Historia microbiología:

 La microbiología como ciencia, existe aproximadamente desde la segunda mitad del Es la primera publicación importante de la Royal Society,
siglo XIX. también fue el primer best-seller científico, inspirando un
 En el siglo III A.C, Teofrasto, sucesor de Aristóteles en el liceo, escribió gruesos gran interés público en la nueva disciplina de la
volúmenes acerca de las propiedades curativas de las plantas. Microscopía. También es notable por haber acuñado el
 En 1665 Micrographia es el título de la obra escrita por el científico inglés Robert término célula.
Hooke, en el que aparecen por primera vez dibujos de imágenes tomadas con El libro contiene la descripción detallada de cincuenta y
microscopía óptica. siete observaciones realizadas con el microscopio que el
 En 1676 Anton van Leeuwenhoek, realizó la primera observación microbiológica propio Hooke fabricó, y tres observaciones telescópicas.
registrada de "animáculos", como van Leeuwenhoek los llamó y dibujó entonces. Fue recibida con entusiasmo por parte de la comunidad
 Término bacteria, derivado del griego βακτηριον ("bastoncillo"), no fue introducido científica europea. Hooke tenía 28 años cuando lo escribió.
hasta el año 1828 por Christian Gottfried Ehrenberg La obra fue un regalo de la Royal Society de Londres para
fascinar al monarca inglés.

Procariotas Eucariotas Crecimiento:

No núcleo, organelos, Citoesqueleto Núcleo, organelos, Citoesqueleto Bacterias > levaduras > hongos
Unicelulares, reproducción asexual Unicelulares y pluricelulares, reproducción sexual y asexual
1 día 1-2 días 7 días
Menor a 10 µm Mayor a 10 µm

Microbiología: Reino Protista:

 Estudio de los microorganismos (actividades, forma, y su estructura, reproducción, fisiología, metabolismo Bacterias, algas,
e identificación, distribución en la naturaleza y relación con otros seres. hongos, protozoos.
 Célula: unidad básica de la vida.
 Microorganismo: sistemas específicos para la investigación de la fisiología, genética y
reacciones bioquímicas, que son la base de la vida. Son capaces de utilizar sustancias Fisión binaria:
químicas, desde materiales inorgánicos simples hasta sustratos orgánicos complejos.
Replicación ADN
 Grupos de microorganismos:
Elongación celular
o Bacterias: procariota, unicelulares, división por fisión binaria. Formación septum
o Hongos: fungi, multicelulares, varían en su tamaño (micro- Generación de dos paredes celulares
macroscópicos) Separación células hijas.
o Protozoos: protistas eucarióticos unicelulares, papel en la naturaleza es
variable
 Campos de aplicación: depende del objetivo para el cual sirva el microorganismo.

UTILIDAD INDUSTRIAL DE MICROORGANISMOS

 Levaduras: convierten azúcar en alcohol Conservación de m.o. en cultivo

 Mohos: antibióticos, enzimas
Resiembra: resembrar y luego congelar en tubos de agar.
 Bacterias: vinagre y productos lácteos.
Desecación: remover H2O de los m.o. con aire o vacío.
Congelación:
Cultivo:
Ordinaria: (-5°C, -20°C)
Ultra fina: (-60°C)
 Aislamiento de microorganismos
Nitrógeno (-150°C, -196°C)
 Puro o axénico (mismo tipo de m.o) única colonia.
 Mixto (varios tipos de m.o)
 Técnicas de aislamiento para cultivos puros:
o Siembra placas de Petri por rayado
 Separación del m.o obtenido de la muestra siendo dispersado sobre el agar.
o Siembra de placa vertida:
 m.o en un tubo cada uno con concentración distinta en c/u.
o Diluciones en serie
 Se conoce el m.o o está en altas concentraciones.
 Se realizan varias diluciones de la muestra y se incuban hasta que solamente aparezca el que se desea.
 Conservación y manejo de los micro cultivos.
o Reducción de la actividad metabólica del m.o.
o Selección del método depende de:
 Susceptibilidad del m.o al proceso de conservación
 Tendencia de cambios genéticos.
 Numero de muestras
 Periodo de conservación.
 Equipo disponible
 Probabilidad de contaminación
Medios de cultivo:

Dependen: Rendimiento de biomasa, concentración del producto, velocidad de formación, rendimiento de metabolito.

