1
ESCUELA SUPERIOR
POLITECNICA DE CHIMBORAZO
SEDE ORELLANA
NOMBRE: GLORIA L.
FECHA:21/09/2020
INSEMINACIÓN ATIFICIAL
SELECCION DE LAS OVEJAS A INSEMINAR
Los programas de inseminación artificial (IA) y mejoramiento genético están
normalmente destinados a las ovejas de alto valor genético de la cabaña o del
establecimiento.
Antes de incorporar los animales a un programa de inseminación, es necesario
tener en cuenta los siguientes aspectos de nutrición, sanidad y reproductivos:
-Las hembras deben alcanzar 2.5-3 puntos de condición corporal un mes antes
de la inseminación. La condición corporal es un valor subjetivo o índice de la gordura
de los animales. Consiste en medir la deposición grasa de los músculos lumbares,
situados por debajo de las apófisis transversas de las vértebras lumbares (máximo, 5;
mínimo, 0).
- Las ovejas deben estar libres de enfermedades y parásitos.
- El destete de los corderos debe realizarse 6 a 8 semanas antes de la
inseminación.
- Se deben refugar las ovejas "viejas" y con problemas de ubre (pezones
ciegos, ubres cortadas, mastitis), como así también aquellas ovejas que no hubieran
retenido servicio por 2 años consecutivos.
SINCRONIZACION DE ESTROS
Los métodos de sincronización de estros constituyen una herramienta de gran
utilidad en los programas de IA, ya que facilitan el manejo de los animales al evitarse
el encierre diario para la detección de celos naturales. Se pueden dividir en: 1)
farmacológicos y 2) naturales.
1. Métodos farmacológicos
Tienen la ventaja de concentrar un alto porcentaje de celos en un período corto de
tiempo, lo que facilita la programación y realización de los trabajos de IA. Haremos
referencia a los 2 más utilizados:
a) Las esponjas intravaginales con progestágenos y b) Las prostaglandinas sintéticas.
1a) Esponjas intravaginales con progestágenos
1b) Prostaglandinas sintéticas
Simulan la acción de la prostaglandina F2 alfa, agente luteolítico liberado por el
útero, acortando la vida del cuerpo lúteo. Por este motivo, sólo pueden utilizarse
durante la estación reproductiva. Dado que los celos se presentan más dispersos que
en el tratamiento con esponjas, la IA se realiza con previa detección de celos.
Las prostaglandinas inducen la regresión luteal entre los días 5 y 14 del ciclo
estral en ovejas, con manifestación de celo entre las 48 y 84 horas de aplicada la
inyección. Las ovejas que se encuentren entre el día 15 y 17 del ciclo, experimentarán
luteólisis en forma natural y entrarán en celo dentro del mismo intervalo. En tanto que
las que se encuentren entre los días 0 y 4 son refractarias a la prostaglandina y se
alzarán recién 13-17 días más tarde.
Por lo tanto, nosotros recomendamos su administración en una sola aplicación,
alcanzándose una concentración de celos del 65-75%. Debido a la menor fertilidad de
los estros inducidos hormonalmente, es preferible inseminar sobre el segundo celo
post-sincronización (celo natural), comenzándose con la detección de celos a partir del
día 16 post-aplicación y durante un período de 5 días. La detección de celos puede
realizarse mediante la incorporación de un 4% de machos retajos marcadores.
En nuestra experiencia, 50 microgramos/oveja de Delprostenate en 1 sola
inyección intramuscular, concentran un 70% de los celos en ovejas adultas (Gráfico
II). En borregas este porcentaje puede variar entre el 55 y 70% según su estado
corporal.
El costo por aplicación es aproximadamente de 1 $.
25
% diario de estro retorno
20
15
10
0
1617181920212223
Días post aplicación de prostaglandinas
Gráfico II.
Distribución de la presentación de los estros retorno en ovejas Merino tratadas con
prostaglandinas.
2. Métodos naturales
La actividad sexual de las ovejas puede ser inducida al comienzo de la estación
de cría, por la acción que sobre la fisiología reproductiva, ejerce la incorporación de
los machos en una majada de hembras que haya permanecido aislada de los mismos por
un período mínimo de 4 semanas. Este estímulo sexual se denomina "efecto macho". Si
bien es un método económico, se observa una concentración de celos variable.
Se utilizan machos jóvenes vasectomizados en una proporción del 4%,
preferentemente no borregos y en buen estado corporal.
