LABORATORIO DE QUÍMICA

CURSO: QUÍMICA
PROFESOR: Yojani Bereniz Sala

INFORME DE PRÁCTICAS
PRÁCTICA N°: 12
TÍTULO: PROPIEDADES QUIMICAS AMINOACIDOS Y PROTEINAS
INTEGRANTES:
María lucero cañañaupa
Lisbeth Callata Churata
Dayana Centeno Cotrina

HORARIO DE PRÁCTICA

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: Jueves 9/07

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: Martes 14/07

LIMA -PERU
CAPÍTULO

12
Propiedades químicas
de aminoácidos y
proteínas
Fundamento Teórico

Propiedades químicas de
aminoácidos y proteínas

Las proteínas desnaturalizadas son químicamente

más reactivas y más fácilmente hidrolizadas por
enzimas. Si se trata de proteínas con actividad
biológica, ésta desaparece por la
desnaturalización. Para muchas proteínas, el
aspecto más visible de su desnaturalización es la
disminución de su solubilidad en agua
produciéndose la coagulación.
La desnaturalización puede realizarse por acción
del calor y al colocar la proteína a un pH muy alto
(mayor que 10) o muy bajo (menos que 3) por
adición de ácidos o álcalis concentrados.

Reacción xantoproteica Reacción de Biuret

Reacción con ninhidrina Prueba de Millón
Esta reacción se debe a la Las proteínas y péptidos que contienen
Los aminoácidos en solución presencia de grupos por lo menos 3 unidades aminoácidos Es una prueba característica
acuosa, calentados con (2 enlaces peptídicos) dan una
bencénicos en ciertos coloración violeta característica al para restos fenólicos, dando
ninhidrina (hidrato de aminoácidos. El ácido nítrico
tricetohidrindeno) dan un
reaccionar (en medio alcalino) con una una coloración rosa salmón:
en presencia de esos grupos solución de sulfato cúprico. Esta el reactivo de Millón es una
producto de condensación de prueba es muy sensible, utilizada para
color violeta o violeta azulado. aromáticos da lugar a la detectar la presencia de enlaces mezcla de mercurio y ácido
Con esta reacción podemos formación de derivados peptídicos y también en la nítrico (nitrato mercurioso y
identificar grupos aminos libre nitrados de color amarillo determinación cuantitativa de mercúrico).
proteínas. Es negativa con los
en posición α que por alcalinización dipéptidos y con los aminoácidos
intensifican su color libres.
1. Identificación de α – aminoácidos libres: Reacción de ninhidrina

NINHIDRINA OBSERVACIÓN
α - AMINOÁCIDO Rx (+) Azul-morado
ALBÚMINA Rx (-) Incoloro
MUESTRA Rx (-) Incoloro
PROBLEMA

EVALUACIÓN
¿Cómo verificó la presencia de α-aminoácidos libres?

Por la coloración a color azul o morado. Los aminoácidos en soluciones acuosas y

calentado con ninhidrina forman una reacción de color morado o azul. De este modo,
la reacción con el ensayo de ninhidrina dio positivo sólo con la glicina, identificando
que tiene un grupo amino libre en posición α.

¿Por qué la albúmina, no tuvo el mismo comportamiento?

Porque es una proteína, y presenta enlaces peptídicos. En el ensayo con ninhidrina,

sólo se reconoce a los aminoácidos libres, y no a las proteínas como la albúmina

2. Reconocimiento de R anillos aromáticos: Reacción xantoproteica

XANTOPROTEICA OBSERVACIÓN
TIROSINA Rx (+) Amarillo-pardo
GLICINA Rx (-) Incoloro
ALBUMINA Rx(+) Coágulo amarillo
MUESTRA PROBLEMA Rx(+) Coágulo amarillo

EVALUACIÓN
¿De qué manera identificó que el aminoácido y la proteína cuenta con restos bencénicos?

- En los aminoácidos, por la coloración amarillo-pardo.