Características de un cultivo Pruebas

Según sus cualidades físicas: Prueba indol:
 Líquidos
 Semisólidos  Positivo: fondo amarillo superficie roja.
 Sólidos  Determina la habilidad del organismo de
Según su origen romper el indol del aminoácido triptófano.
 Naturales: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen  Presencia triptofanasa
animal o vegetal como es extracto de tejidos o infusiones y cuya composición  Productos: Indol, ac. pirúvico, amoníaco
química no se conoce exactamente.
 Sintéticos: son los medios que contienen una composición química definida Prueba de rojo de metilo:
cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados
reproducibles.  Positivo: Coloración roja
 Semisintéticos: son los sintéticos a los que se les añaden factores de  Indicadora de la presencia de ácidos
crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por provenientes de la fermentación de la glucosa
ejemplo extracto de levadura.  Productos: ácidos láctico, acético, succínico.
Según su formulación: CO2, H2O, CH3CH2OH
 Químicamente definidos: se conoce la cantidad exacta de cada uno de los
compuestos que hay en el medio. Prueba ureasa
 Complejos: se realizan a partir de extractos naturales (extracto de levadura,
sangre, etc.); no se conoce exactamente cuál es la composición del medio; sin  Positivo: Coloración fucsia.
embargo, presenta la ventaja de que ya están presentes todos o casi todos los  Indicadora de la existencia de enzima
elementos que una célula puede requerir.  Producto: NH3 pH básico
Según su uso:
 Medio general: medio en donde crecen todo tipo de microorganismos, Prueba citrato
excepto los que necesitan condiciones especiales (por ejemplo, agar CLED).
 Medio selectivo: permite seleccionar el crecimiento de una especie o grupo  Positivo: Cambio color verde a azul
determinado (hongos, bacterias entéricas, protozoos).  Permite diferenciar un grupo
 Medio diferencial: permite identificar una especie con otra, ambas en el de bacterias que son capaces de crecer
mismo medio. Puede ser por su crecimiento, su metabolismo, su respiración, con citrato como única fuente de carbono y
etc. (por ejemplo, medio de McConkey). sales amónicas inorgánicas como única
 Medio de enriquecimiento: contiene los nutrientes necesarios para apoyar el fuente de nitrógeno
crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, se utiliza para la  Producto: NA2CO3
cosecha de diferentes tipos de microorganismos en un mismo medio.
 Medio mínimo: contiene la mínima cantidad de nutrientes posible que Prueba catalasa:
permite el crecimiento de una especie;
 Medio de transporte: preparado para servir como almacenamiento temporal  Positivo: desprendimiento de burbujas.
a especímenes transportados o en transferencia; mantienen su viabilidad y  Permite diferencia bacterias aerobias.
su concentración.
Prueba TSI:

Se utilizan diferentes medios de cultivo para observar ciertas características Fermentación azucares (+) Viraje rojo->amarillo
metabólicas de los microorganismos Prod. Sulfuro de Hidrógeno (+) ppt Negro
Prod. De CO2 (+) si hay burbujas en el agar.
Características metabólicas
Rxn (alcalina – roja) (ácida – amarilla)
Conocer de manera detallada su actividad bioquímica.
Observación de cambios químicos de los sustratos.
 Reacciones químicas
 Enzimas que intervienen  COLONIAS: son visibles
 Productos intermediarios  MICROORGANISMOS: son visibles
 Reacciones bioquímicas que tienen lugar dentro de la célula. únicamente al microscopio (Frotis).

El tamaño de los microorganismos suele expresarse en micrómetros (um) o micras.