Para que este método sea efectivo es necesario que un gran porcentaje de
hembras se encuentre en anestro, próximas al inicio de la estación de cría. Entre el
40 y 100% de las ovejas en anestro estacional responde ante la presencia de los
machos, presentando 2 momentos de concentración de estros, alrededor de los días 18
y 24 post-introducción de los machos.
El conocimiento de este efecto puede ser importante para promover la salida
del anestro en especies muy estacionales. Sin embargo, no se recomienda su utilización
para trabajos que requieren alta concentación de celos tales como la IA.
PREPARACION DE MACHOS MARCADORES
Los machos marcadores se utilizan normalmente para facilitar la detección de
hembras en celo. Pueden ser a) Machos enteros con arneses, b) Vasectomizados o c)
Capones a los cuales se les induce la actividad sexual.
En Patagonia, se aconseja la utilización de machos vasectomizados. Estos se
introducen a la majada con el pecho, axilas y antebrazos embebidos con Ferrite (polvo
utilizado en la tinción de pisos) en agua. El Ferrite se coloca por la mañana y por la
tarde, aconsejándose la utilización de los colores rojo y negro, que son bien visibles a
campo. En caso de realizarse más de una detección de celos en la misma majada, será
conveniente utilizar primero el color rojo y el negro en el celo retorno, que resulta
visible sobre el primero.
Para la preparación de machos marcadores, será conveniente elegir animales
jóvenes de buena líbido, que podrán ser utilizados como marcadores por un lapso
mayor de tiempo. Serán sometidos a una operación de vasectomía (deferectomía), ya
sea quirúrgicamente o por laparoscopía.
- Cirugía
La operación se realiza con anestesia local, una vez esquilada y desinfectada el
área escrotal. Se palpan los conductos deferentes a la altura del cuello del
escroto. Se realiza una pequeña incisión para cada testículo a través de la piel y
túnica vaginalis. Se procede a la exteriorización y remoción de 1-2 cm del
conducto deferente. Se aplica antibiótico en polvo y se sutura la piel.
- Laparoscopía
El macho es colocado en una camilla en decúbito dorsal, previo ayuno de 24
horas. La operación consiste en la exteriorización y remoción de 1-2 cm de cada
uno de los conductos deferentes, a través de 2 orificios realizados en la pared
abdominal con un trócar de 10 mm. Un sistema óptico (laparoscopio), conectado
a una fuente de luz por medio de una fibra óptica, e introducido en la cavidad
abdominal mediante una punción, permite la visualización de los órganos
internos y la exteriorización de los conductos deferentes.
Los machos exhibirán comportamiento sexual y montarán dentro de los 2 ó 3
días posteriores a la cirugía o laparoscopía. Sin embargo, será conveniente no
utilizarlos hasta 10 días después de la operación.
INSEMINACION ARTIFICIAL CON SEMEN FRESCO
Manipulación y examen del semen
El semen colectado en la vagina artificial o mediante el empleo del
electroeyaculador, es conservado en baño de agua a una temperatura de 28-30 ºC
durante su evaluación y posterior utilización.
Es de suma importancia que el tiempo transcurrido entre la obtención del
eyaculado y la última inseminación sea el menor posible (alrededor de 1 hora),
extremándose este cuidado en caso de tratarse de semen sin diluir.
Antes de proceder a su utilización, el eyaculado debe ser evaluado al
microscopio (100 aumentos), observando fundamentalmente que el mismo posea una
motilidad masal (valor subjetivo del vigor de movimiento de las ondas; 0, mínimo; 5,
máximo), igual o superior a 3.
La dilución del semen obtenido se realiza en forma aproximada, asegurándose
una cantidad de 100 a 150 millones de espermatozoides totales por dosis de
inseminación de 0.02-0.25 cc. Por ej., si se tiene un eyaculado de 1 cc y una
concentración estimada de 4000 millones de espermatozoides/ml para inseminar 30
hembras, mediante la adición de 2 cc de diluyente al semen, se completan 30 dosis de
inseminación de 0.1 cc por animal (semen diluído).
En Uruguay, donde usualmente la IA se realiza con semen fresco sin diluir, en
la mayoría de los casos se fija una dosis constante de 0.02 cc por oveja (semen puro).
Si bien la frecuencia con la cual se puede obtener semen de un carnero
depende de su líbido, condición corporal, edad, etc., se recomienda un régimen de 2-3
saltos por día por un período de 4-5 días, seguido de un descanso de 2-3 días.
El examen del semen al microscopio durante el transcurso de la inseminación
permitirá ir verificando su motilidad. El semen se homogeneizará mediante agitación,
en forma periódica, durante su utilización. El material de inseminación que entre en
contacto con el semen estará debidamente templado y seco.
