UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
FACULTAD DE CIENCIAS
CH 061 BIOLOGÍA
LABORATORIO
SECCIÓN
N° de laboratorio: 3
B1
Título de la práctica: “Efecto de la T° y el PH en la amilasa salival”
Informe Desempeño Nota
Apellidos y Nombre
(15 p) (-) ( )
Meza Enciso, Patricia Milagros
Nombre del profesor:
Fecha de realización del laboratorio:
Fecha de entrega del Informe:
2020 - I
Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2020-I
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE QUÍMICA
BIOLOGÍA (CH 061)
INFORME DEL LABORATORIO Nº 3
EFECTO DE LA T° Y EL pH EN LA AMILASA SALIVAL
1. Resumen (1p)
2
Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2020-I
2. Objetivos específicos (2.5p)
1.
2. Determinar la especificidad de la amilasa salival sobre el sustrato almidó n mediante la
comprobació n indirecta con el uso de los reactivos de Lugol y Bennedict.
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2020-I
3. Procedimiento Experimental desarrollado en diagrama de flujo (2.0 p)
(Uno por cada experimento, insertar hojas si es necesario)
Especificidad de la amilasa
salival por el sustrato
Tubo de ensayo N°X
Agregar
Enzima
Agregar
Sustrato
Añadir
Tampón pH 7.0
Condición externa
Condiciones Normales
Incubar la solución
A 37 °C por 60 minutos
Separar la mitad del contenido
Tubo 1 Tubo 2
Agregar Agregar
Reactivo IKI Reactivo Benedict
Sí ¿la solución es No No ¿la solución es Sí
de color gris de color marrón
azulado? rojizo?
Presencia de No contiene No se detecta Presencia de azucares
almidón/celulasa almidón/celulasa azucares reductores reductores
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Fin del laboratorio Fin del laboratorio
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N = 1: Enzima → Amilasa / Sustrato → Almidón
N = 2: Enzima → Amilasa / Sustrato → Glucosa
N = 3: Enzima → Amilasa / Sustrato → Celulosa
N = 4: Enzima → Agua desionizada / Sustrato → Celulosa
N = 5: Enzima → Peptidasa / Sustrato → Almidón
N = 6: Enzima → Bacterias / Sustrato → Celulosa
4. Datos y observaciones experimentales, resultados (2.5 p)
Experimento I: Digestión del almidón por la amilasa salival.
Tabla N°1 Resultados del efecto del pH sobre la actividad
Tubo N° 1 2 3 4 5 6 7 8
Rvo. IKI
Rvo.
Benedict*
A.D. Agua desionizada | H: hervir | C: congelar | C.D. condiciones normales
Observaciones:
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Experimento II: Especificidad de la amilasa salival por el sustrato
Tabla N°2. Resultado de la hidrólisis de la sacarosa
Tubo N° 1 2 3 4 5 6
Rvo. IKI - - + + + -
Rvo.
Benedict* + + - - - +
Indicar positivo (+) o negativo (-) segú n sea el resultado, indicando la intensidad del color con (+
+)
Observaciones:
Prueba de Lugol
- Tubo N°1: coloració n amarillenta
- Tubo N°2: coloració n amarillenta
- Tubo N°3: coloració n negro azulado
- Tubo N°4: coloració n negro azulado
- Tubo N°5: coloració n negro azulado
- Tubo N°6: coloració n amarillenta
Prueba de Bennedict: se necesitó llevar a ebullició n las muestras en los tubos de ensayo
para que el reactivo de Bennedict pueda reaccionar con los posibles azú cares reductores
presentes en cada muestra.
- Tubo N°1: coloració n marró n rojizo
- Tubo N°2: coloració n marró n rojizo
- Tubo N°3: coloració n azul
- Tubo N°4: coloració n azul
- Tubo N°5: coloració n azul
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- Tubo N°6: coloració n marró n rojizo
5. Discusión de observaciones, datos y resultados (3.5 p)
(Adicionar otra hoja de ser necesario)
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2020-I
Experimento II: Especificidad de la amilasa salival por el sustrato
- Tubo N°1: ya que ph7 es el medio adecuado para que la amilasa actú e, esta
enzima logra digerir el sustrato almidó n hidrolizá ndolo y es así como se obtiene
glucosa y maltosa. Obtenemos así:
Prueba de Lugol: negativa (ya no hay presencia de almidó n)
Prueba de Bennedict: positiva (presencia de azú car reductor: glucosa)
- Tubo N°2: la enzima amilasa no actú a sobre la glucosa debido a su alta
especificidad, es decir, solo actú a en el almidó n.
