1 Armonización y estandarización.

Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

Capítulo 25.

Armonización y estandarización.
Buenas prácticas de laboratorio (BPL)
ANTONIO VILUMARA TORRALLARDONA
Jefe de la Unidad de Garantía de Calidad de I+D
Laboratorios Dr. Esteve, S.A.
Barcelona

LAS BUENAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO (BPL). HISTORIA Y APLICACIÓN

PARTES DE QUE CONSTAN LOS PRINCIPIOS DE LAS BPL

ORGANIZACIÓN Y PERSONAL DEL LABORATORIO DE ENSAYO

Dirección del laboratorio
Director del estudio
Investigador principal
Personal del estudio

PROGRAMA DE GARANTÍA DE CALIDAD

INSTALACIONES
Instalaciones del sistema experimental
Instalaciones para la manipulación de los productos de ensayo y de referencia
Instalaciones de archivo
Eliminación de residuos

APARATOS, MATERIALES Y REACTIVOS

SISTEMAS EXPERIMENTALES

PRODUCTOS DE ENSAYO Y DE REFERENCIA

PROCEDIMIENTOS NORMALIZADOS DE TRABAJO (PNT)

REALIZACIÓN DEL ESTUDIO

Protocolo
Recopilación de datos

INFORME FINAL

ARCHIVO. ALMACENAMIENTO Y CONSERVACION

RESUMEN

BIBLIOGRAFÍA
2 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

LAS BUENAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO (BPL). HISTORIA Y APLICACION

Las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) son un sistema de calidad que recopilan los procesos
organizativos y las condiciones bajo las cuales los estudios no-clínicos de seguridad sanitaria y me-
dioambiental son planificados, realizados, controlados, registrados, archivados e informados.

Su objetivo es asegurar la calidad e integridad de todos los datos obtenidos durante un estudio
determinado, y su cumplimiento es necesario para todos aquellos estudios no clínicos de seguridad
sobre productos farmacéuticos, productos pesticidas, productos cosméticos, medicamentos veterina-
rios, así como, aditivos alimentarios, aditivos de piensos y productos químicos industriales.

La calidad comparable de datos experimentales constituye la base del reconocimiento mutuo entre
los diferentes países. Si cada uno de éstos puede confiar en los datos experimentales obtenidos en
otros países, se evita la duplicidad o repetición de los ensayos. De este modo, se ahorran gastos, tiem-
po y reducción cuantitativa de animales destinados a experimentación. La aplicación de estos princi-
pios debe contribuir a eliminar barreras técnicas en el comercio y continuar mejorando la protección
de la salud humana y del medio ambiente.

Históricamente, los pasos seguidos hasta las normas y disposiciones que rigen actualmente son los
siguientes: Hasta mediados de los años 70, las autoridades de la Food and Drug Administration
(FDA) asumían que los estudios presentados para su aprobación, cumplían con uno de los requisitos
recomendados, que era el de la fiabilidad y exactitud de los datos obtenidos durante el experimento.
Las autoridades observaron que en algunos estudios presentados por las compañías farmacéuticas
había datos contradictorios y evidencias de prácticas de laboratorio inaceptables. Eso hizo que en los
años 1975 y 1976, los propios laboratorios farmacéuticos solicitaran a la FDA la redacción y el esta-
blecimiento de una normativa que regulase los ensayos toxicológicos, a fin de corregir y evitar las
anomalías observadas, anomalías que incluían fundamentalmente las siguientes deficiencias o errores:

• Insuficiente planificación de los ensayos.

• El personal técnico desconocía la importancia de atenerse exactamente a los protocolos
experimentales.
• Los datos del estudio no estaban sujetos a una supervisión periódica.
• Deficiencias en la forma de tomar, valorar y archivar los datos primarios.
• Los protocolos no permitían la evaluación de todos los datos disponibles.
• Imposibilidad de certificar la cualificación científica y experiencia del personal impli-
cado en el ensayo
• Aplicación inadecuada de las técnicas de laboratorio y del manejo de los animales de
experimentación.
• Los estudios contratados por terceros no eran supervisados por los centros encargados.
• Algunos datos obtenidos durante el ensayo, no constaban en el informe final.

A la vista de la baja calidad encontrada en algunos informes, después de un programa de inspec-

ciones llevado a cabo en todo el país y a fin de intentar solucionar estas incorrecciones, el 19 de no-
viembre de 1976 se propuso un proyecto de norma que la FDA publicó en el Federal Register (FR),
denominándolo “Good Laboratory Practice Regulations for Nonclinical Laboratory Studies”. A par-
tir de este momento se sucedieron toda una serie de inspecciones, publicándose sus resultados. Des-
pués de unos ligeros cambios salió la versión definitiva de las BPL en el Code of Federal Regulations
(CFR) (21, Part. 58), para ser revisado con posterioridad (véase CFR, vol. nº 42, nº 172,1987).

La Organización para la Cooperación y Desarrollo Económico (OCDE) a la vista de la divulgación

de dichas normas por la FDA, tomó conciencia del problema y un grupo de expertos, elaboraron una
guía sobre los Principios de las BPL muy parecida a la de la FDA, editándose en 1981 con el título de
“OECD Principles of Good Laboratory Practice”. Esta guía, a pesar de que no es de obligado
cumplimiento, sí que es una recomendación a seguir para todos los países que forman dicha
3 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

organización. Durante los años 1995 y 1996 se realizó una revisión, redactando una nueva versión a
mediados de 1998. La Unión Europea (UE) asumió las BPL de la OCDE, publicando las siguientes
directivas:
• 9 junio 1988: Directiva 88/320/CEE relativa a la inspección y verificación de las BPL.
• 18 diciembre 1989: Directiva 90/18/CEE por la que se adapta al progreso técnico el
Anexo de la Directiva 88/320/CEE.

