INFORME DE LABORATORIO Nº 4
“TECNICA DE CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA Y EXTRACCION DE ESPINACA”
INTEGRANTES
LUISA CAROLINA OROZCO
KENIA MESTRA
KAROLLAIM SOTO
PROFESOR
PHD GEAN CARLOS ARTEAGA
UNUVERSIDAD DE CORDOBA
FACULTAD DE INGENIERIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE ALIMENTOS
2020
INTRODUCCIÓN
Con el siguiente laboratorio daremos lugar a La cromatografía en capa fina. Es una técnica
analítica rápida y sencilla, muy utilizada en un laboratorio de Química Orgánica. En la técnica de
cromatografía se presenta una fase estacionaria y una fase móvil, el principio es el mismo: la
sustancia de interés se adhiere a la fase estacionaria o se moverá con la fase móvil, viajando a una
velocidad que es directamente proporcional a la análoga de la fase estacionaria. El tipo de fase
estacionaria depende del tipo de compuesto que se quiera separar, además presenta un proceso
sencillo, el cual nos mostrara las moléculas que están en movimiento según la afinidad que
muestren en la fase estacionaria.
OBJETIVO GENERAL:
Separar los pigmentos abundantes presentes en hojas de espinacas utilizando la cromatografía de
capa fina.
RESULTADOS OBTENIDOS Y PASOS:
Técnica de cromatografía en capa fina:
Materiales:
- 10 placas de de papel filtro 3x6
- 2 placas de aluminios 3x6
- Pipetas
- Mortero con pistilo
Reactivos:
Acetona, etanol-cloroformo, hexano-cloroformo, hexano-etanol, etanol-acetona, acetona-
cloroformo, hexano, hexano-acetona, cloroformo
Extracto de espinaca
Sulfato de sodio
Teniendo en trozos las hojas de espinaca dentro de nuestro mortero, se le agrega 4ml de
hexano y 2ml de etanol.
Ahora utilizando el mortero con pistilo se machaca las hojas de espinacas.
Se transfiere la fase orgánica de la molienda de
las hojas de espinaca a un tubo de ensayo con
tapón y se deja reposar
Aquí se logra apreciar la separación de la solución orgánica del
extracto de espinaca
Al extracto de espinaca se le agrega Con una espátula un
poco de sulfato de sodio anhidro y luego se agita el tubo
y se deja sedimentar
La elaboración de las placas de papel filtro y de aluminio se lleva utilizando las medidas marcadas
Las placas son marcadas y posterior mente se le
agrega un poco de muestra a separar utilizando una
pipeta Pasteur
Se colocan las placas dentro de los vasos que contiene cada uno de los disolventes y estos son
tapados con un vidrio de reloj
Se espera hasta que la muestra corra, es decir se
elige el mejor disolvente, aquel que muestre más
cantidad de colores y los cuales la muestra halla
corrido mayor distancia.
Los disolventes elegidos fueron hexano y
hexano-cloroformo
La mejor separación de dio con la muestra hexano-
cloroformo siendo este el mejor disolvente
Con las medidas de la distancia recorrida del disolvente se
calculó el Rf = 0.9333
Como se aprecia en la imagen utilizando el hexano-cloroformo fue posible separar las mesclas de
extracto de espinaca pudiendo identificar los pigmentos carotenos altamente polares, carotenos
polares como la clorofila b y los componentes no polares.
Preguntas complementarias:
1. ¿Cuáles son los tipos de cromatografías y explicarlos?
Existen diferentes tipos de técnicas cromatografías y estas se clasifican según su forma de
lecho, es decir si está en su estado físico en su fase móvil y los mecanismos de separación. Aquí
describiré los más utilizados.
Cromatografía de columna
Es la aplicación providente de la cromatografía. Se usa para conseguir compuestos químicos
completamente puros a partir de Tipos de cromatografía una mezcla de elementos en un nivel de
microgramos hasta kilogramos usando grandes
columnas industriales. La columna básica de
cromatografía providente es un tubo de vidrio
con un diámetro de 5 a 50 mm y posee una
altura de 50 cm a 1 m con una llave en la parte
inferior. La solución se prepara con la fase
permanente en polvo y luego se esparce
cuidadosamente en la columna. Se debe tener
mucho cuidado para impedir la producción de las burbujas de aire. Una mezcla del material
orgánico revuelve sobre la fase estacionaria.
La capa principal esta generalmente cubierta con una pequeña capilla de arena, de algodón o lana
del mismo vidrio para resguardar la forma de esa capa orgánica, luego se pasa lentamente a través
de su columna para adelantar el material orgánico. Habitualmente se crea un depósito de elución
redondo o un embudo de separación tomando la forma de un tapón.
Cromatografía de papel
Es un método analítico utilizado para identificar y separar las mezclas que son pintadas
principalmente con pigmentos fuertes. Este
proceso también se puede utilizar en las escuelas de
secundarias o primarias en experimentos de
laboratorio con tinta. Esta técnica ha sido
sustituida en gran parte por cromatografía de capa
fina, sin embargo, este método sigue siendo una
eficaz herramienta de enseñanza.
La cromatografía en papel bidireccional, es
conocida como cromatografía bidimensional,
envuelve la utilización de dos solventes y a la
misma vez aplicando una rotación del papel a 90 °
entre ellos. Esto es ventajoso para lograr separar las mezclas complejas de elementos similares, un
ejemplo particular es la separación de aminoácidos.
Cromatografía en capa fina
La cromatografía en capa fina (TLC) es un método de la cromatografía que es eficaz para separar
elementos orgánicos. Envuelve una fase
estacionaria que radica en una capa muy
delgada del material absorbente,
habitualmente es el óxido de aluminio,
gel de sílice o la celulosa paralizada
sobre una lámina puntal inerte
completamente plana. La fase líquida
radica en obtener una solución exacta
para separar un solvente apropiado en
atraída a través de una placa por acción
fina, logrando separar la solución
experimental.
Cromatografía liquida de alta resolución
La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) es un tipo de cromatografía en la columna
utilizada diariamente en bioquímica y química analítica. También es conocida a veces como
cromatografía líquida de alta presión y
se usa para separar los elementos de
una mezcla mediante la utilización de
una diversidad de interacciones
químicas entre la sustancia que se está
analizando y la columna de
cromatografía.
En este tipo el análisis se fuerza a
través de la columna en su fase
estacionaria habitualmente el tubo está
lleno de pequeñas partículas circulares
con una cierta química en la superficie
bombeando un líquido a alta presión a
través de la columna.
2. Que es el factor RF y como se calcula
El símbolo Rf significa “Relación de frentes”, es una relación de distancias, y se expresa como el
cociente entre la distancia recorrida por la sustancia y la distancia recorrida por el disolvente hasta
el frente del eluyente:
El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra: tipo de
adsorbente, eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de
saturación, etc. Tiene una reproducibilidad de 20%, por lo que es mejor correr duplicados
de la misma placa.
CONCLUSIÓN:
Para concluir, estos disolventes se caracterizan por tener bajos puntos de ebullición y viscosidad,
lo que les permite moverse con rapidez. Raramente se emplea un disolvente más polar que el
metanol. Usualmente se emplea una mezcla de dos disolventes en proporción variable; la
polaridad de la mezcla será ́ el valor promediado en función de la cantidad de cada disolvente
empleada. El eluyente idóneo para cada caso ha de encontrarse por "el método del ensayo y del
error"
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
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