- En las proteínas, por la formación de un coágulo amarillo.
- Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con el ácido
nítrico formando derivados de color amarillo, por lo cual la reacción permite
reconocer a aminoácidos como la tirosina; y proteínas como la albúmina y muestra
problema.
¿La albúmina tiene restos bencénicos?
- Si, porque la reacción fue positiva, y ello se debe a la presencia de grupos
bencénicos. Donde, el ácido nítrico al entrar en contacto con tales grupos
aromáticos; forma derivados nitrados de color amarillo. Asimismo, desnaturalizan a
la proteína por la presencia de ácido, formándose un coágulo amarillo.
¿A qué conclusión llegó con su muestra problema?

- Que es una proteína que presenta restos bencénicos, pues al igual que la albúmina,
también dio positivo en la reacción xantopreteica.
3. Reconocimiento de restos fenólicos: Prueba de Millón

MILLÓN OBSERVACIÓN
TIROSINA Rx(+) Rosa-guinda
GLICINA Rx(+) Rosa-guinda
ALBUMINA Rx(+) Coágulo rosa
MUESTRA PROBLEMA Rx(+) Coágulo rosa

EVALUACIÓN
¿Cómo verificó la presencia de restos fenólicos?

Por el cambio de coloración, donde en proteínas la reacción da un coagulo de color rosa. Mientras
que en los aminoácidos la coloración es rosa-guinda. De este modo, la reacción reconoce todo tipo
de anillo aromático o restos fenólicos que, a diferencia de la xantorpoteica, la prueba del millón es
más general, reaccionando ante silenos toluenos, etc.

¿Si en la prueba xantoproteica dio positiva la reacción, necesariamente la misma muestra tiene que
dar positiva la prueba de Millón?

Si, porque se identifico la presencia de restos bencénicos, los cuales son parte de los anillos
aromáticos que en la prueba de Millón es positivo.
¿Si una muestra da positiva la prueba de Millón, necesariamente tiene que dar positiva la prueba
xantoproteica?

No, porque la prueba del millo reconoce cualquier anillo aromático, por lo que la prueba xantoproteica
puede dar positivo o negativo, dependiendo si la muestra tiene restos bencénicos u otro tipo de anillo
aromático.
¿A qué conclusión llegó con su muestra problema?

La muestra problema es una proteína con anillos aromáticos, que con la prueba de millón, se formó
un sobrenadante el cual se dio por la formación de un coágulo debido a la desnaturalización.
4. Prueba para aminoácidos azufrados

ACETATO DE OBSERVACION
PLOMO/NaOH

CISTEINA Rx + Color negro o gris

GLICINA Rx + Color negro o gris

ALBÚMINA Rx + Marrón grisáceo

MUESTRA Rx - Incoloro
PROBLEMA

EVALUACIÓN
¿De qué manera verificó la presencia de restos azufrados en aminoácidos y proteínas?

El reconocimiento de aminoácidos azufrados se evidencio mediante la formación de un

precipitado gris oscuro o negro; en cuanto a, las proteínas por el precipitado marrón
grisáceo. La reacción se desarrolla con el acetato de plomo en medio alcalino formando el
sulfuro de plomo. Además, se debe a que el azufre se libera en medio alcalino y a
ebullición, formándose la sal de plomo

¿A qué se debe el color marrón-gris característico de esta prueba?

Por la presencia de restos azufrados en la proteína los cuales, cambian de color a marrón
grisáceo por la presencia del acetato de plomo.
¿A qué conclusión llegó con su muestra problema?

La muestra problema no presenta compuestos azufrados. Se puede identificar, agregando

gotas de NaOH al 40% en la muestra; de esta manera, al agregar el acetato de plomo no
cambia de color.
5. Reconocimiento de enlaces peptídicos: Reacción de Biuret

BIURET OBSERVACION

CISTEINA Rx - Celeste

GLICINA Rx - Celeste

ALBÚMINA Rx + Lila o morada

MUESTRA Rx + Lila o morada

PROBLEMA

EVALUACIÓN
¿En las pruebas realizadas con el reactivo de Biuret, encontró alguna diferencia con cada
una de las muestras ensayadas? ¿Cómo lo diferenció?

Si, en el caso de los aminoácidos el Biuret dio negativo, que debido a los iones cúpricos se
quedo en color celeste. Por otro lado, en las proteínas se visualizó un color lila o morada,
pues se reconoce los enlaces peptídicos.

