UNIVERSIDAD NORBERT WIENER
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL
S-10
ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA-VISIBLE: LA LEY DE
LAMBERT Y BEER
Mg. Gerardo De Lama Carrillo
2020 - I
INDICE
Espectroscopia ultravioleta-visible.
Ejemplos de aplicación.
La ley de Lambert y Beer: absorbancia, transmitancia,
absortividad y absortividad molar.
Limitaciones de la aplicación de la ley de Lambert y Beer.
Aplicaciones y problemas.
ESPECTROSCOPIA
INTRODUCCIÓN A LOS MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS
Los métodos espectrométricos son un gran grupo de métodos
analíticos que se basan en la espectroscopia atómica y molecular.
La espectroscopia es un término general para la ciencia que trata de
las distintas interacciones de la radiación con la materia.
La espectrometría y los métodos espectrométricos se refieren a la
medida de la intensidad de la radiación mediante un detector
fotoeléctrico o con otro tipo de dispositivo electrónico.
Los métodos espectrométricos que más se usan se basan en la
radiación electromagnética, que es un tipo de energía que adopta
varias formas, de las cuales las más fácilmente reconocibles son la luz
y el calor radiante. Sus manifestaciones más difícilmente reconocibles
incluyen los rayos gamma y los rayos X, así como las radiaciones
ultravioleta, de microondas y de radiofrecuencia.
ESPECTROSCOPÍAS Y ESPECTROMETRÍA
Etimológicamente:
Espectroscopia viene del verbo griego "scopeo" que significa "mirar,
observar“.
Espectrometría y espectrofotometría vienen del griego "metron" que
significa "medida" y también "instrumento para medir", y del griego
"photos" que es "luz".
Entonces,
La espectroscopía, estudia la interacción de la radiación electromagnética con
la muestra y un espectroscopio es un instrumento que te permite OBSERVAR
un espectro luminoso, pero no puede medirlo (aunque a veces se llama
equivocadamente así a un espectrómetro.
La espectrometría mide la energía absorbida o liberada (emisión) por un
analito y un espectrómetro permite MEDIR, es decir, la evaluación cuantitativa
de un espectro radiante, como la luz de una estrella, pero a veces el nombre
se emplea para la medición de espectros no luminosos (por ejemplo el
espectro de las ondas de radio)
ESPECTROSCOPÍAS Y ESPECTROMETRÍA
un espectrofotómetro genera su propia luz blanca y se usa para MEDIR
espectros luminosos de sustancias que esa luz atraviesa; las distintas
intensidades en sus distintas frecuencias/longitudes de onda. Estos
instrumentos antes empleaban prismas para descomponer la luz blanca en
sus componentes; hoy emplean redes de difracción. Las distintas
intensidades luminosas pueden emplearse para saber la concentración de
una sustancia química.
Un gráfico de la respuesta como
función de la longitud de onda (o
más comúnmente la frecuencia)
se conoce como espectro.
ESPECTROSCOPIA
La radiación electromagnética al incidir sobre la materia puede
sufrir los siguientes procesos:
ESPECTROSCOPIA UV-Visible
<E
UV UV
Rx lejano cercano Vis IR
o de vacío o de cuarzo
10 100 380 780 𝜆 (nm)
ESPECTROSCOPIA UV-Visible
La espectroscopia ultravioleta-visible o (UV/VIS) es una espectroscopia
caracterizada por la emisión de fotones utilizando la radiación
electromagnética de las regiones visible y ultravioleta cercana del
espectro .
Esta radiación absorbida por las moléculas provoca transiciones
electrónicas que pueden ser cuantificadas.
Aplicaciones
Determinación de iones metálicos y complejos de elementos de
transición (Ni+2, Cu+2, Co+2, Cr2O7 -2 )
Complejos de transferencia de carga ej: Fe(II) –1,10 Fenantrolina,
Fe(III)– tiocianato.
Compuestos orgánicos con enlaces conjugados, heterociclos,
Campos: industrial, clínico, forense, medio ambiente.