Hay que indicar que las directivas de la UE para ser efectivas deben ser publicadas en cada uno de
los países que forman dicha Unión. En España los dos Reales Decretos (RD) que establecen los prin-
cipios de las BPL son:
• RD 822/1993, de 28 de mayo (BOE nº 128)
• RD 2034/1994, de 14 de octubre (BOE nº 281)

Considerando las modificaciones realizadas por la OCDE y siendo estas publicadas en 1998, la UE
ha revisado las dos directivas anteriormente señaladas, a fin de incorporar estas modificaciones, que-
dando reflejadas en las dos nuevas Directivas:
• 8 marzo 1999: Directiva 1999/11/CE
• 8 marzo 1999: Directiva 1999/12/CE

Como consecuencia de estas publicaciones, España también ha modificado sus dos RD, sustitu-
yendo el anexo del RD 822/1993 por el RD 1369/2000 de 19 de julio (BOE núm. 173) y el RD
2043/1994 por la ORDEN del 14 de julio de 2000 (BOE núm. 103). La directiva 1999/11/CE, estable-
ce que las BPL “deben aplicarse a los ensayos no clínicos de seguridad sobre productos de ensayo
contenidos en productos farmacéuticos, plaguicidas, cosméticos, medicamentos veterinarios, aditivos
utilizados en la alimentación humana y animal, y sustancias químicas industriales. Estos productos de
ensayo suelen ser sustancias químicas sintéticas, pero también pueden ser de origen natural o biológi-
co y, en algunas circunstancias, puede tratarse de organismos vivos. El propósito de los estudios con
estos productos es obtener datos sobre sus propiedades y su inocuidad para la salud humana y me-
dioambiente”. En este contexto podríamos considerar como estudios de seguridad, y por lo tanto rea-
lizarse conforme a las BPL, los siguientes tipos de estudios:
• Estudios de toxicidad aguda.
• Estudios de toxicidad por dosis repetidas (subagudas y crónicas).
• Ensayos de mutagénesis, "in vivo" e "in vitro".
• Estudios de carcinogénesis.
• Estudios de fototoxicidad y estudios de ototoxicidad.
• Ensayos de tolerancia y ensayos de irritación (ocular y dérmica).
• Estudios de teratogénesis.
• Efectos de la administración perinatal y posnatal inmediata.
• Estudios de toxicocinética.
• Análisis químico de las nuevas sustancias.
• Ensayos de seguridad farmacológica.

PARTES DE QUE CONSTAN LOS PRINCIPIOS DE LA BPL

Siguiendo lo establecido en la directiva 1999/11/CE, los principios de las BPL están compuestos
por los siguientes apartados:

Sección I
• Introducción.
• Prefacio.
• Ámbito de aplicación.
• Definición de términos.
4 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

Sección II
• Organización y personal del Laboratorio.
• Programa de garantía de calidad (PGC).
• Instalaciones.
• Aparatos, materiales y reactivos.
• Sistemas experimentales.
• Productos de ensayo y de referencia.
• Procedimientos normalizados de trabajo (PNT).
• Realización del estudio.
• Informe final.
• Archivo y conservación de registros y materiales.

Como muchas otras normas, las BPL son de difícil interpretación ya que hay muchos aspectos
prácticos del laboratorio que no están claramente definidos en el texto. Pueden existir diferencias de
criterio con los mismos técnicos del laboratorio en el momento de su aplicación. Para subsanar preci-
samente estas diferencias, los distintos organismos han publicado una serie de guías complementarias
a las directivas que intentan aclarar aspectos confusos de dicha normativa. En este sentido la OCDE
ha publicado hasta el momento, 11 monografías. También en España se han publicado cuatro docu-
mentos por parte del Ministerio de Sanidad y Consumo, que intentan mejorar y unificar la aplicación
de las BPL. Son guías de trabajo y deben ayudar a mejorar la interpretación de los dos RD publicados
en nuestro país. Hay otras guías e incluso reglamentaciones que complementan también las BPL. Es el
caso por ejemplo de la guía para el uso y cuidado de los animales de experimentación y de las diferen-
tes guías sobre higiene y seguridad en el laboratorio o manejo y tratamiento de residuos.

ORGANIZACIÓN Y PERSONAL DEL LABORATORIO

Las BPL recomiendan que las instalaciones dispongan de personal entrenado, cualificado y con
suficiente experiencia, que les permita realizar el ensayo correctamente. Cada una de las personas
involucradas en un estudio, tiene la responsabilidad de asegurar la calidad e integridad de los datos
asociados con dicho estudio.

Para la implantación de las BPL y un buen funcionamiento del centro, es clave que la dirección del
mismo asuma plenamente la decisión del cumplimiento y seguimiento de dichas normativas. Este
apoyo es básico ya que sin él es prácticamente imposible que dichas normas puedan llevarse a cabo en
el laboratorio. Un primer punto es definir claramente el organigrama del laboratorio, en donde queden
definidas las posiciones de todo el personal. Este organigrama debe ir acompañado de documentos en
los que se detallen las titulaciones, capacitaciones, experiencia y descripción del puesto de trabajo
(job description) individualizado para cada profesional o técnico. Estos registros deben estar descritos
en tres documentos distintos: curriculum vitae, descripción del puesto de trabajo y training o registros
de entrenamiento y formación.