¿Su muestra problema tiene enlaces peptídicos?

Si, porque al añadir gotas de hidróxido de sodio al 10% y solución de sulfato de cobre al
1%, cambia de color a uno lila o morada. De esta manera, se concluye que la muestra
problema es una proteína por los enlaces peptídicos.

6. Desnaturalización de la albúmina

TEMPERATURA (°C) Rx (-) - incoloro

ALCOHOL ETÍLICO Rx (+)- pp blanco
ÁCIDO CLORHÍDRICO CONCENT. Rx (+)- pp blanco
ÁCIDO NÍTRICO CONCENT. Rx (+)- pp amarillo
SOLUCIÓN CONCENT. DE NaOH Rx (+)- pp blanco
 CUESTIONARIO
1. ¿Con cuál de los reactivos empleados en la práctica se utiliza para
verificar la presencia de α-aminoácidos en una hidrólisis de la proteína?

- La ninhidrina es un poderoso agente reactivo común para visualizar las

bandas de separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis,
también es utilizada con fines cuantitativos para la determinación de
aminoácidos. Reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se
encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que varía de Celeste a lila
intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se
estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es
independiente de la coloración original del aminoácido. Esta prueba es
positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos casos
donde no da positiva la prueba de Biuret, da positiva la de ninhidrina, e
indica que no hay proteínas, pero sí hay aminoácidos libres de un pH 4 y 8.

2. ¿Cuál es el grupo responsable de la reacción positiva con la prueba

xantoproteica?

- Los responsables de las reacciones positivas en la prueba Xantoproteica

son los bencenos.
3. ¿Cómo comprobaría que la albúmina de huevo contiene aminoácidos con
restos fenólicos?
- La albumina frente al ensayo de Millon reacciona positivo presentando un
coagulo-rosa a diferencia del ensayo de Millon que reconoce a los restos
fenólicos.
5. ¿Con qué prueba reconocería, los enlaces peptídicos de una proteína?
- Con la prueba de Biuret: El nombre de la reacción procede del compuesto coloreado formado
por la condensación de dos moléculas de urea con eliminación de amoníaco. Esta reacción está
dada por aquellas sustancias cuyas moléculas contienen dos grupos carbamino (-CO.NH) unidos
directamente o a través de un solo átomo de carbono o nitrógeno. El reactivo de Biuret
contiene Cu2SO4 en solución acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH o KOH). La
reacción se basa en la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los
pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.
Esta última reacción provoca un cambio de coloración: Lila o morado
7. Explique a qué se debe el fenómeno de la desnaturalización de las proteínas.
Una proteína se desnaturaliza cuando pierde si estructura secundaria, terciaria o cuaternaria.
La desnaturalización es la desorganización de la forma molecular completa de una proteína.
Esta puede presentarse como un desdoblamiento o desenrolla miento de las hélices o como
separación de subunidades. La efectividad de un agente desnaturalizante depende del tipo de
proteína. La primera teoría sobre desnaturalización razonable fue enunciada por Wu. En esta
teoría se supuso que la desnaturalización consiste en una reorganización de las cadenas
péptidas en la molécula de la proteína debido a la rotura de ciertos enlaces débiles, mediante
agentes de desnaturalización (calor, detergentes, disolventes orgánicos, ácidos y bases fuertes,
radiación UV, solución de urea, radiación por microondas, etc.); los enlaces débiles
mencionados mantendrían juntas las cadenas.
BIBLIOGRAFIA

1.- Holum, John R. Química Orgánica: Curso breve. Ed. LIMUSA. México.
1997.

2.- Cueva , J. León. J y Fukusaki .,A. Laboratoriod eQuímica Orgánica . Ed.

Juam Gutemerg Lima Perú- 2008

3.- Mc Murray, John Química Orgánica. Ed. IBEROAMÉRICA. México. 2007

4.- Morrison, Robert y Boyd, RQuímica Orgánica. Ed. ADDISON- WESLEY

IBEROAMERICANA. EUA. .2006. 57. Solomons, T.W. Química Orgánica.
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