(Para mayor información consultar el Manual de "Obtención, procesamiento y
conservación del semen ovino", Comunicación Técnica de Producción Animal del INTA
Bariloche Nº 200).
Inseminación artificial cervical
La inseminación cervical puede llevarse a cabo mediante una pistola de
inseminación multidosis, que permite mediante un émbolo dentado, inseminar varias
ovejas una vez cargado el semen, así como graduar el volumen de la dosis de
inseminación.
El semen se aspira desde el tubo de colección, dejando previamente una cámara
de aire de 2 cc.
El lugar donde se practicará la inseminación debe estar limpio, a una
temperatura ambiental de 20-25 ºC y libre de corrientes de aire.
Las ovejas deben sujetarse en un mínimo de tiempo, evitando causar stress
innecesario en los animales.
Para realizar la inseminación cervical, las hembras se presentan inclinadas
cabeza-abajo, con los cuartos traseros montados sobre una baranda o riel. También
podrán sujetarse mediante un brete giratorio situado a la salida de la manda.
Se limpia la vulva con una toalla de papel descartable y se aplica una muy
pequeña cantidad de vaselina para facilitar la introducción del vaginoscopio. Este se
introduce lentamente hasta el fondo de la vagina de la hembra, donde se localiza el
orificio de entrada al útero (cérvix). En el caso de presentarse moco abundante que
dificulta su localización, mediante una vaina plástica con jeringa, se absorbe y se
elimina.
Se solicita el semen a un auxiliar. La punta de la vaina de inseminación se guía
hasta la entrada del orificio uterino y es introducida mediante suaves movimientos
giratorios, hasta donde se presente resistencia (Gráfico III).
Una vez descargado el semen es conveniente que la hembra permanezca
durante 2 ó 3 minutos en la posición de inseminación, y luego en un brete contiguo a los
machos por un par de horas.
Los porcentajes de preñez logrados en inseminación cervical con semen fresco,
y dosis de 100-150 millones de espermatozoides, varían entre el 60 y 70%.
Gráfico III. Inseminación artificial por vía vaginal
INSEMINACION ARTIFICIAL CON SEMEN CONGELADO
En el ovino, el uso de esta técnica es de aplicación reciente, debido a que tanto
la dificultad que presenta el cuello uterino de la oveja para ser traspuesto por la vaina
de inseminación (vía vaginal), así como la reducción de la viabilidad espermática
producida por el proceso de congelamiento y descongelamiento, impedían obtener
tasas de preñez semejantes a otras especies. Los porcentajes de preñez obtenidos
por medio de la inseminación cervical con semen congelado varían entre el 20 y el 25%.
A comienzos de la década del 80, investigadores australianos desarrollaron una
técnica de inseminación intrauterina por laparoscopía, que depositando el semen
descongelado directamente en la luz de los cuernos uterinos, permitía obtener
porcentajes de preñez superiores al 50%.
Esta técnica permite asimismo realizar un uso muy eficiente del semen. Al
depositarse la dosis de inseminación en proximidad del ovario, basta un bajo número
de espermatozoides para preñar una hembra. Esto permite obtener, mediante una
adecuada dilución y fraccionamiento del semen, entre 60 y 150 dosis fecundantes de
un mismo eyaculado (3000-7000 millones de espermatozoides).
Descongelamiento y examen del semen post descongelamiento
El descongelamiento del semen se realiza a una temperatura de 36 ºC. Una vez
descongelado, es conveniente proceder a su rápida utilización. Si el semen fue
congelado en pastillas, su descongelamiento puede llevarse a cabo en tubos de
hemólisis secos mantenidos a esa temperatura en baño de agua. Se agitarán durante
un minuto dentro del baño para asegurar un descongelamiento homogéneo.
Si el congelamiento del semen se realizó en pajuelas, éstas se agitarán durante
15 segundos bajo el agua. La pajuela es retirada del baño y secada con una toalla de
papel descartable. Se le cortan ambos extremos para proceder a su vaciado, ya sea en
un tubo de hemólisis o directamente en la vaina de inseminación.
La evaluación de la calidad seminal al descongelamiento es de suma importancia.
Normalmente se evalúan 2 ó 3 dosis por partida. Es necesario hacer varias
observaciones de la misma pajuela o pastilla.
Inmediatamente después del descongelamiento, se coloca una gota de semen en
portaobjetos templado sobre platina térmica, realizándose una observación al
microscopio de la motilidad masal.