Características químicas:
Un micrómetro es equivalente a 0.001 milímetros (mm). Componentes pared celular

Por su tamaño los microorganismos son observados al microscopio en frotis o ARN o ADN
películas finas, preparaciones que suelen ser teñidas, pero algunas veces se
observan en fresco.
Metabolismo microbiano

Tinción con Azul Algodón de Lactofenol

Identificación de hongos
No es considerada una tinción diferencial
Posee características tintoriales que permiten
observar cada uno de los componentes fúngicos y
apreciar fácilmente las estructuras para una
adecuada identificación.
El fenol inactiva las enzimas líticas de la célula
Quita patogenicidad
El ácido láctico preserva las estructuras fúngicas
Tinciones:

Aunque los microorganismos vivos se pueden observar directamente en fresco al Las tinciones se pueden clasificar como:
microscopio óptico, la mayoría de las veces es necesario teñirlos para qué por Simples cuando toda la muestra se tiñe del mismo
medio del uso de colorantes, sea mucho más fácil su identificación; además, la color y se utiliza un sólo colorante (azul de lacto fenol
presencia de ciertas estructuras, así como su reacción a determinadas técnicas, o tinta china);
nos permite clasificar a las bacterias. Así pues, los colorantes tienen las siguientes Tinción diferencial, cuando se visualiza más de un
funciones: color porque se utiliza más de un colorante (Gram o
Ziehl-Neelsen(tuberculosis);
 Permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes. Tinción específica, cuando se utilizan anticuerpos
 Revelan su forma y tamaño. marcados con una molécula fluorescente para
 Muestran la presencia de estructuras internas y externas. identificar una estructura celular en particular
 Producen reacciones químicas específicas. (inmunocitoquímico).
El control de calidad de los métodos tintoriales es importante, ya que así se
asegura que la preparación de la muestra haya sido adecuada, por lo que se recomienda realizar al mismo tiempo de la evaluación de la muestra
clínica, la tinción de un agente infeccioso ya identificado mediante esa tinción, el cual funcionará como un control positivo

Tinción simple
 Realice un frotis de un
 Utiliza un solo colorante, el cual permite teñir el Técnicas de fijación.
cultivo microbiano.
interior celular. Existen dos tipos de fijadores: físicos y químicos.
 Fije al calor la
 Tiñe microorganismos procarióticos (vivos o muestra.
muertos). Procesos de fijación físicos:
 Cubrir con azul de
 En el caso de eucarióticos sólo se tiñen si están  Desecación
metileno la
muertos.  Calor seco
preparación y esperar
 Algunas estructuras, como los corpúsculos  Calor húmedo
2 minutos.
metacromáticos, se tiñen más intensamente con  Ultrasonido
 Lavar con agua.
este colorante que el resto de la célula.  Microondas
 Secar al aire.
Procesos de fijación químicos:
 Observar al
Entre los colorantes más utilizados están:  Oxidantes: óxido crómico, ácido acético, ácido
microscopio hasta
pícrico, acetona, dicromato de potasio
 Azul de metileno llegar al objetivo de
 Reductores: formaldehído, glutaraldehído,
 Fucsina 100x utilizando aceite
etanol, metanol, paraldehído
 Safranina de inmersión.
 Lugol

Tinciones:

Gram:
(+morado) Si se tiñen, pared celular llena de peptidoglicano
(- rojo) No se tiñen, menos capas de peptidoglicano, segunda membrana
repele la tinción.