Dirección del laboratorio

Se define así al grupo de persones o a la persona con la autoridad y responsabilidad formal de que
el laboratorio esté organizado y funcione de acuerdo con los principios de las BPL. La dirección es la
responsable de la calidad e integridad de los estudios llevados a cabo en su centro, ya que es la que
someterá la aprobación del informe final a las autoridades competentes.

Las responsabilidades de la dirección expuestas en las BPL tienen un impacto sobre el cumpli-
miento de dichas normas. Como más importantes se podrían comentar las siguientes: debe asegurar la
disponibilidad de suficiente personal cualificado, locales apropiados, equipos y materiales para la
oportuna y adecuada realización del estudio. Antes del inicio de cada estudio, la dirección del labora-
torio nombrará un director de estudio con la titulación, capacitación y experiencia apropiadas, debien-
5 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

do también asignar un suplente para su posible sustitución. Si el estudio es multicéntrico debe nom-
brarse un Investigador Principal con capacitación y experiencia adecuadas. La dirección debe imple-
mentar y conducir un sistema efectivo de Garantía de Calidad realizado por personal asignado direc-
tamente por ella, a fin de asegurar que la responsabilidad de la garantía de calidad se ejerza en con-
formidad con los principios de las BPL.

La dirección debe asegurarse que se han establecido y los PNT apropiados y previamente aproba-
dos por ella, tanto originales como sus revisiones. Estos PNT junto con el protocolo aprobado por el
director del estudio, deben ser los documentos básicos y adecuados para obtener la calidad e integri-
dad de los datos. La dirección debe mantener un listado actualizado de los estudios programados que
se lleven en marcha en aquel momento (master schedule) y un archivo histórico de todos los PNT.

Finalmente, la dirección debe nombrar un responsable para la gestión del archivo, en el cual se
guarden todos los datos, especímenes y muestras procedentes de los estudios efectuados en el labora-
torio en condiciones óptimas, y que según las correspondientes regulaciones hay que archivar durante
varios años. Algunas de estas responsabilidades pueden ser delegadas a otras personas dentro de la
organización, debiendo quedar claramente documentadas.

Director del estudio

Es la persona responsable de la realización del estudio no clínico sobre seguridad sanitaria o me-
dioambiental. Tiene la responsabilidad principal de la realización del estudio, así como de la interpre-
tación, análisis, documentación e informe de los resultados del ensayo. Para cada estudio se debe
nombrar un director, altamente cualificado, entrenado y con experiencia técnica para llevar a cabo la
investigación.

También tiene toda una serie de responsabilidades y funciones dentro del laboratorio que debe
asumir y cumplir. Antes del comienzo de un ensayo debe aprobar el protocolo, asegurándose también
que la Unidad de Garantía de Calidad (UGC) disponga de una copia del mismo. Este protocolo y los
correspondientes PNT estarán a disposición del personal asignado al estudio.

Debe asegurarse de que cualquier cambio del protocolo se haga mediante una modificación o una
enmienda, así como los datos primarios obtenidos se registren claramente e íntegramente. También es
responsable de que el estudio se realice de acuerdo con los principios de las BPL, por lo que debe
firmar el informe final incluyendo en el mismo un certificado de cumplimiento de las BPL. Por últi-
mo, debe asegurarse que al término del estudio, el protocolo, informe final, datos primarios y todo
material perteneciente al mismo, sea archivado adecuadamente.

Investigador principal

Tiene responsabilidades sobre la fase o fases del estudio que le han sido delegadas y debe asegurar
que son seguidos los principios de las BPL.

Personal del estudio

Realizan in situ todo el procedimiento experimental del ensayo y son las responsables de asegurar
que el estudio sea de calidad. Deben conocer claramente las BPL, así como el protocolo y los corres-
pondientes PNT aplicables al estudio que están realizando. El personal tomará las debidas precaucio-
nes sanitarias para minimizar los riesgos para su salud y asegurar la integridad de la investigación.

PROGRAMA DE GARANTÍA DE CALIDAD

Este programa ha de ser independiente de la realización de los estudios y concebido para asegurar
a la dirección que el laboratorio cumple con los principios de las BPL. La puesta en marcha y la for-
mación de este programa es un requisito fundamental para el establecimiento de las BPL. Todo este
6 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

“sistema” debe efectuarse por una o más personas designadas por la dirección y directamente respon-
sables ante ella siendo, por tanto, orgánicamente independiente de todos los jefes de departamento o
sección, debiendo actuar con absoluta independencia.

La dirección debe decidir y designar el personal que llevará a cabo el Programa de Garantía de
Calidad (PGC), estableciendo de forma clara y concisa sus funciones y responsabilidades. Este perso-
nal, dada las características de su trabajo, debe poseer un perfil humano muy específico con capacidad
para el diálogo, flexibilidad y tolerancia, pero sin menoscabo de la calidad de los estudios y del recto
cumplimiento de las normativas. Igualmente debe poseer capacidad de observación y meticulosidad
en su tarea de auditar y supervisar los ensayos, los datos producidos y los informes finales presenta-
dos.

Asimismo, es necesario emprender una importante tarea de información y de formación de todas

las personas relacionadas con el programa, a fin de que se entienda, perfectamente, no sólo su necesi-
dad y beneficio, sino también hacer comprender que su implantación necesita una sincera y decidida
aceptación por parte de todo el personal, ya que si esto no es posible puede comportar graves proble-
mas y poner en peligro el éxito esperado. Algunas de las dificultades de su aceptación se originan por
las inspecciones que el personal de la UGC realiza a los estudios que se están realizando en el labora-
torio y por la mayor cantidad de documentación y por tanto de trabajo que ello origina en el personal.