A continuación se coloca una gota de semen entre porta y cubreobjeto
templados. En esta observación se estima el porcentaje de espermatozoides vivos, así
como la motilidad individual progresiva (valor subjetivo de la velocidad de
desplazamiento hacia adelante de los espermatozoides vivos; 0, mínimo; 5, máximo).
Para aceptar una partida, el semen debe poseer:
a) motilidad masal al descongelamiento,
b) un porcentaje de espermatozoides vivos igual o superior al 30% y
c) motilidad individual progresiva igual o superior a 2.5.
Preparación de las hembras para inseminar
Las ovejas se encerrarán durante la mañana del día anterior a la inseminación,
permaneciendo en ayuno de agua y forraje por 24 horas. Esto reduce el contenido del
rumen, facilitando la localización de los ovarios y úteros, evitando además la
regurgitación desde el rumen durante la laparoscopía.
Las hembras son aseguradas en una camilla, en decúbito dorsal, donde se les
esquila y lava el abdomen con jabón blanco. El animal se presenta al inseminador con
los cuartos hacia arriba, en una inclinación de 45º.
Inseminacion artificial intrauterina
El material de laparoscopía (endoscopio, trócares de 5 y 7 mm y cánulas
correspondientes) se coloca en una bandeja con una solución desinfectante de un
amonio cuaternario (DG6), y será devuelto a la bandeja entre inseminación e
inseminación.
Para llevar a cabo la inseminación intrauterina, se introduce en la cavidad
abdominal un trócar de 7 mm y cánula a la izquierda de la línea media de la oveja y a
unos 5 cm de la ubre, cuidando de no perforar las venas visibles a simple vista. Antes
de introducir el trócar de 5 mm y cánula a la derecha de la línea media, es conveniente
dejar ingresar aire dentro de la cavidad abdominal, lo que facilita la visualización de
los órganos internos. Reemplazando el trócar de 7 mm por el laparoscopio, se examina
la cavidad abdominal para la localización de los cuernos uterinos. A través de la cánula
de 5 mm, se introduce el transcap con la vaina o aspic de inseminación (aspic IVM
Cassou, L'Aigle, Francia), con el volumen requerido de semen (Gráfico IV).
Gráfico IV. Inseminación artificial por laparoscopía
La inseminación de la dosis seminal se realiza mediante inyección en el tercio
medio y en dorsal del cuerno uterino, depositándose la mitad de la dosis de semen. El
semen debe fluir libremente hacia el interior del útero. A continuación, se repite la
maniobra en el otro cuerno.
Luego de la deposición del semen, se retira la vaina de inseminación y el
laparoscopio, permitiendo la salida de aire del interior de la cavidad abdominal, antes
de retirar las cánulas.
Una vez finalizada la inseminación es conveniente que los animales permanezcan
por 2-3 horas en un corral, antes de ser trasladados al campo.
El volumen de la dosis utilizado normalmente en inseminación laparoscópica es
de 0.25 cc. El número de espermatozoides totales por dosis de inseminación varía
entre 40 y 50 millones, obteniéndose tasas de preñez del 50 al 60%.
INSEMINACION TRANSCERVICAL CON SEMEN CONGELADO
Si bien el desarrollo de la técnica de IA intrauterina permitió difundir el
empleo del semen congelado con porcentajes aceptables de preñez en la especie ovina,
investigadores de distintas partes del mundo continúan buscando la posibilidad de
desarrollar un método más económico y sencillo que permita realizar la deposición del
semen en el útero a través del canal cervical.
Entre los distintos factores que afectan los porcentajes de preñez en IA
cervical con semen congelado se citan: el momento de deposición del semen en el cuello
uterino en relación a la ovulación o celo, el número de espermatozoides por dosis de
inseminación y fundamentalmente la profundidad de deposición del semen en el canal
cervical. En la mayoría de las ovejas rara vez se supera el centímetro de profundidad.
Cuando se logra trasponer el cérvix con la pipeta de inseminación y la deposición del
semen se realiza en el cuerpo del útero, se alcanzan porcentajes de preñez similares a
los obtenidos por IA laparoscópica.
Recientemente un grupo de investigadores de la Universidad de Guelph
(Canadá) desarrolló un método de IA (Guelph System for Transcervical Artificial
Insemination, GST-AI), que permite trasponer el cérvix de las ovejas en el 80-90% de
los casos, citándose porcentajes de preñez superiores al 40%. La fertilidad alcanzada
con este método es hasta el momento muy variable (19-53%), dependiendo de la
experiencia del técnico y en relación a la profundidad de penetración del cérvix. Se
supone, sin embargo, que existen otros factores, aún desconocidos, que determinan
dicha variación.
