejemplo, se han obtenido
BIOTECNOLOGÍA
aislados en leche cruda y salmuera del queso (Van den Tempel & Jakobsen, 1998), en
el primer sustrato se identificaron 37 aislamientos, entre las levaduras predominantes
se encuentran incluidas Candida famata, Candida catenulata, Candida lipolytica,
Candida krusei y Trichosporon cutaneum, y en el segundo sustrato se identificó un total
de 29 aislamientos, de los cuales las levaduras que mostraron mayor predominancia
fueron C. famata y Candida globosa.
Otro estudio que se destaca es el de Fajardo & Sarmiento (2007), donde evalúan la
melaza de caña como sustrato para la producción de Saccharomyces cerevisae. En esa
investigación se realizaron cultivos de dos cepas levaduriformes, una de
Saccharomyces cerevisae nativa y la otra de Saccharomyces cerevisae reconocida
como prebiótico en el comercio, utilizando diferentes concentraciones de melaza de
caña (10%, 20% y 30% (P/V)), con el fin de determinar la concentración adecuada para
obtener la mayor concentración de biomasa. Los resultados obtenidos mostraron que
los valores más altos de crecimiento se encontraron en la cepa de Saccharomyce
cerevisae nativa a una concentración de 20% (P/V) de melaza de caña con una
-1 -1
productividad de 2,769 gL h , mientras que en la otra cepa se evidenció una
-1
productividad de 0,233 gL h -1. Además se evidenció que Saccharomyces posee la
enzima invertasa la cual hidroliza la sacarosa y es asimilada con mayor facilidad, y que
el medio de melaza de caña al 20% (P/V) es un medio medianamente productivo y
altamente selectivo para Staphylococcus aureus.[ CITATION JUA15 \l 3082 ].
1.3 JUSTIFICACIÓN
Las levaduras se encuentran en la mayoría de las frutas y de las flores y en los
exudados de las plantas. Estas levaduras fermentan los azúcares, produciendo CO2 y
BIOTECNOLOGÍA
etanol y se consideran los principales microorganismos empleados en la fermentación
en el proceso de obtención del bioetanol y también llevan a cabo reacciones de
importancia crucial para la elaboración de productos como el vino, cerveza cervezas
yogurts, etc. Así mismo se consideran para la producción de enzimas, saborizantes,
pigmentos, aminoácidos; como biocatalisis se utilizan para estudios farmacéuticos e
intermediarios químicos, aplicación en biorremediación y degradación de
contaminantes, entre otros
Desde el punto de vista biotecnológico las levaduras son los microorganismos de mayor
impacto para el sector agroindustrial debido a la gran cantidad de procesos donde
intervienen. Estos involucran desde una fermentación clásica hasta la injerencia en los
procesos de respiración en frutas.
Es por eso que es necesario indagar amplio campo de las levaduras debido a sus
importantes aplicaciones en la industria de tal manera que en el siguiente trabajo se
pretende conocer más a detalle a las levaduras según sus que podemos clasificar
según sus características morfológicas identificadas microscópicamente estimando el
tipo de levadura obtenida.
1.4 OBJETIVOS
1.4.1 Objetivo General
Aislar, purificar e identificar morfológicamente las levaduras presentes en un
mosto de uva con residuos de cascara de manzana.
1.4.2 Objetivos Específicos
Obtener mosto estéril con residuos de cascara de manzana fermentado por 1
semana.
Inocular el mosto con presencia de levaduras en tubos de ensayo.
Sembrar en agar malta para su proliferación.
Visualizar, describir e identificar morfológicamente las levaduras presentes en el
mosto.
.
2 BIBLIOGRAFIA
BIOTECNOLOGÍA
JUANSANCLEMENTE. (2015). AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN
MORFOLÓGICA Y BIOQUÍMICA DE LA MICROFLORA LEVADURIFORME. Santiago
de Cali.
RODRIGUEZ. (2003).