La finalidad de la UGC es monitorizar cada estudio para asegurar a la dirección que los laborato-
rios, instrumentos, personal, métodos, prácticas, registros de datos y controles se realizan de acuerdo
con los protocolos de los estudios y los PNT aprobados. Esta monitorización se realiza mediante ins-
pecciones periódicas y auditoría del informe final. Las inspecciones pueden ser de tres tipos: basadas
en estudios, en instalaciones y en procesos.

Una vez el personal de la UGC ha realizado la inspección debe realizar un informe de los resulta-
dos observados en la misma, informando de éstos a la dirección y al director del estudio. Este debe
indicar qué acciones correctoras tomará para solucionar las anomalías detectadas, si las hubiese habi-
do. La auditoría del informe final consiste en confirmar que los métodos, procedimientos y observa-
ciones se describen de manera exacta y completa, y que los resultados del informe reflejan los datos
primarios del estudio. Cuando exista esta confirmación, el responsable de la UGC debe elaborar y
firmar una declaración, que se incluirá en el informe final. En la misma se especificaran los tipos de
inspecciones realizadas y sus fechas, incluyendo la fase o fases del estudio inspeccionadas, y las fe-
chas en que los resultados de las inspecciones se informaron a la dirección y al director del estudio.
Esta declaración también sirve para confirmar que el informe final refleja fielmente los datos prima-
rios.

INSTALACIONES

Las instalaciones del laboratorio deben ser las adecuadas para satisfacer los requisitos del estudio,
tanto en tamaño, construcción como ubicación, minimizando las posibles alteraciones que puedan
interferir en la validez del estudio. Los materiales de la construcción deben ser de fácil limpieza. El
tamaño de las instalaciones, éstas deben tener una suficiente capacidad para producir y mantener las
condiciones ambientales requeridas. El diseño de las instalaciones debe proporcionar un adecuado
grado de separación entre las diferentes actividades para asegurar la realización correcta de cada estu-
dio (véase Capítulo 5).

En el siguiente apartado, las BPL hacen referencia a los requisitos mínimos que deben cumplir
ciertos tipos de instalaciones, ya que el estudio que se lleva a cabo puede verse afectado. Diferencian
distintos tipos de instalaciones en función del uso al que están destinadas.
7 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

Instalaciones del sistema experimental

El laboratorio debe tener un número suficiente de habitaciones o áreas con el fin de asegurar la se-
paración de especies, aislamiento de proyectos individuales, salas de cuarentena o alojamiento espe-
cial de animales. También debe tener salas para garantizar el aislamiento de los estudios en los que se
utilicen sustancias u organismos de los que se conozca o sospeche que puedan comportar peligros
biológicos. Para más información respecto a las instalaciones de animales, véase el Capítulo 5.

Deben estar diseñadas, construidas y situadas de modo que se reduzcan al mínimo los trastornos
que puedan influir desfavorablemente en el estudio. Evitar ruidos externos e internos, iluminación
difusa o pobre, olores que puedan proceder de otras salas, etc.

La elección de buenos materiales es también importante. Estos han de proporcionar superficies li-
sas, no porosas, ser impermeables, resistentes a la corrosión y a los agentes químicos, utilizando en la
medida de lo posible aislantes térmicos y acústicos.

Un elemento básico e imprescindible en las instalaciones para animales, es el sistema de aire acon-
dicionado. Las normas BPL no detallan las condiciones en que se deben mantener los animales y se
fundamentan en el anexo II el artículo 5 de la Directiva 86/609/CEE (véase Anexo I).

Instalaciones para la manipulación de los productos de ensayo y de referencia

Para prevenir contaminaciones o mezclas, debe haber salas o áreas separadas para la recepción y
almacenamiento de los productos de ensayo y de referencia, y las operaciones de mezclas de los pro-
ductos de ensayo con un vehículo.

Estas salas o áreas de almacenamiento de los productos de ensayo deben estar separadas de las sa-
las o áreas que contengan los sistemas experimentales, y deben de ser adecuadas para preservar la
identidad, concentración, pureza y estabilidad, así como garantizar un almacenamiento seguro de las
sustancias peligrosas.

Instalaciones de archivo

Su función es ofrecer almacenamiento y una recuperación segura de protocolos, datos primarios,

informes finales, muestras de productos a ensayar y especímenes. El diseño y las condiciones del ar-
chivo protegerán su contenido contra un deterioro prematuro. En el apartado de archivo, almacena-
miento y conservación, se detallan las condiciones que debe reunir este tipo de instalación.

Eliminación de residuos

Dentro del laboratorio, otro tipo de instalación que actualmente tiene mucha importancia y que está
sujeta a normativas específicas a seguir, son las salas o recintos para la recogida, almacenamiento y
eliminación de todos los residuos y animales sobrantes, de forma segura e inocua. La manipulación y
eliminación de residuos debe ser efectuada de forma que no ponga en peligro la integridad del perso-
nal en los estudios que se estén realizando.

APARATOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Los equipos destinados a la obtención, almacenamiento, medida o recuperación de datos, tienen

que pasar por un proceso de validación con el fin de asegurar que su diseño y capacidad sean adecua-
das para las funciones que deben realizar en el estudio. Como ejemplos podríamos incluir, balanzas,
equipos analíticos (HPLC, cromatografía, absorción atómica, etc.), analizadores de sangre y orina,
equipos informáticos utilizados para la obtención directa de datos, ordenadores para el cálculo estadís-
tico, etc. El buen funcionamiento de todos estos instrumentos es esencial para la obtención de datos
válidos y de calidad.
8 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

Periódicamente, han de ser examinados y sometidos a una serie de operaciones de limpieza, man-
tenimiento y calibración de acuerdo con los PNT. Se establecen en el laboratorio planes de acción
para llevar a cabo todos estos procedimientos, muchas veces teniendo en cuenta las recomendaciones
de los propios suministradores y otras con la experiencia del propio laboratorio.