La oveja se sitúa en una camilla especial, que permite su inmovilización en
posición reclinada y dorsal, con la cabeza hacia abajo y las extremidades traseras
retraídas. Se introduce un vaginoscopio que posibilita la localización del cérvix y
permitirá su fijación posterior por medio de un fórceps (Bozman). El fórceps se utiliza
asimismo para aplicar una suave tracción del cérvix hacia arriba, facilitando la
introducción de una pipeta de inseminación de acero inoxidable y diámetro fino, en el
canal cervical y hacia el lumen o cuerpo del útero.
La IA se lleva a cabo 50 a 56 horas post-retiro de las esponjas intravaginales,
utilizándose dosis de inseminación que varían entre los 80 a 150 millones de
espermatozoides.
Este método de inseminación fue puesto a prueba en Australia, por técnicos
con distinto grado de entrenamiento -sin experiencia y con entrenamiento previo-,
obteniéndose porcentajes de preñez del 19 y 26%, respectivamente. Ambos grupos de
técnicos alcanzaron porcentajes de penetrabilidad del cérvix (43 y 76%,
respectivamente), menores a los obtenidos en Canadá. Este hecho estaría relacionado
con el tiempo transcurrido entre la última parición y el momento de inseminación o
servicio de la majada, que es tradicionalmente menor a los 4 meses en las majadas
canadienses y de alrededor de 7 meses en las majadas australianas.
MOMENTO DE LA INSEMINACION ARTIFICIAL
De acuerdo al método de sincronización de estros que se haya utilizado, la
inseminación se realizará en forma sistemática o posterior a la detección de celos.
Cuando se utilizan esponjas intravaginales en combinación con PMSG, la mayoría de las
ovejas presenta celo 48 horas después del retiro de las esponjas, ovulando a las 60
horas. La inseminación cervical sistemática se realiza alrededor de 12 horas antes de
la ovulación, o sea entre las 48 y 54 horas post-tratamiento hormonal; mientras que la
inseminación intrauterina, se realiza próxima al momento de la ovulación, o sea entre
las 58 y 66 horas post-tratamiento.
Los celos naturales, sincronizados por efecto macho o por la administración de
prostaglandinas (2º celo post-tratamiento), pueden detectarse mediante la utilización
de machos marcadores. La detección de celos se llevará a cabo preferentemente 2
veces/día. La ovulación se presenta 25 a 30 horas después del inicio del celo, por lo
que para realizar la IA cervical 12 horas antes de la ovulación, las hembras apartadas
en celo por la mañana, se inseminarán por la tarde; y las apartadas por la tarde, se
inseminarán por la mañana.
MANEJO DE LAS OVEJAS DESPUES DE LA INSEMINACION
ARTIFICIAL
Las hembras que no respondieron a la inseminación, pueden ser servidas en el
celo retorno, a fin de obtener un porcentaje de parición mayor. En este caso, se
introducen machos enteros 10-12 días después de la inseminación en una proporción
del 3-4%.
Las hembras gestantes serán destinadas a los mejores potreros, especialmente
en el último tercio de la gestación y en los primeros 2 meses de lactancia, cuando la
demanda nutricional es más alta. Será conveniente que en estos cuadros tengan fácil
acceso a las aguadas y a reparos naturales.
Si es necesario conocer la identidad de los padres, se realizará control de los
nacimientos durante la parición. Los cuadros de parición no muy extensos facilitan las
recorridas diarias, siendo aconsejable no llevar perros durante las mismas.
Cuando las madres han sido inseminadas sistemáticamente, se facilita el
control de los nacimientos, dado que la parición es más concentrada. Sin embargo, si
las condiciones climáticas suelen ser adversas durante la parición, será recomendable
distanciar entre sí los días de inseminación, a fin de disminuir el riesgo de pérdidas
por mortandades perinatales.
BIBIOGRAFIA
-Cueto, M.; García Vinent, J.; Gibbons, A.; Wolff, M. y Arrigo, J. (1993). Obtención,
procesamiento y conservación del semen ovino. Manual de divulgación.
Comunicación Técnica de Producción Animal del INTA Bariloche Nº 200.
■ https://slideplayer.es/slide/1371671/
■ https://www.slideshare.net/luviu/inseminacion-artificial-a-tiempo-fijo-en-ovinos-
en-medio-rural