Wright
 Se emplea generalmente para la diferenciación de elementos
celulares de la sangre y es clasificada como una tinción policromática.
 Puede teñir compuestos ácidos o básicos presentes en una célula
Ziehl-Neelsen
 modificación de la ya existente tinción de Romanowsky
 El reactivo de Wright está compuesto por eosina y azul de metileno,  Diagnóstico rutinario de tuberculosis
cuando éste se oxida se conoce como azur B  Técnica rápida, fácil y de bajo costo
 La eosina es un colorante ácido que tiene afinidad por componentes  Permite diferenciar a las bacterias en dos grupos:
alcalinos. aquellos que son capaces de resistir la decoloración con
o Rosada-anaranjada para citoplasmas alcohol-ácido (BAAR) y aquellos que no lo son.
o Rojo intenso en el caso de los eritrocitos  Resistencia de decoloración por alto contenido de lípidos
 Frotis de sangre periférica y frotis de médula ósea complejos (ácidos micólicos) y ceras.
 Efecto Romanowsky  Positivo: color rojo
o Púrpura a los núcleos
o Color rosa al citoplasma Negativa o coloración con tinta china para cápsula
o Azul para ácidos nucleicos
 Búsqueda de Plasmodium spp.  Limitado por la presencia de un fondo oscuro
 Positiva para cápsulas bacterianas.
ULTIMA TINCION (AZUL ALGODÓN) PAGINA ANTERIOR  No necesita fijación
Bacterias: microorganismos unicelulares que se reproducen por fisión binaria. Integran el reino procariota (pro primitivo, cariota núcleo).

Dos tipos d células_ eucariotas y procariotas (en común: membrana celular, ribosomas encargados de la síntesis proteíca, y el ADN portador
de la información genética)

Organismos multicelulares: animales y plantas (células eucariotas)

Protistas, hongos, algas: unicelulares, multicelulares, colonias, pueden ser eucariotas.

Bacterias:

Generalmente no poseen un núcleo verdadero o membrana nuclear, ya que su material genético se encuentra realmente distribuido en el
núcleosoma, pero no es núcleo verdadero ya que su cromosoma es extendido, (no empaquetado)

Arqueobacterias
• Ambientes fuertes
• Membrana: Lipidos formados por glicerol unido a cadenas de hidrocarburo.
• Pared: Formada por glicoproteínas o solo por proteínas.
• Secuencias parecidas a las de los eucariontes

Eubacterias
• Ambientes no fuertes
• Membrana: lipidos formados por glicero, unido a cadenas de ácidos grasos
• Pared: Formada por peptidoglucano
• Secuencias diferentes a eucariontes y arqueobacterias.

Tamaño:

 Generales 0.5-3 μm (inclusive 10 μm)

 Interés médico (0.4-2 μm)
 Visualizarlos: microscopio óptico con objetivo de inmersión (100x) y aceite
de inmerción.
 Cultivo: Tamaño de las bacterias, (biomasa, depende del tamaño de los
microorganismos y unidades formadoras de colonia por cm3 o ml en
dependencia de su nutriente

Morfología

Pasos: (cultivado, Frotis, Fijado, Teñido)

Primero en ver: morfología (cosos, bacilos, apéndices bacterianos, otras morfologías) forma determinada por su pared celular (delimita la
forma).

Bacilos y espiroquetas

 Dentro de los espirilos, se tienen treponema, borrelia (espiral sacaromyces).

 Dentro de los bacilos Corinobacterium (forma de letras chinas, curva hacia un lado y alargada en el otro) extremo
 Vibrio cólera (forma de coma, un bacilito gordito)
 Hicobacter pilorí (hélice).

Caso de los cocos:

Esferas que se tienen en distintas disposiciones:

 Coquitos en parejas (diplococos)

 Mismos diplococos dentro de una capsula (encapsulados, pneumococo)
 Estafilococos, mayor disposición es en racimo de uvas.
 Estreptocosos: hileras
 Tétrada: cuatro coquitos planos
 Sarcina: verlo como 3d pero son acúmulos de tétradas.

Bacilos: en la práctica es difícil lograr identificar es cocobacil y bacilo, pero las demás morfologías son más difíciles, ya uq eno tienen una
disposición predominante para asignar un grupo específico al que pertenece.