Debe prestarse especial atención a la calibración, señalando su periodicidad en el PNT del aparato
siguiendo los criterios del suministrador o la experiencia del personal. Estará documentada, exigiendo
un certificado o informe de calibración si ésta lo realiza un centro externo. Cualquier cambio de ubi-
cación u operación distinta a la calibración previa obligará a realizar una nueva. Cada aparato debe
llevar una etiqueta con indicación de: fecha de la calibración, firma de la persona que haya realizado
la calibración y fecha de la próxima calibración.

Los patrones para realizar las calibraciones, deben estar certificados por organismos oficiales. Los
equipos de ventilación, aire acondicionado, iluminación, filtros, etc., de las salas de los animales tam-
bién son inspeccionados y mantenidos periódicamente. Otro punto que señala la normativa, es el man-
tenimiento de registros de todos estos controles y actividades lo que implica que cada instrumento
deba poseer una documentación propia en la que se indiquen todas y cada una de las operaciones rea-
lizadas en él.

Todos los programas referentes a la inspección rutinaria, limpieza, mantenimiento y calibración, de

los equipos deben estar detallados en PNT específicos. En éstos se escriben con todo detalle las ope-
raciones que hay que realizar (puesta en marcha y apagado, , períodos de limpieza, calibraciones,
conservación, condiciones de los contratos de mantenimiento, etc.), nombrando previamente para
cada aparato o conjunto de ellos a una persona responsable del control de las operaciones.

En un laboratorio es importante que los productos químicos, reactivos y soluciones estén etiqueta-
dos claramente, indicando la identidad (con su concentración, si procede), fecha de caducidad y las
instrucciones específicas de almacenamiento. La información referente a la procedencia, fecha de
preparación y estabilidad no es necesario que estén señaladas en la etiqueta, pero sí debe estar dispo-
nible. La fecha de caducidad puede ser ampliada en base a nuevos ensayos, que demuestren que la
estabilidad es correcta durante este nuevo período.

SISTEMAS EXPERIMENTALES

Son el sujeto de estudio con independencia de su origen biológico, químico o físico o una combi-
nación de todos ellos. Normalmente el sistema biológico más utilizado en un laboratorio es el animal
de experimentación, sujeto a una amplia reglamentación (véase Capítulo 12).

Otras normas que también regulan el uso, cuidado y las instalaciones del animal de laboratorio son
las BPL. Un punto importante que debe incluirse dentro del PGC, es el de establecer y mantener las
condiciones adecuadas para el alojamiento, manejo y cuidado de los reactivos biológicos, asegurando
la calidad de los datos. Actualmente el animal de laboratorio es objeto de una auténtica prioridad y
vigilancia en el campo de la experimentación, ya que si queremos garantizar el nivel científico de los
ensayos, debemos asegurar la calidad de los animales utilizados.

Todos los animales procedentes del exterior del centro, deben ser aislados inmediatamente después
de su recepción hasta que su estado sanitario haya sido evaluado, manteniendo registros de su proce-
dencia, fecha y condiciones de llegada. Estos períodos de cuarentena vienen regulados para cada es-
pecie en al anexo II de la directiva 86/609/CEE y deben fijarse en los correspondientes PNT del labo-
ratorio. Si durante este período se produjera alguna mortalidad, estos lotes no serán utilizados en estu-
dios y cuando sea apropiado, serán sacrificados. El tratamiento de cualquier enfermedad que se pro-
duzca antes o durante un estudio debe ser registrado.
9 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

Una vez terminado el período de cuarentena y siempre que las condiciones de trabajo o hábitat se-
an distintas a las del experimento, se aclimatarán durante un período adecuado, a las nuevas condicio-
nes ambientales.

Cuando se somete a los animales a un tratamiento u observación, y especialmente cuando son reti-
rados de su alojamiento o contenedores durante la realización del estudio, deben estar claramente
identificados. Esta identificación es doble, una sobre el mismo animal (véase métodos en Capítulo 2)
y la otra mediante una etiqueta en la jaula. No se utilizará, en ningún caso, el mismo número o código
de identificación para dos animales distintos en un mismo establecimiento. Antes del comienzo de un
estudio se asigna a cada animal, grupo, dosis, sexo, etc. un único código que se indicará en el protoco-
lo correspondiente.

Existe toda una serie de factores de riesgo que pueden contaminar al colectivo animal y por tanto
producir problemas durante la realización de un estudio. Destacan el alimento, debiéndose usar dietas
completas, equilibradas y constantes (véase Capítulo 4). El agua de bebida es también otro factor de
riesgo. Para ello se deben establecer una serie de controles rutinarios tanto biológicos como químicos.

Las jaulas y demás materiales que forman parte del ambiente de los animales, como por ejemplo,
la cama, deben ser desinfectados o esterilizados y ser renovados en intervalos apropiados. Hay que
tener en cuenta que este material está en contacto directo con el animal, por lo que puede ser un factor
importante de contaminación.

PRODUCTOS DE ENSAYO Y DE REFERENCIA

Las BPL requieren que antes de comenzar el estudio, se recopile toda la información del producto.
Procedencia, identificación química, forma y propiedades físicas más relevantes, su pureza y la identi-
ficación de cualquier impureza significativa.

Los productos han de ser almacenados en lugares adecuados, evitando el riesgo de cualquier posi-
ble contaminación química o física. Los recipientes de contención del producto tienen que identificar-
se de forma clara, y en ellos ha de figurar al menos la siguiente información:

• Nombre del producto.