ABSORCIÓN DE RADIACIONES
Espectro de absorción de ácido acetil salicílico (AAS) en HCl 0,05 M
La concentración de la solución no modifica la forma del espectro
ABSORCIÓN DE RADIACIONES
Una sustancia es una estructura energética:
- se mueven sus moléculas,
- los grupos de átomos en las moléculas,
- los átomos en los grupos,
- los electrones en los átomos.
El grado de agitación depende:
- del tipo de sustancia,
- de la influencia del medio en que se halle y
- del efecto de energía externa que le llegue.
Dependiendo de su complejidad, una sustancia puede llegar a una
infinidad de estados energéticos, pero todos ellos son cuantificados. Las
energías de las radiaciones electromagnéticas también son cuantificadas.
Por lo tanto, cada sustancia puede absorber ciertas radiaciones y otras no.
La absortividad específica a y la absortividad molar ε son factores que
indican la capacidad de una sustancia para absorber una radiación
determinada y junto con su curva espectral son parámetros utilizados
como referencia para la identidad de un compuesto.
TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA
Una radiación tendrá un 100% de transmitancia (T) si al pasar a través de
una sustancia sale inalterada, su intensidad, es decir, no es absorbida por
la sustancia. Si la radiación es absorbida parcialmente, la transmitancia
será inferior al 100%.
Si escogemos una radiación que puede ser absorbida por la sustancia en
estudio, el porcentaje trasmitido disminuye en proporción logarítmica con
la cantidad de sustancia presente. Como esta disminución es logarítmica
se introduce por conveniencia práctica el término absorbancia (A):
A = – logT
Las escalas del sistema de lectura vienen graduadas en porcentajes de
transmitancia (%T) ó en (A). Transmitancia 100% equivale a Absorbancia
cero. 0% Transmitancia corresponde a Absorbancia infinita.
TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA
LEY DE LAMBERT - BEER
Ley de Lambert - Beer y parámetros de control
La ley de Beer establece que si a través de una solución con
concentración C en una especie absorbente, contenida en una celda de
espesor b, pasa una radiación monocromática que es absorbida por la
especie, se cumple la relación:
A = abC
Siendo A : la absorbancia y
a : la absortividad específica (L/cmxg),
b: espesor de la celda (cm),
C: concentración de la muestra (g/L ó mg/mL);
o sea, que la magnitud de la absorbancia es proporcional
- al poder absorbente,
- al espesor de la celda y
- a la concentración
LEY DE LAMBERT - BEER
Ley de Lambert - Beer y parámetros de control
la absorbancia también es igual a:
A = εbC
siendo ε: la absortividad molar (L/cm x mol),
cuando se utiliza esta expresión matemática
C: se expresa en moles por litro (M/L).
ε = f(𝜆max)
LEY DE LAMBERT - BEER
Desviaciones de la Ley de Lambert - Beer
Se observan frecuentemente desviaciones de la proporcionalidad entre A
y C (cuando b es constante). Algunas de estas desviaciones son
importantes y representan limitaciones reales de la ley. Estas son de
tipo:
a) Químico;
b) Instrumental.
La Ley de Beer es sólo aplicable a soluciones en las que las
interacciones dependientes de la concentración de las moléculas o iones
son mínimas. Concentraciones “altas” alteran las absortividades molares
y por lo tanto conducen a una relación no lineal entre A y C.
LEY DE LAMBERT - BEER
Desviaciones de la Ley de Lambert – Beer
a) Desviaciones químicas
Cuando las especies absorbentes(muestras) experimentan
asociación, disociación o reacción con el solvente originan
productos con características absorbentes distintas de las del
analito.
Un ejemplo típico se observa con soluciones de dicromato potásico
no amortiguadas, en las que existen los siguientes equilibrios:
Cr2O7+H2O ↔ 2HCrO4 ↔ 2H+ + 2CrO4-2
A casi todas las longitudes de onda los valores de ξ del ion
dicromato y las dos especies de cromatos son muy diferentes.
LEY DE LAMBERT - BEER
Desviaciones de la Ley de Lambert – Beer
b) Desviaciones instrumentales
Radiación policromática: el requisito básico para el cumplimiento
de la Ley de Beer es que la radiación incidente sea monocromática.