Prueba de Lugol: negativa (no hay presencia de almidó n)
Prueba de Bennedict: positiva (presencia de azú car reductor: glucosa)
- Tubo N°3: la enzima amilasa no actú a sobre la celulosa, ya que es una enzima
altamente específica que solo degrada al almidó n.
Prueba de Lugol: positiva (presencia de celulosa)
Prueba de Bennedict: negativa (la celulosa no es azú car reductor)
- Tubo N°4: el agua desionizada no actú a como enzima, por lo que la celulosa no
será degradada.
Prueba de Lugol: positiva (presencia de celulosa)
Prueba de Bennedict: negativa (la celulosa no es azú car reductor)
- Tubo N°5: la peptidasa no actú a sobre el almidó n debido a su especificidad, es
decir, es una enzima que degrada solo a las proteínas.
Prueba de Lugol: positiva (presencia de almidó n)
Prueba de Bennedict: negativa (el almidó n no es azú car reductor)
- Tubo N°6: las bacterias producen enzimas llamadas celulasas, las cuales logrará n
degradar a la celulosa presente como reactivo, obtenemos, así como productos
mú ltiples monó meros de glucosa.
Prueba de Lugol: negativa (no hay presencia de almidó n ni ningú n polisacá rido)
Prueba de Bennedict: positiva (presencia de azú car reductor: glucosa)
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2020-I
6. Conclusiones (2.5 p)
1.
2. Se logró determinar la especificidad de la amilasa salival como excepcionalmente alta, la cual
de acuerdo al uso de las pruebas de Bennedict y Lugol se comprobó experimentalmente que éste
consistía en la particular hidrolizació n de las enzimas.
7. Cuestionario (1.0 p)
1. ¿Qué efecto tiene la ebullició n sobre la actividad enzimá tica?
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2020-I
2. ¿La amilasa funciona a distintos niveles de pH distinto al pH ó ptimo?, ¿Cuá l es el pH
ó ptimo?
8. Referencias bibliográficas
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2020-I
PRESENTACION DEL INFORME
INDICAR el grupo de laboratorio al que pertenecen: A1, A2, B1, B2
I. Resumen (1.0 p)
¿Qué teorías lo sustentan? En relación con el desarrollo de los experimentos.
II. Objetivos específicos (2.5 p)
Tema central de estudio para cada experimento desarrollado, ¡deben ser específicos!
III. Procedimiento experimental (2.0 p)
Presentado un diagrama de flujo por cada experimento a desarrollar (solo una muestra por
experimento)
IV. Observaciones experimentales, datos y resultados, para c/experimento (2.5 p)
Durante el desarrollo del experimento:
¿Qué se observó? ¿Qué datos se obtuvieron? ¿Cuáles fueron los resultados? ¿Qué reacciones se
dieron?
Se indican los resultados tal y como se dieron durante la investigació n. Se debe describir los
pasos ejecutados durante la experimentació n
Se pueden presentar los datos en tablas, grá ficas, o figuras, debidamente numeradas
V. Discusión de las observaciones experimentales, datos y resultados (3.5 p)
¿Se obtuvieron los resultados correctos según la teoría? ¿Si?,¿N? ¿Qué sucedió?
Es la etapa que encadena los resultados obtenidos por la investigació n. Se relaciona, interpreta
y discute los resultados.
Se pone a prueba la capacidad analítica y de autocrítica del investigador.
La discusió n pone el toque personal al trabajo.
VI. Conclusiones (2.5 p)
¿Qué significan los resultados?
Las conclusiones está n relacionadas directamente con los objetivos.
Es el análisis del cumplimiento de cada uno de los objetivos de la prá ctica
VII. Cuestionario (1.0 p)
Preguntas relacionadas al tema
VIII. Referencias Bibliográficas
Estas deben estar vinculadas a sus discusiones, de haberse empleado en el resumen indicarlo.
Como minino deberá emplear tres referencias.
Ejemplo de referencia
Paper:
Autor(es). Añ o. Título. Revista. Paginas.
Ivanov, V., Chu, J., 2008. Applications of microorganisms to geotechnical engineering for
bioclogging and biocementation of soil in situ. Rev Environ Sci Biotechnol 7, 139–153.
doi:10.1007/s11157-007-9126-3
Libro:
Autor(es). Añ o. Libro. Editorial, Edició n. Pá ginas
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