• Número de lote.
• Suministrador.
• Fecha de recepción.
• Condiciones de almacenamiento.
• Fecha de caducidad.

Igualmente, hay que mantener registros de la caracterización de los productos, fechas de entrada y
caducidad, cantidades recibidas y utilizadas durante estudio.

Las características más importantes del producto (identidad, lote, pureza, composición, etc.), deben
conocerse desde su inicio, aunque durante el transcurso del mismo podrán ampliarse sus parámetros,
debiendo en todos los casos estar debidamente documentados. Es importante conocer la estabilidad
tanto del producto a ensayar como el de referencia en las condiciones de almacenamiento y del estu-
dio. En muchos ensayos el producto se mezcla en un vehículo, sea para administrar en forma de solu-
ción o mezclado con la dieta. En estos casos las BPL indican que debe determinarse la homogeneidad,
concentración y estabilidad del producto a ensayar en ese vehículo.

Todos estos procedimientos son indicados en los correspondientes PNT, en los que se describe la
política del centro respecto a los parámetros mínimos que es necesario conocer antes de empezar un
estudio. El laboratorio debe disponer de PNT sobre manejo, manipulación, muestreo y almacenamien-
10 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

to de los productos. En todos los estudios, excepto en los de corta duración, hay que conservar una
muestra de cada lote del producto de ensayo con fines analíticos.

PROCEDIMIENTOS NORMALIZADOS DE TRABAJO (PNT)

En los PNT o procedimientos normalizados de trabajo, se describe de forma documentada el modo

de realizar ensayos o actividades normalmente no detalladas en los protocolos o guías. Todo laborato-
rio debe contar con PNT escritos y aprobados por la dirección del laboratorio. Sus posibles revisiones
han de ser aprobadas por la dirección del laboratorio y siempre se dispondrá de los PNT correspon-
dientes antes de aplicar una técnica determinada, ya que este documento junto con el protocolo, cons-
tituyen la base para la realización del ensayo. Los objetivos principales de los PNT son:

• Estandarizar los métodos, ya que permiten una continuidad en la realización del estudio,
y de esta manera conseguir que los resultados obtenidos en el mismo laboratorio sean
prácticamente siempre realizados en las mismas condiciones de trabajo.
• Reducir los riesgos de equivocación por parte del personal que realiza el estudio, ya que
en este sentido los PNT son un medio de formación de las nuevas personas que se inte-
gran en el laboratorio. Los PNT disminuyen los errores sistemáticos que puedan produ-
cirse normalmente y minimizan la influencia que pudiera existir por el cambio de per-
sonal en un momento dado, reduciendo por tanto la variación de los resultados si estos
han sido obtenidos por diferentes personas.
• Mejorar la calidad e integridad de los datos obtenidos en un estudio.

Es importante planificar y estructurar con todo detalle los PNT antes de escribirlos definitivamen-
te, ya que son la pauta a cumplir en las diferentes áreas del laboratorio. Los PNT son documentos
técnicos planificados y escritos con instrucciones para el personal, por tanto, son las referencias ma-
nuales de los procedimientos a seguir para asegurar que todas las operaciones se realizan correcta-
mente. Deben ser válidos para todo el personal científico y definir el conjunto de métodos operatorios
a emplear en un estudio. A pesar de que los procedimientos deben estar detallados al máximo, deben
permitir una cierta flexibilidad cuando haya que realizar cualquier tipo de modificación de la técnica.

Hay que tener en cuenta que los textos, separatas y métodos analíticos provenientes de la biblio-
grafía no pueden ser en sí mismos los PNT del estudio, sino que sólo se pueden utilizar como com-
plemento.

Otro punto a considerar en los PNT es su distribución, en el entorno del laboratorio. Es necesario
que el personal que esté realizando un determinado estudio, pueda consultar los mismos en cualquier
momento y por tanto tenga acceso a ellos fácilmente, ya que precisamente su trabajo vendrá regulado
y estructurado por los PNT previamente escritos. Estos también serán usados para la confección del
correspondiente protocolo experimental.

REALIZACIÓN DEL ESTUDIO

Protocolo

Todo estudio ha de tener un protocolo escrito en el que se definan los objetivos y el diseño expe-
rimental. El protocolo debe ser aprobado y fechado por el Director del Estudio y verificado su cum-
plimiento de BPL por el personal de la UGC. En algunos países las legislaciones indican que éste
también debe ser aprobado por la dirección del laboratorio y el promotor, entendiéndose por promotor
la entidad que encarga, financia y/o presenta un estudio no clínico de seguridad sanitaria o medioam-
biental.

Es el documento básico a seguir para la realización de un estudio y debe ser complementado por
los PNT, los cuales expondrán con detalle todas las pautas a seguir y que de forma resumida están
11 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

indicadas en el protocolo. Estos dos documentos son la base para llevar a cabo el estudio por todo el
personal implicado en el mismo y a su vez son los documentos que el personal de la UGC seguirá
para la realización de sus inspecciones o auditorias.

Si durante el ensayo el director del estudio observa que no puede seguir exactamente el protocolo
aprobado, las normas BPL establecen que cualquier cambio, modificación o revisión del mismo estará
documentada, aprobada, fechada y mantenida con el protocolo. Actualmente la normativa establece la
posibilidad de poder realizar estos cambios mediante:

a) “Modificación” del protocolo después de la fecha de inicio de un estudio. Es un cambio in-

tencionado, que será justificado, aprobado, fechado y firmado por el director del estudio,
manteniéndose siempre con el protocolo inicial.
b) “Desviación” del protocolo es un cambio no intencionado del protocolo después de la fecha
de iniciación del mismo. Debe ser descrita, explicada, reconocida y fechada de manera opor-
tuna por el director del estudio y/o investigador principal y manteniéndose junto a los datos
primarios del estudio.