Dependiendo de las características tecnológicas del sistema óptico
del instrumento será más o menos accesible poder utilizar en forma
práctica una radiación limitada a una sola longitud de onda.
Radiación parásita: la radiación dispersa de longitud de onda
distinta a la seleccionada; se origina en el monocromador del
instrumento (Sistema óptico), además puede alcanzar el detector
sin haber pasado a través de la muestra.
Rangos analíticos de espectroscopía visible
El color
El color es una propiedad importante de una sustancia. El color de la
materia está relacionado con su absortividad o reflexividad. El ojo
humano ve el color complementario al que se absorbe.
Absorbancia y colores complementarios
Rangos analíticos de espectroscopía visible
Transmisión y color
INSTRUMENTACIÓN
Incluyen 5 componentes (todos los instrumentos espectroscópicos)
1. Fuente estable de
energía.
2. Dispositivo para realizar
la medida y que aísle una
región del espectro.
3. Recipiente transparente
que contenga la muestra.
4. Detector de radiación.
5. Sistema de tratamiento y
lectura de la señal.
La fuente de Radiaciones:
Fuentes de radiación.
(a) Lámpara de deuterio para el rango
UV.
(b) Lámpara de tungsteno para el
rango visible.
PROBLEMAS
PROBLEMA 10.1
¿Cuál es la absorbancia de una disolución que presenta una
transmitancia del 30% a una longitud de onda de 640 nm?
Solución.
Para resolverlo, basta con acudir a las definiciones de absorbancia y
transmitancia.
%T= 30
T= (30/100)= 0,3
Y sabiendo que A = -LogT, el cálculo es directo:
A = -Log 0,3 = 0,5228
Notese que carece de unidades.
PROBLEMA 10.2
Si la disolución del ejercicio anterior consiste de una especie W cuya
concentración es 2,30x10-4 M, y suponiendo que la celda tiene un grosor de
2 cm: ¿cuál debe ser su concentración para obtener una transmitancia del
8%?
Solución.
Se pudiera resolver directamente con esta ecuación:
-LogT= εbc
Pero, se desconoce el valor de ε. Por lo tanto, hay que calcularlo con los
datos anteriores, y se asume que permanece constante en un amplio rango
de concentraciones:
ε = -LogT/bc
= (-Log 0,3)/ (2 cm x 2,3x10-4 M)
=1136,52 M-1∙cm-1
Y ahora, sí se puede proceder al cálculo con %T=8:
c = -LogT/εb
= (-Log 0,08)/ (1136,52 M-1∙cm-1 x 2 cm)
=4,82x10-4 M
Entonces, basta con que la especie W duplique su concentración (4,82/2,3)
para disminuir su porcentaje de transmitancia de 30% a 8%.
PROBLEMA 10.3
Se desea determinar el manganeso en una muestra. Se disolvió una
muestra de 0,4895 g, el manganeso se oxidó a MnO4- y la solución se
diluyó a 100 mL en un matraz aforado. La absorbancia a 525 nm en una
celda de 1 cm fue 0,396. Una solución de MnO4- de 3x10-4 M presenta
una absorbancia de 0,672
Solución.
Ast = a· b ·Cst 0,672= a·1 ·3x10-4 a = 2240
Ax = a· b· Cx 0,396 = 2240·1·Cx Cx = 1,77 x 10-4 M
Otra forma de cálculo:
PROBLEMA 10.3
Solución.
Calcular el porcentaje de Mn en la muestra
En el matraz de 100 ml encontramos una concentración 1,77x 10-4M
de MnO4- .
Calculemos los mg de Mn en 100 mL
Calculemos los mg de Mn por 100 g de muestra ( porcentaje)
En los 100 mL se disolvieron 0,4895 g de muestra y hay 0,97 mg de
Mn. ¿ Cuantos mg de Mn hay en 100 g de muestra?
X = 198,2 mg Mn / 100g muestra
% = 0,2 g Mn /100g muestra
X = 0,2 %
¡Muchas gracias!
