INFORME SEPARACIÓN DE AMINOÁCIDOS POR CROMATOGRAFÍA EN
PLACA DELGADA
DAVID PARRA
SABRINA CARDONA
OBJETIVOS PARTICULARES
- Separar aminoácidos y péptidos mediante el uso de la cromatografía en papel.
- Determinar el corrimiento cromatográfico de un aminoácidos
CONSULTA
1. La celulosa se compone de cadenas lineales de D-glucosa unidas por enlaces
β(1-4) es decir es un carbohidrato.
Cromatografía en papel ya que normalmente el papel a usar está compuesto
por celulosa debido a que ésta en el agua se vuelve electronegativa y bastante
polar, adquiriendo propiedades de intercambio iónico débiles, soporte y se
propicia para ser la fase estacionaria.
2. Entre más polar sea un compuesto, mayor adherencia tendrá en la fase
estacionaria, por lo que su migración a lo largo de ella es menor, lo que
significa que el arrastre por la fase móvil será mucho más lento.
Por lo que la diferenciación de los compuestos se establecerá por su migración
tras reconocer la polaridad.
3. La ninhidrina reacciona con aminoácidos que tengan el grupo amino libre,
dando lugar a la formación de amoniaco y anhídrido carbonico con reducción
del reactivo a hidrindatina.
Azul/Violeta: para aminas primarias.
Amarillo: para la prolina e hidroxipidina.
Café: para la asparragina.
DIAGRAMAS DE FLUJO:
Extracción de espinaca:
5g de espinaca
Extracción en mortero
con 15mL de etanol
Centrifugar extractos
etanólicos
Reunir sobrenadantes en vaso
Evaporar a baño María
de precipitado de 100 mL
Extracción de zumo de naranja:
Zumo de naranja
Centrifugar zumo a 960g
durante 15 minutos
Homogenizar sobrenadante
a 95%v/v con etanol
Centrifugar nuevamente a
900g durante 15 minutos
Recuperar sobrenadante y
ajustar pH
RESULTADOS ESPERADOS
PATRON Rf
Lisina 0.03
Triptofano 0.60
Histidina 0.12
Glicina 0.25
Alanina 0.26
Arginina 0.17
Metionina 0.59
Cisteina 0.12
Asparagina 0.24
TABLA DE RESULTADOS OBTENIDOS
Distancia al centro de la Distancia al frente del
Patrón/muestra problema Rf
mancha (cm) solvente (cm)
BIBLIOGRAFÍA
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