El contenido mínimo de un protocolo, debe reunir la siguiente información, sin limitarse a ella:

• Título descriptivo.
• Descripción, indicando la naturaleza y objetivo del estudio.
• Identificación del producto del ensayo.
• Producto de referencia que se va a utilizar.
• Nombre y dirección del promotor.
• Nombre y dirección de cada uno de los laboratorios y centros de ensayo que intervienen.
• Nombre y dirección del director del estudio.
• Nombre y dirección del investigador o investigadores principales, y la fase o fases del es-
tudio delegadas por el director del estudio y sometidas a la responsabilidad del investiga-
dor principal.
• Fecha de aprobación del protocolo con la firma del director del estudio.
• Fechas propuestas de inicio y finalización del experimento.
• Referencia a las guías de la OCDE, otras guías o métodos usados.
• Justificación de la elección del sistema experimental.
• Características del sistema experimental, como especie, cepa, subcepa, suministrador,
número, rango de peso, sexo, edad y cualquier otra información relevante.
• Método de administración y la razón de su elección.
• Niveles de dosis o concentraciones, frecuencia y duración de la administración o aplica-
ción.
• Información detallada del diseño experimental, incluyendo una descripción del desarrollo
cronológico del estudio, todos los métodos, materiales y condiciones, tipo y frecuencia
de los análisis, medidas, observaciones y exámenes que se van a realizar y, si los hubiese,
los métodos estadísticos utilizados.
• Una lista de los registros que se van a conservar.

Recopilación de datos

Otro punto al que hace referencia las BPL, es el de recopilación de datos durante el estudio. Todos
los registros y documentación original del laboratorio, o sus copias compulsadas, que son el resultado
de las observaciones y actividades originales de un estudio, se denominan “datos primarios” Estos
también pueden incluir fotos, copias de microfilm o microfichas, datos obtenidos de instrumentos
automatizados, o cualquier otro medio que sea reconocido como capaz de proporcionar seguridad en
el almacenamiento de la información por un período determinado.
12 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

Las BPL recomiendan que todos los datos generados durante la realización del estudio sean regis-
trados inmediatamente de forma directa, exacta y legible por la persona encargada de realizarlo. Estas
anotaciones deben firmarse con rúbrica o iniciales y fecharse.

Cualquier modificación de los datos primarios debe efectuarse de manera que no oculte la lectura
de la entrada previa, debiéndose indicar la razón del cambio y ser fechado y firmado (con rúbrica o
iniciales) por la persona que haya realizado la modificación.

Actualmente, y en la última revisión de las BPL, se ha incluido un apartado que hace referencia a
la obtención de datos primarios a través de sistemas informatizados, por lo que el vacío reglamentario
existente hasta ahora ya está regulado. A este respecto la normativa indica: “los datos obtenidos como
entradas directas de ordenador deben ser identificados en tiempo y fecha de su introducción por la
persona responsable de su entrada. Los sistemas informatizados deberán diseñarse para poder posibili-
tar en todo momento la conservación de datos que permitan realizar auditorías retrospectivas que
muestren todos los cambios de los datos sin ocultar los datos originales. Debe ser posible asociar to-
dos los cambios de datos con las personas que los han realizado, por ejemplo por medio de firmas
electrónicas con hora y fechas. Las modificaciones deberán justificarse en todos los casos”.

INFORME FINAL

Es un documento en el que se describe el desarrollo del estudio, sus resultados y conclusiones. El

responsable de elaborar este informe al finalizar el estudio es el director del estudio. Además de la
información mínima que debe contener un informe, las BPL también dan toda una serie de recomen-
daciones a seguir para la cumplimentación y presentación del mismo.

• Para cada estudio se preparará un informe final.

• Se utilizará el sistema internacional de unidades.
• Habrá de estar firmado y fechado por el director del estudio, aceptando la validez de los
datos.
• El director del estudio certificará el cumplimiento de las BPL.
• Asimismo, estará firmado y fechado por el investigador principal u otros científicos, si
los hubiese.
• Las correcciones o adiciones del informe final se incorporarán mediante modificación.

El contenido mínimo del informe final, sin limitarse a ellos, incluye los siguientes datos:

• Título descriptivo (el mismo que el del protocolo).

• Identificación del producto a ensayar.
• Identificación del producto de referencia.
• Características del producto (pureza, estabilidad y homogeneidad).
• Información sobre el promotor y laboratorio, indicando: nombre y dirección del promo-
tor, laboratorio, director del estudio, investigador principal (si lo hubiese), y de las perso-
nas que han contribuido a la realización del informe.
• Fechas de comienzo y finalización de la fase experimental.
• Declaración de la UGC.
• Descripción de métodos y materiales usados.
• Referencias bibliográficas.
• Resumen de resultados.
• Informaciones y datos requeridos en el protocolo.
• Exposición de resultados (cálculos y métodos estadísticos).
• Discusión y conclusiones.
• Archivo.
13 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

ARCHIVO. ALMACENAMIENTO Y CONSERVACIÓN

El archivo es el lugar donde se guarda de forma segura todo el material (datos primarios, especí-
menes, muestras, etc.) procedente de un estudio y que dispone de acceso controlado.

Los archivos deben ser concebidos y equipados para acoger y almacenar de forma segura durante
el período reglamentado, el siguiente material.