Apéndices bacterianos:

 Hifa
 Tallo
Tamaño microorganismos:

 Átomo
 Pequeñas moléculas
 Proteínas
 Virus
 Bacterias
 Levaduras (hongos)
 Actinomicetos
 Protoaxis
 Algas
 Ácaros
 Colémbolos
 Mohos y setas

Estructuras internas:

Inmersas en el citoplasma, solución acuosa y viscosa que contiene solutos orgánicos e inorgánicos, y elementos especializados como los
ribosomas y los cuerpos de inclusión.

Movimiento: se da en presencia de un gradiente de protones a través de proteínas Mot en el cuerpo basal. La rotación se da en el sentido
contrario de las agujas de reloj

Cilio: Estructuras celulares que se caracterizan por presentarse como apéndices cortos con aspecto de pestaña, que contienen una estructura
central altamente ordenada, constituida generalmente por más de 600 tipos de proteínas, envuelta por el citosol y la membrana plasmática.

 Movimiento hacia delante y atrás.

Flagelo: movimiento helicoidal desplazamientos:

 Rotación en contra manecillas reloj o a favor (CCW)

 Movimiento de tambaleo (CW)
 Flagelo polar reversible: primero a favor, luego en contra
 Flagelo polar unidireccional
TAXONOMIA

 Dominio: Separa a los seres vivos por sus características celulares.

 Reino: Divide a los seres vivos por su naturaleza en común.
 Filo o división: Son las principales divisiones grandes, los reinos animal y
vegetal.
 Clase: Comprende varios órdenes.
 Orden: Comprende un conjunto de familias con ciertos caracteres comunes.
 Familia: Comprende los géneros afines.
 Género: Un conjunto de especies muy cercanas entre sí.
 Especie: Individuos que no sólo se parecen mucho entre sí externamente, sino que Su material genético es muy similar, por ello nacen
las subespecies (como un segundo apellido) que otorga una individualidad.

Pruebas genéticas para la obtención del árbol filogenético, eso se hace por medio
del estudio a nivel genético (secuencia de ADN, por ejemplo).

Gen 16S región en la secuencia nucleotídica del genómica, es conservada (sufre

pocas mutaciones) por lo que se utiliza esta región para la identificación de
bacterias.

Técnicas:

 Shootgun, secuenciación de genomas completos de una muestra se

obtiene el NGS, que no solo cubre bacteria sino en familias, géneros y
especies de microorganismos en general. (virus es por este método)
 18s (mohos y levaduras).
 16s es de las bacterias.

Nomenclatura es el paso final en un estudio taxonómico.

 Es el darle nombre a los microorganismos y su objetivo es precisamente elegir el nombre adecuado y nombrar el germen siempre
por el mismo nombre evitando así confusiones.
 Es importante diferenciar entre taxonomía y nomenclatura, ya que nomenclatura es únicamente darle el nombre al organismo luego
que se ha completado el trabajo taxonómico.

Como nombrar bacterias:

CSP (comité internacional de sistemática de Procariotas) denominó a su sistema: Código de bacteriología.

Una bacteria tiene un nombre binomial ósea que todo microorganismo se rige por dos nombres: género y especie.

 Inicio del texto: Pseudomona aeruginosa

 Resto del texto: P. aeruginosa
 Primer nombre del microorganismo (género) en MAYUSCULA, y el
Segundo (especie) se escriben con minúscula.
 Todas subespecies se escriben textos sin formato (ni cursivo ni
subrayado).

 Cuando se desconoce la especie se utiliza sp, (Aspergilus sp.)

 Cuando se refiere a muchas especies del mismo género (spp.)

Todos los nombres están escritos en latín porque es un idioma que no varía con el tiempo, no tiene modismos y no tiene cambios en su
estructura gramática como los demás idiomas, en todos los comités de nomenclatura, se llegó a la conclusión de utilizar latín.

Cada país puede asignar un nombre común a sus microorganismos, pero por dicho
nombre no pueden ser reconocidos internacional-mundialmente.

Los nombres oficiales deben publicarse en un artículo de la Revista Internacional de

Microbiología Sistemática y Evolutiva.