• Protocolo y enmiendas.
• Datos primarios.
• Productos a ensayar y de referencia.
• Documentación relativa a los sistemas experimentales.
• Especímenes.
• Informes finales.
• Informes de las inspecciones de la UGC.
• Lista de estudios programados (master schedules).
• Documentación de personal.
• Revisiones del Programa de garantía de calidad.
• Registros e informes del mantenimiento y calibración de los aparatos.
• Documentación de la validación de los sistemas informáticos.
• Fichero cronológico de los PNT.
• Registros de los controles ambientales.
• Soportes magnéticos.

Debido a que el tiempo de conservación del material es muy largo, el archivo debe cumplir un nú-
mero básico de condiciones a fin de mantener en el mejor estado posible todo este material archivado.
Ello hace que en el diseño del archivo se deban tener en cuenta los siguientes factores: medidas de
protección contra robo y actos vandálicos, protección contra incendios (detectores de humo), extinto-
res de dióxido de carbono o no acuosos, circuitos eléctricos de seguridad, evitar entrada de luz solar
directa, evitar el paso de conducciones de agua, barreras contra animales e insectos, sistemas ambien-
tales controlados y sala adyacente para consultas. Todos estos factores podrán variar según la cantidad
y material a archivar.

El funcionamiento de los archivos debe estar documentado mediante los correspondientes PNT. El
acceso a los mismos debe estar limitado sólo a las personas autorizadas por dirección. Estos son los
que llevarán el control de entrada y salida del material y sólo ellos tendrán acceso al archivo. Todas
estas operaciones deben registrarse. El archivero debe tener indexado todo el material existente en el
mismo, a fin de conocer en cualquier momento su estado y poder buscarlo o recuperarlo.

RESUMEN

Las normas BPL son, en esencia una filosofía de trabajo. No regulan propiamente la parte científi-
ca de los ensayos, sino que son las exigencias generales a seguir respecto a la calidad de los mismos.
No son más que un sistema de garantía de calidad cuyo objetivo principal es mejorar el funcionamien-
to de los laboratorios y la idoneidad de los datos obtenidos en los estudios.

La finalidad de la aplicación de las BPL es la aceptación mutua de resultados entre diferentes paí-
ses, por lo que es obvio que todos intenten unificar el contenido de las mismas a fin de que no haya
diferencias significativas entre ellas. Es importante poder demostrar a las autoridades de los otros
países a los que se presenta la posible aprobación del nuevo producto, que los resultados obtenidos en
los correspondientes ensayos preclínicos, han sido generados cumpliendo con normas de trabajo que
merecen la garantía y aceptación mutua de los mismos. Con ello se obtienen toda una serie de benefi-
cios importantes en el comercio internacional de sustancias químicas, como son la reducción del nú-
14 Armonización y estandarización. Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)

mero de animales, facilitar técnicas alternativas y evitar en lo posible la repetición innecesaria de es-
tudios, todo ello con el consiguiente ahorro de tiempo y recursos.

BIBLIOGRAFIA

Carson PA, Dent NJ: Good laboratory and clinical practices. Heinemann Professional Publishing
Ltd. Oxford, 1990.
Directiva 86/609/CEE de 24 de noviembre de 1986. Protección de los animales utilizados para expe-
rimentación y otros fines científicos. DOCE L358 de 18.12.86.
Directiva 1999/11CE de 8 de marzo de 1999. Principios de las Buenas Prácticas de Laboratorio.
DOCE L 77 de 23.3.1999.
Garfield FM: Quality assurance principles for analytical laboratories, AOAC, Arlington, Virginia,
1984.
Garfield, F.M. Principios de Garantía de Calidad para Laboratorios Analíticos. Ed. Española. AOAC
1993.
Good Laboratory Practice Regulations. Final Rule. Federal Register,52:33768-33782. September 4,
1987.
Nonclinical Laboratory Studies. Proposed Regulations for Good Laboratory Practice Regulations.
Proposed Rule. Federal Register 41: 51206-51228. November 19, 1976.
OECD. Principles of Good Laboratory Practice. París 1998.
OECD Series on Principles of Good Laboratory Practice and Compliance Monitoring
Nº 1 OECD Principles of Good Laboratory Practice. 1998
Nº 2 Revised guides for compliance monitoring procedures for Good Laboratory Practice,1995
Nº 3 Revised guidance for the conduct of Laboratory inspections and study audits,1995
Nº 4 Quality Assurance and GLP, 1992
Nº 5 Compliance of Laboratory suppliers with GLP Principles, 1992
Nº 6 The application of the GLP Principles to field studies, 1992
Nº 7 The application of the GLP principles to short-term studies,1993
Nº 8 The Role and Responsibilities of the Study Director in GLP Studies ,1993
Nº 9 Guidance for the Preparation of GLP Inspection Reports ,1995
Nº 10 The application of the principles of GLP to computerised systems,1995
Nº 11 The Role and Responsabilities of the Sponsor in the Application of the Principles of GLP.
Real Decreto 883/1998, relativo al manejo y tratamiento de residuos tóxicos y peligrosos.
Real Decreto 822/1993 de 28 de mayo, por el que se establecen los principios de buenas prácticas de
laboratorio y su aplicación en la realización de estudios no clínicos sobre sustancias y productos
químicos. BOE nº 128 de 29 mayo de 1993.
Sabater-Tobella J., Vilumara A., Buenas prácticas de laboratorio. Ed. Díaz de Santos, Madrid, 1988.
Sabater-Tobella J: Implementation of GLP in the analytical service laboratory. Chapter 4: Implement-
ing International Good Practices: GAPs, GCPs, GLPs, GMPs. Ed. Dent NJ Interpharm Press,
Inc.1993.